專利名稱：一種合成高活性寡糖農藥β－葡聚六糖的方法
技術領域：
本發明屬于生物農藥領域，具體地說是提供一條有效地合成高活性寡糖農藥β-葡聚六糖的合成方法。
我國是一個農業大國，而由于日益嚴峻的病蟲害威脅，每年因為農作物病蟲害造成的經濟損失達數百億元，對國家和農民都造成了嚴重的損失。因此農藥在農業生產中占有著非常重要的地位。但是，傳統的農藥毒性很大，長期使用一方面會使害蟲產生抗藥性而降低藥效，更為重要的是傳統農藥對人類環境與生態的污染、破壞很大。因而發展高效、安全、環境友好的新型農藥已成為當今農藥開發的新趨勢。
寡糖生物農藥作為一類新型的植物激素及植物抗性反應的激活因子，在農作物生長發育和病蟲害防治中有著廣泛的應用開發前景。寡糖能夠刺激植物的免疫系統反應，產生具有抗病害的活性物質(如植保素等)來抑制病蟲害的生成。寡糖農藥具有高效、不污染環境、對人畜無害等優點，其在水果、蔬菜病害防治的安全高效性也正是寡糖農藥的特色，迎合了人們對綠色食品的需求，因而研究開發寡糖農藥無疑將具有重要的理論意義和十分廣闊的應用前景。近二十年來美國佐治亞大學的CCRC(復合寡糖研究中心)在植物與病蟲害相互作用及寡糖的抗病蟲害研究中進行了大量的基礎研究，并在大豆、玉米等農作物中取得了很好的實驗室及田間應用效果。同時，國際上許多研究機構也在積極研究開發相關的寡糖農藥產品。
寡糖作為植物免疫激活因子的基礎研究是從六十年代開始的，人們發現降解植物細胞壁得到的寡糖片段能夠誘導植保素的合成。從得到的寡糖混合物中分離出的一系列活性寡糖中，活性最好的最小中位寡糖是如式(1)所示的β-葡聚六糖。β-葡聚六糖是目前發現的最有活性的寡糖激活因子之一，1克寡糖可以使1000噸農作物的組織產生足夠量的植保素。但是用生物降解的方法得到的是一混合物，很難純化而且量非常少，難以滿足實際需求。同時，生物降解反應得到的聚合度大小調控有一定的困難。所以人們開始尋求化學合成的方法來制備β-葡聚七糖(HSE)，在八十年代合成一個寡糖尤其是一個七糖是一項非常困難的工作，隨著寡糖合成技術的發展使得這項工作成為可能。在九十年代左右，Ossowski，Fugedi，Lorentzen，Verduyn等小組相繼采用不同的合成路線完成了七糖的制備。這些合成方法路線一般多較長，產率并不理想，而且使用的試劑較貴，成本很高，并不適用于工業化生產。1997年，美國Nicolaou小組用固相合成的方法合成了葡聚七糖(HSE)，這是一個令人注目的工作，但要將其發展為工業化生產還不太現實。
本發明的目的是提供一種有效地合成β-葡聚六糖的方法，該合成反應路線短，操作簡便，收率高，原料成本低，具有很高的工業生產前景。
本發明提供了一種合成高活性寡糖農藥β-葡聚六糖的方法，其特征在于該方法采用Schmidt糖苷化方法在TMSOTf促進下，將葡萄糖三糖給體片段A和三糖受體片段B，進行有效的對接，得到帶保護基的六糖，脫去保護基即得到β-葡聚六糖；所述片段A的結構中，葡萄糖的2位羥基為Bz保護基，異頭碳為三氯乙酰亞胺酯作為給體，片段A與片段B的保護基結構如下式表示 其中，Ac＝CH3(C＝O)-，Bz＝C6H5(C＝O)-，Me＝CH3-。
本發明中所述片段A與片段B的合成中，都從中間體二糖片段C合成得到，片段C與單糖給體進行反應時，無須保護葡萄糖4位羥基，而是利用4，6位羥基的不同活性，進行選擇性糖苷化，合成所需的三糖片段，片段C的結構如下式表示 本發明從葡萄糖出發，分別合成了葡萄糖三糖給體和葡萄糖三糖受體，采用Schmidt糖苷化方法在TMSOTf促進下高產率地得到保護的葡聚六糖，脫去保護基即得到β-葡聚六糖。在三糖片段的合成中，采用區域選擇性糖苷化的方法，從而簡化了反應步驟，使反應路線短，操作簡便，收率高，原料成本低，具有很高的工業生產前景。
具體地，本發明β-葡聚六糖的合成方法可以按以下步驟進行，當然本發明并不局限于此1)單糖中間體3的合成以α-葡萄糖甲苷為原料，在無水DMF溶劑中與2，2-二甲基苯甲醛反應，將葡萄糖4，6位羥基保護起來得到中間體2；化合物2溶于二氯甲烷中，在三乙胺催化下，與1-苯甲酰基-苯并三唑(BzOBt)反應，保護葡萄糖2位的羥基，得到了3位羥基裸露的單糖中間體3。
