專利名稱：制備雙(羥甲基)環丁基嘌呤和嘧啶的方法
下列式Ⅰ化合物及其藥物上可以接受的鹽具有抗病毒作用，式Ⅰ為
在式Ⅰ及整個說明書中，各符號的定義如下R1是
其中R2是氫，甲基，氟，氯，溴，碘，羥基或氨基;R3是氟，氯，溴，碘，氫，甲基，三氟甲基，乙基，正丙基，2-氟乙基，2-氯乙基，或
式中R4是氯，溴，碘，氫，甲基或三氟甲基;R5是烷基;R6是氫，烷基，取代烷基，或芳基;R7和R8各自是氫，-PO3H2或
當R1是下式基團時，式Ⅰ化合物是優選化合物，這些基團包括
當R1是下式基團時，式Ⅰ化合物是最優選化合物，這些基團包括
術語“烷基”意指直鏈或支鏈基團。這些基團最好含有1至10個碳。術語“取代烷基”意指具有一個或多個取代基的烷基。優選的取代基是鹵素，氨基，疊氮基，羥基，氰基，三烷銨(其中每個烷基具有1至6個碳)，具有1至6個碳的烷氧基，芳基和羧基。術語“芳基”意指苯基或帶有1，2或3個取代苯基。優選的取代基是1至6個碳原子的烷基，1至6個碳的烷氧基，鹵素，三氟甲基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，硝基，氰基，2至11個碳的烷羰氧基，羧基，氨甲酰基，羥基。
式Ⅰ化合物及其藥物上可接受的鹽是抗病毒劑，可用于治療如家庭飼養動物(如，狗，貓，馬等)、哺乳動物和人，以及鳥類(如小雞和火雞)的病毒感染。式中R1為下列取代基的式化合物對下述一種或多種病毒具有有效的對抗作用。所述取代基為
所述病毒包括單純性皰疹病毒1和2，水痘帶狀泡疹病毒，巨細胞病毒，牛痘病毒，鼠白血病病毒，人類免疫缺陷病毒(HIV)。據認為，它們也具有抗各種其他DNA病毒和后病毒的作用。除上述DNA病毒外，可例舉的DNA病毒包括其他皰疹病毒〔如，愛-巴氏病毒(Epstein-Barr virus)，假狂犬病病毒，等〕其他痘病毒(如，猴痘和肌瘤)，乳多空病毒(如，乳頭瘤病毒)，乙型肝炎病毒和腺病毒。除上述列舉的后病毒外，可列舉的后病毒還包括對人有影響的后病毒，如，人類T細胞親淋巴病毒(HTLV)和對其他動物有影響的后病毒，如，貓白血病病毒和馬感染貧血病毒。除了式中R1是下式基團的式Ⅰ化合物外，所述基團為
所有其他式Ⅰ化合物均對下列一種或多種病毒具有對抗作用。這些病毒包括單純性皰疹病毒1和2，水痘帶狀泡疹病毒，巨細胞病毒，和前文所述的后病毒和其他DNA病毒。據認為
的式Ⅰ化合物具有抗前述各種DNA病毒和后病毒的作用，但對單純性皰疹病毒1和2、水痘帶狀泡疹病毒及巨細胞病毒無效。
根據所用藥劑是用于治療內部還是外部病毒感染的區別，可采用胃腸道外(例如，靜脈，腹膜內或肌肉注射)口服或局部形式給予本發明化合物。
就治療內部感染而言，以治療感染有效量，通過口服或胃腸道外途徑，給予上述化合物。當然，劑量大小取決于感染程度，但其范圍最好是約1.0-50mg/公斤體重。理想的給藥方式是每天以適當的間隔分次給藥。
就治療眼，或其他外部組織(如，嘴和皮膚)的感染而言，一般是以軟膏，霜劑，氣霧劑，凝膠，粉劑，洗劑，混懸液或溶液(如，滴眼液)的形式將組合物施于患者身體的感染部位。載體中化合物的濃度當然取決于感染程度，但最好是約0.1-7%(重量)。
由下式2所示中間體可以制得式中R1是
R7和R8是氫的式1化合物，式2為
式中P是保護基，例如，酰基，芐基，硅甲烷基，x是離去基團，例如，氯，溴，碘或本領域所熟知的芳基或烷基苯磺酸酯基(例如，例如，對甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基)。術語“酰基”意指基團R9
，式中R9是含1-6個支鏈或直鏈碳原子的低級烷基或者是苯基。術語“硅甲烷基”是指本領域所熟知的保護基硅甲烷基〔例如，叔丁基二甲基硅甲烷基，叔丁基二苯基硅甲烷基，(三苯甲基)二甲硅甲烷基，甲基二異丙基硅甲烷基，或三異丙基硅甲烷基)。
在堿存在下，于非質子極性溶劑中，式2化合物與例如式3所示鳥嘌呤的保護形式化合物反應，得到相應的式4化合物。所述堿包括碳酸鉀，氫化鈉或氫化鉀;所述溶劑包括二甲基甲酰胺，二甲亞砜或環丁砜。式3為
式4為
