專利名稱：含有用于松弛平滑肌的活性成分的脂質體組合物、該組合物的制備方法及其治療應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及基于可局部施用的在脂質體中的活性成分的藥物組合物，以及該組合物的制備方法和其應用，所述藥物組合物增強流經組織，尤其是在生殖區域中的血流。
背景技術：
已知脂質體是用于可控釋放藥物活性成分的試劑(參見例如Ulrich的評述，Biosci Rep.2002；22(2)129-50或者WO 96/14083，在脂質體中的SOD)。在局部應用脂質體中的局部麻醉劑的制劑也為本領域技術人員所已知；例如，US-4937078描述了含有常用鈉通道阻斷劑諸如丁卡因、利多卡因等的脂質體。其他已知化合物是能促進流經組織的血流特別是已知通過其應用來消除勃起機能障礙和陽痿的化合物(參見例如WO94/28902和EP 0967214 A1)。

發明內容
盡管已知的基于吡唑并嘧啶酮(pyrazolopyrimidones)和吡唑嘧啶酮(pyrazolopyrimidinones)的活性成分制劑作為通過口服施用或者鼻內施用的制劑存在，但是本發明的目的是提供用于所述物質的有效局部應用(優選為直接在生殖區域應用)的組合物，特別是提供一種使得這些活性成分的總體較低但同時在女性或男性性器官區域具有足夠高的局部劑量的制劑。
根據本發明，通過提供用于局部，尤其是經皮和/或經粘膜施用活性成分的脂質體系統實現所述目的，所述活性成分松弛平滑肌，尤其是在性器官中供血血管的平滑肌。例如，可通過鈣離子的誘導分泌觸發此效果。


圖1顯示在DPPC/膽固醇脂質體中的西地那非包封量作為泡囊尺寸函數的示圖。
具體實施例方式
在第一實施方案中，本發明涉及一種制劑，在該制劑中，活性成分是包封在脂質體中和/或以與脂質體結合的形式存在，其優選為選自由前列腺素、腺苷酸環化酶、cAMP、AMP、ATP、NO-合成酶、一氧化氮(NO)、NO化合物、硝酸鹽、鳥苷酸環化酶、cGMP、GMP、GTP和磷酸二酯酶，尤其是西地那非、他達那非(tadalafil)、伐地那非(vardenafil)構成的組。
本發明的脂質體制劑不僅僅實現將活性成分暫時儲存在周圍組織(從中持續釋放物質)中，而且與全身性應用相比具有更好的生物利用率和更長的半衰期。
對平滑肌細胞的松弛效果導致流經外部治療的組織，例如性器官的血流增強，并因此導致性行為中的較高敏感性和感受性。
在本發明上下文中的活性成分或活性物質尤其是能介入cAMP或cGMP循環并引起較高Ca離子分泌的物質。其包括例如刺激cAMP途徑的諸如罌粟堿和酚妥拉明等物質；行使重要的遞質功能并激活鳥苷酸環化酶(隨后形成cGMP)的一氧化氮(NO)；NO供體；甘油三硝酸酯；米諾地爾；L-精氨酸；林西多明(在體內通過NO-合成酶將精氨酸轉化為瓜氨酸而形成)；嗎多明；磷酸二酯酶抑制劑，例如介入cGMP途徑(其中涉及PDE5受體)的例如西地那非或枸櫞酸西地那非；前列腺素，例如介入cAMP循環的例如前列地爾(PGE-1)、地諾前列酮(PGE-2)。
除非有來自各自上下文的明顯指明，否則當在下文中提及西地那非時，也同時指他達那非、伐地那非及它們的酸性鹽，例如枸櫞酸西地那非和伐地那非HCl·3H2O(三水合鹽酸伐地那非)等。
在WO 02/36257中公開的用于活性成分包封的可逐級(scalable)方法已證實在制備和用活性成分裝載脂質體時特別有利，這是由于該方法的高效率和其極其溫和的條件。該方法通常用于制備具有脂質雙層膜的單層脂質體，其非常優異的皮膚穿透性已在以前的工作中得以公認和證明。然而，也可以使用現有技術中公開的用于制備和裝載脂質體的其他方法。