其反應過程如反應式(1)所示 2)單糖給體5的合成以葡萄糖為原料，在醋酸鈉和醋酸酐溶液中加熱回流，得到全乙酰化的葡萄糖，然后用芐胺脫去開頭碳的乙酰基，得到化合物4；化合物4與三氯乙腈反應，得到葡萄糖三氯乙酰亞胺酯給體5。
其反應過程如反應式(2)所示 3)單糖給體7的合成以葡萄糖為原料，在無水吡啶溶劑中用三苯基甲基氯選擇性保護葡萄糖的6位羥基，再用醋酸酐將其它羥基保護起來，然后用芐胺脫去異頭碳的乙酰基，得到化合物6；化合物6與三氯乙腈反應，得到葡萄糖三氯乙酰亞胺酯給體7。
其反應過程如反應式(3)所示 4)二糖中間體9(C)的合成單糖受體3和葡萄糖給體5在三氟甲磺酸三甲基硅(TMSOTf)的促進下高產率得到二糖8，TMSOTf與原料的摩爾比為0.8～1.2∶2；化合物8在80％的醋酸作用下得到了關鍵的二糖中間體9(C)。其反應過程如反應式(4)所示 5)三糖中間體11的合成二糖受體9(C)和葡萄糖給體5在三氟甲磺酸三甲基硅(TMSOTf)的促進下，利用4，6位羥基的不同活性，進行選擇性糖苷化反應，得到三糖10，TMSOTf與原料的摩爾比為0.8～1.2∶2；化合物10用醋酸酐/吡啶處理后，再在醋酸酐/醋酸鈉/硫酸混合溶液中將異頭碳甲苷轉化為乙酰基，得到三糖12。
其反應過程如反應式(5)所示 6)三糖給體14(A)的合成三糖12在N，N-二甲基甲酰胺溶劑中與醋酸肼作用，脫去異頭碳的乙酰基得到化合物13；化合物13與三氯乙腈反應，得到三糖三氯乙酰亞胺酯給體14(A)。
其反應過程如反應式(6)所示 7)三糖受體的合成二糖受體9(C)和葡萄糖給體7在三氟甲磺酸三甲基硅(TMSOTf)的促進下，進行選擇性糖苷化反應，得到三糖15，TMSOTf與原料的摩爾比為0.8～1.2∶2；化合物1 5用醋酸酐/吡啶處理后，再用80％的醋酸溶液處理得到三糖受體17(B)。
其反應過程如反應式(7)所示 8)六糖的合成三糖受體17(B)和葡萄糖三糖給體14(A)在三氟甲磺酸三甲基硅(TMSOTf)的促進下進行選擇性糖苷化反應，以很好的產率得到全保護的六糖18，TMSOTf與原料的摩爾比為0.8～1.2∶2；化合物18用甲醇鈉處理脫去保護基后，即得到了目標分子葡聚六糖1(I)。
其反應過程如反應式(8)所示 反應產物用400MHz的NMR譜儀進行了1H和13C NMR表征。新化合物還進行了元素分析、ESI質譜、旋光等測試。
下面通過實施例對本發明的技術給予進一步地說明實施例1單糖中間體3的合成α-葡萄糖甲苷(10.696g，55.08mmol)溶于60ml無水DMF中，加入對甲苯磺酸調節PH在4左右，然后加入2，2-二甲基苯甲醛(12.6g，83.62mmol)，在浴溫50℃下減壓反應2小時，TLC檢測表明反應基本完全。Et3N中和反應，用乙酸乙酯稀釋后，依次用水、飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥。濃縮后涼干。得到白色固體2(14.93g)，產率96％；化合物2(11.713g，41.49mmol)溶于80ml二氯甲烷中，加入1-苯甲酰基-苯并三唑(9.926g，41.49mmol)，然后加入6.42ml三乙胺，室溫反應5小時后，濃縮，柱層析(石油醚∶乙酸乙酯2∶1)得到白色固體3(13.79g)，產率86％。1H NMR(400MHz，CDCl3，δppm)8.10-7.37(m，10H，2×Bz)，5.55(s，1H，PhCH-)，5.07(d，1H，J＝4.0Hz，H-1)，5.03(dd，1H，J＝4.04,9.84Hz，H-2)，4.33(m，2H，H-5，H-6a)，3.88(m，1H，H-6b)，3.78(t，1H，H-4)，3.61(t，1H，H-3)，3.38(s，3H，CH3)。
