一種羊肚菌液體菌種的生產工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及羊肚菌栽培技術領域，具體涉及羊肚菌液體菌種的生產工藝。
【背景技術】
[0002]羊肚菌又名羊肚菜，為羊肚菌屬食用菌，是一種珍貴的食用菌和藥用菌;羊肚菌的營養相當豐富，羊肚菌含抑制腫瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增強機體免疫力、抗疲勞、抗病毒、抑制腫瘤等諸多作用；羊肚菌是子囊菌中最著名的美味食菌，其菌蓋部分含有異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸和纈氨酸7種人體必需的氨基酸，甘寒無毒，有益腸胃、化痰理氣藥效。羊肚菌的營養相當豐富，據測定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38.1%，還含有多種氨基酸，特別是谷氨酸含量高達1.76%。因此，有人認為是“十分好的蛋白質來源”，并有“素中之葷”的美稱。人體中的蛋白質是由20種氨基酸搭配而組成的，而羊肚菌就含有18種，其中8種氨基酸是人體不能制造的，但在人體營養上顯得格外重要，所以被稱之為“必需氨基酸”。另外，據測定羊肚菌至少含有8種維生素:維生素B1、維生素B2、維生素B12、煙酸、泛酸、吡噦醇、生物素、葉酸等。羊肚菌的營養成份，可與牛乳、肉和魚粉相當。因此，國際上常稱它為“健康食品”之一。羊肚菌含抑制腫瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增強機體免疫力、抗疲勞、抗病毒、抑制腫瘤等諸多作用；日本科學家發現羊肚菌提取液中含有酪氨酸酶抑制劑，可以有效地抑制脂褐質的形成。羊肚菌所含豐富的砸是人體紅細胞谷胱甘肽過氧化酶的組成成分，可運輸大量氧分子來抑制惡性腫瘤，使癌細胞失活;另方面能加強維生素E的抗氧化作用。砸的抗氧化作用能改變致癌物的代方向，并通過結合而解毒，從而減少或消除致癌的危險。羊肚菌既是宴席上的珍品，又是久負盛名的食補良品。羊肚菌性平、味甘，具有益腸胃、消化助食、化痰理氣、補腎、壯陽、補腦、提神之功能，對脾胃虛弱、消化不良、痰多氣短、頭暈失眠有良好的治療作用。羊肚菌有機鍺含量較高，具有強健身體、預防感冒、增強人體免疫力的功效。由于羊肚菌是一種極為珍貴的野生菌，并可以作為食材在市面上出售，因此羊肚菌需要大面積的進行種植生產，而保持羊肚菌的優質高產需優良的羊肚菌菌種。
[0003]目前羊肚菌菌種仍采用原始的培育方法，培養基中各成分的搭配比例不合理，培育過程缺乏有效的控制和管理，不同原料的成分、顆粒大小和木質纖維物理結構不同，都會對食用菌菌種質量有重要的影響，研發一種能培養出優質羊肚菌的羊肚菌菌種成為本領域技術人員亟待解決的技術問題。

【發明內容】

[0004]本發明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優點。
[0005]為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了一種羊肚菌液體菌種的生產工藝，包括以下步驟:
[0006]步驟一、將羊肚菌純菌種接種到斜面試管中的固體培養基上，并于22°C?24°C恒溫培養5天?8天，得到斜面試管菌種；
[0007]步驟二、將羊肚菌液體菌種培養液輸入高壓脈沖處理室中，利用高壓脈沖電場進行殺菌處理后輸入三角瓶中，將斜面試管中的固體培養基上的菌種劃分為小塊，得到菌種塊;然后將菌種塊接種到三角瓶中，每個三角瓶中接種3塊?6塊菌種塊;所述三角瓶使用前用紫外燈殺菌30?40min;
[0008]步驟三、將三角瓶放置于搖床上，在18°C?22°C下培養7天?9天，得到三角瓶液體菌種；
[0009]步驟四、將羊肚菌液體菌種培養液輸入高壓脈沖處理室中，利用高壓脈沖電場進行殺菌處理后輸入發酵罐中，將三角瓶液體菌種接種到發酵罐中；所述發酵罐使用前用紫外燈殺菌30?40min;
[0010]步驟五、往發酵罐中通入凈化空氣，通入凈化空氣后的壓力為0.05MPa?0.15MPa，然后在19°C?23°C下培養6天?8天，即得到羊肚菌液體菌種。
[0011]優選的是，所述固體培養基的制備方法如下:每1000毫升水里放入12g?16g土豆淀粉，1g?15g瓊脂，Ig?3g維生素B，0.5g?0.8g磷酸氫二鉀，0.5g?0.8g硫酸鎂，消泡劑
0.3g?0.5g，攪拌均為后，輸入高壓脈沖處理室中，利用高壓脈沖電場進行殺菌處理，然后冷卻，即得到所述固體培養基。
