專利名稱：腺苷a3受體激動劑的制作方法
技術領域：
本發明要求2001年8月8日提交的美國臨時專利申請第60/311,069號的優先權，其披露的內容結合于此作為參考。本發明涉及一種新型腺苷A3受體激動劑，其對于治療神經障礙、心臟疾患、和其它細胞增生紊亂有益。本發明還涉及制備這些化合物的方法，以及含有這些化合物的藥物組合物。
背景技術：
腺苷是一種自然產生的核苷，其通過與所有調節重要生理過程的被稱為A1、A2a、A2b、和A3的腺苷受體族相互作用發揮生物效應。例如，A1腺苷受體的刺激可縮短持續時間并減少AV節細胞動作電位的振幅，因此，可延長AV節細胞的不應期。這樣，A1受體的刺激提供了一種治療室上性心動過速的方法，包括結內折返性心動過速的終止，以及在心房纖維顫動和心房撲動中心室率的控制。A2A腺苷受體調節冠狀血管擴張，A2B受體已交織在肥大細胞激活、哮喘、血管舒張、細胞生長的調節、腸功能、和神經分泌的調節中(參見Adenosine A2BReceptors as Therapeutic Targets(腺苷A2B受體作為治療目標)，Drug Dev Res 45198；Feoktistov et al..，TrendsPharmacol Sci 19148-153)。A3腺苷受體調節細胞增殖過程。尤其是，作為A3受體激動劑(A3adenosine receptors agonist)的化合物，在治療和/或預防癌癥、心臟病、不育癥、腎病、和CNS紊亂有所應用。此外，A3受體激動劑刺激骨髓細胞增殖，從而誘導體內G-CSF的分泌。因此，A3受體激動劑在對抗藥物的毒副作用，尤其是諸如白細胞減少和嗜中性白細胞減少癥等化學治療藥物的毒副作用方面有益。
對于A3腺苷受體的配體至今還幾乎沒有報道。某些非選擇性N6-取代腺苷衍生物已作為A3受體的激動劑進行了披露，包括APNEA(N6-2-(4-氨苯基)乙基腺苷)，其已經成功地用于碘化形式的放射性配體(Zhou et al.)。然而，典型的黃嘌呤和非黃嘌呤A1和A2受體拮抗劑似乎沒有與該受體結合(Zhou et al.)。
因此，希望提供A3受體激動劑的化合物。優選地，該化合物對A3受體有選擇性，從而可以避免由于它與其它腺苷受體相互作用而產生的副作用。

發明內容
本發明的一個目的是提供A3受體激動劑。因此，一方面，本發明涉及化學式I的化合物 化學式I其中R1是可選取代的低級烷基，可選取代的環烷基，可選取代的芳基、或可選取代的雜芳基；
X是共價鍵或可選取代的亞烷基；R2是R4-Z-Y-C≡C-或可選取代的吡唑基其中Y是可選取代的亞烷基，Z是氧、硫、或NH-，而R4是可選取代的芳基或可選取代的雜芳基；以及R3是羥甲基或-C(O)-NR5R6；其中R5和R6獨立地是氫或低級烷基；及其藥用鹽、酯、和藥物前體。
本發明的第二個方面涉及藥物制劑，包括有效治療量的化學式I的化合物以及至少一種藥用賦形劑。
本發明的第三個方面涉及化學式I的化合物在制備治療哺乳動物疾病或身體不適的藥物上的應用，其可以用A3受體激動劑進行治療，包括給需要的哺乳動物施加有效治療劑量的化學式I的化合物。這類疾病包括但不限于癌癥、腎臟和心臟缺血、神經退化紊亂、不育癥、嗜中性白細胞減少癥、腎臟疾病、以及CNS紊亂。
本發明的第四個方面涉及化學式I的化合物的制備方法。
對于化學式I的化合物，優選的一類包括下列這樣的化合物，其中R2是可選取代的吡唑-1-基，尤其是其中的R1為可選取代的烷基或可選取代的芳基，R3為羥甲基，而X是共價鍵。在這些化合物中，優選的組包括下列這樣的化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可選取代的低基烷基、酯、氨羰基、可選取代的芳基、或可選取代的雜芳基所取代。
一個優選的亞組包括下列這些化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可選取代的苯基或可選取代的烷基所取代，而R1為可選取代的烷基。更優選的是這樣的化合物，其中的R1為1-3個碳原子的低級烷基，而R2是由具有甲氧基或氯取代基的苯基或芐基所取代的吡唑-1-基。
第二個優選的亞組包括下列這些化合物，其中R2是吡唑-1-基，它被可選取代的雜芳基所取代，而R1為可選取代的烷基。更優選的是這樣的化合物，其中的R1為1-3個碳原子的低級烷基，而R2是被吡啶取代的吡唑-1-基。
第三個優選的亞組包括下列這些化合物，其中R2是被可選取代的苯基所取代的吡唑-1-基，R1為可選取代的苯基，而X是亞烷基。更優選的是這樣的化合物，其中的R1為3-碘代苯基，尤其是X是亞甲基。
第二個優選的類包括下列化合物，其中R2是吡唑-4-基，它被可選取代的苯基或可選取代的烷基所取代，尤其是其中的R1為可選取代的烷基，而X是共價鍵。更優選的是這樣的化合物，其中的R1為低級烷基。
第三個優選的類包括下列化合物，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-，尤其是其中的R4是可選取代的苯基，而Y是1、2、或3個碳原子的亞烷基。在這些化合物中，一個優選的組包括下列這些化合物，其中的R4是被甲氧基或氯可選取代的苯基，而Y是亞甲基，R1為可選取代的低級烷基，R3是羥基，X是共價鍵，而Z是氧。
定義和一般參數本說明書中使用的詞和詞組通常具有下述規定的含義，除非其含義另有規定。
術語“烷基”指具有1至20個碳原子的單價基支鏈或無支鏈的飽和烴鏈。該術語用諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基、正癸基、叔癸基等基團來舉例說明。
術語“取代的烷基”指1)如上述定義的烷基，具有有1、2、3、4、或5個取代基，優選1至3個取代基，選自由鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，其選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2；或2)如上述定義的烷基，插入1-10個原子，其獨立地選自氧、硫、和NRa-，其中Ra是選自氫、烷基、環烷基、鏈烯基、環鏈烯基、炔基、芳基、雜芳基、和雜環基。所有的取代基可選擇地進一步被烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR取代，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2；或3)如上述定義的烷基，具有如上述所定義的1、2、3、4、或5個取代基，并且由如上述所定義的插入1-10個原子。
術語“低基烷基”指具有1、2、3、4、5、或6個碳原子的支鏈或無支鏈的飽和烴鏈的單價基。該術語用諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基等基團來舉例說明。
術語“取代的低基烷基”指如上述所定義的低級烷基，具有1至5個取代基，優選1、2、或3個取代基，如針對取代的烷基所定義，或如以上所定義的低基烷基，其插入1、2、3、4、或5個原子，如針對取代的烷基所定義，或如上述所定義的低基烷基，其具有如上所定義的1、2、3、4、或5個取代基，并插入如上述所定義的1、2、3、4、或5個原子。
術語“亞烷基”指支鏈或無支鏈飽和烴鏈的雙基，優選具有1至20個碳原子，更好1至10個碳原子，更優選的是有1、2、3、4、5、或6個碳原子。該術語用諸如亞甲基(-CH2-)，亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構體(如，-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等基團來舉例說明。
術語“低級亞烷基”指支鏈或無支鏈飽和烴鏈的雙基，優選具有1、2、3、4、5、或6個碳原子。
術語“取代的亞烷基”指1)如上述定義的亞烷基，具有1、2、3、4、或5個取代基，選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，其選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2；或
2)如上述定義的亞烷基，由1-20個原子隔開(插入1-20個原子)，其獨立地選自氧、硫、和NRa-，其中Ra是選自氫、可選取代的烷基、環烷基、環鏈烯基、芳基、雜芳基、和雜環基，或選自羰基、羰基酯、羰基酰胺、和磺酰基；或3)如上述定義的亞烷基，其具有如上述所定義的1、2、3、4、或5個取代基，并且被如上述所定義的1-20個原子隔開。取代的亞烷基的實例是氯亞甲基(-CH(Cl)-)、氨基亞乙基(-CH(NH2)CH2-)、甲氨基亞乙基(-CH(NHMe)CH2-)、2-羧基亞丙基異構體(-CH2CH(CO2H)CH2-)、乙氧基乙基(-CH2CH2O-CH2CH2-)、乙基甲基氨乙基(-CH2CH2N(CH3)CH2CH2-)、1-乙氧基-2-(2-乙氧基-乙氧基)乙烷(-CH2CH2O-CH2CH2-OCH2CH2-OCH2CH2-)等等。
術語“芳烷基”指共價連接于亞烷基的芳基，其中芳基和亞烷基在本文進行定義。“可選取代的芳烷基”指共價連接于可選取代的亞烷基的可選取代的芳基。這類芳烷基通過諸如芐基、苯乙基、3-(4-甲氧基苯基)丙基等舉例加以說明。
術語“烷氧基”指基團R-O-，其中R為可選取代的烷基或可選取代的環烷基，或R為基團-Y-Z，其中Y為可選取代的亞烷基，而Z為可選取代的鏈烯基、可選取代的炔基；或可選取代的環鏈烯基，其中烷基、鏈烯基、炔基、環烷基、和環鏈烯基如在本文中所定義。優選的烷氧基是烷基-O-并包括，作為實例的如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等等。
術語“烷硫基”指基團R-S-，其中R如針對烷氧基所定義。