實施例2 葡萄糖給體5的合成將全乙酰化的葡萄糖(12.645g，32.39mmol)溶于50ml無水乙醚溶液，冰浴下向體系芐胺(4.31ml，38.83mmol)，室溫下反應過夜。濃縮后乙酸乙酯提取，依次用1N鹽酸溶液、飽和NaHCO3溶液、飽和食鹽水洗滌。濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯2∶1)得到白色固體4(9.24g)，產率90％。
化合物4(1.498g，4.30mmol)溶于20ml無水二氯甲烷中，加入2.2mlCCl3CN并滴加DBU數滴，室溫下攪拌2小時。減壓濃縮，殘留物快速柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯4∶1)得到無色糖漿5(2.11g，99.6％)。1HNMR(400 MHz，CDCl3，δppm)8.69(s，1H，NH)，6.55(d，1H，J＝3.8Hz，H-1)，5.55(t，1H，J＝9.7Hz，H-3)，5.17(t，1H，J＝9.6Hz，H-4)，5.12(dd，1H，J＝3.7Hz，H-2)，4.26(dd，1H，J＝4.0，12.1Hz，H-6)，4.20(m，1H，H-5)，4.12(dd，1H，J＝2.0，12.2Hz，H-6)，2.07(s，3H，OAc)，2.04(s，3H，OAc)，2.02(s，3H，OAc)and 2.01(s，3H，OAc)。
實施例3 葡萄糖給體7的合成無水葡萄糖(10.10g，56.06mmol)，溶入80ml無水吡啶，加入TrCl(15.9g，57.04mmol)，40℃下反應6小時；隨后向體系中加入20mlAc2O室溫反應過夜。反應液傾入冰水中，析出白色固體，過濾，固體用乙酸乙酯溶解后，依次用1N鹽酸溶液、飽和NaHCO3溶液、飽和食鹽水洗滌。在無水甲醇中重結晶，得到全保護葡萄糖30.8g，產率93％。
將上述化合物(17.15g，29.04mmol)溶于100ml無水乙醚溶液，冰浴下向體系芐胺(15ml，5eq)，室溫下反應過夜。后處理操作同化合物4。濃縮后用石油醚與乙酸乙酯重結晶得到淺黃色固體6(13.22g)，產率83％。1H NMR(400MHz，CDCl3，δppm)7.44-7.20(m，15H，3×Bz)，5.52(d，1H，J＝3.52Hz，H-1)，5.48(t，1H，J＝9.90Hz，H-3)，5.20(t，1H，J＝9.92Hz，H-4)，4.97(dd，1H，J＝3.60，10.24Hz，H-2)，4.20(m，1H，H-5)，3.28-3.03(m，2H，H-6)，2.09(s，3H，OAc)，2.00(s，3H，OAc)and 1.73(s，3H，OAc)。
化合物6(0.576g，1.05mmol)溶于5ml無水二氯甲烷中，加入0.5mlCCl3CN并滴加DBU數滴，室溫下攪拌3小時。減壓濃縮，殘留物快速柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯5∶1)得到無色糖漿5(0.623g，85.6％)。直接用于下一步反應。
實施例4 二糖中間體8的合成單糖受體3(1.00g，2.59mmol)、葡萄糖給體5(1.605g，3.26mmol)和4分子篩溶于30ml無水CH2Cl2中，氬氣保護下，室溫攪拌2小時。冷至-78℃，滴加TMSOTf(0.05N，2.5ml)的CH2Cl2溶液，反應1小時后，滴加三乙胺猝滅反應。過濾，濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯3∶1)得到二糖8(2.12g)，產率94％。1H NMR(400MHz，CDCl3，δppm)8.08-7.33(m，10H，2×Bz)，5.60(s，1H，PhCH-)，5.12(dd，III，J＝4.0，10.0Hz，H-2)，5.07-4.97(m，4H)，4.78(d，1H，J＝7.8Hz，H-1’)，4.38(t，1H，J＝9.86Hz)，4.30(dd，1H，J＝4.25，9.8Hz)，4.19(dd，1H，J＝4.40，12.23Hz)，4.02-3.88(m，2H)，3.83(t，1H，J＝10.04Hz)，3.74(t，1H，J＝9.20Hz)3.60(m，1H)，3.39(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，OAc)，1.97(s，3H，OAc)，1.90(s，3H，OAc)and 1.55(s，3H，OAc)。