在金屬螯合催化劑〔例如，18-冠(醚)-6(1，4，7，10，13，16-六氧雜環十八烷)或15冠(醚)-5(1，4，7，10，13-五氧雜環十五烷)〕的存在下，可方便地進行該反應。從式4化合物中除去保護基，得到式中R1是
和R7，R8為氫的式1化合物。
當4中保護基P是酰基時，采用起催化作用的甲醇鈉甲醇溶液或甲醇-氨，可選擇性地除去保護基P。隨后通過下述方法可以除去嘌呤環上的保護基O-芐基，所述方法包括用醇性無機酸水溶液(如，甲醇鹽酸水溶液)或于液氨中的金屬鈉處理，或者采用氫解方法(例如，在環己烷和乙醇中以氫氧化鈀-炭作催化劑)。另外，也可以先除去嘌呤O-芐基保護基，然后再除去保護基酰基。
如果化合物4中基團P是保護基硅甲烷基，可采用氟離子(例如，于四氫呋喃中的氟代四丁基銨)除去P基團。然后用醇性礦物酸水溶液或通過氫解除去嘌呤作護基O-芐基。如果4中的保護基P是芐基。無論是采用于液氨中的鈉還是采用氫解(如，以于環己烷和乙醇中的氫氧化鈀-炭作催化劑)可除去所有的保護基芐基。另外，用溶解在二氯甲烷中的三氯化硼處理，可以除在所有的保護基芐基。
采用類似于制備化合物4的條件，由式2化合物與式5化合物反應，得到式6化合物，式5為
選擇性除去保護基P，得到式中R1是
R7和R8是氫的式Ⅰ化合物。例如，當6中的保護基是酰基時，采用起催化作用的甲醇鈉甲醇溶液可以選擇性地除去該P基團。如果6中的保護基P是硅甲烷基，采用氟離子(例如，氟代四丁基銨)處理，可選擇性地除去該保護基。如果6中的保護基是芐基，采用三氯化硼處理可以選擇性地除去P基團。
式中R1是a，R7和R8是氫的式Ⅰ化合物中，氯基團經酸解(例如，采用熱鹽酸水溶液)，得到式中R1是b，R7和R8是氫的式1化合物，a為
按下列方法可以制得式2化合物在熱叔丁醇中，由富馬酸二甲酯和乙烯酮縮乙二醇反應，得到式7化合物的外消旋混合物(參見K.C.Brannock，etal.，J.Org.Chem.，29，940(1964))。在溶劑(如，乙醚或四氫呋喃)中用還原劑(如，氫化鋁鋰)處理式7化合物，得到二醇8。按照本領域熟知的方法，用保護基“P”可以保護羥基，得到式9化合物。采用于丙酮中的對甲苯磺酸或于乙腈中的硫酸水溶液使9去縮醇化，得到式10化合物，后者經還原劑處理，得到作為次要產物的式11化合物，以及與之共存的作為主要產物的式12異構化合物，該化合物可經層析分離。前述還原劑包括在醇(如甲醇，乙醇或異丙醇)中的硼氫化鈉或氰基硼氫鈉。另外，先用溶解于四氫呋喃中的三-仲丁基硼氫鋰或三戊基硼氫化鋰處理式10化合物，然后用過氧化氫和碳酸氫鈉水溶液處理，得到作為主要產物的式11化合物和作為次要產物的式12化合物(如果存在的話)，后者可通過層析分離(如有必要)。采用本領域熟知的方法，可將式11化合物轉化為式2化合物。例如，在吡啶中用對甲苯磺酰氯或甲磺酰氯處理11，分別得到式中X是對甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基的式2化合物。在溶劑(如，甲苯，醚或二噁烷)中，在三乙胺，三苯膦，偶氮二羧酸二乙酯或二異丙酯存在下，分別用對甲苯磺酸或甲磺酸處理式12異構化合物，可以制得式中X是對甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基的式2化合物。
另外，在溶劑(如，二甲基甲酰胺)中，用鹵代(即，氯，溴，碘)甲基三苯氧基鏻或鹵代甲基三苯基鏻處理式12化合物，得到式中X是氯，溴或碘的式2化合物。此外，按照本領域熟知的方法〔例如，參見H.Loibner，et，al.，Helv.Chim，Acta.，59，2100(1976)〕采用三苯膦，偶氮二羧酸二乙(或二異丙)酯，并以(例如)碘甲烷，溴甲烷或二氯甲烷作為鹵源，從上述式12化合物可以得到式中X是氯，溴或碘的式2化合物。
上述描述圖解如下
從式6化合物可以制得式中R1為c，R7和R8為氫的式1化合物。式c為