術語“鏈烯基”指支鏈的或無支鏈的不飽和烴基的單價基，較好具有2至20個碳原子，更好2至10個碳原子，最好2至6個碳原子并且具有1-6個，優選1個，雙鍵(乙烯基)。優選的鏈烯基包括亞乙基或乙烯基(-CH＝CH2)、1-亞丙基或烯丙基(-CH2CH＝CH2)、異亞丙基(-C(CH3)＝CH2)、雙環[2.2.1]庚烯等等。在鏈烯基與氮相連的情況下，雙鍵不能在氮的α位。
術語“低基鏈烯基”指如上所定義的鏈烯基，具有2至6個碳原子。
術語“取代的鏈烯基”指如上所定義的鏈烯基，具有1、2、3、4、或5個取代基，而優選1、2、或3個取代基，選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羰基、羰基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“炔基”指不飽和烴的單價基，較好具有2至20個碳原子，更好具有2至10個碳原子，最好具有2至6個碳原子，并且具有至少1個、優選1至6個乙炔(三鍵)不飽和部位。優選的炔基包括乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(或丙炔基(-C≡CCH3)等等。在炔基連接于氮的情況下，三鍵不能在氮的α位。
術語“取代的炔基”指如上所定義的炔基，具有1、2、3、4、或5個取代基，優選1、2、或3個取代基，選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“氨羧基”指基團-C(O)NRR，其中每個R獨立地是氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基，或其中兩個R基團一起形成雜環基團(如，嗎啉代)。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，取代基選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“酯”或“羧基酯”指基團-C(O)OR，其中R是烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基，其可選地被烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nRa進一步取代，其中Ra是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“酰氨基”指基團-NRC(O)R，其中每個R獨立地是氫、烷基、芳基、雜芳基、或雜環基。所有取代基可選地被烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR進一步取代，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“酰氧基”指基團-O(O)C-烷基、-O(O)C-環烷基，-O(O)C-芳基、-O(O)C-雜芳基、和-O(O)C-雜環基。除非定義中另有限定，所有取代基都可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，取代基選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“芳基”指6至20個碳原子的芳族碳環基團，具有單環(如，苯基)或多環(如，聯苯基)、或多個稠合(稠)環(如，萘基或蒽基)。優選的芳基包括苯基和萘基等等。
除非針對芳基取代基的定義另有限定，這類芳基可選地用1、2、3、4、或5個取代基、優選1、2、或3個取代基取代，選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羧基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、以及-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“芳氧基”指基團芳基-O-，其中芳基如上所定義，并包括同樣如上所定義的可選取代的芳基。術語“芳硫基”指基團R-S-，其中R如針對芳基所定義。
術語“氨基”指基團-NH2。
術語“取代的氨基”指基團-NRR，其中每個R是獨立地選自由氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基、和雜環基組成的組，前提是兩個R基團不同時為氫，或基團-Y-Z，其中Y為可選取代的亞烷基，而Z為鏈烯基、環鏈烯基、或炔基。除非定義中另有限定，所有取代基可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“羧基烷基”指基團-C(O)O-烷基、-C(O)O-環烷基，其中烷基和環烷基如上所定義，且可選地進一步由下述基團取代，即烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“環烷基”指3至20個碳原子的環狀烴烷基，具有單環或稠環。這類環烷基包括，作為實例的，單環結構如環丙基、環丁基、環戊基、環辛基等等，或稠環結構如金剛烷基、以及雙環[2.2.1]庚烷，或芳基稠合于其上的環烷基，例如1，2-二氫化茚及類似物。
術語“取代的環烷基”指環烷基，其具有1、2、3、4、或5個取代基、優選1、2、或3個取代基，其選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧即羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羧基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。
術語“鹵素”或“鹵”指氟基、溴基、氯基、和碘基。
術語“酰基”指基團-C(O)R，其中R為氫、可選取代的烷基、可選取代的環烷基、可選取代的雜環基、可選取代的芳基、和可選取代的雜芳基。
術語“雜芳基”指芳基(即，不飽和的)，在至少一個環內包括1至15個碳原子和1至4個雜原子，這些原子選自氧、氮、和硫。
除非針對雜芳基取代基的定義另有限定，這類雜芳基可選地用1、至5個取代基、優選1、2、或3個取代基取代，取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基(一個烷基酯)、芳硫基、雜芳基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基，芳氧基、芳烷基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羧基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限定，所有取代基可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。這類雜芳基可具有一個單環(如，吡啶基或呋喃基)或多個稠環(如，中氮茚基、苯并噻唑基、或苯并噻吩基)。含氮雜環和雜芳基的實例包括但不限于吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中氮茚、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、2，3-二氮雜萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、肉啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、以及其它含有雜芳基的N-烷氧基-氮的化合物。
對化學式I中R4的定義的一個選擇是雜芳基，即一個可選取代的吡唑基。該定義包括吡唑，其連接a)通過吡唑的N1位置，即化學式的吡唑-1-基部分 其中，A代表化學式I的化合物的2-位上附著的點，而R5、R6、和R7獨立地是氫或上述雜芳基所示的可選的取代基；以及b)通過吡唑的任一碳原子，即化學式的C-吡唑基 其中A代表化學式I的化合物的2-位上附著的點，而R8、R9、和R10獨立地是氫或上述雜芳基所示的可選的取代基。
優選的是可選取代的吡唑-1-基和可選取代的吡唑-4-基。優選的取代基是氫、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、和可選取代的雜芳烷基。
術語“雜芳氧基”指基團雜芳基-O-。
術語“雜環基”指單價飽和或部分不飽和基團，具有單環或多個稠環，在環內具有1至40個碳原子和1至10個雜原子，優選1至4個雜原子，這些雜原子選自氮、硫、磷、和/或氧。
除非針對雜環取代基的定義另有限制，這類雜環基可選地用1至5個、優選1、2、或3個取代基取代，其選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環鏈烯基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、氨羰基、烷氧基羰氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環基硫基、硫羥、烷硫基、芳基、芳氧基、氨基磺酰基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-芳基、和-SO2-雜芳基組成的組。除非定義中另有限制，所有取代基可選地被1、2、或3個取代基進一步所取代，其選自烷基、羧基、羧基烷基、氨羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、和-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基，而n為0、1、或2。雜環基可以具有單環或多個稠環。優選的雜環包括四氫呋喃基、嗎啉代、哌啶基等等。
術語“硫羥(巰基thiol)”指基團-SH。
術語“取代的烷基硫”指基團-S-取代的烷基。