實施例5 二糖受體9(C)的合成二糖8(1.433g，l.95mmol)溶于20ml80％的醋酸，60℃加熱反應2小時。將反應液濃縮后，乙酸乙酯稀釋，依次用飽和NaHCO3溶液、水、飽和食鹽水洗滌。濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)得到了關鍵二糖中間體9(C)(1.01g)，產率80.1％。[α]D2464.1°(c0.68，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δppm)8.08-7.48(m，5H，Bz)，5.13(t，1H，J＝9.4Hz)，5.06-4.97(m，4H)，4.70(d，1H，J＝8.0Hz，H-1’)，4.22-4.21(m，2H)，4.07(t，1H，J＝9.4Hz)，3.94(dd，1H，J＝3.04，11.96Hz)，3.85-3.81(m，2H)，3.74-3.64(m，2H)，3.39(s，3H，CH3)，2.11(s，3H，OAc)，2.03(s，3H，OAc)，1.93(s，3H，OAc)and 1.37(s，3H，OAc)；ESI MS(m/z)1886(3M+)，1258(2M++1)，651(M++1)(100％)，646(M++H2O)，331，169；元素分析C28H36O16·1/2H2O理淪值C，52.74；H，5.85.實測值C，52.92；H，6.08。
實施例6 三糖中間體10的合成二糖受體9(C)(1.99g，3.09mmol)和4MS溶于6ml無水CH2Cl2中，氬氣保護下，室溫攪拌30分鐘。冷至-78℃，滴加TMSOTf(0.05N，3.0ml)的CH2Cl2溶液，隨后滴加單糖給體5(1.75g，3.55mol)的CH2Cl2溶液，反應1小時后，三乙胺猝滅反應。過濾，濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)得到三糖10(2.33g)，產率77％。[α]D2428.4°(c 1.11，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.06-7.48(m，5H，Ph-H)，5.22(t，1H，J＝9.48Hz)，5.13-4.95(m，7H)，4.67(d，1H，J＝8.04Hz，H-1)，4.63(d，1H，J＝7.96Hz，H-1)，4.28-4.16(m，5H)，4.03(t，1H)，3.83-3.72(m，4H)，3.51(t，1H，J＝8.84Hz)，3.45(s，3H，CH3)，2.11(s，3H，OAc)，2.10(s，3H，OAc)，2.09(s，3H，OAc)，2.04(s，3H，OAc)，2.03(s，6H，2×OAc)，2.01(s，3H，OAc)，1.93(s，3H，OAc)and 1.39(s，3H，OAc)；ESI MS(m/z)1940(2M++Na)，982(M++Na)(100％)，977(M++H2O)，976，331；元素分析C42H54O25·1/2H2O計算值C，52.12；H，5.73.實測值C，52.04；H，5.83。
