一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法
【專利摘要】本發明公開了一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，包括如下步驟：1：羊肚菌子實體的分離克隆；2：栽培種的制作；3：外援營養袋的制作；本發明方法在高寒、高海拔等自然條件惡劣地區不受自然條件限制，可周年規模化、規范化種植羊肚菌，所用材料來源廣泛、便捷，能變廢為寶，且循環利用生活、生產等廢舊物如廢紙、廢紙箱、草木灰、農作物秸稈、落葉、腐熟的家禽、家畜糞便等，該技術不但出菇重復性高，產量高且穩定，而且經濟、環保的日光溫室羊肚菌反季節種植技術。
【專利說明】
一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法
技術領域
[0001]本發明屬于設施農業食用菌種植技術領域，特別涉及一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法。
【背景技術】
[0002]羊肚菌(Morchella esculenta)是一種名貴食藥用真菌，羊肚菌科、羊肚菌屬多種真菌的總稱，更是營養及藥用價值都較高的真菌。野生種常于春末夏初發生，羊肚菌營養豐富，含有多種蛋白質、多糖、維生素、礦質元素及20余種氨基酸，被認定為人體營養的高級補品，成為世界上最著名的珍貴食用菌之一。而且，羊肚菌還具有較強的抗腫瘤、增強人體免疫力、補腎壯陽、預防感冒、強身健體等作用。除了食用、藥用價值外，現代社會還針對其特殊營養成分開發了商業化的調味品、保健飲品、食品(氨基酸)添加劑、泡酒等一系列產品。由此可見，羊肚菌是一種開發前景廣闊的珍稀食藥用菌。目前國內一些高檔酒店和電商市場均能見到羊肚菌食譜或精裝商品銷售，如淘寶網標價196元/50克干品，阿里巴巴的羊肚菌干品批發價在800?2000元/斤，其需求量相當大。而目前中國野生羊肚菌受環境惡劣變化和人為肆意采挖影響，野生羊肚菌產量急劇縮減，每年僅產約10噸，人工栽培每年生產量不超過500噸，而全球羊肚菌總需求量預計超過10萬噸，因此，僅靠采集野生羊肚菌已經遠遠不能滿足社會需求，而反季節栽培羊肚菌定能帶來良好的經濟收益。另外羊肚菌在食品、保健品、醫藥化工等多領域有著廣闊的應用前景，是中國主要出口到法國等歐洲國家的食用菌產品，并且隨著德、法、意、美等國家對羊肚菌的需求量增大，其價格不斷攀升。但是由于羊肚菌人工栽培難度大，人工栽培研究進展緩慢，野生羊肚菌其遠遠不能滿足國內與國際市場的需求，并且由于近年來過渡采挖野生羊肚菌，嚴重破壞了羊肚菌的生物多樣性和森林、草地生態系統平衡。因此，羊肚菌的人工或半人工栽培技術一直是國際食用菌研究的熱點，栽培試驗偶有成功，但其重復性差，出菇不穩定，產量低，無法進行商業化栽培。因此，研究羊肚菌的高產質優的人工栽培則具有巨大的市場前景和經濟效益、生態效益，同時對于減少野生菌類的開采，保護生態環境，具有重要的意義。
[0003]近幾年來，我國羊肚菌人工栽培的研究主要集中在菌種生產工藝，各種大田、林地、小麥、麥冬地仿生栽培技術、套種技術方面，國外則主要集中在室內工廠化栽培技術方面。在中國的四川、重慶、云南、湖北等地，基本上實現了羊肚菌的規模化、商業化生產，目前，國內外對羊肚菌(M.esculenta)、黑脈羊肚菌(M.angusticeps)、尖頂羊肚菌(M.conica)的栽培條件已進行了廣泛的研究且。2014?2015年投產的羊肚菌種植面積已經達到8000多畝，畝產達到10?150kg/畝。人工栽培羊肚菌的研究探索已有近百年的歷史，在1986年美國舊金山州立大學Ron Ower在1982年和1986年被授權了兩個羊肚菌栽培的美國專利。在20世紀50年代劉波開展了半人工栽培方面試驗研究，并且采用新鮮的天然菌絲體栽培、用新鮮和干燥子實體栽培、用純培養的菌絲體栽培等，都能成功地長出了子實體。同時。半人工栽培方面，臺灣省通過菌土接種法、子實體接種法也開展了半人工栽培試驗；國外，在1898年5?6月份Baron dyvoire通過把羊肚菌的子實體塊接種在菊芋(Helianthus tuberosus)苗床穴中，秋季在菊芋莖基部四周施人蘋果渣，I?2周后再蓋上枯枝落葉，翌年春天除去枯枝落葉的方法進行了半人工栽培試驗，發現在比較潮濕的條件下，羊肚菌的菌絲體在基質中蔓延生長，其后年年都有羊肚菌子實體長出；在1892年Repin將經培養多月的羊肚菌菌絲體作菌種撒在種花地上栽培，4年后獲得菌絲體，且在經碳酸鈣處理至堿性的干葉組成的苗床上和從蘋果殘物填滿的山溝中也長出羊肚菌子實體;J.Pelmas報道，用pH值〈7的蘋果漿或舊報紙都可種出子實體，但實驗不能重復；1904?1905年Molliard蘋果渣上種出了羊肚菌子實體；1909?1910Matruchat用紙漿、腐木混合物栽培羊肚菌，也獲得了子實體。室外栽培方面，我國進行了大量研究。在1997朱斗錫首次報道了羊肚菌栽培方法。四川青川縣在上世紀90年代也進行過羊肚菌的大田栽培實驗，出菇不是很穩定。因此，尋找一種具有穩定高產量尤其是在高寒地區穩定高產的羊肚菌人工栽培技術，顯得極為迫切。因此，該研究的目的在于解決在青海、西藏、甘肅甘南等高寒、高海拔地區如何更好地利用日光溫室大棚進行羊肚菌的反季節栽培，以實現高寒地區羊肚菌產量高、品質好以及以此來促進高寒地區經濟發展和農牧民增收、創益的目的。
[0004]1.中國專利申請CN201310113092.X，公開了一種小麥套作羊肚菌人工仿生栽培的方法，該方法包括:I)制種；2)做畦；3)接種與覆土; 4)發菌管理；5)補充營養液;6)出菇管理。
[0005 ] 2.中國專利申請201310129134.9，公開了一種羊肚菌的栽培方法。
[0006]3.中國專利申請CN201310152370.2，公開了一種粗腿羊肚菌的林下栽培方法。
[0007]4.中國專利申請CN201210339140.2，公開了一種羊肚菌的栽培新方法。
[0008]5.中國專利申請CN201310115468.0公開了梯棱羊肚菌的栽培方法。
[0009]6.中國專利申請CN201310597665.0公開了利用生料栽培羊肚菌的方法。
[0010]7.中國專利申請CN200910060399.1公開了羊肚菌培養料配方及羊肚菌天然栽培方法。
[0011]8.中國專利申請CN200810058482.0公開了一種尖頂羊肚菌生態栽培方法，。
[0012]9.中國專利申請CN201310549990.X公開了一種羊肚菌培養料及其栽培技術。
[0013]10.中國專利申請CN201010148565.6公開了一種羊肚菌的室內栽培方法及其所用溫室O
[0014]11.中國專利申請CN200610010962.0公開了羊肚菌擴繁方法。
[0015]12.中國專利申請CN201010287662.3公開了羊肚菌大田商業化栽培新方法。
[0016]13.據農聯網(//www.agri I ink.cn) 2013-03 = 21報道，2013 年四川省農業廳聯合省農科院在什邡、金堂、崇州等地，采用稻一菜一菌復合種植模式栽培羊肚菌，畝產達300?500斤，是一種羊肚菌新種植模式。
[0017]14.中國專利申請CN105218252 A公開了一種羊肚菌栽培專用固體營養液覆土材料的制備方法。
[0018]15.中國專利申請CN 105154342 A公開了一種羊肚菌液態菌種的培養方法。
[0019]16.中國專利申請CN 105191667 A公開了羊肚菌營養配方、營養袋及其制備方法與羊肚菌培養方法。
[0020]17.中國專利申請CN 103907471 A公開了一種麥冬無遮蓋套種羊肚菌的方法。
[0021]18.中國專利申請CN 103907481 A公開了一種羊肚菌優質菌種的生產工藝。
[0022]19.中國專利申請CN 103583232 A公開了一種羊肚菌培養料及其栽培技術。
[0023]20.中國專利申請CN 103190292 A公開了粗腿羊肚菌的林下栽培方法。
[0024]然而，上述方法均存在如下缺點:按其技術和方法在高寒高海拔地區，種植羊肚菌產量都非常低，甚至因受低溫的限制而不能出菇，因此均不能在高寒地區實現周年化生產。