術語“雜芳基硫羥(heteroarylthiol)”指基團-S-雜芳基，其中，雜芳基如上所定義，包括同樣如上所定義的可選取代的雜芳基。
術語“亞砜”指基團-S(O)R，其中R為烷基、芳基、或雜芳基。“取代的亞砜”指基團-S(O)R，其中R為取代的烷基、取代的芳基、或取代的雜芳基，如本文所定義。
術語“砜”指基團-S(O)2R，其中R為烷基、芳基、或雜芳基。“取代的砜”指基團-S(O)2R，其中R為取代的烷基、取代的芳基、或取代的雜芳基，如本文所定義。
術語“酮”指基團-C(O)-。術語“硫代羰基”指基團-C(S)-。術語“羧基”指基團-C(O)-OH。
“可選的”或“可選地”指隨后描述的事件或情況可能發生或可能不發生，并且該描述包括其中所述事件或情況發生的例子以及不發生的例子。
術語“化學式I的化合物”指包含本發明披露的化合物、和該類化合物的藥用鹽、藥用酯、以及藥物前體。
術語“治療有效量”指化學式I的化合物的量，當給予需要這類治療的哺乳動物時，其足以達到治療目的，如下面所定義。治療有效量會隨受治療者和要治療的疾病狀態、受治療者的體重和年齡、疾病狀態的嚴重程度、給藥方式等等不同而不同，其對熟悉該領域的技術人員而言，很容易加以確定。
術語“治療”或“處理”指對哺乳動物的疾病的任何治療，包括(i)預防疾病，也就是說，使得疾病的臨床癥狀不顯現；(ii)抑制疾病，也就是說，阻止臨床癥狀的發展；和/或(iii)緩解疾病，也就是說，使臨床癥狀消退(減輕)。
在許多情況下，由于存在氨基和/或羧基或類似的基團，本發明的化合物可以形成酸式和/或堿式鹽。術語“藥用鹽(藥學上可接受的鹽)”是指這樣的鹽，其保留化學式I的化合物的生物功效和性能，并且其并不是在生物上或其他方面不理想的。藥用堿加成鹽可以通過無機堿和有機堿來制備。衍生自無機堿的鹽，包括，僅作為例子的，鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、和鎂鹽。衍生自有機堿的鹽，包括但不限于伯胺、仲胺、以及叔胺的鹽，例如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、環烷基胺、二(環烷基)胺、三(環烷基)胺、取代的環烷基胺、二取代的環烷基胺、三取代的環烷基胺、環烯基胺、二(環烯基)胺、三(環烯基)胺、取代的環烯基胺、二取代的環烯基胺、三取代的環烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、雜芳基胺、二雜芳基胺、三雜芳基胺、雜環胺、二雜環胺、三雜環胺、混合的二胺和三胺，其中在胺上的至少兩個取代基不同并且選自由烷基、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、環烷基、取代的環烷基、環烯基、取代的環烯基、芳基、雜芳基、雜環、以及類似物組成的組。還包括下述胺，即其中兩個或三個取代基，與氨基氮一起，形成雜環基或雜芳基。
適合胺的特定實例包括，僅作為例子的如，異丙胺、三甲胺、二乙胺、三(異丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、三甲胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡堿、普魯卡因、海巴明(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、1，2-乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、嗎啉、N-乙基哌啶以及類似物。
藥用酸加成鹽可以通過無機酸和有機酸來制備。衍生自無機酸的鹽包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、以及類似物的鹽。衍生自有機酸的鹽包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉硅酸、苯乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、以及類似物的鹽。
在本文所用的“藥用載體(藥學上可接受的載體)”包括任何和所有的溶劑、分散介質、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑、以及類似物。這類在藥物活性物質方面的介質和藥劑的應用是本技術領域所熟知的。除了在任何與活性成分不相容的常規介質和藥劑范圍內，可以設想其在治療組合物方面的應用。輔助活性成分也可以結合到該組合物中。
命名法本發明的化合物的命名和編號是以化學式I的代表性的化合物進行舉例說明，其中，R1為甲基，R2為4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，R3為羥甲基，而X為共價鍵 其被命名為(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇(英文名稱(4S，2R，3R，5R)-5-(hydroxymethyl)-2-{2-[4-(4-methoxyphenyl)pyrazolyl]-6-(methylamino)purin-9-yl}oxolane-3，4-diol)
化學式I的化合物的合成化學式I的化合物，其中R2為可選取代的吡唑-1-基的制備方法示于反應圖解I中。
反應圖解I 化學式I其中Ac為乙酰基，而X為共價鍵或可選取代的亞烷基。
步驟1-化學式(2)的制備化學式(2)的化合物是通過化學式(1)的化合物的6-氯的取代而制成，其制備描述見J.F.Gorster and R.K.Robins，Org.Chem.1966，Vol.31，3258-62。化學式(1)的化合物與化學式為R1XNH2的化合物在堿存在的情況下進行反應，其中X為共價鍵或可選取代的亞烷基。反應在惰性質子溶劑，如甲醇、乙醇、正丁醇、以及其類似物溶劑中于室溫和回流溫度之間進行約12至48小時。當反應基本完全時，用常規方法分離化學式(2)的產物，例如在減壓下除去溶劑，接著在硅膠上層析(色譜分離，chromatography)殘余物。
步驟2-化學式(3)的化合物的制備化學式(2)的化合物通過與水合肼反應被轉化成化學式(3)的化合物。反應在沒有溶劑，或可選地在質子溶劑如乙醇中于室溫和回流溫度之間進行約12至48小時。當反應基本完全時，用常規方法分離化學式(3)的產物，例如在減壓下除去溶劑并用醚研磨產物。可替換地，化學式(3)的化合物在下一步未經提純而被使用。
步驟3-化學式I的化合物的制備化學式(3)的化合物通過與化學式(4)的可選取代的1，3-丙二酮衍生物反應被轉化為化學式I的化合物。反應通過將化學式(3)的化合物懸浮在質子溶劑(優選乙醇)中，加入化學式(4)的化合物并回流混合物約2至16小時來完成。當反應基本完全時，用常規方法，例如濾出產物，分離化學式I的化合物。
例如，從化學式(4)的化合物開始，其中R5和R7為氫，而R6為4-甲氧基苯基，獲得化學式I的化合物，其中R2為4-甲氧基苯基吡唑-1-基。從化學式(4)的化合物開始，其中R5和R7為氫，而R6為-CO2Et，獲得化學式I的化合物，其中R2為4-乙氧羰基吡唑-1-基。然后，該酯基在堿性條件下水解得到游離酸，再通過本領域技術人員所熟知的方法或通過反應圖解IA所示的方法被轉化成諸如可選取代的氨化物的酸的衍生物。
反應圖解IA 化學式I，其中R6為乙氧基羰基 化學式I，其中R6為氨基步驟1-化學式I的化合物的保護，其中R6為乙氧基羰基化學式I的化合物，其中R6為乙氧基羰基，溶解在極性溶劑中，優選DMF，并加入咪唑和氯化叔丁基二甲基甲硅烷(tertiarybutyldimethylsilyl chloride)。反應在50-100℃的溫度下約進行12至48小時。當反應基本完全時，用常規方法分離產物，例如在減壓下除去溶劑，接著在硅膠上閃點層析(flash chromatography)殘余物。
步驟2-乙基酯水解成羧酸將步驟1所得的產物懸浮在水、醇、和強堿的混合物中，優選地，在甲醇中的氫氧化鉀。反應在0-40℃的溫度下，優選約25℃的溫度下進行約2至5天，優選約3天。當反應基本完全時，在減壓下除去溶劑，殘余物被酸化至pH值約為5，并用常規方法，例如過濾來分離產物。
步驟3-酰胺的制備將步驟2所得的產物溶解在惰性溶劑中，優選二氯甲烷，向其中加入HBTU、HOBt、N-甲基嗎啉、催化量的DMAP、以及化學式為HNRR的可選取代的氨化物，如上所定義。反應在0-40℃的溫度下，優選約25℃的溫度下進行約8至48小時，優選約24小時。當反應基本完全時，用常規方法分離產物。
步驟4-去保護將步驟2所得的產物用氟化胺的甲醇溶液進行處理。反應在約回流溫度下進行大約8至48小時，優選約24小時。當反應基本完全時，在減壓下除去溶劑，殘余物被酸化至pH值約為5，并用常規方法，例如通過制備TLC來分離產物。
化學式I的化合物，其中R2為可選取代的吡唑-4-基的制備方法示于反應圖解II中。制備吡唑-4-基衍生物的本方法以及其它一般方法參見美國專利第6,214,807號，其全部披露于此一作為參考。
反應圖解II 化學式I化學式(5)起始原料的制備通過本領域技術人員所熟知的方法來完成。化學式(9)的中間體的制備如下所示。
化學式(a)的1，3-二酮與肼在適當的溶劑中縮合獲得化學式(b)的吡唑，將其用化學式為R8Hal(鹵化R8)的合適鹵化物進行N-烷基化生成化學式(c)的化合物。用強堿在4位形成的陰離子經碘急冷獲得化學式(9)的4-碘衍生物(F.Effenberger et.al.J.Org.Chem.(1984)，49，4687)。