例如，當6中的基團P是保護基酰基或硅甲烷基時，先通過氫化(例如，在甲醇或乙醇中采用甲酸銨和鈀一炭，在環己烷和乙醇中采用鈀-炭，或者是鈀-炭，氫和乙醇)還原氯基團，然后再除去保護基P。除去保護基P的具體方法是當P是酰基時，既可以采用起催化作用的甲醇鈉，也可以采用甲醇-氨;當P是硅甲烷基時，可以采用氟離子。另外，也可以先除去保護基酰基或硅甲烷基，然后再還原氯基團。如果6中的保護基P是芐基，通過氫解(例如，在環己烷和乙醇中加入氫氧化鈀-炭;或者在甲醇或乙醇中加入甲酸和鈀-炭)可以同時完成去保護和氯基團的還原。
此外，按照類似于制備式4化合物的方法，由任意保護的式13化合物與式2化合物反應，然后按本領域熟知的方法除去保護基，由此可制得上述式1化合物，式13為
采用所列舉的酰基，三苯甲基或取代三苯甲基可以任意地保護式13化合物中的氨基(-NH2)。所述取代三苯甲基是4-單甲氧基三苯甲基和4，4′-二甲氧基三苯甲基。
按照本領域熟知的方法〔例如，J.C.Martin，et，al.，J.Med.Chem.，28，358(1985)〕，用熱甲醇-氨處理式6化合物，可以制得式中R1是E，R7和R8是氫的式1化合物。式E為
如果6中保護基團P是酰基，例如，可采用熱甲醇-氨處理，導致由氨基取代氯基團，同時除去保護基酰基。如果保護基團P是芐基或硅甲烷基，可先由氨基團置換氯基團，然后可以除去保護基團P(例如，采用氫解，或者當P是芐基時，用三氯化硼處理或者當P是硅甲烷基團時，用氟離子處理)。
另外，按照類似于制備式4化合物所采用的方法，由任意保護的式14化合物與式2化合物反應，然后按本領域熟知的方法去掉保護基，可以制得上述式1化合物，式14為
采用所列舉的酰基，三苯甲基或取代三苯甲基可任意地保護14中的氨基。
按照本領域熟知的方法，例如，參見J.F.Gerster，et，al.，J.Amer.Chem.Soc.，87，3752(1965);K.K.Ogilvie，et.al.，Can.J.Chem.，62，2702(1984);M.R.Harndcn，et.al.，J.Med.Chem.，30，1636(1987)，由式6化合物或式中R1是g，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是f，R7和R8是氫的式1化合物，式f為
式g為
另外，按照類似于制備式4化合物所采用的方法，由式15化合物與式2化合物反應，然后采用本領域熟知的方法除去保護基團P，由此可以制得式1化合物，式15為
按照本領域熟知的方法，從式5化合物可以制式15化合物。例如，參見W.A.Bowles，etal.，J.Med.Clem.，6，471(1963);M.Maccoss，et.al.，Tetra-hedronLett.，26，1815(1985)。
在堿(例如，碳酸鉀，氫化鈉或氫化鉀)存在下，在非質子極性溶劑(例如，二甲基甲酰胺，二甲亞砜，或環丁砜)中，任意地加入18-冠醚-6或15-冠醚-5，由式2化合物與任意保護形式的式16化合物反應，在除去保護基后，得到相應的式中R1是h，R7和R8是氫的式1化合物。式16為
式h為
采用所列舉的酰基，三苯甲基或取代三苯甲基可以任意地保護式16化合物中的氨基。
另外，按照類似于制備式4化合物所采用的方法，由式16a化合物與式2化合物反應，繼之除去保護基，得到式中R1是i，R7和R8是氫的式1化合物。式16a為
另外，按照類似于制備式4化合物所采用的方法，由式2化合物與式17化合物反應，然后通過酸解氯基團，并同時或隨后除去保護基團，由此制得前述式1化合物。式17為
按照類似于制備式4化合物所采用的方法，由式2化合物與式18化合物反應，然后除去保護基團P，由此得到相應的式中R1是j，R7和R8是氫的式1化合物，式18為
按照類似于制備式4化合物所采用的方法，式19化合物與式2化合物反應，可以制得前述式1化合物，式19為
這一方法提供了相應于式20的化合物，式20為
用加熱的在醇(如，甲醇或乙醇)中的氨處理式20化合物，同時或隨后除去保護基團P，得到式中R1是K，R7和R8是氫的式I化合物，式k為
通過選擇性除去保護基團P，可從式20化合物制得式中R1是l，R7和R8是氫的式l化合物，式l為
