專利名稱:鉬在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用的制作方法
技術領域:
本發明涉及醫藥技術領域,具體地說是鑰在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用。
背景技術:
鑰為人體及動植物必須的微量元素。為銀白色金屬,硬而堅韌。人體各種組織都含鑰,成人體內總量為9mg,肝、腎中含量最高。鑰在機體的主要功能是參與硫、鐵、銅之間的相互反應。鑰是黃嘌呤氧化酶、醛氧化酶和亞硫酸氧化酶發揮生物活力的必需因子,對機體氧化還原過程中的電子傳遞、嘌呤物質與含硫氨基酸的代謝具有一定的影響。在這三種酶中,鑰以喋呤由來性輔助因子的形式存在。鑰還能抑制小腸對鐵、銅的吸收,其機制可能是鑰可競爭性抑制小腸粘膜刷狀緣上的受體,或形成不易被吸收的銅-鑰復合物、硫-鑰復合物或硫鑰酸銅(Cu-MoS)并使之不能與血漿銅藍蛋白等含銅蛋白結合。鑰為多種酶的組成部分,鑰的缺乏會導致齲齒、腎結石、克山病、大骨節病、食道癌等疾病。鑰還被用于治療長期依賴靜脈高營養的患者和奶牛飼料中,但有關低鑰增強雄鼠生殖能力的研究還未見相關文獻報道。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供了鑰的新用途,即鑰在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用。本發明為解決上述技術問題所采用的技術方案是:鑰在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用,所述鑰每天的攝入量為0.056mg"0.135mgo本發明的有益效果是:本發明提供的一定量的鑰可以有效地用于增強雄鼠生殖能力中,對于雄鼠生殖能力的增強效果顯著,無明顯不良反應。
圖1為精液抹片示意 圖2為飲水染鑰后所致小鼠精子畸形照片;
圖中標記:A、尾部卷曲;B、正常形態;C、無頭;D、雙主段;E、短主段;F、無主段;G、小頭;H、大頭;1、連接部崎形;J、頭部崎形。圖3為不同濃度鑰對精子參數的影響。
具體實施例方式鑰在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用,所述鑰每天的攝入量為
0.056mg 0.135mg0本發明中,鑰制成的藥物中鑰的濃度為12.5 30mg/L,每只小鼠每天飲用4.5ml含有鑰的藥物。
實驗例
1.選用性成熟ICR雄鼠(8周齡)60只,體重25-30 g。飼養環境溫度25±2°C。小鼠自由采食,自由飲用不同鑰(Mo)含量的蒸餾水,每天14 h光照,10 h黑暗條件。2.將小鼠隨機分為六組,每組10只,分別讓其自由飲用鑰濃度為0、12.5、25、50、100、200 mg/L的蒸餾水4.5ml,攻毒時間為2周。3.2周之后,先給小鼠稱重,脊椎脫日法致死小鼠后,立即剪開腹腔,分離并摘取雙側附睪,迅速去除多余的脂肪組織,在電子天平上稱取附睪的質量,用以計算附睪系數(附睪系數=附睪重量/體重)。然后,把附睪放到含37°C預熱的生理鹽水小平皿中,用眼科剪在附睪尾剪口,用移液器輕輕吹打1-2次,在37°C水浴鍋上孵育,30min后,測定精子參數(包括精子活力、精子密度和精子畸形率)。4.精子活力和密度測定:將擦干凈的細胞計數板放于顯微鏡的載物臺上,蓋上蓋玻片,預溫;取20uL稀釋好的精液滴在計數板蓋玻片的邊緣使精液自動滲進計數室,25-30°C的環境中,在10X20倍鏡下,計數左上角至右下角五個中方格的總精子數,以精子的頭部為準,依“數上不數下,數左不數右”的原則進行計數位于格線上的精子,先求出五個大方格中非直線運動的精子數,然后人為致死精子,計數五個大方格(80個小方格)中總精子數,根據公式,即可得出精子活力和每毫升的精子數。精子活力=(總精子數-非直線前進運動精子數)/總精子數 每毫升所含精子數=(X/80) X 400 X稀釋倍數X10000
為了減少誤差,必須進行兩次計數,如果前后兩次誤差大于10%,應作第三次檢查。最后在三次檢查中取兩次誤差不超過10%,求出平均數,即為所確定的精子數。5.精子畸形率測定:取20uL精子懸液,滴于清潔載玻片上,右手拿一載玻片或蓋玻片,使其與左手拿的載玻 片呈向右的45度角,并使其接觸面在精液滴的左側。將載玻片向右拉至精液剛好進入兩載玻片形成的角縫中,然后平穩地推至左邊(不得再向回拉),做成精液抹片(見圖1)。必須注意精液抹片不要太厚,同時要防止用力過大而造成人為的畸形精子數增多。抹片后,使其自然風干。晾干后用甲醇固定5min,用1%伊紅染色3-5min,水洗,待干后鏡檢。載玻片放在400 X顯微鏡下進行觀察,隨機計數若干個視野200個左右的精子。然后按下列公式計算出畸形精子的百分數:
精子畸形率=(非正常精子數/計數的總精子數)X100%
結果
不同濃度鑰對精子參數的影響見圖3 ;
注:圖3中*表示與O mg/L組相比在P < 0.05水平差異顯著;**表示與O mg/L組相比在P〈 0.01水平差異顯者。由圖3可得,當鑰的濃度為25mg/L時,附睪系數、精子活力和密度顯著高于Omg/LMo濃度組(P < 0.01),精子畸形率顯著低于Omg/L Mo濃度(P < 0.01),精子畸形的圖片見圖2。鑰的濃度彡100mg/L時,與Omg/L Mo組相比,附睪系數、精子活力和密度顯著降低(P < 0.01),精子畸形率顯著升高(P < 0.01)。鑰濃度為12.5和50 mg/L時,生殖參數沒有發生顯著變化。這表明25mg/L Mo對雄性小鼠生殖能力有增加作用,但100mg/L Mo對雄性小鼠生殖有明顯的毒性作用。
權利要求
1.鑰在制備增強雄鼠生殖 能力的藥物中的應用,所述鑰每天的攝入量為0.056mg .0.135mg
全文摘要
鉬在制備增強雄鼠生殖能力的藥物中的應用,所述鉬每天的攝入量為0.056mg~0.135mg。本發明提供的一定量的鉬可以有效地用于增強雄鼠生殖能力中,對于雄鼠生殖能力的增強效果顯著,無明顯不良反應。
文檔編號A61K33/24GK103099815SQ20131002467
公開日2013年5月15日 申請日期2013年1月23日 優先權日2013年1月23日
發明者劉鳳軍, 張玉玲, 翟小偉, 陳曉麗, 王玉琴, 靳麗軍, 麻雪剛, 楊自軍 申請人:河南科技大學