化學式(9)的碘吡唑在有銅鹽或無銅鹽的存在的情況下，通過與化學式(8)的化合物進行鈀介體偶合而被轉化成相應的化學式(10)的化合物(K.Kato et.al.J.Org.Chem.1997，62，6833-6841；Palladium Reagents and Catalysts-Innovations in Organic Synthesis，Tsuji，John Wiley and Sons，1995)。化學式(7)三丁基錫衍生物的合成在以前已有所描述(K.Kato et.al.J.Org.Chem.1997，62，6833-6841)，如以上反應圖解II所示。
化學式I的化合物，其中R2為乙炔基衍生物的制備方法示于反應圖解III。
反應圖解III 化學式I其中R8代表可選取代的芳基或芳烷基，而Z為氧、硫、或-NH-。
步驟1-化學式(12)的化合物的制備起始的化學式(11)的化合物(2-碘腺苷)按照文獻的步驟由鳥(嘌呤核)苷經四個步驟制得(M.J.Robins et.al.Can.J.Chem.(1981)，59，2601-2607；J.F.Cerster et.al.Org.Synthesis，242-243；V.Nair et.al.，J.Org.Chem.，(1988)，53，3051-3057)。
化學式(12)的化合物是通過化學式(11)的化合物6-氯取代基的置換，與化學式為R1XNH2的化合物，其中X為共價鍵或可選取代的亞烷基，在堿存在的情況下反應，用與以上所示化學式(2)的化合物的制備相同的方式而制備。
步驟2-化學式I的制備化學式I的化合物，其中R2為乙炔基衍生物，通過與化學式(13)的適當的取代的乙炔基衍生物反應由化學式(12)的化合物制得。反應在極性溶劑，優選DMF，在碘化銅和二氯雙(三苯基膦)鈀(II)催化劑的作用下，在約50-100℃的溫度下，優選在一個密閉試管中進行約2至16小時。當反應基本完全時，化學式I的產物用常規方法，如薄層層析(thin layer chromatography)經分離而得到。
優選方法和最后的步驟本發明的化合物可以按照以下的最后步驟制備。
1.化學式(3)的化合物 與化學式(4)的化合物接觸
2.化學式(8)的化合物 與化學式(9)的化合物接觸 并且將產物與具有弱酸，如氟化胺接觸，以除去保護基團。
3.化學式(12)的化合物
與化學式(13)的化合物在銅鹽和催化劑存在下進行接觸 用途、測試、和給藥一般用途化學式I的化合物可有效治療對給予A3腺苷受體(激動劑)起反應的疾病。這類疾病包括但不限于細胞增殖過程的調節。尤其是，作為A3受體激動劑的化合物在治療和/或預防癌癥、心臟病(包括作為缺血-再灌注劑的使用)、不育癥、腎臟疾病、和CNS紊亂等方面有一定效用。此外，它們在對抗藥物的毒副作用，尤其是諸如白細胞減少癥和嗜中性白細胞減少癥等化學治療藥物的毒副作用方面有一定作用。
測試如在上文作為參考的那些專利和專利申請中、以及在下面的實施例中所描述的，進行了活性試驗，這些試驗通過本領域技術人員熟知的方法來進行。
藥物組合物化學式I的化合物通常以藥物組合物的形式給予。因此本發明提供的藥物組合物，其包括，作為有效成分的一種或多種化學式I的化合物、或者其藥用鹽或酯、以及一種或多種藥用賦形劑、載體，包括惰性固體稀釋劑和充填劑，稀釋劑，包括無菌水溶液和各種有機溶劑，滲透促進劑、增溶劑、和佐劑。化學式I的化合物可單獨或與其它治療藥劑一起給予。這類組合物是用制藥技術領域熟知的方法進行制備(例如，參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mace Publishing Co.，Philadelphia，PA 17thEd.(1985)和“ModernPharmaceutics”，Marcel Dekker，Inc.3rdEd.(G.S.Banker & C.T.Rhodes，Eds.)。
給藥化學式I的化合物可通過任何具有相似效用的可接受的給藥方式、以單劑量或多劑量給予，例如，正如在那些作為參考文件的專利和專利申請中所描述的，包括直腸、口腔、鼻內、和經皮途徑，通過動脈內注射、靜脈內給藥、腹膜內給藥、胃腸道外給藥、肌內給藥、皮下給藥、口服、局部給藥，一般作為吸入劑，或者通過浸漬或涂覆裝置諸如支架(stent)，例如，或插入動脈的圓柱形聚合物給藥。
一種給藥方式為胃腸外給藥，尤其是通過注射。本發明新型的組合物可結合于其中用于注射給藥的形式，包括水或油懸浮液、或乳濁液，采用芝麻油、玉米油、棉子油、或花生油、以及酏劑、甘露醇、右旋糖、或無菌水溶液，以及類似的藥物載體。通常也將鹽水溶液用于注射，但在本發明中是較少優選的。也可以使用乙醇、丙三醇、丙二醇、液態聚乙二醇等(以及其合適的混合物)、環糊精衍生物、和植物油。適當的流動性可以通過如下方法來保持，諸如包衣的使用，如卵磷脂，在分散的情況下通過保持所需要的顆粒尺寸，以及通過使用表面活性劑。可以通過使用各種抗菌劑和抗真菌劑來預防微生物的作用，例如，對羥基苯甲酸酯類(parabens)、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、乙基汞硫代水楊酸鈉、以及類似物。
可注射的無菌溶液的制備如下在具有如上文所列舉的各種其它成分的適當溶劑中加入所需量的化學式I的化合物，如需要，繼之以過濾滅菌。一般，分散劑的制備如下將各種經滅菌的活性成分加入無菌載體中，其包括基本的分散介質和以上所列舉的所需的其它成分。在無菌粉末用于制備可注射無菌溶液的情況下，優選的制備方法是采用真空干燥和冰凍干燥技術，其從先前無菌過濾的溶液產生活性成分粉末以及任何額外的所需成分的粉末。
口服給藥是給予化學式I的化合物的另一種途徑。給藥可通過膠囊或腸溶衣片劑、或類似物。在制備包括化學式I的至少一種化合物的藥物組合物時，活性成分通常用賦形劑稀釋和/或封裝在這樣的載體中以致可以呈現膠囊劑、小藥囊、紙、或其它包裝物形式。當賦形劑用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體、或液體(如上述)，就活性成分而言，其其賦形劑、載體、或介質的作用。因此，該組合物的形式可以是片劑、丸劑、散劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液、糖漿劑、氣霧劑(作為固體或在液體介質中)、含有例如高達10％重量活性化合物的軟膏劑、軟膠囊劑和硬膠囊劑、可注射無菌溶液、以及無菌封裝的散劑。
合適賦形劑的一些例子包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯樹膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無菌水、糖漿、以及甲基纖維素。配方也包括潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂、和礦物油；濕潤劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑如羥苯甲酯和羥苯丙酯；甜味劑；以及增香劑。
通過采用本領域熟知的方法可以配制出本發明的組合物，在對患者給藥后，可提供活性組分的快速、持續、或延緩釋放。用于口服給藥的控釋給藥系統包括含有聚合物涂布的貯囊或藥物-聚合物基體配方的滲透泵系統和溶解系統。控釋系統的實例在美國專利第3,845,770號、第4,326,525號、第4,902514號、和第5,616,345號中給出。本發明使用方法的另一個配方采用透皮遞藥裝置(“貼劑”)。這類透皮貼劑可用于提供本發明化合物在受控量下的連續或不連續注入。用于遞藥的透皮貼劑的結構和使用是本領域熟知的。例如，參見美國專利第5,023,252號、第4,992,445號、和第5,001,139號。這類貼劑構成用于連續、脈沖、或按需要給藥。
這些組合物優選配制成單位劑型。術語“單位劑型”指物理上分離的單位，適用于人類和其它哺乳動物的單位劑量，每個單位包括預定量的活性材料，其經計算以產生所希望的治療效應，以及合適的藥物賦形劑(例如，片劑、膠囊劑、和針劑)。化學式I的化合物在寬劑量范圍內是有效的，并且通常給予有效藥物量。優選地，對于口服給藥而言，每劑量單位含有10mg至2g的化學式I的化合物，更優選的是10至700mg，而對于胃腸外給藥來說，優選的是10至700mg的化學式I的化合物，更優選的是約50至200mg。然而，需要理解的是，實際給予的化學式I的化合物的量將由醫生根據相關的情況決定，包括要治療的疾病、選擇的給藥途徑、給予的實際化合物及其相對活性、每個患者的年齡、體重和反應、患者癥狀的嚴重程度、以及類似情況。
為了制備片劑這樣的固體組合物，主要的活性成分與藥物賦形劑混合形成含有本發明化合物的均相混合物的固體預制劑組合物。當提到這些預制劑組合物為均相時，它是指活性成分均勻地分散到整個組合物中，從而使該組合物可以容易地細分成等效的單位劑型，如片劑、丸劑、和膠囊劑。
本發明的片劑或丸劑可以進行包衣或或通過其它方式進行混合以提供劑型，其具有作用時間長，或保護免受胃的酸性條件的作用的優點。例如，片劑或丸劑可包括內部劑量成分和外部劑量成分，后者以包封的形式裹住前者。這兩種成分可用腸溶層隔開，該腸溶層用于阻止成分在胃中的崩解并使得內部成分完整無損地送入十二指腸或被延緩釋放。各種材料都可用于腸溶層或包衣，這些材料包括許多高分子酸以及高分子酸與紫膠、十六烷醇、和乙酸纖維素的混合物。
用于吸入劑或吹入劑的組合物包括藥用溶液或有機溶劑、或其混合物、以及粉末。液體或固體組合物可以包含適當的如上文所述的藥用賦形劑。優選地，這些組合物可通過口服或鼻吸入途徑給予，產生局部或系統的效應。存在于優選的藥用溶劑中的組合物可通過使用惰性氣體進行霧化。霧化的溶液可通過霧化裝置直接吸入或者霧化裝置與面罩吸入器、或間歇式正壓呼吸機相連。從以適當方式遞送成分的裝置可給予溶液、懸浮劑、或粉末組合物優選口服或鼻內給藥。
下述實施例是用來說明本發明的優選實施例。對于本領域技術人員而言，在遵照發明者披露的有代表性的技術的實施例中所披露的技術可在本發明實施中得以很好應用，因此認為其構成了實施的優選方式。然而，本領域技術人員應認識到，根據本發明披露的內容，在不偏離本發明精神和范圍的情況下，可以對所披露的特定實施例進行許多改變并，獲得相同或相似的技術效果。
