一種羊肚菌菌種的制備工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于食用菌栽培技術領域，涉及一種食用菌的制備工藝，具體涉及一種羊肚菌菌種的制備工藝。
【背景技術】
[0002]羊肚菌又名羊肚菜，為羊肚菌屬食用菌，是一種珍貴的食用菌和藥用菌；羊肚菌的營養相當豐富，羊肚菌含抑制腫瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增強機體免疫力、抗疲勞、抗病毒、抑制腫瘤等諸多作用；由于羊肚菌是一種極為珍貴的野生菌，并可以作為食材在市面上出售，因此羊肚菌需要大面積的進行種植生產，而保持羊肚菌的優質高產需要優良的羊肚菌菌種。
[0003]目前羊肚菌菌種仍采用原始的培育方法，培養基中各成分的搭配比例不合理，培育過程缺乏有效的控制和管理，不同原料的成分、顆粒大小和木質纖維物理結構不同，都會對食用菌菌種質量有重要的影響，研發一種能培養出優質羊肚菌的羊肚菌菌種成為本領域技術人員亟待解決的技術問題。
【發明內容】
[0004]本發明所要解決的技術問題是，針對以上現有技術存在的缺點，提出一種羊肚菌菌種的制備工藝，該菌種制備工藝，操作簡單易行，成本低，制備出的菌種菌絲生長快，菌絲粗壯濃密，提高了羊肚菌種植的存活率和產量。
[0005]本發明解決以上技術問題的技術方案是:
一種羊肚菌菌種的制備工藝，該制備工藝菌體包括以下步驟:
(1)母種的制作及培養；
按質量份數計母種培養基由50-60份的土豆，8-14份的瓊脂，0.5-0.8份的維生素B劑5-7份的葡萄糖組成，將土豆、瓊脂、維生素B及葡萄糖全部放入1500ml的水中加熱，直至加入水中的瓊脂全部煮化即得到母種培養基待用；
用250ml的試管取制作出的母種培養基150ml，用棉花塞住試管開口端，將試管放在115-130°C下的高壓滅菌鍋內滅菌l_2h，然后自然冷卻至室溫，將試過放入密封的無菌接種箱中，每個試管中接入羊肚菌菌絲，置于20-23?培養箱中培養，直至生長成母種；
(2)原種的制作及培養；
原種的培養料按質量份數計包括以下組分，玉米:60-75份，小麥:50-60份，稻谷:15-20 份；
原種的培養料的制作工藝流程為:稱量-浸泡-煮料-瀝干-分裝-封口-滅菌-無菌檢驗-接種-培養，其中:
稱量，分別稱取選用的玉米、小麥、稻谷；
浸泡，將玉米、小麥、稻谷分別進行浸泡，玉米浸泡30-34h，且每隔5h換一次水防止顆粒變酸，小麥浸泡3-4h，稻谷浸泡l-3h ； 煮料，將浸泡好的玉米、小麥、稻谷分別置于鍋中加熱水煮，直至玉米、小麥、稻谷的種皮剛破裂，然后撈出，瀝干去多余的水分；
分裝，將瀝干后的玉米、小麥、稻谷裝入10ml的廣口瓶中，每瓶裝入量折合干重為35-40g ；
封口，將分裝好的廣口瓶用1cmXlOcm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；滅菌，將封口后的廣口瓶在120-130°C下滅菌20-25h，然后采用冷空氣冷卻；
無菌檢驗，將滅菌過后的培養料置于恒溫箱中培養1-3天，若無菌生長則滅菌徹底可使用；若有菌生長，滅菌不徹底，從新滅菌直至無菌檢驗成功；
接種，在無菌條件下，將制備好的母種按每瓶接種量為2-4g接種到培養料的試管中，將接好的菌種置于23-25°C下恒溫培養；
(3)羊肚菌菌種的制作及培養；
按質量份數計選用玉米芯:75-80份，小麥粒子:10-15份，木肩:10-15份，過磷酸鈣:
1-3份，尿素:1-2份，作為羊肚菌菌種的培養料，將培養料中的玉米芯、小麥粒子、木肩、過磷酸鈣、尿素攪拌均勻，保持含水量為75-80%，然后裝入聚丙烯袋中封口 ；
將封口的聚丙烯袋放入滅菌鍋內滅菌，常壓下100-108°C保存l_3h，取出冷卻至室溫；將裝有羊肚菌菌種培養料的聚丙烯袋和原種培養料一并置于接種箱中，并密封0.5-lh，將原種接入到裝有羊肚菌菌種培養料的聚丙烯袋中，并送入培養室，控制培養室的溫度為20-23°C，培養13-15天獲得羊肚菌栽培菌種。
[0006]本發明進一步限定的技術方案為:
前述羊肚菌菌種的制備工藝中，原種培養料中的玉米、小麥、稻谷均選用顆粒飽滿、無蟲蛀、無霉變的玉米、小麥、稻谷并除塵備用。
[0007]前述羊肚菌菌種的制備工藝中，步驟(I)在母種的制作時試管中接入的羊肚菌菌絲的制作方法具體為:采收新鮮的羊肚菌你子實體，并將子實體切成l_2mm的菌塊，讓將菌塊放置于PDA培養基上，將PDA培養基置于20-23°C的培養箱中，5_8天后即獲得羊肚菌菌絲。