通過用活性成分主動裝載脂質體可以實現最大裝載密度。該過程可以分為兩個主要類別膜裝載和脂質體內水相裝載。含有諸如氨基等可質子化基團的活性成分可以通過H+梯度受控裝載而包含在脂質體中并以質子化狀態保留在其中。對于此類主動裝載，最重要的特征是脂質體膜/脂質體介質分配系數。已發現辛醇/緩沖液分配系數提供了良好的物質跨膜擴散的指示并因此與活性成分的裝載或與釋放曲線相關。
在此理論模型的基礎上，具有不同脂質組成，優選含有長鏈磷脂并具有低膽固醇濃度的脂質體在合適的裝載緩沖劑，優選在硫酸銨或枸櫞酸/碳酸鈉緩沖液中制備。在硫酸銨或枸櫞酸鹽緩沖液中制備脂質體后，改變周圍介質，即交換或稀釋周圍介質，可選為中和周圍介質或使周圍介質堿性化，由此在脂質體內緩沖劑和脂質體外介質間形成H+梯度。在向脂質體外介質中加入活性成分后，由于該H+梯度，所述活性成分遷移進入脂質體，在其中質子化并在脂質體中保持穩定。
在該技術的應用中，裝載的程度或裝載容量主要由脂質體內部和外部H+濃度的比率決定。在已進行的試驗中，使用每μmol脂質200nmol～400nmol活性成分的活性成分/脂質比率可實現與來自于涉及主動裝載脂質體的文獻中已知值相近的值。裝載介質中活性成分濃度的增加沒有導致裝載容量的增加。
上述主動裝載是由泡囊成形、活性成分添加和堿性化構成的三階段方法。因此，本發明的又一個目的是建立利用在WO 02/36257中公開的交叉流動模塊可以實現的單階段制備方法。為此目的，將所述活性成分溶解在富含H+的水相例如硫酸銨溶液或枸櫞酸溶液中，并通過交叉流動注射技術并隨后立即使用稀釋緩沖劑(例如在硫酸銨系統中的5％葡萄糖溶液或者在枸櫞酸鹽系統中的pH 9.0～9.5的枸櫞酸/碳酸鈉)稀釋剩余的外部(＝脂質體外)水相而包封在脂質體中。已發現裝載有活性成分的脂質體的質量，尤其是關于其皮膚透過性可簡單地通過改變尤其是減少泡囊膜中膽固醇含量得以改善。
當需要或期望時，所述裝載容量可進一步通過將平均脂質體尺寸從大約150nm～200nm(正如在此處描述的實驗中通常所使用的)提高至300nm～500nm。此外，也可通過在制備過程中或在隨后過濾泡囊過程中提高脂質濃度而進一步提高所述方法的效率，即每ml混懸液中脂質體包封的活性成分的量。
如果將西地那非用作活性成分，所述硫酸銨/葡萄糖溶液系統優選用于主動裝載，這是由于西地那非在枸櫞酸鹽緩沖液中溶解性很差或者完全不溶。NH3在脂質體內水性介質中與硫酸銨以可逆平衡形式存在，并試圖跨脂質體膜向外遷移并留下H+。西地那非以相反方向遷移入脂質體，接受所述氫離子H+，由此變得更親水并因此保留在膜內。按此方式，西地那非可有效地裝載入脂質體。這還以類似方式應用于西地那非替代物他達那非和伐地那非。
為確定關于膜柔韌性和相關的皮膚透過性的最佳脂質體制劑，制備并測試了各種具有不同脂質組成的脂質體混懸液。主要使用磷脂(可選與膽固醇聯合使用)。然而，用其他脂質，例如糖脂、腦苷脂、硫腦苷脂或半乳糖苷代替或補充磷脂也在本發明的范圍之內。可以使用的脂質的典型成員是例如磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、心磷脂、鞘磷脂、縮醛磷脂、甘油糖脂、神經酰胺、糖鞘脂(glycophingolipid)和中性糖鞘脂。
提高對于經皮施用很重要的膜流動性的一種可能性是減少脂質體雙層膜的相變，所述相變主要由所述磷脂的酰基鏈的長度、膽固醇的量和磷脂的飽和度確定。為此原因，在所述制備方法的一個實施方案中，DPPC(一種酰基鏈長度為16個碳原子的磷脂)被DMPC(鏈長度為14個碳原子)替代，這使熔點TM從45℃降低至31℃。