實施例7 三糖中間體12的合成化合物10(3.77g，3.71mmol)溶于20ml吡啶和4ml醋酸酐的混合溶液中反應過夜。濃縮后，將殘留物溶解于24mlAc2O，0℃，加入18mlAc2O/18mlAcOH/0.84mlH2SO4的混合溶液，室溫反應10小時后，經過常規后處理，再經柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)得到三糖12(3.01g)，產率78％。[α]D2424.4°(c 0.71，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)7.99-7.49(m，5H ，Ph-H)，6.38(d，1H，J＝3.6Hz)，5.24-5.19(m，2H)，5.13-4.87(m，5H)，4.67(d，1H，J＝7.6Hz)，4.53(d，1H，J＝8.0Hz)，4.44-3.96(m，8H)，3.77-3.65(m，2H)，3.50(m，1H)，2.63(s，3H，CH3)，2.19(s，3H，OAc)，2.09(s，9H，3×OAc)，2.05(s，3H，OAc)，2.02(s，3H，OAc)，2.00(s，6H，2×OAc)，1.90(s，3H，OAc)and 1.65(s，3H，OAc)；ESI MS(m/z)1052(M++Na)(100％)，1051，1047(M++H2O)，1046，970，331；元素分析C45H56O27·1/2H2O計算值C，52.07；H，5.54.實測值C，52.02；H，5.54。
實施例8 三糖給體14(A)的合成三糖12(1.353g，1.29mmol)溶于15mlDMF，加入醋酸肼(0.134g，1.45mmol)，室溫攪拌反應2小時后，將反應液傾入水中，乙酸乙酯提取，干燥濃縮后，經柱層析分離得到三糖13(1.27g)，產率98％；[α]D24-4.7°(c 0.72，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.07-7.29(m，5H，Ph-H)，5.49(d，1H，J＝2.53Hz，H-1)，5.23-4.85(m，8H)，4.71(d，1H，J＝7.96Hz，H-1)，4.57(d，1H，J＝7.79Hz，H-1)，4.43-4.35(m，2H)，4.27-4.06(m，4H)，3.90(m，1H)，3.72-3.60(m，3H)，2.09(s，6H，2×OAc)，2.07(s，6H，2×OAc)，2.03(s，6H，2×OAc)，2.01(s，3H，OAc)，2.00(s，3H，OAc)and1.89(s，3H，OAc)；ESI MS(m/z)1019(M++MeOH)(100％)，970(M+-OH)，331；元素分析C43H54O26計算值C，52.33；H，5.52.實測值C，52.26；H，5.62。
化合物13(1.616g，1.61mmol)溶于10ml無水二氯甲烷中，加入0.5ml CCl3CN并滴加DBU數滴，室溫下攪拌3小時。減壓濃縮，殘留物快速柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)得到三糖給體14(A)(1.516g)，產率為82％。直接用于下一步反應。1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.62(s，1H，NH)，8.00-7.27(m，5H，Ph-H)，6.57(bs，1H，H-1)，5.41-4.86(m，8H)，4.65(d，1H，J＝7.58Hz，H-1)，4.58(d，1H，J＝7.88Hz，H-1)，4.42-3.98(m，7H)，3.74-3.55(m，3H)，2.09(s，6H，2×OAc)，2.05(s，3H，OAc)，2.03(s，3H，OAc)，2.01(s，6H，2×OAc)，1.99(s，3H，OAc)，1.89(s，3H，OAc)and 1.67(s，3H，OAc)。