例如，當20中保護基團P是酰基時，采用起催化作用的甲醇鈉甲醇溶液可以選擇性地除去該P基團。當20中保護基團P是硅甲烷基時，用氟離子(例如，氟代四丁基銨)處理，可以選擇性地除去該P基團。當20中的保護基團P是芐基時，用三氯化硼處理，可選擇性地除去該P基團。
將式中R1是m，R7和R8是氫的式1化合物中的氯基團酸解(例如，采用熱鹽酸水溶液)或堿解(例如，甲醇氫氧化鈉水溶液)，得到式中R1是n，R7和R8是氫的式1化合物。式m為
式n為
另外，按照本領域熟知的方法〔例如，M.J.Robins，et al.，J.Med.Chem.，27，1486(1984);K.K.Ogilvie，et al.，Can.J.Chem.，62，241(1984)〕采用腺苷脫氨酶處理式中R1是O，R7和R8是氫的式1化合物，可以制得上述式1化合物，式O為
按照本領域熟知的方法，由相應的式中R2，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是A，R2是甲基，氯，溴，碘，羥基或氨基，R7和R8是氫的式1化合物，式A為
由相應的式中R2溴或碘，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是q，R2是氟，R7和R8是氫的式1化合物，式q為
用酰基可以任意地保護氨基(-NH2)和/或羥基。用氟離子處理，然后除去(如果必要)任意的保護基團酰基，得到式中R1是r，R7和R8是氫的式1化合物，式r為
在上述反應中，氟離子來源是在溶劑(如二甲基酰胺或二甘醇)中的氟化鈉或氟化鉀，或者是在四氫呋喃中的氟代四丁基銨，并采用例如起催化作用的甲醇鈉甲醇溶液或甲醇一氨，除去所述保護基。
采用本領域中已知的方法，從相應的式中R2，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是B，R2是甲基，氯，溴，碘，羥基或氨基，R7和R8是氫的式1化合物。式B為
通過酰基可任意地保護氨基和/或羥基。
由相應的式中R2是溴或碘，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是B，R2是氟，R7和R8是氫的式1化合物。可采用酰基任意地保護氨基(-NH2)和/或羥基。用氟離子〔例如，在溶劑(如，二甲基甲酰胺或二甘醇)中的氟化鈉或氟化鉀，或者是在四氫呋喃中的氟代四丁基銨〕處理，然后采用起催化作用的甲醇鈉甲醇溶液或甲醇-氨除去(如有必要)任意的保護基團酰基，由此制得式中R1是U，R7和R8是氫的式1化合物，式U為
按照本領域熟知的方法，從相應的式中R2，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是V，R2是甲基，氯，溴，碘，羥基或氨基，R7和R8是氫的式1化合物，式V為
采用酰基可任意地保護氨基(-NH2)和/或羥基。
采用本領域已知的方法，從式21化合物可以制得式R1是W，R7和R8是氫的式1化合物式21為
式中P是保護基團酰基，式W為
通過已知方法，從式中R1是X，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式21化合物。式X為
可采用酰基任意地保護羥基。
制備8-取代嘌呤核苷及其同系物的一般方法，參見例如，M.J.Robins，etal.，J.Med.Chem.，27，1486(1984);R.E.Holmes，etal.，J.Amer.Chem.Soc.，86，1242(1964);R.A.Long，etal.，J.Org.Chem.，32，2751(1967);R.E.Holmes，etal.，J.Amer.Chem.Soc.，87，1772(1965);M.Ikehara，etal.，Tetrahedron，26，4251(1970);H.J.Brentnall，etal.，TetrahedronLett.，2595(1972);M.Ikehara，etal.，Chem.Pharm.Bull.，13，1140(1965);M.Ikehara，etal.，Chem.Commun.，1509(1968).