實施例1化學式(2)的化合物的制備A.化學式(2)的化合物的制備，其中R1為甲基，而X為共價鍵
3，4-二乙酰氧基-2-(2，6-二氯嘌呤-9-基)-5-(2-氧代丙氧基)四氫呋喃，化學式(1)的化合物(1mmol)懸浮在1∶4的甲基胺/MeOH的混合物中，該混合物在室溫下攪拌24小時。減壓下除去溶劑，殘余物在醚中研磨，得到(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇(酚)，即白色固體狀化學式(2)的化合物。
B.化學式(2)的化合物的制備，改變R1和X類似地，按照上述1A的步驟，但用丙胺和3-碘苯胺代替甲胺，制備以下化學式(2)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(丙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(3-碘苯胺基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化學式(2)的化合物的制備，改變R1和X類似地，按照上述1A的步驟，但用化學式R1XNH2的其它化合物代替甲胺，制備以下化學式(2)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(乙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(環丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(環丙基甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(環戊基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(苯胺基嘌呤-9-基)]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(4-氯芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(2-氟芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(吡啶-2-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(吡咯-3-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；D.化學式(2)化合物的制備，改變R1和X類似地，按照上述1A的步驟，但用化學式R1XNH2的其它化合物代替甲胺，制備化學式(2)的其它化合物。
實施例2化學式(3)的化合物的制備A.化學式(3)的化合物的制備，其中R1為甲基，而X為共價鍵
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-氯-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，化學式(2)的化合物(0.5mmol)懸浮在水合肼(5mL)的混合物中，混合物在室溫下攪拌24小時。減壓下除去肼，殘余物在醚中研磨并過濾，得到(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼基-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即白色固體狀化學式(3)的化合物。
B.化學式(3)的化合物的制備，變化R1和X類似地，按照上述2A的步驟，但用化學式(2)的丙胺和3-碘苯胺代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，制備以下化學式(3)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(3-碘苯胺基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化學式(3)的化合物的制備，變化R1和X類似地，按照上述2A的步驟，但用化學式(2)的其它化合物代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，制備以下化學式(3)的化合物(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(乙氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(環丙基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(環丙基甲氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(環戊基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(苯胺基嘌呤-9-基)-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(4-氯芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(2-氟芐氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(吡啶-2-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(吡咯-3-基氨基)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化學式(3)化合物的制備，不同的R1和X類似地，按照上述2A的步驟，但用化學式(2)的其它化合物代替2-[2-氯-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，制備化學式(3)的其它化合物。
實施例3化學式(I)的化合物的制備A.化學式(I)的化合物的制備，其中R1為甲基，R2為4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，而X為共價鍵 化學式I
(4S，2R，3R，5R)-2-[2-肼-6-(甲胺)嘌呤-9-基]-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇(0.5mmol)懸浮在3mL乙醇中，并向懸浮液中加入化學式(4)的化合物2-(4-甲氧基苯基)丙醛。該混合物加熱回流5小時，并將形成的沉淀過濾收集，用乙醇和醚洗滌，以得到(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(甲胺)嘌呤-9-基}-草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即化學式I的化合物，Ms，455.43(M+1)。
B.化學式I化合物的制備，變化R1、R2、和X類似地，按照上述3A的步驟，但用化學式(3)的其它化合物可選代替2-[2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基]-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，并用化學式(4)的其它化合物可選代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制備以下化學式I的化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(3-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(3-乙氧基羰基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(酰氨基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(甲基酰氨基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(乙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(丙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(環戊基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(乙基酰氨基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲基苯基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲基苯基)吡唑基]-6-(環戊基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-氯苯基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(嘧啶-5-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(嘧啶-5-基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-4-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-4-基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(苯并噁唑-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(苯并噁唑-2-基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(喹啉-2-基)吡唑基]-6-(3-甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(異喹啉-1-基)吡唑基]-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-正丁基-3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-正丙基-3，5-二甲基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化學式I的化合物的制備，改變R1，R2和X類似地，按照上述3A的步驟，但用化學式(3)的其它化合物可選代替2-(2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基)-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，并用化學式(4)的其它化合物可選代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制備以下化學式I的化合物