[0012]優選的是，所述羊肚菌液體菌種培養液包括以下重量份的各組分:可溶性淀粉30?50份、蛋白胨6?8份、七水硫酸鎂0.4?0.6份、磷酸二氫鉀0.8?1.2份、蔗糖8?12份、魔芋葡甘聚糖0.01?0.03份、有機砸添加劑0.5?I份、0.03?0.05份維生素B1、0.03?0.05份維生素B2、水800?1200份、消泡劑0.0I?0.03份、中藥提取物0.2?0.5份;所述羊肚菌液體菌種培養液的pH值為6.5?6.8。
[0013]優選的是，所述有機砸添加劑包括以下重量份的各組分:人參果果汁30?50份、納米纖維素8?10份、蛋白粉I?3份、亞砸酸鈉I?3份、卡拉膠3?5份;維生素Cl?3份;甘氨酸亞鐵3?5份、海藻酸鈉5?8份。
[0014]優選的是，所述消泡劑為豆油或木肩粉。
[0015]優選的是，所述中藥提取物的制備方法為:按重量份，取定草根20份，紫草茸20份，陳皮30份，石見穿25份，荊芥穗10份，甘草20份，板藍根18份，魚腥草17份，川芎10份，當歸8份，地黃12份，研磨至300目藥末;將研磨的藥末放置于砂鍋中加水，水量為藥末重量的5?10倍，然后攪拌并煎熬60-90min，煎熬完成后提取藥液，過濾冷卻，即得中草藥提取物。
[0016]優選的是，所述步驟二中，菌種塊的長度和寬度均為2?2.5mm。
[0017]優選的是，所述高壓脈沖處理室外圍設置有冷水循環系統，其中循環冷水溫度為10?15°C，水循環速度為0.2?1.0m/s;所述高壓脈沖處理室中兩極板的間距為0.5?3cm。
[0018]優選的是，所述高壓脈沖電場殺菌處理的參數為:脈沖幅度為7?15KV，脈沖頻率為800?1500Hz，脈沖寬度為6?1us，處理時間為40-80min。
[0019]優選的是，所述步驟三中，搖床的轉速為160r/min?180r/min。
[0020]本發明至少包括以下有益效果:
[0021](I)本發明提供的一種羊肚菌液體菌種培養液，利用配方量的組分所配制的羊肚菌液體菌種培養液的pH值為6.5?6.8，該羊肚菌液體菌種培養液所具有的pH值非常適宜羊肚菌液體菌種的生長，能夠縮短羊肚菌液體菌種的生長周期，增強羊肚菌液體菌種的活力。
[0022](2)采用高壓脈沖電場進行殺菌處理，具有操作簡單，穩定性好、殺滅力強，能有效破壞雜菌的生理活性酶，能有效殺滅羊肚菌生長過程中存在的各種霉菌和雜菌。
[0023]本發明的其它優點、目標和特征將部分通過下面的說明體現，部分還將通過對本發明的研究和實踐而為本領域的技術人員所理解。
【具體實施方式】
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[0024]下面結合實施例對本發明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據以實施。
[0025]應當理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術語并不配出一個或多個其它元件或其組合的存在或添加。
[0026]實施例1:
[0027]—種羊肚菌液體菌種的生產工藝，包括以下步驟:
[0028]步驟一、將羊肚菌純菌種接種到斜面試管中的固體培養基上，并于22°C恒溫培養6天，得到斜面試管菌種；
[0029]步驟二、將羊肚菌液體菌種培養液輸入高壓脈沖處理室中，利用高壓脈沖電場進行殺菌處理后輸入三角瓶中，將斜面試管中的固體培養基上的菌種劃分為2mm的小塊，得到菌種塊;然后將菌種塊接種到三角瓶中，每個三角瓶中接種6塊菌種塊;所述三角瓶使用前用紫外燈殺菌40min;所述高壓脈沖處理室外圍設置有冷水循環系統，其中循環冷水溫度為15°C，水循環速度為1.0m/s;所述高壓脈沖處理室中兩極板的間距為0.5cm;所述高壓脈沖電場殺菌處理的參數為:脈沖幅度為7KV，脈沖頻率為1500Hz，脈沖寬度為6us，處理時間為40min；
[0030]步驟三、將三角瓶放置于轉速為160r/min的搖床上，在18°C下培養7天?9天，得到三角瓶液體菌種；
[0031]步驟四、將羊肚菌液體菌種培養液輸入高壓脈沖處理室中，利用高壓脈沖電場進行殺菌處理后輸入發酵罐中，將三角瓶液體菌種接種到發酵罐中；所述發酵罐使用前用紫外燈殺菌40min;所述高壓脈沖處理室外圍設置有冷水循環系統，其中循環冷水溫度為15°C，水循環速度為1.0m/s;所述高壓脈沖處理室中兩極板的間距為0.5cm;所述高壓脈沖電場殺菌處理的參數為:脈沖幅度為7KV，