信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽及其應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽及其應用，具體涉及具有抑制信號傳導及轉錄激活因子，預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移的多肽。
【背景技術】
[0002]女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的，乳腺癌是發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發生在女性，男性僅占1%。目前乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。
[0003]乳腺并不是維持人體生命活動的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性，細胞之間連接松散，容易脫落。癌細胞一旦脫落，游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉移，危及生命。如何消滅某種癌癥的遠處轉移或防止復發，是癌癥治療方法中不可缺少的組成部分，也是目前正在探討的治療乳腺癌熱點問題。
[0004]信號傳導及轉錄激活因子(STAT)是一種重要的核轉錄因子。細胞因子與受體結合后激活JAK，再進一步激活STAT。研究發現，STAT3在多種腫瘤組織中異常表達和激活，并與腫瘤的增殖、分化、細胞凋亡、血管生成、浸潤轉移和免疫逃避密切相關。STAT3蛋白的活性形式在多種腫瘤的侵襲和轉移過程中起著重要的作用。因此，抑制信號傳導及轉錄激活因子，能夠抑制信號傳導及轉錄激活因子與VEGFR3的結合，抑制成熟的淋巴管形成，從而抑制乳腺癌細胞的轉移，可以預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移。
[0005]目前，沒有成熟開發的信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽問世，用于預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移。
【發明內容】
[0006]發明目的
本發明提供全新的序列，該序列為信號傳導及轉錄激活因子拮抗劑，對乳腺癌具有很好的療效。
[0007]技術方案
信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽，其特征在于其序列為QLKNLYKDEANPSWPPTEQ。
[0008]信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽在預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移藥物中的應用。
[0009]有益效果利用固相合成法化學合成信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽，該多肽具有全新的序列，該多肽可體外抑制信號傳導及轉錄激活因子，預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移。我們發現的信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽可以同時抑制乳腺癌細胞增殖活力，并在體內試驗中提高荷瘤小鼠生存率，具有潛在的新藥開發價值。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽乳腺癌細胞MCF-7遷移的作用。
[0011]采用劃痕實驗。先用marker筆在24孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~lcm—道，橫穿過孔。每孔穿過3條線；將成對數生長的MCF-7細胞，以1.0X105加入24孔培養板中，培養24h。第二天用10 μ I槍頭比著直尺，垂直于背后的橫線劃痕，以劃痕和背后橫線的交叉點為固定觀察位點；實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物長春新堿；空白組加入相同體積的溶劑，每孔設五個復孔；放入37°C、5%C02培養箱,培養。按0,6,12,24,36小時，拍照；測量O，6，12，24，36h劃痕寬度。以不同的時間點，記錄每孔三個固定位置處劃痕寬度的變化，即為細胞遷移距離。按照公式計算遷移率(migrat1n rate，MR):遷移率(MR)=(實驗第η小時的劃痕寬度一實驗第O小時的劃痕寬度)X 100%/實驗第O小時的劃痕寬度。結果，隨信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽濃度增加，遷移抑制率逐漸下降，說明信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽能夠抑制乳腺癌細胞MCF-7遷移，抑制率為66.3%。
[0012]實施例2
信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽對體外培養人乳腺癌細胞的生長和存活IC50。
[0013]采用MTT比色法。將對數生長的人乳腺癌細胞，以1.0X 15加入96孔培養板中，培養24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑。每孔設五個復孔，培養48h，分別在0h、2h、8h、14h、20h、24h、36h、，48h每孔加入MTT，作用4h后，加入DMS0，孵育30min，在酶標儀620nm處測定吸光度A值，按公式人乳腺癌細胞生長抑制率=(1-實驗組吸光值/對照組吸光值)X 100%。計算出實驗藥物的IC50為108.76 μ Mo
[0014]實施例3
用腫瘤模型檢測信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽的體內活力。
[0015]建立MCF-7腫瘤模型，陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑，實驗組多肽(上海生工合成)設3個劑量:0.75、1.5、3 μ M mg/Kg。21天后，觀察小鼠存活數量，計算存活率。結果顯示，信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽可有效地保護小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率達到49.2%。
【主權項】
1.信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽，其特征在于其序列為QLKNLYKDEANPSWPPTEQ。
2.如權利要求1所述的信號傳導及轉錄激活因子抑制多肽在預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移藥物中的應用。
【專利摘要】本發明涉及藥物領域，具體涉及具有抑制信號傳導及轉錄激活因子，預防和治療乳腺癌術后癌癥的復發和轉移的多肽。其序列為QLKNLYKDEANPSWPPTEQ是全新的序列，它們可以在體外抑制乳腺癌細胞的增殖和遷移，并在體內試驗中提高荷瘤小鼠生存率，具有潛在的新藥開發價值。
【IPC分類】C07K7-08, A61K38-10, A61P35-00
【公開號】CN104693280
【申請號】CN201510157199
【發明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達生物科技有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2015年4月6日