按照下述已知方法，由式中R1是Z，R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R1是Y，R7和R8是氫的式1化合物，式Y為
式Z為
所述方法參見J.A.Montgomery，etal.，in“SyntheticProceduresinNucleicAcidChcmistry，”Vol.l.W.W.ZorbachandR.S.Tipson，Eds.，IntersciencePublishers(JohnWileyandSons)，N.Y.，P.205，1968。
在堿存在下，在非質子極性溶劑中，以及在18-冠醚-6或15-冠醚-5的存在下，由相應的式23化合物與式2化合物反應，可以制得式中R3是氫，氟，甲基，乙基，正丙基，2-氯乙基或2-氟乙基的式22化合物，所說堿包括碳酸鉀，氫化鈉，或氫化鉀，所說非質子極性溶劑包括二甲基甲酰胺，二甲亞砜或環丁砜。式22為
式23為
在該反應中形成式24中間體。除去保護基團P即得到相應的式22化合物。式24為
例如，當P是酰基時，用甲醇鈉甲醇溶液或甲醇-氨處理，可以除去該保護基，或者當P是硅甲烷基時，用氟離子即可去保護。當P是芐基時，通過氫解(如，在環己烷和乙醇中以氫氧化鈀-炭催化)或者用三氯化硼處理，即可完成去保護。
采用本領域已知的方法〔H.Griengl et al.，J.Med，Chem.，30，1199(1987);J.Med，Chem.，28，1679(1985)〕可以制得式中R3是2-氯乙基或2-氟乙基的式23化合物。
由相應的式中R3是氫的化合物22也可制得式中R3是氟的式22化合物，即，用酰基任意地保護各個羥基，繼之用次氟酸甲酯氟化，該方法為本領域中的已知方法，參見例如，M.J.Robins，et al.，J.Amer.Chem.Soc.，93，5277(1971)和Chem.Communs.，18(1972);T.S.Lin，et al.，J.Med.Chem.，26，1691(1983)。
由式25化合物也可制得式中R3是2-氯乙基和2-氟乙基的式22化合物，式25為
式中P2和P是彼此不同的保護基，其中當P存在時可選擇性地除去P2。例如，當P2是硅甲烷基，三苯甲基或取代三苯甲基時，P可以是芐基或酰基。同樣，當P2是酰基或芐基時，P可以是保護基團硅甲烷基。選擇性除去保護基團P2，得到式中R3是2-羥乙基的式24化合物。用三苯基膦-四氯化碳處理這一化合物，繼之除去保護基團P，得到式中R3是2-氯乙基的式22化合物。同樣，用三苯基膦-N-溴代琥珀酰胺或三苯基膦-N-溴代琥珀酰胺-碘代四丁基銨代替三苯基膦-四氯化碳例如，參見H.Griengl，et al.，J.Mecl.Chem.，28，1679(1985)〕分別得到式中R3是2-溴乙基或2-碘乙基的式24化合物。繼之用離子處理，然后再除去保護基團P，得到式中R3為2-氟乙基的式22化合物。當P是硅甲烷基時，用氟離子處理進行去保護。另外，用二乙基氨基三氟化硫處理式中R3是2-羥乙基的式24化合物使之除去保護基團P，得到式中R3是2-氟乙基的式22化合物。
按照類似于制備式中R3是氫，甲基或乙基的式24化合物所采用的方法，由式26化合物與式2化合物反應，可以制得式25化合物。式26為
采用本領域已知的方法，由相應的游離醇，可以制得式26化合物。
采用本領域熟知的方法，由相應的式24化合物(式中P是保護基團酰基)可以制得式中R3是下述基團的式27化合物，這些基團包括氫，氟，甲基，乙基，正丙基，2-氯乙基或2-氟乙基。例如，參見I.Wempner，et al.，“Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistvy”，Vol.l，W.W.Zorbach and R.S.Tipson，Eds.，Interscince Publishrs，N.Y.，P.299，1968T.S.Lin，et al.，J.Med.Chem.，26，1691(1983);P.Herdewijn，et al.，J.Med.Chem.，28，550(1985)。采用甲醇-氨或甲醇鈉甲醇溶液去保護，得到相應的式27化合物，式27為
另外，在堿存在下，在非質子極性溶劑中，以及在18-冠醚-6或15-冠醚-5的存在下，由相應的式28化合物與式2化合物反應，然后除去保護基，由此制得式中R3是氟，氫，甲基，乙基，正丙基，2-氯乙基或2-氟乙基的式27化合物。上述堿包括碳酸鉀，氫化鈉或氫化鉀;上述溶劑包括二甲基甲酰胺，二甲亞砜或環丁砜，式28為
例如，用酰基可以任意地保護28中的氨基(-NH2)。采用甲醇鈉甲醇溶液或甲醇-氨可以除去這一保護基。
另外，采用本領域熟知的方法，通過用次氟酸三氟甲酯氟化，由相應的式中R3為氫的化合物可以制得式中R3為氟的式27化合物。也可將式中R3是氫的式27化合物氟化，并且用酰基保護羥基和/或氨基。經氟化后，用甲醇-氨或氫氧化物水溶液去保護，得到式中R3是氟的式27化合物。例如，參見M.J.Robins et al.，J.Amer.Chem.Soc.，93，5277(1971)和Chem.Commun.，18(1972);T.S.Lin，st al.，J.Med.Chem.，26，1691(1983)。
采用本領域已知的方法，從相應的式中R3是氫的式22和27化合物可以制得式中R3是氯，溴或碘的式22和27化合物。例如，參見“Basic Principalsin Nucleic Acid Chemistry，”Vol.l，P.O.P.Ts′o，Ed.，Academic Press，N.Y.，P.146，1974;P.K.Changin“NucleicAcidChemistry”Part3，L.B.TownsendandR.S.Tipson，Eds.，JohnWileyandSonsN.Y.，P.46，1986。