實施例9 三糖中間體15的合成二糖受體9(C)(1.51g，2.34mmol)和4MS(3g)溶于20ml無水CH2Cl2中，氬氣保護下，室溫攪拌2小時。冷至-78℃，滴加TMSOTf(0.05N，2.2ml)的CH2Cl2溶液，隨后滴加單糖給體7(1.78g，2.56mmol)的CH2Cl2溶液，反應2小時后，三乙胺(0.1ml)猝滅反應。過濾，濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1.5∶1)得到三糖15(2.21g)，產率為80.4％。[α]D2450.0°(c 1.19，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.08-7.20(m，20H，4×Bz)，5.20-4.96(m，8H)，4.68(d，1H，J＝8.00Hz，H-1)，4.65(d，1H，J＝7.60Hz，H-1)，4.37-4.07(m，4H)，3.89-3.74(m，3H)，3.59-3.53(m，2H)，3.37(s，3H，CH3)，3.29(dd，1H，J＝2.2，10.64Hz)，3.09(dd，1H，J＝4.6，10.56Hz)，2.05(s，3H，OAc)，2.03(s，3H，OAc)，2.02(s，3H，OAc)，1.99(s，3H，OAc)，1.93(s，3H，OAc)，1.73(s，3H，OAc)and 1.40(s，3H，OAc).ESI MS(m/z)1218(M++Na+2H2O)(100％)，1177(M++H2O)，694，970，331，243；元素分析C59H66O24汁算值C，61.13；H，5.74.實測值C，61.23；H，5.88。
實施例10 三糖受體17(B)的合成化合物15(1.20g，1.02mmol)溶于10ml吡啶和3ml醋酸酐的混合溶液中反應過夜。濃縮后，將殘留物溶解于20ml無水CH2Cl2中，加入FeCl3·H2O(533mg)，室溫攪拌5小時。水洗后，干燥濃縮。柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)得到三糖17(B)(0.907g)，產率為96％。[α]D2430.3°(c 0.85，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.06-7.50(m，5H，Ph-H)，5.26(t，1H，J＝9.6Hz)，5.06-4.86(m，8H)，4.69(d，J＝7.92Hz，H-1)，4.59(d，1H，J＝8.0Hz，H-1)，4.39(dd，1H，J＝4.4，12.4Hz)，4.27(t，1H，J＝9.52Hz)，4.09-3.91(m，3H)，3.77-3.53(m，5H)，2.63(s，3H，CH3)，2.09(s，3H，OAc)，2.07(s，3H，OAc)，2.06(s，6H，2×OAc)，2.02(s，3H，OAc)，1.99(s，3H，OAc)，1.89(s，3H，OAc)and 1.59(s，3H，OAc)；ESI MS(m/z)1941(2M++Na)，1936(2M++H2O)，981(M++Na-1)，976(M++H2O-1)(100％)，332；元素分析C42H54O25·H2O計算值C，51.64；H，5.78.實測值C，51.85；H，5.74。
實施例11 六糖前體18的合成三糖受體17(B)(0.323g，0.337mmol)、三糖給體14(A)(0.456g，0.403mmol)和4分子篩(lg)溶于20ml無水CH2Cl2中，氬氣保護下，室溫攪拌2小時。冷至-78℃，滴加TMSOTf(0.05N，0.66ml)的CH2Cl2溶液，反應1小時后，滴加三乙胺猝滅反應。過濾，濃縮后柱層析分離(石油醚∶乙酸乙酯1∶1→1∶2)得到六糖18(0.548g)，產率84.4％。