(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(乙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(乙氧基羰基)吡唑基}-6-(乙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(環丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(環丙基甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(丙基酰氨基)吡唑基]-6-(環丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(苯胺基嘌呤-9-基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[(吡啶-4-基)吡唑基}-6-(3-碘芐基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(芐氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(2-氟芐氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(吡咯-2-基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(吡咯-3-基甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化學式I的化合物的制備，變化R1、R2、和X類似地，按照上述3A的步驟，但用化學式(3)的其它化合物可選代替2-(2-肼-6-甲氨基嘌呤-9-基)-5-羥甲基四氫呋喃-3，4-二醇，并用化學式(4)的其它化合物可選代替2-(4-甲氧基苯基)丙醛制備以下化學式I的化合物實施例4化學式(12)的化合物的制備A.化學式(12)的化合物的制備，其中R1為甲基 40％的水合甲胺(1mL)與2-碘腺苷(100mg)的混合物在甲醇(2mL)中于室溫下攪拌12小時。過濾沉淀物，用醚洗滌并在真空下干燥，得到化學式(11)的化合物，2-碘-6-甲氨基腺苷。
B.化學式(12)的化合物的制備，變化R1類似地，按照上述4A的步驟，但用化學式R1NH2的其它胺取代甲胺，制備以下化學式(11)的化合物2-碘-6-正丙基氨基腺苷；和2-碘-6-(3-碘芐基)氨基腺苷。
C.化學式(12)的化合物的制備，變化R1類似地，按照上述4A的步驟，但用化學式HNRR的其它胺取代甲胺，制備以下化學式(11)的化合物2-碘-6-乙基氨基腺苷；2-碘-6-異丙基氨基腺苷；
2-碘-6-正己基氨基腺苷；2-碘-6-環丙基氨基腺苷；2-碘-6-環戊基氨基腺苷；2-碘-6-(3-羥基環戊基)氨基腺苷；2-碘-6-環戊基甲氨基腺苷；2-碘-6-苯基氨基腺苷；2-碘-6-芐基氨基腺苷；2-碘-6-(4-甲氧基芐基)氨基腺苷；2-碘-6-(4-氟芐基)氨基腺苷；2-碘-6-(吡啶-3-基)氨基腺苷；以及2-碘-6-(呋喃-2-基)氨基腺苷。
D.化學式(12)的化合物的制備，變化R1類似地，按照上述4A的步驟，但用化學式HNRR的其它胺替代甲胺，制備化學式(11)的其它化合物。
實施例5化學式I的化合物的制備A.化學式I的化合物的制備，其中R1為甲基，R2為3-苯氧基丙炔-1-基，而R8為苯基
在23℃下將溶于N，N-二甲基甲酰胺(1ml)和三乙基胺(0.021mL，0.16mmol)的2-碘-6-甲氨基腺苷(50mg)和丙-2-炔基羥苯(0.022mL，0.16mmol)的溶液中加入碘化銅(5mg，0.026mmol)和二氯雙-(三苯基膦)鈀(II)(22mg，0.031mmol)的催化劑。在一個密閉的反應小瓶中于80℃攪拌6小時，反應(物)在真空下被濃縮，而殘余物用預備的薄層色譜(二氯甲烷∶甲醇9∶1)提純以得到(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(甲氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]-草脲胺(oxolane)-3，4-二醇，即化學式I的化合物，MS412.1(M+1)。
B.化學式I的化合物的制備，變化R2類似地，按照上述5A的步驟，但用化學式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羥苯，制備化學式I的以下化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[2-(3-羥基-3-苯基丙-1-炔基)-6-(甲氨基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-2-{2-[3-(4-氯苯氧基)丙-1-炔基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-2-{2-[3-(2-甲氧基苯氧基)丙-1-炔基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}-5-(羥甲基)草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
C.化學式I的化合物的制備，變化R1、R2、和X類似地，按照上述5A的步驟，但用化學式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羥苯，制備化學式I的以下化合物(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(乙氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(正丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(異丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；
(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(正己基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(環丙基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(環戊基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(3-羥基環戊基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(環戊基甲氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(苯基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(芐氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(4-甲氧基芐氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(4-氟芐氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(吡啶-3-基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以及(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[6-(呋喃-2-基氨基)-2-(3-苯氧基丙-1-炔基)嘌呤-9-基]草脲胺(oxolane)-3，4-二醇。
D.化學式I的化合物的制備，變化R1、R2、和X類似地，按照上述5A的步驟，但用化學式(7)的其它化合物代替丙-2-炔基羥苯，制備其它化學式I的化合物。