由相應的式中R3是碘的式22和27化合物經下列反應可以制得式中R3是三氟甲基的式22和27化合物。即按照本領域已知的方法，用酰基保護羥基和氨基(-NH2)，然后用碘代三氟甲烷和銅處理之。繼之用甲醇-氨或在甲醇中的甲醇鈉去保護，得到相應的式中R3是三氟甲基的式22和27化合物。例如，參見Y.Kobayashi，et al.，J.Chem，Soc.Perkinl，2755(1980);S.Lin，et al.，J.Med Chem.，26，1691(1983)。
從相應的式中R3是碘或-HgCl的式22和27化合物，經過有機鈀中間體，可以制得式中R3是
，R4是氯，溴，碘，氫，甲基或三氟甲基的式22和27化合物。采用本領域已知的方法，從相應的式中R3是氫的式22和27化合物可以制得式中R3是-HgCl的式22和27化合物。例如，參見E.DeClercq，et al.，pharmac.Ther.，26，1(1984);M.E.Perlman，et al.，J.Med.Chem.，28，741(1985);P.Herde-wijn，et al.，J.Med.Chem.，28，550(1985);D.E.Bergstrom，et al.，J.Med Chem.，27，279(1984)。
采用本領域已知的方法，從相應的式中R1是
的式1化合物可以制得式中R1是
的式1化合物。
采用本領域已知的方法，從相應的式中R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R7和R8中的一個或兩者均為
的式1化合物。
可列舉的酰化方法參見“SyntheticProceduresinNucleicAcidChemistry”，Vol.1，W.W.ZorbachandR.S.Tipson，Eds.，JohnWileyandSons，1968;“NucleicAcidChemistry”，Part1，L.B.TownsendandR.S.Tipson，Eds.，JohnWileyandSons，1978Y，Ishido，etal.，“NucleosidesandNucleotides”，5，159(1986);J.C.Martin，etal.，J.Pharm.Sei.，76，180(1987);A.Matsuda，etal.，Synthesis，385(1986)。
采用本領域已知的方法，從相應的式中R1是
的式1化合物可以制得式中R1是
的式1化合物。例如，參見A.HolyandJ.Zemlicka，Collect.Czech.Chem.Commun.，32，3159(1967);K.K.Ogilvie，etal.，NucleosidesandNucletides，4，507(1985);M.H.Caruthers，etal.，J.Amer.Chem.Soc.，108，2040(1986)采用本領域已知的方法，從相應的式中R7和R8是氫的式1化合物可以制得式中R7和/或R8是-PO3H2的式1化合物，例如參見H.Schaller，et al.，J.Amer.Chem.Soc.，85，3821(1963);J.Beres，et al.，J.Med.Chem.，29，494(1986);R.Noyori，et al.，Tet.Lett.，28，2259(1987);W.Pfeiderer，et al.，Helv.Chim.Acta.，70，1286(1987);“Nucleic Acid Chemistry”.Part 2，L.B.Townsend and R.S.Tipson，Eds.，John Wiley and Sons，1978.
本發明化合物和涉及本發明化合物的中間體所呈現的立體化學是相對的，而不是絕對的，從圖中可以看出，在本發明化合物中，R1所代表的堿與鄰近-CH2OH取代基呈反式，各-CH2OH取代基之間互呈反式。
式中R1是下列基團的式1化合物可以與無機或有機酸形成酸成鹽。這些基團包括
可以列舉有鹵氫酸鹽(如鹽酸鹽和溴氫鹽)，烷基磺酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽，碳酸鹽。
式中R1是下列基團的式1化合物可以與無機或有機堿形成堿式鹽，這些基團包括
可列舉的是堿金屬鹽(如，鈉鹽和鉀鹽)，堿土金屬鹽(如，鈣鹽和鎂鹽)，銨鹽和取代銨鹽。
式中R7和/或R8是-PO3H2的式1化合物可以與無機或有機堿形成堿式鹽，可列舉的是堿金屬鹽(如，鈉鹽和鉀鹽)，堿土金屬鹽(如，鈣鹽和鎂鹽)，銨鹽和取代銨鹽。
下列實施例是本發明的特定實施例。
實施例1(1α，2β，3α)-9-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕鳥嘌呤A)乙烯酮縮乙二醇采用“Organic Syntheses”，Coll.Vol.ⅢE.C.Horning，Ed，John Wiley and Sons，N.Y.P.506(1955)所介紹的方法制得這一化合物。在50℃將溴乙醛縮乙二醇(38.5ml，0.254mol)加到叔丁醇鉀(28.5g，0.254mol)的無水叔丁醇(150ml經3
分子篩干燥)溶液中。在反應燒瓶的頂部裝有一個帶有全回流部分接取蒸餾頭的用玻璃單環填充的柱(20×1.4cm)。將油浴溫度緩慢地升至100℃。反應物回流35分鐘后，用約16小時，以4.5滴/分的速度，并以22∶4.5的蒸餾頭回流比蒸掉叔丁醇。將油浴冷至20℃，用短徑蒸餾裝置代替上述單環物填充柱。在20-50°及約4mm下蒸餾，得到26.96g經′H-NMR積分測定含23.31g乙烯酮縮乙二醇和3.66g叔丁醇的混合物。