降低膜剛性而提高流動性的第二種可能性是降低膜內膽固醇的比例。基于總脂質含量，從55mol％∶45mol％的DPPC∶膽固醇比例(如在脂質體裝載的文獻中所描述)開始，膽固醇的量逐漸降低至38％或30％。與較高膽固醇含量的結果相比，發現活性成分裝載略有降低。然而，這些脂質體顯示改善了皮膚透過性并保持穩定，甚至在數周的長期測試中也沒有明顯的活性成分流失。
與早期工作的發現相反，也可制備穩定的不含膽固醇的脂質體并成功地用活性成分對其進行裝載，所以根據本發明，基于總脂質含量，所述膽固醇含量為0mol％～50mol％。
使脂質體膜更柔軟的第三種可能性是使用母雞的蛋磷脂酰膽堿(E-PC)(一種具有不飽和磷脂的天然脂質混合物)替換完全飽和的DPPC或DMPC脂質。除使用這些天然脂質時的穩定性問題外，還必須在氮氣氣氛下制備脂質體。然而，這些泡囊既沒有給出關于泡囊尺寸和均勻性的良好結果也沒有給出皮膚透過性的改善。
使用本領域技術人員已知的替代性、功能相當的系統來用于H+梯度的形成也包括在本發明的范圍之內。在該上下文中，“功能相當”應當理解為指如下能力，即形成跨所述脂質體的脂質雙層膜的H+梯度而在該過程中不破壞膜完整性，因此在脂質體中包封的特別是質子化的活性成分保持穩定---在此處公開的穩定性標準情況下。
對于使用脂質體西地那非組合物作為局部使用的治療劑，所述脂質體優選混入水凝膠中，水凝膠與純混懸液相比更容易施用于皮膚。然而，制備西地那非脂質體的其他蓋侖制劑并且特別是以溶液劑、洗劑、乳劑、酊劑、噴霧劑、軟膏劑或霜劑形式局部施用所述制劑也包括在本發明的范圍之內。在該領域里的本領域技術人員熟悉更多的可能性以及制備各種蓋侖制劑必需的藥用伴隨物質和添加劑。
在先前試驗中，例如Carbopol 981NF(來自Noveon)，已證實可以使用非常低濃度的水凝膠是有用的。其可用于藥用、可相對廉價地獲得并可大量得到。
為更好地進行描述，進一步參考如下實施例解釋本發明。
實施例1西地那非脂質體的制備所述脂質體優選使用適用于所需活性成分的水相通過已知的交叉流動法(WO 02/36257)制備，可選地為至少部分活性成分最初包含在所述水相中和在脂質體的形成過程中包封在脂質體內部。隨后通過中性或堿性稀釋緩沖劑(優選為也含有活性成分)的方式稀釋所述脂質體混懸液，而在所述脂質體內部和外部間形成H+梯度，這可既快速又高效地從稀釋緩沖劑中轉運更多的可質子化活性成分進入脂質體并保持已在脂質體形成過程中包封的活性成分。
作為另外一種選擇，也可以選自如下方法在第一步，制備充填有緩沖劑的不含有活性成分的脂質體，然后僅在制備脂質體后如上所述通過H+梯度將活性成分主動裝載入脂質體中。該過程可以在裝載活性成分前檢查所述脂質體混懸液的質量。
兩種技術都是非常適合再生產的并可允許在脂質體中包封任何所期望的活性成分。它們也可以在非常溫和的處理條件下進行，使得完全可以省去使用可能有害的溶劑，尤其是省去使用泡囊形成用的剪切力。
此外，使用該交叉流動法可提供無菌或無微生物形式的所有試劑并在無菌條件下進行所述脂質體的制備和裝載，因此最終獲得作為裝載有活性成分的脂質體形式的無菌或無微生物產品。
脂質體制備(根據WO 02/36257)細節根據所選擇的脂質或脂質組合物在25℃～60℃的溫度，例如在DPPC脂質體的情況下為在50℃～55℃的溫度，使用攪拌將所述脂質混合物溶解在96％乙醇中。緩沖液也優選在相同溫度，例如在55℃保持恒溫。當通過泵例如蠕動泵方式將極性水相(緩沖劑)泵過交叉流動模塊時，將乙醇/脂質溶液同時在可按需預先選擇的壓力下注射入所述極性相中。