[0025]以上技術和方法中提到的原料在高寒地區受到極大的限制，不能循環利用廢紙、廢紙箱、農作物秸桿等工作、生活廢棄物，需要投入大量材料費用，同時，對種植戶來說，需要生產菌種的先進設備和場所，技術要求高，種植戶很難操作，因此使其生產成本增高;在大規模種植僅使用遮陽網蔭棚時，由于高寒高海拔地區風力大，很容易被大風掀翻，加之紫外線非常強，遮陽網易于老化，要經常更換，造成管理麻煩和成本增加，同時，在寒冷季節種植起不到保暖作用;羊肚菌采摘后，遮蔭網還需要進行人工回收，回收以后的材料不能循環利用，而且費工費時，遮陽網材料殘留在土壤中，還會對土壤造成進一步污染，影響下一茬羊肚菌種植。
[0026]綜上所述，目前所采用的羊肚菌人工種植方法普遍選用的原料及配方比較復雜，尤其是象6?芐基腺嘌呤、赤霉素等藥品種植戶得到較困難且成本較高，同時在制種過程中需要先進、高端的設備，價格非常昂貴，同時，大面積使用后廢棄的遮陽網，會導致管理困難、污染環境等問題。因此，目前迫切需要一種新的方法，以解決上述問題。

【發明內容】

[0027]為解決上述現有技術存在的問題，本發明的目的在于提供一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，在高寒、高海拔等自然條件惡劣地區不受自然條件限制，可周年規模化、規范化種植羊肚菌，所用材料來源廣泛、便捷，能變廢為寶，且循環利用生活、生產等廢舊物如廢紙、廢紙箱、草木灰、農作物秸桿、落葉、腐熟的家禽、家畜糞便等，該技術不但出菇重復性高，產量高且穩定，而且經濟、環保的日光溫室羊肚菌反季節種植技術。
[0028]為達到上述目的，本發明的技術方案為:
[0029]—種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，由如下步驟組成:
[0030]步驟I:羊肚菌子實體的分離克隆:
[0031]培養基料在容器中分五層設置，按照質量份數，每一層具體為:第一層為25?80份羊肚菌基腳土+3?5份生石灰+72?15份腐熟牛、羊或雞奠，第二層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第三層為10?30份小麥+85?65份農作物秸桿粉+1?3份維生素B族+4?2份草木灰，第四層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第五層為10?35份玉米芯+10?30份雜木肩+70?30份粉碎廢紙+10?5份尿素，容器口塞上棉塞，在溫度為125°C，壓力為0.15Mpa下高壓滅菌I小時，在室溫下自然冷卻;將野生或栽培羊肚菌子實體取麥粒大小的I?2塊組織接種在上述試管第一層料上，將試管放在12?28°C下，空氣濕度為60%?95%，下避光培養，接種后第2天開始長出菌絲，10?15天待試管中長滿菌絲直至長出菌核后取試管底部的菌絲或菌核或有菌絲、菌核的培養基直接接種在栽培種培養料上；
[0032]步驟2:栽培種的制作
[0033]培養主料配方為10%?35 %小麥+75 %?30 %直徑0.2?0.5厘米的玉米秸桿顆粒+ 10%?30%草木灰+1%磷酸二氫鉀+3%磷肥+1%石灰;②將浸泡24?48小時的小麥煮至里面不發白但不爛皮后撈出瀝干水分，加上玉米秸桿顆粒、草木灰拌勻;③將磷酸二氫鉀、磷肥和石灰完全溶解在水里拌在上述混合物里做成培養料，含水量50 %?65 % ;④培養料封口料配方為:60 %?82 %羊肚菌基腳土，38 %?14%草木灰，I %?3 %生石灰，I %磷酸二氫鉀，含水量30 %?45 %，pH為7.0?7.5;⑤封口料裝瓶或裝袋:先將培養料主料裝入瓶或袋中，裝瓶或裝袋，再裝入封口料;⑥封口滅菌:121°C?125°C，0.12Mpa?0.15Mpa高壓滅菌4?2小時;⑦接種:將滅菌后的料冷卻，在無菌環境中接入步驟I分離得到的菌絲或菌核連同培養料取黃豆粒大小接種在封口料上并壓緊與料充分接觸，一支20mm X 200mm試管視菌絲和菌核長勢可以接30?55瓶或袋，其中最下層接15?25瓶或袋，第二層接10?20瓶，第一層接5瓶?10瓶;⑧培養:在溫度為10?28°C下避光培養，空氣濕度為55 %?90 %，接種后第2?4天開始長出菌絲，10?20天菌絲滿瓶或滿袋直至長出菌核即為栽培種；
[0034]步驟3:外援營養袋的制作
[0035](I)外援營養袋養料配方:60 %?85 %廢紙、35 %?10 %尿素、I %磷酸二氫鉀、0.5%硫酸鎂、0.5%硫酸鋅，3%石膏；
[0036]步驟4:日光溫室棚種植，周年均可種植，此步驟包括:
[0037](I)整地及播種:①施基肥:施有機肥和油菜餅粉作為基肥，②土壤滅菌:將廂內土壤翻松，整平，先用石灰進行全面的消毒，石灰用量為250kg/畝?350kg/畝，澆一次透水后，瞭曬2-5天，再撒一層I厘米厚的草木灰和一層5厘米厚的中砂，噴灑濃度為0.5%氯氰菊酯及50 %的辛硫磷混合水溶液殺蟲;③溫室棚滅菌:土壤消毒后再將地深翻一次后密閉大棚用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸滅菌3天，然后通風處理2天;④起廂:平整后的種植土地表面開設廂面，廂面寬度為80?120cm，再在廂面四周開設廂灌水溝，灌水溝的寬度15?30cm，灌水溝的深度為15?20cm，然后將栽培種撒播在廂面上，該技術要求大播種量，分春、秋、冬三季播種；
[0038](2)消毒:采用75%的酒精對菌種取用器具、盛放盆、接種人員雙手等進行消毒后，接種人員通過取用器具將羊肚菌菌種置于盛放器具中；
[0039](3)拌種:將甘油三酯和磷酸二氫鉀(I?3:1)與水混合制成拌種溶液，將栽培種拌勻，拌種溶液的用量為栽培質量的25% — 35%，因為羊肚菌在營養生長階段必須儲存足夠的營養，而甘油三酯可以作為營養物質儲存在菌絲里以滿足羊肚菌生殖生長的需要，因此，延長了生殖生長時期，減少了病蟲害的發生，出菇穩定，大大地提高了種植產量;該技術是本發明的核心技術之三；
[0040](4)播種:在廂面上先用I %磷酸二氫鉀+1 %赤霉素+0.5%硫酸鎂+0.5%硫酸鋅+10 %草木灰的混合營養液灑濕整個廂面，再直接在廂面上進行撒播，后覆蓋2?4cm的土，再將廂內土壤進行4?6小時的噴灌，直至使土壤濕度達到95%，再在廂面上覆蓋一層(2?3cm厚)的作物秸桿，以利于保濕；目的是通過進行第一次的水刺激使正在生長的菌絲進入生殖生長;如果第一季在2月初播種，菌絲營養生長在2、3和4月，子實體生殖生長在5月中旬至6月初，25?40天生長周期結束，在整個生長階段，在高寒地區棚內溫度不會低于羊肚菌生活史的最低生長溫度，子實體生長I個月左右結束了整個生活史，第一季出菇產量約為100?150kg/畝;接著夏季在6月初進行第二季播種，菌絲營養生長在6、7和8月，8月中旬至9月初開始出菇，這個季節，在高寒地區溫度也不會超過其生活史的最高生長溫度，子實體生長30?50天完成了整個生活史，第二季出菇產量約為150?kg/畝，接著10月份初進行第三季播種，菌絲營養生長在10、11、12和I月，由于早晚溫差較大，一天中棚內凌晨3:00?5:00溫度為最低?5°C?:TC，菌絲生長期延長，子實體生殖生長在第二年的I月底至2月初，這個季節，在高寒高海拔地區溫室棚溫度也不會低于其生活史的最底生長溫度，子實體生長40?55天完成了整個生活史，第二季出菇產量170?200kg/畝；因此，可以實現一年三季的周年生產，且由于，高寒高海拔地區幾乎沒有高于30 V的季節，出菇會延長至30?40天，而在溫度較高地區羊肚菌子實體出菇僅為10?15天;加大播種量是提高產量的關鍵之一，另外用營養液噴灑廂面可以為菌絲生長提供必要的無機鹽、激素等物質，另外羊肚菌連作更能豐富土壤的微生物區系，從而比單作大大地提高了產量；
[0041](5)投放外援營養袋
[0042]在步驟4羊肚菌播種后第:7?10天，在養料袋上扎孔，將養料袋開孔的一側平放于土壤表面，壓至與所有孔均與土壤充分接觸，如果將孔暴露在空氣中，就會引起營養袋內的養料感染雜菌而霉變，外援營養袋之間的距離為25cm?45cm，行距30cm?50cm;
[0043](6)菌絲生長階段管理
[0044]在步驟5羊肚菌播種后，因土壤水分蒸發而導致土壤發白時，就要進行土地灌水溝漫灌和廂面噴灌處理，進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，同時，保持廂面土壤濕度50%?70%，空氣濕度70%?95%，溫度12?22°C ;