B).(反式)-3.3-二乙氧基-1，2-環丁烷二羧酸二乙酯采用K.C.Brannock，etal.，J.Org.Chem.，29，840(1964)改進方法制得了這一化合物。將富馬酸二乙酯(28.28ml，0.173mol)加到含21.63g(0.186mol)乙烯酮縮乙二醇的25.27g上述混合物的無水叔丁醇(60ml)溶液中。將該反應物在82℃加熱7天。減壓下濃縮該反應物，將殘留物分成兩份，3g(A)和39g(B)，將(A)在Merck硅膠-60(1.5×30cm)上層析，以己烷/乙酸乙酯(19∶1)洗脫。將含有產物的組份合并，濃縮得到567mg。(B)部分在Merck硅膠-60(35×5cm)上，用同樣的溶劑層析兩次。合并含有產物的組份，濃縮得到10.43g。所期產物的總得量為10.99g。
C.(反式)-3.3-二乙氧基-1，2-環丁烷二甲醇慢慢地將溶解于四氫呋喃(25ml)中的(反式)-3.3-二乙氧基-1，2-環丁烷二羧酸二乙酯(11.29g，0.0392mol)加到氫化鋁鋰(2.38g，0.0627mol)的無水四氫呋喃(50ml)混懸液中，以此維持反應物溫和回流。將反應物在55℃加熱4小時，然后用醚(100ml)稀釋，倒入飽和氯化銨水溶液(100ml)。用3M硫酸將PH調至4。先用醚(4×100ml)，再用氯仿(3×100ml)提取該混懸液。合并醚提取液，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到5.613g所期產物。合并氯仿提取液，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到112mg另一所期產物。
D).(反式)-3.3-二乙氧基-1，2-環丁烷二甲醇二苯甲酸酯充氮下，于0℃，用5分鐘的時間將苯甲酰氯(9.73ml0.0838mol)加到(反式)-3，3-二乙氧基-1，2-環丁烷二甲醇(5.7g，0.028mol)的無水吡啶(40ml)溶液中。將該反應物溫熱至室溫，形成沉淀。2小時后，加入水(20ml)，并將該反應物攪拌過夜。減壓下除去溶劑。將殘留物溶于乙酸乙酯(400ml)中，依次用水(2×150ml)，1N鹽酸(2×150ml)，飽和碳酸氫鈉(3×150ml)洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，濃縮，得到10.97g所期產物。
E).(反式)-2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮將對甲苯磺酸(250mg，0.00132mol)加到(反式)-3.3-二乙氧基-1，2-環丁烷二甲醇二苯甲酸酯(10.87g，0.0263mol)的丙酮(200ml)溶液中。將該反應物回流3小時。將該溶液減壓濃縮。殘留物溶于乙酸乙酯(200ml)中，用飽和碳酸氫鈉(2×200ml)洗滌，用乙酸乙酯(50ml)反提水層。含并有機層，用硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得到8.7g不純凈產物。在Merck硅膠-60(5×27cm)上對殘留物進行柱層析，用己烷/乙酸乙酯(5∶1)洗脫。合并含有產物的組份，濃縮，得到6.71g所期產物。
(反式)2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮的另一制備方法將570ml，0.5M的硫酸水溶液加到溶于1.5升乙腈中的(反式)-3，3-二乙氧基-1，2-環丁烷二甲醇二苯甲酸酯(50g，0.12mol)溶液中。充氬下，于25℃，將該反應混合物攪拌16時，然后用5升酸乙酯烯釋，依次用2×1升水，2×1升水，2×1升飽和碳酸氫鈉，2×1升水，1升鹽水洗滌該混合物。用硫酸鈉干熔有機相，濃縮得到一油狀物，用己烷研磨，得到34g粗產品。用300ml乙醚研磨該粗品，得到10g所期產物，mp.76-78℃，在-30℃冷濾液冷凍4小時，得到12g純度相等，mp，76-7.8℃的第二批產物。
F).(1α，2β，3β)-3-羥基-12-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯和(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇1，2-二苯甲酸酯將氰基硼氫化鈉(1.01g，16mmol)加到(反式)-2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮(2.46g，7.28mmol)的無水甲醇(40ml)溶液中。加入溴甲酚綠(3mg)作為PH指示劑。在指示劑變蘭時，加入1NHCl甲醇溶液，直到顏色變成黃色。5小時后，顏色不再改變，即已耗盡起始原料。減壓下除去溶劑，將殘留物溶于乙酸乙酯(100ml)中，用飽和氯化鈉(50ml)洗滌。用乙酸乙酯(50ml)反提水層，合并有機層，用硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，殘留物在Merck硅膠-60(5×55cm)上進行柱層析純化。
用己烷/乙酸乙酯(7∶3)洗脫，得到521mg(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯，用乙烷/乙酸乙酯(6∶3)洗脫，得到1.78g(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯。