實施例6類似地，按照上述反應圖解II的步驟，如美國專利第6,214,807號所述，制備化學式I的以下化合物，其中R2為可選取代的C-吡唑(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羥基-5-(羥甲基)草脲胺(oxolan)-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)酰胺；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[1-芐基吡唑-4-基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[1-芐基吡唑-4-基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[1-芐基吡唑-4-基]-6-(3-碘苯基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺(oxolane)-3，4-二醇；以下實施例說明代表性的含有化學式I的化合物的藥劑的制備，例如那些根據實施例1制備的化合物。
實施例7制備含有以下成分的硬質凝膠膠囊含量成分(mg/膠囊)活性成分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0混合以上成分并填充進入硬質凝膠膠囊中。
實施例8用以下成分制備片劑含量成分 (mg/片劑)活性成分25.0纖維素，微晶200.0膠體二氧化硅10.0硬脂酸 5.0將組分混合并擠壓以形成片劑。
實施例9制備含有以下成分的干粉吸入劑型成分重量％活性成分 5乳糖 95將活性成分與乳糖混合，而混合物則加入干粉吸入裝置。
實施例10每個含有30mg活性成分的片劑的制備如下含量成分(mg/藥劑)活性成分30.0mg
淀粉 45.0mg微晶纖維素35.0mg聚乙烯吡咯烷酮(作為10％的無菌水溶液)4.0mg羧甲基鈉淀粉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石粉1.0mg合計 120mg活性成分、淀粉、和纖維素通過一個20目美國篩(No.20meshU.S.sieve)并徹底地進行混合。聚乙烯吡咯烷酮溶液與生成的粉末混合，然后通過一個16目美國篩(No.16mesh U.S.sieve)。如此制備的顆粒在50℃至60℃干燥，并通過一個16目美國篩。先前通過30目美國篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂、和滑石粉加入到顆粒中，混合后，在壓片機上進行擠壓以得到每個重量為120mg的片劑。
實施例11每個含有25mg活性成分的栓劑的制備如下成分含量活性成分25mg飽和脂肪酸甘油酯2,000mg活性成分通過60目美國篩并懸浮在飽和脂肪酸甘油酯中，該脂肪酸甘油酯利用所需的最低熱量進行熔化。然后將混合物注入公稱2.0g的栓劑摸具中并使其冷卻。
實施例12每個含有50mg活性成分/5.0mL劑量的混懸劑的制備如下成分含量活性成分 50.0mg黃原膠4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75g苯甲酸鈉 10.0mg香料和著色劑按所需之量純凈水，達5.0mL將活性成分、蔗糖、和黃原膠進行混合，通過10目美國篩，然后與先前制備的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的水溶液混合。攪拌加入用水稀釋的苯甲酸鈉、香料、與著色劑。然后加入足夠的水以生成所需要的容積。
實施例13皮下劑型可制備如下成分量活性成分5.0mg玉米油 1.0mL
實施例14制備注射用制劑，其具有下述組分成分含量活性成分 2.0mg/ml甘露醇，美國藥典(USP)50mg/ml葡糖酸，美國藥典(USP)適量(PH5-6)水(蒸餾，無菌) 適量至1.0ml氮氣，美國處方集(NF) 適量實施例15制備了局部用制劑，其具有下述組分成分克活性成分0.2-10山梨糖醇酯類(Span60) 2.0吐溫(Tween60) 2.0礦物油5.0凡士林0.10羥苯甲酸甲酯(methyl paraben) 0.15對羥苯甲酸丙酯(propyl paraben)0.05BHA(丁基化羥基苯甲醚) 0.01水適量至100
除水之外，合并所有上述其他成分并加熱到60℃，同時攪拌。然后，在60℃下加入足量的水，同時劇烈攪拌，以便對成分進行乳化，然后加入適量至100g的水。
實施例16緩釋組合物重量 優選最優選的成分范圍(％) 范圍(％)范圍(％)活性成分 50-95 70-90 75微晶纖維素(充填劑)1-35 5-1510.6甲基丙烯酸共聚物 1-35 5-12.5 10.0氫氧化鈉 0.1-1.0 0.2-0.6 0.4羥丙基甲基纖維素 0.5-5.0 1-3 2.0硬脂酸鎂 0.5-5.0 1-3 2.0本發明的緩釋劑型的制備如下將化合物和pH依賴粘合劑以及任何可選的賦形劑緊密混合(干混)。然后，在強堿水溶液存在的情況下粒化干混的混合物，該強堿水溶液被噴射入混合的粉末中。干燥顆粒，篩選，與可選的潤滑劑(諸如滑石粉或硬脂酸鎂)混合，并壓制成片劑。優選的強堿水溶液為堿金屬氫氧化物溶液，諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀，優選氫氧化鈉水(可選地含有高達25％的水混溶溶劑，如低級醇類)。
生成的片劑可以用可選的成膜劑進行包衣，以便于鑒定(分辨)、味道掩蓋、和便于吞服。成膜劑通常存在的量位片劑重量的2％至4％之間。適當的成膜劑在本領域是熟知的，并且包括羥丙基甲基纖維素、陽離子甲基丙烯酸酯共聚物(二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯/甲基丁基甲基丙烯酸酯共聚物-EudragitE-Rhm.Pharma)，以及類似物。這些成膜劑可選地包含著色劑、增塑劑、和其它輔助成分。
優選地，壓制片劑具有足以承受8Kp壓力的硬度。片劑大小將主要取決于片劑中化合物的量。這些片劑將包括300至1100mg的復合游離堿。優選地，這些片劑將包括400-600mg、650-850mg、以及900-1100mg的復合游離堿。
為了改變溶解速率，需控制含粉末化合物的濕混時間。優選地，整個粉末混合時間，即粉末暴露于氫氧化鈉溶液的時間為1至10分鐘，優選為2至5分鐘。在成粒后，將顆粒從成粒機中移走并放置在流化床干燥器中在約60℃進行干燥。
縮寫詞Gpp(NH)p5’-脒基-酰亞胺二磷酸酯(5’-guanylyl-imididodiphosphate)R-PIA苯基異丙基腺苷TEM緩沖液包含50mM Tris、1mM乙二胺四乙酸(EDTA)、和10mM MgCl2的緩沖液試劑腺苷脫氨基酶自Boehringer Mannheim BiochemicalsIndianapolis，IN購買。R-PIA、DMSO、和咯利普蘭(rolipram)從Sigma-RBI(Natick，MA)獲得。
粘合測定(Binding Assavs)細胞培養由人類腺苷A3受體穩定地轉染的CHO細胞(中國倉鼠卵巢細胞)，利用達爾伯克改良伊格爾培養基(DMEM)，在陪替氏培養皿中以單(細胞)層生長，其中是在95％的空氣和5％的CO2的潮濕環境中進行的，該達爾伯克改良伊格爾培養基含有2.5μgml-1的兩性酶素B、100Uml-1的青霉素G、0.1mgml-1的鏈霉素硫酸鹽、和5％胎牛血清。通過在無二價陽離子并含有1mM EDTA的漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)中將細胞每周進行次代培養兩次。然后，這些細胞在密度為每平皿1.2×105個細胞的生長培養基中接種，在大約1天預融合的4天后進行試驗。
膜制備附粘的細胞用HBSS(2×10ml)洗滌2次，在4℃下5ml的50mM的pH值為7.4的三-HCl(Tris-HCl)緩沖液中，借助橡膠淀帚刮凈平皿(plate)，并且懸液均化10s(秒)。然后，將該懸液在27,000xg離心10分鐘。通過如上所述的渦流和離心使顆粒(pellet)再次懸浮在均化的緩沖液中。最終的顆粒再次懸浮在1vol的50mM的pH值為7.4的含有5mM MgCl2的三-HCl緩沖液中，用于粘合測定。對于[35S]GTPγS的粘合測定，最終的顆粒再次懸浮在pH值為7.4的50mM的三-HCl緩沖液中，該緩沖液含有5mM MgCl2、100mMNaCl、和1mM二硫蘇糖醇。然后，將該膜懸浮體置于液氮中10分鐘、融化并用于測定。以牛血清白蛋白為標準，用BradfordTM測定裝置測定蛋白質含量。
競爭性粘合測定測定化學式I的化合物以確定它們對于人類腺苷A3受體的親和性，該受體位于由CHO細胞析取的膜。簡單地說，0.2mg細胞膜用具有恒定混合的腺苷脫氨基酶和50mM的Tris緩沖液(pH值＝7.4)培育。2μL連續稀釋的本發明化合物DMSO儲液，其濃度范圍從0至100μM至10nM。該控制僅接受2μL的DMSO，然后是[3H]苯基異丙基腺苷(3H PIA)、A3受體激動劑，溶解在Tris緩沖液(50mM，pH值＝7.4)中并加入到細胞(最終濃度為2nM)。在23℃培育2小時后，過濾溶液，并將過濾盤放置在閃爍雞尾酒(scintillation cocktail)中。用本發明的競爭性粘合組合物代替[3H]苯基異丙基腺苷的測定通過閃爍計數確定。
由取代試驗生成的數據通常用稱為取代曲線的S形曲線進行擬合，即專門結合的放射性標記的配位體與log[取代劑]M的百分比。該曲線拐點的的橫坐標給出IC50值，即取代或抑制專門結合的50％放射性配位體的取代劑濃度。IC50是取代劑對于受體的抑制劑或的親和常數(Ki)量度。如果取代屬競爭型，則IC50與Ki的關系如下Ki＝IC50/(1+[C*]/Kd*這就是Cheng-Prusoff等式(Biochem.Pharmacol，223099(1973))其中，[C*]是放射性配位體的濃度，而Kd*是其離解常數。