[0045](7)拿掉外援營養袋:營養袋投放7?40天，標準營養袋內長滿菌絲，且菌絲非常密集后拿掉，拿掉外源營養袋菌絲進入生殖生長的誘因之一，后進行第一次補水2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米，每次12小時到40小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50 %?65 %，空氣濕度85%?90%，溫度12 ?22Γ;
[0046](8)羊肚菌出菇管理
[0047]羊肚菌菌絲分化形成原基到具有菌柄和菌蓋的幼小子實體后，進入羊肚菌出菇階段，原基出現到長到3cm期間是一個關鍵的時期這段時間，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50 %?60 %，空氣濕度控制在85 %?90 %，溫度12?22 °C，條件稍有不適，原基就會大量死亡；
[0048](9)采收
[0049]子實體生長5?10天后，顏色由灰色變成灰黃時，子實體表面開始有少量白色孢子粉出現時達到成熟標準及時進行采收，成熟一個采收一個，每天早晨、中午、下午各采摘I次;采摘時，用木制刀具從菌柄基部與土壤的交接處，整齊切斷，不要用手直接從土壤上拔起，以免損傷周圍的幼小原基和未成熟的子實體。
[0050]進一步的，所述步驟一中，第一層裝量為試管容積15%，含水量為50?75 %，第二層裝量為試管容積25%，含水量為55?70%，第三層裝量為試管容積15%，含水量為40?55%，第四層裝量為試管容積25%，含水量為35?50%，第五層裝量為試管容積20%，含水量為55?80%，試管口留出5%的空間以利于管內空氣流通。
[0051]進一步的，所述步驟二中，培養料主料裝量標準為不大于3/5，再裝入封口料，封口料裝量標準為不少于1/5，裝料不能太實，料中間插上一支木條，且瓶或袋要留出1/5的空間，以確保料的通氣性。
[0052]進一步的，所述步驟三中，將各原料混合后用水拌勻，含水量為45%?60%，即得外援營養袋養料，將養料依次進行裝袋、封口，不需要高壓滅菌，即得養料袋。
[0053]進一步的，所述步驟四中，有機肥的使用量為800?1200kg/畝，油菜餅粉的使用量為 120 ?130kg/畝。
[0054]進一步的，所述步驟四中，拿掉外援營養袋后進行第一次補水，補水量為2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現。
[0055]進一步的，所述步驟四中，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米，每次12小時到40小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50%?65%，空氣濕度85%?90%，溫度12?22Γ。
[0056]相對于現有技術，本發明的有益效果為:
[0057]①本發明野生(或栽培)種的子實體的分離克隆技術采用了五層特殊而不同的原料配方，因為菌絲經過五層不同培養料的生長已經達到了純化和復壯的目的，可以直接用來生產栽培種，省去了母種和原種的制作，大大地縮短了制種周期。②在栽培種制作時原料主要以羊肚菌基腳土、草木灰，腐熟牛(或羊、雞)糞、農作秸桿粉、玉米芯、麩皮為主，所用材料來源非常便捷、廣泛、廉價，投入少，大大地降低了成本，但提高了產量。③在營養袋養料配方中以碎紙和尿素為主所用所用材料來源同樣非常便捷、廣泛、廉價，投入少，大大地降低了成本，而且循壞利用了生活、工作廢品，也保護了生態環境。④在整地時進行了施基肥、土壤滅菌、溫室棚滅菌三個環節，因此，在種植期間沒有病蟲害發生，且提高了產量。⑤拌種時采用甘油三酯和磷酸二氫鉀的混合液作為拌種液，因為甘油三酯可以作為營養物質儲存在菌絲里以滿足羊肚菌生殖生長的需要，因此，延長了生殖生長時期，并且減少了病蟲害的發生，提高了種植產量。⑥播種前用營養液噴灑廂面可以為菌絲生長提供必要的無機鹽、激素等物質，播種后將廂面土壤進行4?6小時的噴灌，目的是通過進行第一次的水刺激使正在生長的菌絲進入生殖生長，從而提前出菇，可以縮短種植周期，再在廂面上覆蓋一層(2?3cm厚)的作物秸桿，以利于保濕間接地提高了產量。⑦羊肚菌連作更能豐富土壤的微生物區系，從而比單作大大地提高了產量。⑧投放外援營養袋的最佳時間為羊肚菌播種后第7?10天。⑨拿掉外援營養袋最適時間為16天，因為此時營養袋內已經長滿了密集的菌絲，此時拿掉外源營養可以誘導羊肚菌較早地進入生殖生長，同時進行第一次補水2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米2，每次12小時到40小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50%?65 %，空氣濕度85 %?90 %，溫度12?22°C。⑩菌絲生長階段進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，原基長到3cm關鍵的時期時，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50 %?60 %，空氣濕度控制在85 %?90 %，溫度12?22 °C，最適溫度180C，條件稍有不適，原基就會大量死亡。
[0058]綜上所述，本發明的有益效果:I)在高寒高海拔地區周年生產羊肚菌，且年產量高達422kg?520kg/畝。2)子實體朵形端正、大小均勾、菌冒周長平均2.5cm?4.0cm，菌冒長2.0?3.5cm，菌柄周長0.5?1.5cm，菌柄長I?2cm，菌冒肉質肥厚，品質倶佳率可高達92%。
[0059]3)充分循環利用了生活、工作廢品及下腳料，降低了種植成本，提高了產量，保護和修復了生態環境。
[0060]同時，本發明在制種程序上省去了技術要求最高的母種的制作，且野生種克隆，制作原種、栽培種、栽培料及外援營養袋時選擇生活中常見的廢紙、廢紙箱、玉米芯、小麥、玉米秸桿、麩皮、落葉、雞糞、牛糞等廉價培養料，充分循環利用了當地的生產、生活下腳及料廢棄物等既管理簡單易操作，有生態環保、投資小且大大提高了羊肚菌的產量。
【具體實施方式】
[0061]下面結合【具體實施方式】對本發明技術方案做進一步詳細描述:
[0062]—種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，由如下步驟組成:
[0063]步驟1:野生(或栽培)種的子實體的分離克隆
[0064]所用器材及技術要點:(I)各種規格的試管:1mm X 100mm、12mm X 100mm、15mm X150mm、18mmX 180mm、20mmX 200mm; (2)原料:羊肚菌基腳土、腐熟牛(或羊、雞)奠、小麥、農作秸桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、粉碎廢紙、尿素、維生素BI; (3)技術要點:試管第一層為25?80份羊肚菌基腳土+3?5份生石灰+72?15份腐熟牛、羊或雞糞，第二層為85?65份農作物秸桿粉+15?35份雜木肩，第三層為10?30份小麥+85?65份農作物秸桿粉+1?3份維生素B族+4?2份草木灰，第四層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第五層為10?35份玉米芯+10?30份雜木肩+70?30份粉碎廢紙+10?5份尿素，第一層裝量為試管容積15%，含水量為50?75%，第二層裝量為試管容積25%，含水量為55?70%，第三層裝量為試管容積15%，含水量為40?55%，第四層裝量為試管容積25%，含水量為35?50%，第五層裝量為試管容積20%，含水量為55?80%，試管口留出5%的空間以利于管內空氣流通。容器口塞上棉塞，在溫度為125°C，壓力為0.15Mpa下高壓滅菌I小時，在室溫下自然冷卻;將野生或栽培羊肚菌子實體取麥粒大小的I?2塊組織接種在上述試管第一層料上，將試管放在12?28°C下，空氣濕度為60%?95%，下避光培養，接種后第2天開始長出菌絲，10?15天待試管中長滿菌絲直至長出菌核后取試管底部的菌絲或菌核或有菌絲、菌核的培養基直接接種在栽培種培養料上；因為菌絲經過三層不同培養料的生長已經達到了純化和復壯的目的，可以直接用來生產栽培種，省去了母種和原種的制作，大大地縮短了制種周期。