[0008]本發明的有益效果是:
在封口時，用聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口，這樣既利于通氣保濕，又便于接種時降低污染率。
[0009]本發明中原種培養料均需要顆粒煮破后再使用，這樣有利于羊肚菌菌絲生長，因為羊肚菌屬于子囊菌，而所有的子囊菌都是單核菌，菌絲比雙核菌細微，對營養物質的分解利用能力弱，煮破后，淀粉可從煮破的顆粒中釋放出來，有利于羊肚菌菌絲體吸收利用，使得羊肚菌對培養料營養的充分吸收。
[0010]在羊肚菌菌種的制備過程中，通過對現有技術中的培養基配方進行改進，在菌種培育的各階段采用不同的培養基達到最好的培育效果，本方案提供的菌種制備方法，制備出的羊肚菌菌種品質優良，同時，大大提高了羊肚菌種植的存活率。
[0011 ] 本發明在原種的制作時選料、浸泡、煮料、滅菌和接種的環節進行嚴格的控制，也是制種成敗的關鍵，嚴格控制原種培養料中各組分的浸泡時間、體積、氣溫、水溫等諸多因素，使得做種制備出的羊肚菌菌種存活率更好，產量高。
【具體實施方式】
[0012]實施例1
本實施例提供一種羊肚菌菌種的制備工藝，該制備工藝菌體包括以下步驟:
(1)母種的制作及培養；
按質量份數計母種培養基由50份的土豆，14份的瓊脂，0.5份的維生素B劑6份的葡萄糖組成，將土豆、瓊脂、維生素B及葡萄糖全部放入1500ml的水中加熱，直至加入水中的瓊脂全部煮化即得到母種培養基待用；
用250ml的試管取制作出的母種培養基150ml，用棉花塞住試管開口端，將試管放在115°C下的高壓滅菌鍋內滅菌2h，然后自然冷卻至室溫，將試過放入密封的無菌接種箱中，每個試管中接入羊肚菌菌絲，置于22°C培養箱中培養，直至生長成母種；
母種的制作時試管中接入的羊肚菌菌絲的制作方法具體為:采收新鮮的羊肚菌你子實體，并將子實體切成Imm的菌塊，讓將菌塊放置于PDA培養基上，將PDA培養基置于20°C的培養箱中，5天后即獲得羊肚菌菌絲；
(2)原種的制作及培養；
原種的培養料按質量份數計包括以下組分，玉米:75份，小麥:50份，稻谷:18份；玉米、小麥、稻谷均選用顆粒飽滿、無蟲蛀、無霉變的玉米、小麥、稻谷并除塵備用；
原種的培養料的制作工藝流程為:稱量-浸泡-煮料-瀝干-分裝-封口-滅菌-無菌檢驗-接種-培養，其中:
稱量，分別稱取選用的玉米、小麥、稻谷；
浸泡，將玉米、小麥、稻谷分別進行浸泡，玉米浸泡30h，且每隔5h換一次水，小麥浸泡3h，稻谷浸泡Ih ；
煮料，將浸泡好的玉米、小麥、稻谷分別置于鍋中加熱水煮，直至玉米、小麥、稻谷的種皮剛破裂，然后撈出，瀝干去多余的水分；
分裝，將瀝干后的玉米、小麥、稻谷裝入10ml的廣口瓶中，每瓶裝入量折合干重為
35g ；
封口，將分裝好的廣口瓶用1cmXlOcm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；滅菌，將封口后的廣口瓶在121°C下滅菌22h，然后采用冷空氣冷卻；
無菌檢驗，將滅菌過后的培養料置于恒溫箱中培養2天，若無菌生長則滅菌徹底可使用；若有菌生長，滅菌不徹底，從新滅菌直至無菌檢驗成功；
接種，在無菌條件下，將制備好的母種按每瓶接種量為2g接種到培養料的試管中，將接好的菌種置于25°C下恒溫培養；
(3)羊肚菌菌種的制作及培養；
按質量份數計選用玉米芯:80份，小麥粒子:13份，木肩:10份，過磷酸鈣:1份，尿素:I份，作為羊肚菌菌種的培養料，將培養料中的玉米芯、小麥粒子、木肩、過磷酸鈣、尿素攪拌均勻，保持含水量為80%，然后裝入聚丙烯袋中封口 ；
將封口的聚丙烯袋放入滅菌鍋內滅菌，常壓下108°C保存2h，取出冷卻至室溫； 將裝有羊肚菌菌種培養料的聚丙烯袋和原種培養料一并置于接種箱中，并密封0.5h，將原種接入到裝有羊肚菌菌種培養料的聚丙烯袋中，并送入培養室，控制培養室的溫度為20°C，培養14天獲得羊肚菌栽培菌種。
[0013]實施例2
本實施例提供一種羊肚菌菌種的制備工藝，該制備工藝菌體包括以下步驟:
(1)母種的制作及培養；
按質量份數計母種培養基由60份的土豆，11份的瓊脂，0.7份的維生素B劑5份的葡萄糖組成，將土豆、瓊脂、維生素B及葡萄糖全部放入1500ml的水中加熱，直至加入水中的瓊脂全部煮化即得到母種培養基待用；
用250ml的試管取制作出的母種培養基150ml，用棉花塞住試管開口端，將試管放在121°C下的高壓滅菌鍋內滅菌lh，然后自然冷卻至室溫，將試過放入密封的無菌接種箱中，每