初始試驗已表明，根據所使用的活性成分，不同的緩沖系統也表現出對形成允許進行主動裝載的H+梯度的不同適宜性。因此，例如使用枸櫞酸西地那非作為活性成分時，枸櫞酸(脂質體內)和等摩爾中性或微堿性緩沖劑例如pH 7.5～8.0的枸櫞酸/碳酸鈉(脂質體外)的緩沖系統被證實為不利的，這是因為枸櫞酸西地那非在此類型的緩沖系統中不溶或幾乎不溶。另一方面，枸櫞酸西地那非極易溶于水，并由于該原因對于此活性成分優選使用硫酸銨梯度進行主動裝載。
根據此方法，因此脂質體優選在硫酸銨緩沖液(優選125mmol)存在下形成。在泡囊形成后，例如通過使用稀釋緩沖劑進行稀釋或通過使用5％葡萄糖溶液滲濾進行替換的方式改變保留在所述脂質體外的水相，在該情況下為硫酸銨溶液，結果是兩性小分子，例如西地那非可裝載入脂質體中并在其中質子化，而NH3以相反方向從脂質體中漏出。
a)兩階段變化形式通過H+梯度的方式用西地那非外部裝載脂質體。在如下條件下實現最佳包封率(inclusion rate)。所述脂質(DPPC∶膽固醇摩爾比＝55∶45；每ml水相中共有13μmol～15μmol)溶解在乙醇中，并將此溶液注射入125mM硫酸銨溶液。在自發泡囊形成后，使用5％葡萄糖溶液替換剩余的外部硫酸銨溶液并加入枸櫞酸西地那非。按此方式，在所述脂質泡囊內部和外部間形成H+梯度。由于導致的水解問題，低于2.5的pH值是不合適的，和由于愈加平緩的H+梯度，高于5.5的pH值也是不優選的。125mM的硫酸銨水溶液通常具有約5～5.5的pH。
通過凝膠過濾除去未被包封的西地那非后，通過rp-HPLC的方式測定活性成分含量和脂質含量。通過光子相關光譜法(PCS)的方式測定脂質體尺寸和分布。
根據泡囊尺寸，通過主動裝載的方法可實現每μmol總脂質(＝DPPC+膽固醇)160nmol～230nmol西地那非的包封率(以西地那非/脂質比率表示)。這換算為每ml脂質體混懸液中1000μg～1500μg活性成分的數值。
為實現脂質體包封的西地那非的量的提高，提高了所述葡萄糖溶液中的西地那非含量。然而，發現過量的活性成分不能提高活性成分/脂質比率。因此在通過H+梯度主動外部裝載的情況下，所述有效裝載量似乎主要取決于所述梯度，而較小程度地取決初始采用的活性成分濃度。
b)單階段變化形式將脂質(DPPC∶膽固醇＝55mol％∶45mol％)溶解在乙醇中，并將所述溶液注射入西地那非/硫酸銨溶液(pH 3.5～4.5)中，隨之，立即在自發泡囊形成之后，加入含有進一步的枸櫞酸西地那非的5％葡萄糖溶液(pH 7)用以稀釋所述反應混合物和使所述反應混合物堿性化，所述反應混合物即所得的脂質體混懸液。作為泡囊形成后立即形成該H+梯度的結果，西地那非不僅在一個步驟中包封在脂質體中而且以穩定方式保持在其中。根據pH或H+梯度，按此方式包封在脂質體中的西地那非的量同樣為每μmol總脂質(DPPC+膽固醇)約160nmol～230nmol的西地那非。
也可將活性成分他達那非和伐地那非以類似方式裝載入脂質體。
為了比較目的，也在類似處理條件下制備脂質體包封的前列腺素E1。關于施用效果，參見實施例2。
實施例2脂質體包封的活性成分的使用A.脂質體中的西地那非、他達那非、伐地那非每1ml水凝膠Carbopol 981NF中0.5mg的在脂質體中的各種物質(以無鹽活性成分計算)的制劑被選作用于人體試驗的藥物組合物，并由受試者以每次施用0.5ml～1.5ml的量施用，在每種情況下以其酸性鹽的形式使用西地那非和伐地那非(分別為枸櫞酸西地那非和三水合鹽酸伐地那非)。
通過男性受試者外部施用于陰莖，女性受試者外部施用于陰道和/或陰蒂而使用所述凝膠。
結果a)男性在施用所述制劑后僅很短時間，即在幾分鐘之內，受試者體驗到愉悅的、溫暖的感覺和更強烈的性喚醒。隨之是與以前沒有施用所述制劑時通常或習慣的效果相比，更快更強的勃起以及實質上更長久的陰莖堅硬持續狀態。使用三種活性成分制劑得到相似的效果。