[0065]第一層羊肚菌基腳土含量小于25%時因組織塊長時間脫水而變干，導致不能發菌;腐熟牛、羊或雞糞含量低于丨5 %時菌絲菌絲不扭結，生長緩慢，甚至停止生長;生石灰含量低于3%時料容易霉變，甚至分離失敗。第三層為10%?30%小麥;第三層小麥含量10%、維生素B族低于1%和草木灰含量低于2%時在此層菌絲也不會發生扭結，僅有很少量的菌絲才能進入第四層。第五層粉碎廢紙含量低于30 %和尿素含量低于5 %時，菌絲生長緩慢，也不形成菌核，造成產量降低，玉米芯含量低于10%時，培養料通氣性較差，容易霉變。
[0066]步驟2:栽培種的制作
[0067]所用器材及技術要點:(1)450?750mL的菌種瓶或聚丙烯菌種袋或洗凈的廢棄的罐頭瓶、輸液瓶；(2)原料:羊肚菌基腳土、草木灰，腐熟牛(或羊、雞)糞、農作秸桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、尿素；(3)技術要點:①培養主料料配方為10%?35%小麥+75%?30%直徑0.2?0.5厘米的玉米秸桿顆粒+10 %?30 %草木灰+1 %磷酸二氫鉀+3 %磷肥+1 %石灰。小麥含量和草木灰含量低于10%時發菌很慢，菌絲也不扭結，形成的菌核較少，甚至不形成菌核，造成出菇少，產量低。小麥含量含量高于30%時，菌絲生長的營養過剩，造成資源浪費，同時提高了生產成本，玉米秸桿顆粒低于10%時，原料的通氣性較差，料的霉變率增高。②將浸泡24?48小時的小麥煮至里面不發白但不爛皮后撈出瀝干水分，加上玉米秸桿顆粒、雜木肩、麩皮拌勻。③將磷酸二氫鉀、磷肥和石灰完全溶解在水里拌在上述混合物里做成培養料，含水量50 %?65 %，pH為自然。④培養料封口料配方為:60 %?82 %羊肚菌基腳土，38 %?14 %草木灰，I %?3 %生石灰，I %磷酸二氫鉀，含水量30 %?45 %，pH為7.0?7.5;羊肚菌基腳土含量低于60 %和草木灰含量低于14%，發菌遲且慢，料的保水性能差，水分蒸發快，不利于菌核形成。生石灰含量低于1%時，封口料易生線蟲，高于3%，料的pH值將高于7.5，堿性太強，不利于菌絲生長。⑤封口料裝瓶或裝袋:先將培養料主料裝入瓶或袋中，裝瓶或裝袋，裝量標準為3/5，再裝入封口料，裝量標準為1/5，裝料不能太實，料中間插上一支木條，以確保料的通氣性。⑥封口滅菌:121°C?125°C，0.12Mpa?0.15Mpa高壓滅菌2?4小時。⑦接種:將滅菌后的料冷卻，在無菌環境中接入步驟I分離得到的菌絲或菌核，一支試管可以接30?55瓶或袋，其中最下層接15?25瓶或袋，第二層接10?20瓶，第一層接5瓶?10瓶。⑧培養:在溫度為10?28 °C下避光培養，最適溫度為18?20 °C，空氣濕度為55%?90%，最適濕度為65%?75%，接種后第2-4天開始長出菌絲，1?20天菌絲瓶或滿袋直至長出菌核即為栽培種。
[0068]步驟3:外援營養袋的制作
[0069](I)外援營養袋養料配方:60%?85%廢紙、35%?10%尿素、I %磷酸二氫鉀、0.5%硫酸鎂、0.5 %硫酸鋅，3 %石膏;廢紙含量低于60 %和尿素含量低于10 %時，菌絲進入營養袋的時間延長，延長了拿掉外援營養帶的時間，從而延長了菌絲的營養生長期，推后了生殖生長時間，因此，出菇較晚，使羊肚菌的生長周期延長，不能實現一年三季的生產，間接地降低了產量。(2)將各原料混合后用水拌勻，含水量為45%?60%，即得外援營養袋養料，將養料依次進行裝袋、封口，不需要高壓滅菌，即得養料袋。營養袋養料材料來源便捷、廣泛、廉價，對設備要求不高，投入少，大大地降低了成本，技術簡單。
[0070]步驟4:日光溫室棚(有通風、灌溉設備)種植，周年均可種植，此步驟包括以下過程:(棚內還可以用種植層架進行立體種植，立體種植技術正在研發中)
[0071 ] (I)整地及播種:①施基肥:施有機肥和油菜餅粉作為基肥，有機肥的使用量為800?1200kg/畝，油菜餅粉的使用量為120?130kg/畝;②土壤滅菌:將廂內土壤翻松，整平，先用石灰進行全面的消毒，石灰用量為250kg/畝?350kg/畝，澆一次透水后，晾曬2-5天，再撒一層I厘米厚的草木灰和一層5厘米厚的中砂，噴灑0.5%氯氰菊酯及50%辛硫磷混合水溶液殺蟲;③溫室棚滅菌:土壤消毒后再將地深翻一次后密閉大棚用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸滅菌3天，然后通風處理2天;④起廂:平整后的種植土地表面開設廂面，廂面寬度為80?120 cm，再在廂面四周開設廂灌水溝，灌水溝的寬度15?30cm，灌水溝的深度為15?20cm，然后將栽培種撒播在廂面上，該技術要求大播種量，分春、秋、冬三季播種。
[0072](2)消毒:采用75%的酒精對菌種取用器具、盛放盆、接種人員手等進行消毒后，接種人員通過取用器具將羊肚菌菌種置于盛放器具中。
[0073](3)拌種:將甘油三酯和磷酸二氫鉀(I?3:1)與水混合制成拌種溶液，將栽培種拌勻，拌種溶液的用量為栽培質量的25% — 35%，因為羊肚菌在營養生長階段必須儲存足夠的營養，而甘油三酯可以作為營養物質儲存在菌絲里以滿足羊肚菌生殖生長的需要，因此，延長了生殖生長時期，減少了病蟲害的發生，出菇穩定，大大地提高了種植產量。該技術是本發明的核心技術之三。
[0074](4)播種:在廂面上先用I %磷酸二氫鉀+1 %赤霉素+0.5%硫酸鎂+0.5%硫酸鋅+10%草木灰的混合營養液灑適整個廂面，噴灑此營養液，能有效打破菌絲的休眠，同時提供菌絲營養生長所需的各種鹽。再直接在廂面上進行撒播，后覆蓋2?4cm的土，再將廂土壤進行4?6小時的噴灌，直至使土壤濕度達到95%，再在廂面上覆蓋一層(2?3cm厚)的作物秸桿，以利于保濕。目的是通過進行第一次的水刺激使正在生長的菌絲進入生殖生長。如果第一季在2月初播種，菌絲營養生長在2、3和4月，子實體生殖生長在5月中旬至6月初，25?40天生長周期結束，在整個生長階段，在高寒地區棚內溫度不會低于羊肚菌生活史的最低生長溫度，子實體生長I個月左右結束了整個生活史，第一季出菇產量約為100?150kg/畝。接著夏季在6月初進行第二季播種，菌絲營養生長在6、7和8月，8月中旬至9月初開始出菇，這個季節，在高寒地區溫度也不會超過其生活史的最高生長溫度，子實體生長30?50天完成了整個生活史，第二季出菇產量約為150?kg/畝，接著1月份初進行第三季播種，菌絲營養生長在10、11、12和I月，由于早晚溫差較大，一天中棚內凌晨3:00?5:00溫度為最低?5°C?3°C，菌絲生長期延長，子實體生殖生長在第二年的I月底至2月初，這個季節，在高寒高海拔地區溫室棚溫度也不會低于其生活史的最底生長溫度，子實體生長40?55完成了整個生活史，第二季出菇產量170?200kg/畝。因此，可以實現一年三季的周年生產，且由于，高寒高海拔地區幾乎沒有高于30°C的季節，出菇會延長至30?40天，而在溫度較高地區羊肚菌子實體出燕僅有10?15天。加大播種量是提高產量的關鍵之一，另外用營養液噴灑廂面可以為菌絲生長提供必要的無機鹽、激素等物質，另外羊肚菌連作更能豐富土壤的微生物區系，從而比單作大大地提高了產量。
[0075](5)投放外援營養袋
[0076]在步驟4羊肚菌播種后第:7?10天，在養料袋上扎孔，將養料袋開孔的一側平放于土壤表面，壓至與所有孔均與土壤充分接觸，如果將孔暴露在空氣中，就會引起營養袋內的養料感染雜菌而霉變，外援營養袋之間的距離為25cm?45cm，行距30cm?50cmo
[0077](6)菌絲生長階段管理
[0078]在步驟5羊肚菌播種后，因土壤水分蒸發而導致土壤發白時，就要進行土地灌水溝漫灌和廂面噴灌處理，進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，同時，保持廂面土壤濕度50 %?70 %，最適土壤濕度65%，空氣濕度70%?95%，最適空氣濕度75%，溫度12?22°(:，最適溫度20°(:。