實施例17[35S]GTPγS的粘合測定腺苷A3激動劑刺激[35S]GTPγS粘合的能力通過Lorenzen et al.(1996 Mol.Pharmacol.49915)所述的方法的修改方法來測定。簡單地說，與CHO細胞(30-50μg)分離的膜在0.1ml體積的溶液中培育，該溶液包括50mM的Tris-HCl緩沖液(pH值＝7.4)、5mMMgCl2、100mM NaCl、和1mM二硫蘇糖醇、0.2單位ml-1腺苷脫氨基酶、0.5％BSA、1mM EDTA、10mM GDP、和0.3nM[35S]GTPγS。加入不同濃度的PIA或假定的A3激動劑，而細胞在30℃培育90分鐘。通過向一些膜懸浮體中加入10μM的GTPγS來測定非特性粘合。在培育末期，過濾各懸液并按如上所述測定殘留的放射性。
實施例18cAMP測定化合物抑制弗司扣林(forskolin)刺激的cAMP積累的能力通過培育CHO1細胞來測定，該細胞置于底部清潔的96井(well)微量滴定平皿中，在37℃40ul濃度在每井104至106個細胞之間的HBSS中(5％CO2和95％濕度)。CHO細胞用不同濃度下假定的腺苷A3受體的激動劑在咯利普蘭(50uM)和5uM弗司扣林存在下于37℃培育10分鐘。細胞經5ul的10％十二烷基三甲基溴化胺處理并隨后用微盤晃動器晃動后，細胞立即溶解。
通過Harper和Brooker(1975.J.Cyclic nucleotide Res 1207)所述的放射性免疫測定方法的修改方法測定上清液中cAMP含量。簡單地講，上清液的等分試樣(0.01mL)與以下物質混合，即0.04mL的HBSS、含有10mmol/L CaCl2的0.05mL 50mmol/L醋酸鈉緩沖液(pH值為6.2)、[125I]ScAMP-TME(12500dpm)、以及0.05mL的抗-cAMP抗體(1∶2000稀釋于蒸餾水中的0.1％的牛血清清蛋白)。然后，將樣品在4℃培育16小時。培育末期，每個管中加入70μl50％(wt/vol)的羥基磷灰石懸浮液。輕輕攪拌懸浮液，然后在4℃培育10分鐘。吸收了抗體結合放射性的羥基磷灰石被收集至玻璃纖維過濾器中，該收集通過使用Brandel細胞收集器依靠真空過濾而實現。由過濾器保留的放射性用微克(gamma)自動取樣計數器計數。結果表示為總[I125I]ScAMP結合(bound)減去非特性[125I]ScAMP-TME結合的量(即，在3μmol/L未標記的cAMP存在下[I125I]ScAMP結合的量)。
盡管本發明已經參照其特定的實施例進行了說明，但是，對于本領域的技術人員來說，在不偏離本發明真實精神和范圍的情況下，可以有各種變更和等同替換。此外，在本發明的精神和范圍內可以進行許多變更以適應特定的場合、材料、物質的組和物、工藝、一個工藝步驟或多個工藝步驟。所有這些等變更都由本申請的保護范圍的內容涵蓋。上文引用的所有專利和出版物結合于此作為參考。
權利要求
1.一種化學式I的化合物 化學式I其中，R1是可選取代的低級烷基、可選取代的環烷基、可選取代的芳基、或可選取代的雜芳基；X是共價鍵或可選取代的亞烷基；R2是R4-Z-Y-C≡C-或可選取代的吡唑基其中Y是可選取代的亞烷基，Z是氧、硫或-NH-，而R4是可選取代的芳基或可選取代的雜芳基；以及R3是羥甲基或-C(O)-NR5R6；其中R5和R6獨立地是氫或低級烷基。
2.根據權利要求1所述的化合物，其中R2是可選取代的吡唑-1-基。
3.根據權利要求2所述的化合物，R1是可選取代的烷基或可選取代的芳基，而R3是羥甲基。
4.根據權利要求3所述的化合物，其中R2是由可選取代的低基烷基、酯、氨羰基、可選取代的芳基、或可選取代的雜芳基所取代的吡唑-1-基。
5.根據權利要求4所述的化合物，其中吡唑-1-基由可選取代的苯基或可選取代的芐基取代。
6.根據權利要求5所述的化合物，其中R1是可選取代的低級烷基，而X是共價鍵。
7.根據權利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
8.根據權利要求6所述的化合物，其中R1是正丙基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-甲氧基苯基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
9.根據權利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-氯芐基氨羰基)吡唑-1-基，即(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羥基-5-(羥甲基)草脲胺-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)羧酰胺。
10.根據權利要求6所述的化合物，其中R1是甲基，而R2是4-(4-氯芐基氨羰基)吡唑-1-基，即(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羥基-5-(羥甲基)草脲胺-2-基]-6-(甲氨基)嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-(4-氯苯基)羧酰胺。
11.根據權利要求4所述的化合物，其中R2是由可選取代的雜芳基取代的吡唑-1-基。
12.根據權利要求11所述的化合物，其中R1是正丙基，而R2是4-(吡啶-2-基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-[4-(吡啶-2-基)吡唑基]-6-(正丙基氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
13.根據權利要求5所述的化合物，其中R1是可選取代的芳基，而X是亞烷基。
14.根據權利要求13所述的化合物，其中R1是3-碘芐基，而R2是4-(4-甲氧基苯基)吡唑-1-基，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[4-(4-(甲氧基苯基)吡唑基)-6-(3-碘芐氨基)嘌呤-9-基]草脲胺-3，4-二醇。
15.根據權利要求1所述的化合物，其中R2是可選取代的吡唑-4-基。
16.根據權利要求15所述的化合物，其中R1是可選取代的烷基或可選取代的芳基，R3是羥甲基，而X是共價鍵。
17.根據權利要求16所述的化合物，其中R1是甲基，R2是1-芐基吡唑-4-基，R3是羥甲基，而X是共價鍵，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[1-芐基吡唑基]-6-(甲氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
18.根據權利要求16所述的化合物，其中R1是正丙基，R2是1-芐基吡唑-4-基，R3是羥甲基，而X是共價鍵，即(4S，2R，3R，5R)-5-(羥甲基)-2-{2-[1-芐基吡唑基]-6-(正丙氨基)嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇。
19.根據權利要求1所述的化合物，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-。
20.根據權利要求19所述的化合物，其中R4是可選取代的苯基，而Y是1-3個碳原子的亞烷基。
21.根據權利要求20所述的化合物，其中R4是由甲氧基或氯基可選取代的苯基，而Y是亞甲基。
22.根據權利要求21所述的化合物，其中R1是可選取代的烷基，X是共價鍵，而R3是羥甲基。
23.根據權利要求22所述的化合物，其中R1是甲基，R4是苯基，而Z是氧，即2-羥甲基-5-[6-甲基氨基-2-(3-苯氧基丙炔-1-基)嘌呤-9-基]-四氫呋喃-3，4-二醇。
24.一種可通過A3腺腺苷受體激動劑的治療緩解的哺乳動物疾病狀態的治療方法，所述方法包括給予需要的哺乳動物有效治療劑量的權利要求1所述的化合物。
25.根據權利要求24所述的方法，其中所述疾病狀態是癌癥。
26.根據權利要求24所述的方法，其中所述疾病狀態是嗜中性白細胞減少癥。
27.一種藥物組合物，包括至少一種藥用賦形劑，以及治療有效劑量的權利要求1所述的化合物。
28.一種制備化學式I化合物的方法 化學式I其中，R2是可選取代的吡唑-1-基；包括將化學式(3)的化合物 與化學式(4)的化合物接觸
29.根據權利要求28所述的方法，其中反應可在以下惰性溶劑中完成，所述惰性溶劑選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、和叔丁醇。
30.一種制備化學式I化合物的方法 化學式I其中，R2是可選取代的吡唑-4-基；包括化學式(8)的化合物 與化學式(9)的化合物 在溶于惰性溶劑的鈀絡合物和銅鹽的存在下接觸，并將產物與弱酸接觸。
31.根據權利要求30所述的方法，其中所述鈀絡合物為Pd(PPh3)4，所述銅鹽為CuI，所述惰性溶劑為N，N-二甲基甲酰胺，而所述弱酸為氟化胺。
32.一種制備權利要求1所述的化合物的方法，其中R2是R4-Z-Y-C≡C-；包括在惰性溶劑中，將化學式(12)的化合物 與化學式(13)的化合物 在弱堿、銅鹽、及鈀催化劑的存在下接觸。
33.根據權利要求32所述的方法，其中所述惰性溶劑為N，N-二甲基甲酰胺，所述堿為三乙基胺，所述銅鹽為碘化銅，所述鈀催化劑為二氯雙-(三苯膦)鈀(II)。
全文摘要
本發明涉及化學式I的新型化合物，該化合物是A3腺苷受體激動劑，該化合物對于治療諸如癌癥、心臟缺血、白細胞減少、和嗜中性白細胞減少癥等各種疾病狀態有益。化學式(I)中，R
文檔編號C07H19/173GK1538972SQ02815486
公開日2004年10月20日 申請日期2002年8月6日 優先權日2001年8月8日
發明者埃爾法蒂赫·埃爾扎因, 文卡塔·帕勒, 維布哈夫·瓦爾凱赫特卡, 杰夫·扎布沃茨基, 帕勒, 埃爾法蒂赫 埃爾扎因, 夫 瓦爾凱赫特卡, 扎布沃茨基 申請人:Cv醫藥有限公司