[α]D248.2°(c 0.87，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3，δ/ppm)8.10-7.51(m，10H，2×Bz)，5.24-5.14(m，2H)，5.10-4.93(m，5H)，4.92-4.76(m，7H)，4.75(d，1H，J＝7.9Hz，H-1)，4.62(m，1H)，4.58(d，1H，J＝8.0Hz，H-1)，4.54(m，1H)，4.42-4.38(m，2H)，4.30-3.27(m，3H)，4.1 5-4.03(m，5H)，3.96-3.47(m，10H)，3.34(s，3H，CH3)，3.22(m，1H)，2.12(s，3H，OAc)，2.11(s，6H，2×OAc)，2.08(s，3H，OAc)，2.07(s，3H，OAc)，2.06(s，3H，OAc)，2.05(s，3H，OAc)，2.04(s，3H，OAc)，2.02(s，3H，OAc)，2.00(s，6H，2×OAc)，1.98(s，3H，OAc)，1.97(s，3H，OAc)，1.93(s，3H，OAc)，1.89(s，6H，2×OAc)and 1.85(s，3H，OAc)；ESI MS (m/z)1968(M++K+1)，1949(M++Na-1)，1947(M++H2O+1)(100％)，1929(M++1)，1927，984；元素分析C85H106O50·H2O計算值C，52.46；H，5.65.實測值C，52.38；H，5.76。
實施例12 六糖1的合成化合物18(0.128g，0.067mmol)懸浮于無水甲醇中，滴加甲醇鈉的甲醇溶液(1M，1.4ml)，室溫下攪拌過夜。TLC檢測反應基本完全，陽離子樹脂(H+型)中和，過濾，濃縮，柱層析分離得到了目標分子六糖1(65mg)，產率97％。1H NMR(400MHz，D2O，δ/ppm)4.80(d，1H，H-1)，4.72(d，1H，J＝Hz，H-1)，4.68(d，1H，J＝7.92Hz，H-1)，4.52(d，1H，J＝7.92Hz，H-1)，4.49(d，1H，J＝7.92Hz，H-1)，4.49(d，1H，J＝7.92Hz，H-1)，4.62(d，1H，H-1)，4.58(d，1H，J＝7.92Hz，H-1)，4.22-4.15(m，2H)，3.91-3.3.76(m，8H)，3.75-3.65(m，6H)，3.62-3.58(m，4H)，3.52-3.29(m，16H)，3.42(s，3H，CH3)；13C NMR(100MHz，D2O，δ/ppm)105.5，105.4，105.4，105.4，105.3，101.8，86.7，84.7，78.5，78.5，78.1，78.1，78.1，77.4，77.2，76.0，76.0，75.6，75.6，75.4，73.3.73.0，72.1，72.1，72.1，72.0，72.0，71.4，71.1，71.1，70.5，70.3，70.3，63.2，63.2，63.2，57.8。
權利要求
1.一種合成高活性寡糖農藥β-葡聚六糖的方法，其特征在于該方法采用Schmidt糖苷化方法在TMSOTf促進下，將葡萄糖三糖給體片段A和三糖受體片段B，進行有效的對接，得到帶保護基的六糖，脫去保護基即得到β-葡聚六糖；所述片段A的結構中，葡萄糖的2位羥基為Bz保護基，異頭碳為三氯乙酰亞胺酯作為給體， 片段A與片段B的保護基結構如下式表示其中，Ac＝CH3(C＝O)-，Bz＝C6H5(C＝O)-，Me＝CH3-。
2.按照權利要求1所述合成高活性寡糖農藥β-葡聚六糖的方法，其特征在于所述片段A與片段B的合成，都從中間體二糖片段C合成得到，片段C與單糖給體進行反應時，利用4，6位羥基的不同活性，進行選擇性糖苷化，合成所需的三糖片段，片段C的結構如下式表示
全文摘要
一種合成高活性寡糖農藥—β—葡聚六糖方法,從葡萄糖出發,分別合成了葡萄糖三糖給體和葡萄糖三糖受體,采用Schmidt糖苷化方法在TMSOTf促進下高產率地得到保護的葡聚六糖,脫去保護基即得到β—葡聚六糖;在三糖片段的合成中,采用區域選擇性糖苷化的方法,從而簡化了反應步驟,使得本發明公開的路線反應路線短,操作簡便,收率高,原料成本低,具有很高的工業生產前景。
文檔編號C08B37/02GK1340550SQ0012294
公開日2002年3月20日 申請日期2000年8月30日 優先權日2000年8月30日
發明者韓秀文, 于海, 杜昱光, 包信和, 劉秀梅 申請人:中國科學院大連化學物理研究所