[0079](7)拿掉外援營養袋:營養袋投放7?40天，標準營養袋內長滿菌絲，且菌絲非常密集后拿掉外源營養袋;拿掉外源營養袋菌絲進入生殖生長的誘因之一，后進行第一次補水2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米，每次12小時到40小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50 %?65 %，空氣濕度85% ?90%，溫度 12 ?22°C;
[0080](8)羊肚菌出菇管理
[0081]羊肚菌菌絲分化形成原基到具有菌柄和菌蓋的幼小子實體后，進入羊肚菌出菇階段，原基出現到長到3cm期間是一個關鍵的時期這段時間，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50 %?60 %，空氣濕度控制在85 %?90 %，溫度12?22 °C，條件稍有不適，原基就會大量死亡；
[0082](9)采收
[0083]子實體生長5?10天后，顏色由灰色變成灰黃時，子實體表面開始有少量白色孢子粉出現時達到成熟標準及時進行采收，成熟一個采收一個，每天早晨、中午、下午個采摘I次。采摘時，用木制刀具從菌柄基部與土壤的交接處，整齊切斷，不要用手直接從土壤上拔起，以免損傷周圍的幼小原基和未成熟的子實體。
[0084]實施例1
[0085]實施地點:甘肅省合作市甘肅民族師范學院高原真菌科研教學實習基地，海拔3090米，年均氣溫1.7 °C，無絕對無霜期。
[0086]2013年4月15日在高寒高海拔的合作市土壤剛剛解凍后在甘肅民族師范學院高原真菌科研教學實習基地用遮陽網蔭棚常規法種植3個陰棚，每個棚面積600m2，到8月份在每個棚里見到不到10個子實體，且子實體小。接著在9月15日用同樣的蔭棚進行二季試種，直到2014年4月20日至5月20日，3個陰棚共長出了40個子實體。2013年3月15日同時在日光溫室棚內進行種植技術改進試驗，取得了意想不到的技術效果，2013年?至今，經過4年每年3季的重復試驗，試驗結果能夠重復并獲得了成功。
[0087]實施例2
[0088]實施地點:甘肅省卓尼縣某鄉某村，平均海拔2000-2920米之間，年均氣溫4.6°C，年降水量584毫米，日光溫室棚種植總數為18棚，面積為18畝。種植實施時間:2014年3月10日?2016年3月20日。
[0089]具體實施過程如下。
[0090]步驟1:野生(或栽培)種的子實體的分離克隆
[0091](I)所用試管:15mmX 150mm⑵原料:羊肚菌基腳土、腐熟牛(或羊、雞)糞、小麥、農作秸桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、粉碎廢紙、尿素、維生素B; (3)技術要點:試管第一層為80份羊肚菌基腳土+5份生石灰+15份腐熟牛、羊或雞糞，第二層為65份農作物秸桿粉+35份雜木肩，第三層為30份小麥+65份農作物秸桿粉+3份維生素B族+2份草木灰，第四層為65份農作物秸桿粉+35份雜木肩，第五層為35份玉米芯+30份雜木肩+30份粉碎廢紙+5份尿素，試管塞上棉塞，在121°C高壓鍋內滅菌I小時，在室溫下自然冷卻。將野生或栽培羊肚菌子實體組織塊隨采隨接種在潮濕的土上，此方法達到了簡單的開放式操作，不受周圍環境條件的限制和約束。將試管放在20 0C下，空氣濕度為75 %，最適濕度為80 %下避光培養，接種后第2天開始長出菌絲，13天待試管中長滿菌絲并長出菌核后取有菌絲、菌核的培養基直接接種在栽培種培養料上。
[0092]步驟2:栽培種的制作
[0093](I)選用450mL的洗凈的廢棄的罐頭瓶、輸液瓶；(2)原料:羊肚菌基腳土、草木灰，腐熟牛(或羊、雞)奠、農作稻桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、尿素；(3)技術要點:①培養主料料配方為35 %小麥+30 %直徑0.5厘米的玉米秸桿顆粒+30 %草木灰+1 %磷酸二氫鉀+3 %磷肥+1%石灰。②將浸泡48小時的小麥煮至里面不發白但不爛皮后撈出瀝干水分，加上玉米秸桿顆粒、雜木肩、麩皮拌勻。③將磷酸二氫鉀、磷肥和石灰完全溶解在水里拌在上述混合物里做成培養料，含水量50 %，pH為自然。④培養料封口料配方為:82 %羊肚菌基腳土，14%草木灰，3%生石灰，I %磷酸二氫鉀，含水力量40%，pH為自然。⑤封口料裝瓶或裝袋:先將培養料主料裝入瓶或袋中，裝瓶或裝袋，裝量標準為3/5，再裝入封口料，裝量標準為I/5，裝料不能太實，料中間插上一支木條，以確保料的通氣性。⑥封口滅菌:121°C高壓滅菌3小時。⑦接種:將滅菌后的料冷卻，在無菌環境中于接入步驟I分離得到的菌絲或菌核，一支試管可以接35瓶，其中最下層接15瓶或袋，第二層接10瓶，第一層接5瓶。⑧培養:在溫度為18°C，空氣濕度為55%，最適濕度為75%，接種后第2天開始長出菌絲，13天菌絲瓶且長出菌核即為栽培種。
[0094]步驟3:外援營養袋的制作
[0095](I)外援營養袋養料配方:85%廢紙、10%尿素、I %磷酸二氫鉀、0.5%硫酸鎂、0.5%硫酸鋅，3%石膏；(2)將各原料混合后用水拌勻，含水量為45%，即得外援營養袋養料，將養料依次進行裝袋、封口，不需要高壓滅菌，即得養料袋。
[0096]步驟4:有通風、灌溉設備日光溫室棚種植，此步驟包括以下過程:
[0097](I)整地及播種:①施基肥:施有機肥和油菜餅粉作為基肥，有機肥的使用量為800kg/畝，油菜餅粉的使用量為120kg/畝;②土壤滅菌:將廂內土壤翻松，整平，先用石灰進行全面的消毒，石灰用量為250kg/畝，澆一次透水后，晾曬2天，再撒一層I厘米厚的草木灰和一層5厘米厚的中砂，噴灑0.5 %氯氰菊酯及50 %辛硫磷混合水溶液殺蟲;③溫室棚滅菌:土壤消毒后再將地深翻一次后密閉大棚用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸滅菌3天，然后通風處理2天;④起廂:平整后的種植土地表面開設廂面，廂面寬度為80cm，再在廂面四周開設廂灌水溝，灌水溝的寬度15?30cm，灌水溝的深度為15cm，然后將栽培種撒播在廂面上。菌種量為I瓶/m2。
[0098](2)消毒:采用75%的酒精對菌種取用器具、盛放盆、接種人員手等進行消毒后，接種人員通過取用器具將羊肚菌菌種置于盛放器具中。
[0099](3)拌種:將甘油三酯和磷酸二氫鉀(1:1)與水混合制成拌種溶液，將栽培種拌勻，拌種溶液的用量為栽培質量的25%。
[0100](4)播種:在廂面上先用I %磷酸二氫鉀+1 %赤霉素+0.5%硫酸鎂+0.5%硫酸鋅+10 %草木灰的混合營養液灑適整個廂面，再直接在廂面上進行撒播，后覆蓋2cm的土，再將廂土壤進行4小時的噴灌，直至使土壤濕度達到95%，再在廂面上覆蓋一層(2cm厚)的作物稻桿。第一季在2月8日播種，菌絲營養生長在2、3和4月，5月2日開始出燕，6月15日，生長周期基本結束，在整個生長階段，在高寒地區棚內最低溫度控制在3?12°C，最高溫度控制在14°C?26 °C，子實體生長近40天左右結束了整個生活史，第一季出菇產量124kg/畝?135kg/畝。接著夏季在6月10日進行第二季播種，菌絲營養生長在6、7和8月，9月I日開始出菇，這個季節，在高寒地區棚內最高溫度控制在12°C?24°C，子實體生長48天完成了整個生活史，第二季出菇產量139kg/畝?148kg/畝，接著10月15日進行第三季播種，菌絲營養生長在10、11、12，由于早晚溫差較大，一天中棚內凌晨3:00?5:00溫度為最低-5°C?3°C，菌絲生長期延長，子實體生殖生長在第二年的I月24日，子實體生長55天完成了整個生活史，第三季出菇產量155kg/畝?172kg/畝。年總產量大約為419kg/畝?445kg/畝因此，實現了一年三季的周年生產。
[0101](5)投放外援營養袋
[0102]在步驟4羊肚菌播種后第:7天，在養料袋上扎孔，將養料袋開孔的一側平放于土壤表面，壓至與所有孔均與土壤充分接觸，如果將孔暴露在空氣中，就會引起營養袋內的養料感染雜菌而霉變，外援營養袋之間的距離為25cm，行距30cmo
[0103](6)菌絲生長階段管理