b)女性所述脂質體活性成分凝膠的陰道/陰蒂施用立即導致血流增加的效果，從而導致愉悅、溫暖的感覺和隨之陰道分泌物的產生增加。此外，受試者報告陰道肌肉輕微收縮(類似于性欲高潮時)、性交時更強的性欲感覺和更強的性欲高潮感覺。
脂質體活性成分制劑的應用不僅導致性刺激和欲望的增強，而且更快地觸發刺激，因此導致更快地達到性欲高潮。
單次施用后的作用持續時間在施用制劑后效果立即顯現，上述感覺持續最長達3.5小時。所有三種制劑表現出明確的效果；受試者報告三種不同活性成分制劑間沒有任何實質性的明顯差異。
與Pfizer對女性進行的研究發現(參見New York Times，2004年2月28日，“Pfizer Gives Up Testing Viagra on Women”)相反，在任何比例下本發明的脂質體活性成分制劑甚至在女性外部施用時也顯示出明顯效果。它們因此也可例如用于女性性功能障礙(FSD)的治療，例如用于女性性喚起障礙(FSAD)的治療。
B.脂質體中的前列腺素E1在施用脂質體前列腺素E1后女性測試者也描述了類似的效果。采用的劑量為每1ml凝膠中0.1mg～0.5mg并因此稍稍低于西地那非、他達那非、伐地那非的劑量。
權利要求
1.一種優選用于局部施用的含有包封在脂質體中的活性成分的藥物組合物，其特征在于所述脂質體在其內部具有水性介質，尤其是水性緩沖系統，并在其中含有至少一種對平滑肌有直接或間接松弛效果的活性成分，所述活性成分優選選自由前列腺素、腺苷酸環化酶、cAMP、AMP、ATP、NO-合成酶、一氧化氮(NO)、NO化合物、硝酸鹽、鳥苷酸環化酶、cGMP、GMP、GTP和磷酸二酯酶組成的組，尤其選自由西地那非、他達那非和伐地那非這些物質組成的組。
2.如權利要求1所述的組合物，其特征在于所述脂質體內部存在具有pH 2.5～5.5，尤其為5.0～5.5的水性介質，而所述脂質體外部存在具有中性或堿性pH，優選為pH 7～8的水性介質。
3.如權利要求1或2所述的組合物，其特征在于所述脂質體內部的所述水性介質包含無機緩沖劑，尤其是硫酸銨。
4.如權利要求1～3中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體內部的所述活性成分以質子化形式存在。
5.如權利要求4所述的組合物，其特征在于所述脂質體外部的所述介質是5％葡萄糖溶液。
6.如權利要求1～5中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體是單層的并具有脂質雙層膜。
7.如權利要求1～6中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體含有酰基鏈長度為至少14個碳原子，優選為至少16個碳原子的磷脂。
8.如權利要求1～7中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體含有總脂質的0mol％～50mol％，優選為30mol％～45mol％的量的膽固醇。
9.如權利要求1～8中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體具有150nm～500nm的平均尺寸。
10.如權利要求1～9中任一項所述的組合物，其特征在于所述脂質體含有濃度為每μmol脂質至少100nmol，尤其為150nmol～400nmol的所述活性成分。
11.如權利要求1～10中任一項所述的組合物，其特征在于所述組合物以混懸劑、洗劑、乳劑、酊劑或噴霧劑、凝膠劑、霜劑或軟膏劑的形式存在，優選為無菌形式。