[0104]菌種播種后，只要出現土壤發白，就進行土地灌水溝漫灌和廂面噴灌處理，進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，同時，保持廂面土壤濕度50% %，最適土壤濕度65%，空氣濕度70%，最適空氣濕度75%，溫度16 °C，最適溫度20 °C。
[0105](7)拿掉外援營養袋:營養袋投放25天，當營養袋內長滿菌絲后拿掉，拿掉外源營養袋并進行第一次補水2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250mL/小時.平方米2，每次12小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50 % %，空氣濕度85%，溫度 16°C。
[0106](8)羊肚菌出菇管理
[0107]羊肚菌菌絲分化形成原基到具有菌柄和菌蓋的幼小子實體后，進入羊肚菌出菇階段，原基出現到長到3cm期間是一個關鍵的時期這段時間，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50%，空氣濕度控制在85%，溫度15?22°C，沒有出現原基大量死亡的現象。
[0108](9)采收
[0109]子實體生長5?10天后，顏色由灰色變成灰黃時，子實體表面開始有少量白色孢子粉出現時達到成熟標準及時進行采收，成熟一個采收一個，每天早晨、中午、下午個采摘I次。采摘時，用木制刀具從菌柄基部與土壤的交接處，整齊切斷，不要用手直接從土壤上拔起，以免損傷周圍的幼小原基和未成熟的子實體。分別在2014年6月18日、10月13日、2月20日對棚內子實體發生數量依次進行調查，調查結果表明，18個棚每個棚每季子實體的數量為分別為34?45個/m2、38?58個/V、44?70個/V，周年子實體的數量為124?171個/V，單個成熟子實體的重量為2.25?20.42g，平均按照4.0g/個計算，每個棚每個棚的年產量均為330.83kg/畝?456.22kg/畝，每個棚平均年產量為438.5kg/畝。
[0110]實施例3
[0111]實施地點:青海省樂都縣某鄉某村20個棚，總面積為19.3畝。
[0112]種植實施時間:2015年4月24日?2016年5月22日。
[0113](I)各種規格的試管:20mmX200mm;(2)原料:羊肚菌基腳土、腐熟牛(或羊、雞)糞、小麥、農作秸桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、粉碎廢紙、尿素、維生素B; (3)技術要點:試管培養基料在容器中分五層設置，按照質量份數，每一層具體為:第一層為50份羊肚菌基腳土+4份生石灰+46份腐熟牛、羊或雞糞，第二層為75份農作物秸桿粉+25份雜木肩，第三層為20份小麥+75份農作物秸桿粉+2份維生素B族+3份草木灰，第四層為75份農作物秸桿粉+25份雜木肩，第五層為25份玉米芯+20份雜木肩+48份粉碎廢紙+7份尿素，第一層裝量為試管容積15%，含水量為50?75%，第二層裝量為試管容積25%，含水量為55?70%，第三層裝量為試管容積15%，含水量為40?55%，第四層裝量為試管容積25%，含水量為35?50%，第五層裝量為試管容積20%，含水量為55?80%，試管口留出5%的空間以利于管內空氣流通，試管塞上棉塞，在125°C下的高壓鍋內滅菌I小時，在室溫下自然冷卻。將野生或栽培羊肚菌子實體組織塊隨采隨接種在潮濕的土上，將試管放在溫度為16?20°C下，空氣濕度為60%?95%，下避光培養，接種后第2天開始長出菌絲，10?15天試管中長滿菌絲或長出菌核后可取試管有菌絲、菌核的培養基直接接種在栽培種培養料上。
[0114]所用器材及技術要點:(l)750mL的菌種瓶(2)原料:羊肚菌基腳土、草木灰，腐熟牛(或羊、雞)糞、農作秸桿粉、磷肥、白糖、玉米芯、麩皮、尿素；(3)技術要點:①培養主料料配方為20 %小麥+35 %直徑0.5厘米的玉米秸桿顆粒+20 %草木灰+20 %麩皮+1 %磷酸二氫鉀+3%磷肥+1%石灰。②將浸泡36小時的小麥煮至里面不發白但不爛皮后撈出瀝干水分，加上玉米秸桿顆粒、雜木肩、麩皮拌勻。③將磷酸二氫鉀、磷肥和石灰完全溶解在水里拌在上述混合物里做成培養料，含水量65 %，pH為自然。④培養料封口料配方為:85 %羊肚菌基腳土，15 %草木灰，I %生石灰，I %糖，含水力量30 %?45 %，pH為自然。⑤封口料裝瓶或裝袋:先將培養料主料裝入瓶或袋中，裝瓶或裝袋，裝量標準為3/5，再裝入封口料，裝量標準為1/5，裝料不能太實，料中間插上一支木條，以確保料的通氣性。⑥封口滅菌:121°C高壓滅菌2小時。⑦接種:將滅菌后的料冷卻，在無菌環境中接入步驟I分離得到的菌絲或菌核，一支試管接30?40瓶，其中最下層接15?20瓶，第二層接10?15瓶，第一層接5瓶?10瓶。⑧培養:在溫度為10?28°C下避光培養，空氣濕度為55%?65%，接種后第36小時開始長出菌絲，10?20天菌絲瓶并長出菌核即為栽培種。
[0115]步驟3:外援營養袋的制作
[0116](I)外援營養袋養料配方:85%廢紙、10%尿素、I %磷酸二氫鉀、0.5%硫酸鎂、0.5%硫酸鋅，3%石膏(2)將各原料混合后用水拌勻，含水量為60%，即得外援營養袋養料，將養料依次進行裝袋、封口，不需要高壓滅菌，即得養料袋。
[0117]步驟4:日光溫室棚(有通風、灌溉設備)種植，周年均可種植，此步驟包括以下過程:(棚內還可以用種植層架進行立體種植，立體種植技術正在研發中)
[0118](I)整地及播種:①施基肥:施有機肥和油菜餅粉作為基肥，有機肥的使用量為1200kg/畝，油菜餅粉的使用量為130kg/畝;②土壤滅菌:將廂內土壤翻松，整平，先用石灰進行全面的消毒，石灰用量為350kg/畝，澆一次透水后，晾曬4天，再撒一層I厘米厚的草木灰和一層5厘米厚的中砂，噴灑0.5 %氯氰菊酯及50 %辛硫磷混合水溶液殺蟲;③溫室棚滅菌:土壤消毒后再將地深翻一次后密閉大棚用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸滅菌3天，然后通風處理2天;④起廂:平整后的種植土地表面開設廂面，廂面寬度為120cm，再在廂面四周開設廂灌水溝，灌水溝的寬度30cm，灌水溝的深度為20cm，然后將栽培種撒播在廂面上。菌種量為2瓶/m2。
[0119](2)消毒:采用75%的酒精對菌種取用器具、盛放盆、接種人員手等進行消毒后，接種人員通過取用器具將羊肚菌菌種置于盛放器具中。
[0120](3)拌種:將甘油三酯和磷酸二氫鉀(I?3)與水混合制成拌種溶液，將栽培種拌勻，拌種溶液的用量為栽培質量的35%。
[0121 ] (4)播種:在廂面上先用I %磷酸二氫鉀+1 %赤霉素+0.5%硫酸鎂+0.5%硫酸鋅+10 %草木灰的混合營養液灑適整個廂面，再直接在廂面上進行撒播，后覆蓋2?4cm的土，再將廂土壤進行6小時的噴灌，直至使土壤濕度達到95%，再在廂面上覆蓋一層(3cm厚)的作物秸桿，以利于保濕。目的是通過進行第一次的水刺激使正在生長的菌絲進入生殖生長。如果第一季在4月24播種，菌絲營養生長在5、6和7月，子實體生殖生長在6月18日?7月10日，8月20日左右，生長周期結束，第一季出菇產量138?155kg/畝。接著夏季在9月10日進行第二季播種，菌絲營養生長在10、11和12月，在10日19日開始出菇，12月5日子實體完成了整個生活史，第二季出菇產量161?180kg/畝，接著12月20日進行第三季播種，菌絲營養生長在2015年1、2和3月，由于早晚溫差較大，一天中棚內凌晨3:00?5:00溫度為最低?4°C?4°C，菌絲生長期延長，3月6日開始出菇，4月26日完成了整個生活史，出菇期高達55天，第三季出菇產量172?200kg/畝。因此，也實現了一年三季的周年生產，年總產量大約為472kg/畝?535kg/畝，因此，實現了一年三季的周年生產，并獲得了高產。
[0122](5)投放外援營養袋
[0123]在步驟4羊肚菌播種后第:10天，在養料袋上扎孔，將養料袋開孔的一側平放于土壤表面，壓至與所有孔均與土壤充分接觸，如果將孔暴露在空氣中，就會引起營養袋內的養料感染雜菌而霉變，外援營養袋之間的距離為45cm，行距50cmo
[0124](6)菌絲生長階段管理