12.一種用于制備如權利要求1～11中任一項所述的藥物組合物的方法，其特征在于通過將乙醇的脂質相注射入水相中而自發形成在其內部具有水性介質的脂質體，隨之改變所述水相，尤其為稀釋或交換所述水相，可選為中和所述水相或使所述水相堿性化，由此在所述脂質體的內部和外部間形成H+梯度，而其中活性成分a)最初包含于所述水相中并在所述脂質體自發形成過程中包封在所述脂質體內，和/或b)僅在泡囊形成完畢后加入到已改變的所述水相中并沿H+梯度遷移進入所述脂質體。
13.如權利要求12所述的方法，其特征在于所述水相的改變是在脂質體形成完畢后立即進行的。
14.如權利要求13所述的方法，其特征在于所述水相在改變前具有2.5～5.5，優選為3.5～4.5的pH并在之后具有7～8的pH。
15.如權利要求12～14中任一項所述的方法，其特征在于所述水相含有無機緩沖劑，尤其為硫酸銨，并通過使用中性或堿性緩沖劑，尤其為使用5％葡萄糖溶液進行稀釋而實施所述改變。
16.如權利要求12～15中任一項所述的方法，其特征在于所述脂質相含有酰基鏈長度為至少14個碳原子，優選至少16個碳原子的磷脂。
17.如權利要求12～16中任一項所述的方法，其特征在于所述脂質相含有總脂質的0mol％～50mol％，優選為30mol％～45mol％的量的膽固醇。
18.如權利要求12～17中任一項所述的方法，其特征在于至少一種具有平滑肌松弛效果的物質是作為活性成分初始包含于水相中的和/或是在脂質體形成完畢后加入到已改變的所述水相中的，所述活性成分優選選自由由前列腺素、腺苷酸環化酶、cAMP、AMP、ATP、NO-合成酶、一氧化氮(NO)、NO化合物、硝酸鹽、鳥苷酸環化酶、cGMP、GMP、GTP和磷酸二酯酶組成的組，尤其選自由西地那非、他達那非和伐地那非這些物質組成的組。
19.如權利要求12～18中任一項所述的方法，其特征在于所述藥物組合物以混懸劑、洗劑、乳劑、酊劑或噴霧劑、凝膠劑、霜劑或軟膏劑的形式，優選為無菌形式制備。
20.如權利要求1～11中任一項所述的藥物組合物，該藥物組合物用作局部施用，尤其是經皮和/或經粘膜施用于生殖區域的藥物。
21.如權利要求1～11中任一項所述的藥物組合物在制備用于預防和/或治療男性勃起機能障礙的藥物中的應用。
22.如權利要求1～11中任一項所述的藥物組合物在制備用于治療女性性功能障礙，尤其用于治療女性性喚起障礙(FSAD)的藥物中的應用。
23.如權利要求1～11中任一項所述的藥物組合物在制備用于提高性欲望的藥物中的應用。
24.如權利要求21或23所述的應用，其用于制備外部施用于陰莖的藥物。
25.如權利要求22或23所述的應用，其用于制備陰道和/或陰蒂的外用藥。
全文摘要
本發明涉及含有用于松弛平滑肌的活性成分的脂質體組合物、該組合物的制備方法及其治療應用。具體地說，本發明涉及一種由包含在脂質體內的有效成分制得的用于局部施用的藥物組合物，借此所述脂質體在其內部具有水性介質并在其中含有至少一種對平滑肌肉系統產生直接或間接松弛效果的活性成分，所述活性成分優選為選自由前列腺素、腺苷酸環化酶、cAMP、AMP、ATP、NO－合成酶、一氧化氮(NO)、NO化合物、硝酸鹽、鳥苷酸環化酶、cGMP、GMP、GTP和磷酸二酯酶組成的組，尤其是西地那非。本發明還涉及一種制備所述組合物，可選為無菌形式的所述組合物的方法，以及各種蓋侖制劑形式的裝載有所述活性成分的脂質體在外部施用于生殖區域中的應用，以預防和/或治療男性或女性的性障礙和/或提高性敏感性。
文檔編號A61K9/127GK101043874SQ200580035669
公開日2007年9月26日 申請日期2005年10月14日 優先權日2004年10月18日
發明者安德拉希·瓦格納, 卡羅拉·沃拉爾-烏爾, 赫爾曼·卡廷格爾 申請人:波利門科學生物免疫研究有限公司