[0125]在步驟5羊肚菌播種后，只要出現土壤發白，就要進行土地灌水溝漫灌和廂面噴灌處理，進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，同時，保持廂面土壤濕度50 %?70 %，空氣濕度70 %?95 %，溫度 12 ?22。。。
[0126](7)拿掉外援營養袋:營養袋投放40天，標準營養袋內長滿菌絲，且菌絲非常密集后拿掉，拿掉外源營養袋菌絲進入生殖生長的誘因之一，后進行第一次補水2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米2，每次20小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50%?65%，空氣濕度85%?90%，溫度12?22°C。
(8)羊肚菌出燕管理
[0127]羊肚菌菌絲分化形成原基到具有菌柄和菌蓋的幼小子實體后，進入羊肚菌出菇階段，原基出現到長到3cm期間是一個關鍵的時期這段時間，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50 %?60 %，空氣濕度控制在85 %?90 %，溫度12?22°C，沒有出現原基大量死亡。
[0128](9)采收
[0129]子實體生長5?10天后，顏色由灰色變成灰黃時，子實體表面開始有少量白色孢子粉出現時達到成熟標準及時進行采收，成熟一個采收一個，每天早晨、中午、下午個采摘I次。采摘時，用木制刀具從菌柄基部與土壤的交接處，整齊切斷，不要用手直接從土壤上拔起，以免損傷周圍的幼小原基和未成熟的子實體。
[0130]分別在2015年8月23日、12月8日、4月28日對棚內子實體發生數量依次進行調查，調查結果表明，18個棚每個棚每季子實體的總數量為分別為35?50個/m2、44?60個/V、50?72個/m2，周年子實體的數量為129?182個/m2，單個成熟子實體的重量為2.75?17.66g，平均按照4.0g/個計算，每個棚的年產量約為344.17kg/畝?485.58kg/畝，每個棚平均年產量約為468.8kg/畝。因此，實現了一年三季的周年生產，并獲得了高產。
[0131]實施例4，其他同實施例3
[0132]步驟I中，培養基料在容器中分五層設置，按照質量份數，每一層具體為:第一層為25份羊肚菌基腳土+3份生石灰+72份腐熟牛、羊或雞糞，第二層為85份農作物秸桿粉+15份雜木肩，第三層為10份小麥+85份農作物秸桿粉+1份維生素B族+4份草木灰，第四層為85份農作物秸桿粉+15份雜木肩，第五層為10份玉米芯+10份雜木肩+70份粉碎廢紙+10份尿素；
[0133]分別在2015年8月23日、12月8日、4月28日對棚內子實體發生數量依次進行調查，調查結果表明，18個棚每個棚每季子實體的總數量為分別為30?40個/m2、40?50個/m2、40?60個/m2，周年子實體的數量為100?153個/m2，單個成熟子實體的重量為2.75?17.66g，產量相比實施例3略有降低，但仍能達到一年三季的高產。
[0134]實施例5，其他同實施例3
[0135]步驟一中，試管第一層為20份羊肚菌基腳土+2份生石灰+12份腐熟牛、羊或雞糞，第二層為85?65份農作物秸桿粉+15?35份雜木肩，第三層為8份小麥+85?65份農作物秸桿粉+0.5份維生素B族+1份草木灰，第四層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第五層為10?35份玉米芯+10?30份雜木肩+70?30份粉碎廢紙+10?5份尿素，第一層裝量為試管容積15%，含水量為50?75%，第二層裝量為試管容積25%，含水量為55?70%，第三層裝量為試管容積15%，含水量為40?55%，第四層裝量為試管容積25%，含水量為35?50%，第五層裝量為試管容積20%，含水量為55?80%，試管口留出5%的空間以利于管內空氣流通。
[0136]第一層羊肚菌基腳土含量小于25%時因組織塊長時間脫水而變干，導致不能發菌;腐熟牛、羊或雞糞含量低于丨5 %時菌絲菌絲不扭結，生長緩慢，甚至停止生長;生石灰含量低于3%時料容易霉變，甚至分離失敗。第三層為10%?30%小麥;第三層小麥含量10%、維生素B族低于1%和草木灰含量低于2%時在此層菌絲也不會發生扭結，僅有很少量的菌絲才能進入第四層。第五層粉碎廢紙含量低于30 %和尿素含量低于5 %時，菌絲生長緩慢，也不形成菌核，造成產量降低，玉米芯含量低于10%時，培養料通氣性較差，容易霉變。
[0137]步驟二中，培養主料料配方為8%小麥+79%直徑0.2?0.5厘米的玉米秸桿顆粒+8%草木灰+1%磷酸二氫鉀+3%磷肥+1%石灰。小麥含量和草木灰含量低于10%時發菌很慢，菌絲也不扭結，形成的菌核較少，甚至不形成菌核，造成出菇少，產量低。小麥含量含量高于30%時，菌絲生長的營養過剩，造成資源浪費，同時提高了生產成本，玉米秸桿顆粒低于10 %時，原料的通氣性較差，料的霉變率增高。
[0138]培養料封口料配方為:55 %羊肚菌基腳土，43.5 %草木灰，0.5 %生石灰，I %磷酸二氫鉀，含水量30 %?45 %，pH為7.0?7.5;羊肚菌基腳土含量低于60 %和草木灰含量低于14%，發菌遲且慢，料的保水性能差，水分蒸發快，不利于菌核形成。生石灰含量低于1%時，封口料易生線蟲，高于3%，料的pH值將高于7.5，堿性太強，不利于菌絲生長。
[0139]步驟3:外援營養袋的制作
[0140](I)外援營養袋養料配方:56%廢紙、39%尿素、I %磷酸二氫鉀、0.5%硫酸鎂、
0.5%硫酸鋅，3%石膏;廢紙含量低于60%和尿素含量低于10%時，菌絲進入營養袋的時間延長，延長了拿掉外援營養帶的時間，從而延長了菌絲的營養生長期，推后了生殖生長時間，因此，出菇較晚，使羊肚菌的生長周期延長，不能實現一年三季的生產，間接地降低了產量。
[0141]因培養條件不達標，在高寒高海拔的合作市土壤剛剛解凍后在甘肅民族師范學院高原真菌科研教學實習基地用遮陽網蔭棚種植3個陰棚，每個棚面積600m2，到8月份在每個棚里見到不到20個子實體，且子實體小。效果差異明顯。
[0142]以上所述，僅為本發明的【具體實施方式】，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何不經過創造性勞動想到的變化或替換，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。因此，本發明的保護范圍應該以權利要求書所限定的保護范圍為準。
【主權項】
1.一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，由如下步驟組成: 步驟I:羊肚菌子實體的分離克隆: 培養基料在容器中分五層設置，按照質量份數，每一層具體為:第一層為25?80份羊肚菌基腳土+3?5份生石灰+72?15份腐熟牛、羊或雞奠，第二層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第三層為10?30份小麥+85?65份農作物秸桿粉+1?3份維生素B族+4?2份草木灰，第四層為85?65份農作物稻桿粉+15?35份雜木肩，第五層為10?35份玉米芯+10?30份雜木肩+70?30份粉碎廢紙+10?5份尿素，容器口塞上棉塞，在溫度為125°C，壓力為0.15Mpa下高壓滅菌I小時，在室溫下自然冷卻;將野生或栽培羊肚菌子實體取麥粒大小的I?2塊組織接種在上述試管第一層料上，將試管放在12?280C下，空氣濕度為60 %?95 %，下避光培養，接種后第2天開始長出菌絲，10?15天待試管中長滿菌絲直至長出菌核后取試管底部的菌絲或菌核或有菌絲、菌核的培養基直接接種在栽培種培養料上； 步驟2:栽培種的制作 培養主料配方為10 %?35%小麥+75 %?30 %直徑0.2?0.5厘米的玉米秸桿顆粒+10%?30%草木灰+1%磷酸二氫鉀+3%磷肥+1%石灰;②將浸泡24?48小時的小麥煮至里面不發白但不爛皮后撈出瀝干水分，加上玉米秸桿顆粒、草木灰拌勻;③將磷酸二氫鉀、磷肥和石灰完全溶解在水里拌在上述混合物里做成培養料，含水量50 %?65 % ;④培養料封口料配方為:60%?82%羊肚菌基腳土，38%?14%草木灰，I %?3%生石灰，I %磷酸二氫鉀，含水量30 %?45 %，pH為7.0?7.5;⑤封口料裝瓶或裝袋:先將培養料主料裝入瓶或袋中，裝瓶或裝袋，再裝入封口料;⑥封口滅菌:121°C?125°C，0.12Mpa?0.15Mpa高壓滅菌4?2小時;⑦接種:將滅菌后的料冷卻，在無菌環境中接入步驟I分離得到的菌絲或菌核連同培養料取黃豆粒大小接種在封口料上并壓緊與料充分接觸，一支20mm X 200mm試管視菌絲和菌核長勢可以接30?55瓶或袋，其中最下層接15?25瓶或袋，第二層接10?20瓶，第一層接5瓶?10瓶;⑧培養:在溫度為10?28 °C下避光培養，空氣濕度為55%?90%，接種后第2?4天開始長出菌絲，10?20天菌絲滿瓶或滿袋直至長出菌核即為栽培種； 步驟3:外援營養袋的制作 (I)外援營養袋養料配方:廢紙、尿素、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、硫酸鋅，石膏； 步驟4:日光溫室棚種植，周年均可種植，此步驟包括: (1)整地及播種:①施基肥:施有機肥和油菜餅粉作為基肥，②土壤滅菌:將廂內土壤翻松，整平，先用石灰進行全面的消毒，石灰用量為250kg/畝?350kg/畝，澆一次透水后，晾曬2-5天，再撒一層I厘米厚的草木灰和一層5厘米厚的中砂，噴灑濃度為0.5%氯氰菊酯及50 %的辛硫磷混合水溶液殺蟲;③溫室棚滅菌:土壤消毒后再將地深翻一次后密閉大棚用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸滅菌3天，然后通風處理2天;④起廂:平整后的種植土地表面開設廂面，廂面寬度為80?120cm，再在廂面四周開設廂灌水溝，灌水溝的寬度15?30cm，灌水溝的深度為15?20cm，然后將栽培種撒播在廂面上，該技術要求大播種量，分春、秋、冬三季播種； (2)消毒:采用75%的酒精對菌種取用器具、盛放盆、接種人員雙手等進行消毒后，接種人員通過取用器具將羊肚菌菌種置于盛放器具中； (3)拌種:將甘油三酯和磷酸二氫鉀與水以I?3:1:5的體積比混合制成拌種溶液，將栽培種拌勻，拌種溶液的用量為栽培質量的25%?35%，因為羊肚菌在營養生長階段必須儲存足夠的營養，而甘油三酯可以作為營養物質儲存在菌絲里以滿足羊肚菌生殖生長的需要，因此，延長了生殖生長時期，減少了病蟲害的發生，出菇穩定，大大地提高了種植產量；該技術是本發明的核心技術之三； (4)播種:在廂面上先用I%磷酸二氫鉀+1 %赤霉素+0.5 %硫酸鎂+0.5 %硫酸鋅+10 %草木灰的混合營養液灑濕整個廂面，再直接在廂面上進行撒播，后覆蓋2?4cm的土，再將廂內土壤進行4?6小時的噴灌，直至使土壤濕度達到95 %，再在廂面上覆蓋一層(2?3cm厚)的作物秸桿，以利于保濕；目的是通過進行第一次的水刺激使正在生長的菌絲進入生殖生長;如果第一季在2月初播種，菌絲營養生長在2、3和4月，子實體生殖生長在5月中旬至6月初，25?40天生長周期結束，在整個生長階段，在高寒地區棚內溫度不會低于羊肚菌生活史的最低生長溫度，子實體生長I個月左右結束了整個生活史，第一季出菇產量約為100?150kg/畝;接著夏季在6月初進行第二季播種，菌絲營養生長在6、7和8月，8月中旬至9月初開始出菇，這個季節，在高寒地區溫度也不會超過其生活史的最高生長溫度，子實體生長30?50天完成了整個生活史，第二季出菇產量約為150?kg/畝，接著10月份初進行第三季播種，菌絲營養生長在10、11、12和I月，由于早晚溫差較大，一天中棚內凌晨3:00?5:00溫度為最低?5°C?:TC，菌絲生長期延長，子實體生殖生長在第二年的I月底至2月初，這個季節，在高寒高海拔地區溫室棚溫度也不會低于其生活史的最底生長溫度，子實體生長40?55天完成了整個生活史，第二季出菇產量170?200kg/畝；因此，可以實現一年三季的周年生產，且由于，高寒高海拔地區幾乎沒有高于30 V的季節，出菇會延長至30?40天，而在溫度較高地區羊肚菌子實體出菇僅為10?15天;加大播種量是提高產量的關鍵之一，另外用營養液噴灑廂面可以為菌絲生長提供必要的無機鹽、激素等物質，另外羊肚菌連作更能豐富土壤的微生物區系，從而比單作大大地提高了產量； (5)投放外援營養袋 在步驟4羊肚菌播種后第:7?10天，在養料袋上扎孔，將養料袋開孔的一側平放于土壤表面，壓至與所有孔均與土壤充分接觸，如果將孔暴露在空氣中，就會引起營養袋內的養料感染雜菌而霉變，外援營養袋之間的距離為25cm?45cm，行距30cm?50cm; (6)菌絲生長階段管理 在步驟5羊肚菌播種后，因土壤水分蒸發而導致土壤發白時，就要進行土地灌水溝漫灌和廂面噴灌處理，進行灌溉時，水里加上甘油三酯0.5mL/L、磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，以提供菌絲生長的營養，同時，保持廂面土壤濕度50%?70%，空氣濕度70% ?95%，溫度 12 ?22°C; (7)拿掉外援營養袋:營養袋投放7?40天，標準營養袋內長滿菌絲，且菌絲非常密集后拿掉，拿掉外源營養袋菌絲進入生殖生長的誘因之一，后進行補水，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50%?65%，空氣濕度85%?90%，溫度12?22°C ; (8)羊肚菌出燕管理 羊肚菌菌絲分化形成原基到具有菌柄和菌蓋的幼小子實體后，進入羊肚菌出菇階段，原基出現到長到3cm期間是一個關鍵的時期這段時間，廂面土壤濕度控制在田間持水量的50 %?60 %，空氣濕度控制在85 %?90 %，溫度12?22 °C，條件稍有不適，原基就會大量死亡； (9)采收 子實體生長5?10天后，顏色由灰色變成灰黃時，子實體表面開始有少量白色孢子粉出現時達到成熟標準及時進行采收，成熟一個采收一個，每天早晨、中午、下午各采摘I次;采摘時，用木制刀具從菌柄基部與土壤的交接處，整齊切斷，不要用手直接從土壤上拔起，以免損傷周圍的幼小原基和未成熟的子實體。2.根據權利要求1所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟一中，第一層裝量為試管容積15 %，含水量為50?75 %，第二層裝量為試管容積25 %，含水量為55?70%，第三層裝量為試管容積15%，含水量為40?55%，第四層裝量為試管容積25 %，含水量為35?50 %，第五層裝量為試管容積20 %，含水量為55?80 %，試管口留出5 %的空間以利于管內空氣流通。3.根據權利要求1所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟二中，培養料主料裝量標準為不大于3/5，再裝入封口料，封口料裝量標準為不少于I/5，裝料不能太實，料中間插上一支木條，且瓶或袋要留出1/5的空間，以確保料的通氣性。4.根據權利要求1所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟三中，將各原料混合后用水拌勻，含水量為45 %?60 %，即得外援營養袋養料，將養料依次進行裝袋、封口，不需要高壓滅菌，即得養料袋。5.根據權利要求1所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟四中，有機肥的使用量為800?1200kg/畝，油菜餅粉的使用量為120?130kg/畝。6.根據權利要求1所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟四中，拿掉外援營養袋后進行第一次補水，補水量為2L/m2，后每隔7天補一次水進行水刺激，直到原基出現。7.根據權利要求6所述的一種高寒高海拔地區羊肚菌多季種植方法，其特征在于，所述步驟四中，補水時向水中加入磷酸二氫鉀0.05mL/L和細胞分裂素0.05mL/L，水刺激的速度為250?100mL/小時.平方米，每次12小時到40小時，在水刺激前土壤要相對的干燥，水刺激后的土壤含水量50%?65%，空氣濕度85%?90%，溫度12?22°C。
【文檔編號】A01G1/04GK105993613SQ201610657674
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年8月11日
【發明人】常毓巍, 何淑玲, 馬令法, 楊敬軍, 李瑛萍, 馬軍
【申請人】甘肅民族師范學院