制備(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯和(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯的另一方法在-78℃，充氮下，用3分鐘，將35.5ml(0.0355mol)1M三仲丁基硼氫化鋰的四氫呋喃溶液加到攪拌著的(反式)-2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮(12.0g，0.0355mol)的無水四氫呋喃溶液中。將反應溫熱至室溫，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(34ml)，繼之，在用冰水浴將反應溫度維持在30℃的同時，滴加30%的過氧化氫(13.0ml，0.127mol)。將反應物溫熱至室溫，攪拌30分鐘，用乙酸乙酯(400ml)和水(120ml)稀釋，分層，用水(100ml)提取有機層，出現乳化，加入氯化鈉使之分層，合并兩個水層，用乙酸乙酯提取，合并所有的乙酸乙酯層，用硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得到殘留物(12.5g)。在兩個WaterPrepPak500硅膠柱體上，用含30%乙酸乙酯的己烷作洗脫劑，以250ml/分鐘的洗脫速度，通過制備性高壓液相色譜純化一部分上述殘留物(7g)。在第14-22分鐘鐘洗脫得到(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯，在23-34分鐘洗脫得到(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯。將前述剩余的12.5g殘留物作類似的洗脫(分兩次，第一次用含25%乙酸乙酯的己烷洗脫，第二次用含35%乙酸乙酯的己烷洗脫)，得到總量為8.80g(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯和2.6g(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯。
(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯的另一制備方法在-78℃，充氮下，用5分鐘，將38.9ml(0.0389mol)1M三戊基硼氫鋰四氫呋喃溶液加到(反式)-2，3-二-〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮(13.15g，0.0389mol)的四氫呋喃(180ml)溶液中。將該反應物攪拌10分鐘，然后溫熱至室溫。加入飽和碳酸氫鈉溶液(36.9ml)，隨后在用冰浴將溫度維持在30℃的同時，慢慢加入30%的過氧化氫(14.19ml，0.138mol)。用水(120ml)稀釋該反應物，用乙酸乙酯(400ml)提取。用水(100ml)洗滌有機層，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到17.8g所期產物粗品。該粗制產物是含有極少量(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯的殘留物。用兩個WatrsPrep500硅膠柱，用含30%乙酸乙酯的己烷洗脫，使所述殘留物制備高壓液相色譜純化，得到9.17g(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯。
另外，用120ml(0.12mol)1M三戊基硼氫鋰將40.5g(0.12mol)(反式)-2，3-二-〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁酮還原(如上所述)，將所得粗產物溶解在100ml己烷/乙酸乙酯(2∶1)中，并將它施于1.2升Merck硅膠-60干襯墊上。用5升同-溶劑混合物洗滌該襯墊，按500ml一份收集洗液。將含產物的洗液合并，蒸發，得到39.8g無色液體狀所期物質，其純度足以用于下一步合成。
G).(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯通過用無水吡啶(2×20ml)濃縮脫水，干燥(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-苯甲酸酯(7.31g，0.0215mol)，然后將它溶于36ml無水吡啶中，加入對甲苯磺酰氯(6.56g，0.0344mol)。在60℃，充氮下，將該反應物攪拌16小時，減壓除去吡啶，通過與甲苯(2×30ml)共沸蒸餾除去殘留的吡啶。將殘留物溶于乙酸乙酯(480ml)中，并用飽和碳酸鉀洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，減壓濃縮，得到一殘留物，后者在Merck硅膠-60(1500ml)上層析純化。先用3000ml乙酸乙酯/己烷(1∶5)預洗脫該柱，然后用乙酸乙酯/己烷(1∶3)洗脫該柱，按50ml一份收集洗脫液。合并適宜的組份，濃縮，得到7.00g(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯。
另外，在60ml吡啶中，在60℃，將(1α，2β，3β)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯(39.8g117mmol)與對甲苯磺酰氯(24.65g，128.5mmol)一起加熱22小時后，將溫度降至40℃，加入2ml水。2小時后，除去揮發物，殘留物在乙酸乙酯和水之間分配，用3%的碳酸氫鈉洗滌有機層，用硫酸鈉干燥。濃縮掉溶劑得到粗產物，用戊烷研磨，得到39.4g粗產物。將該產物溶于溫熱的120ml乙酸乙酯中，將該溶液冷卻至室溫，用120ml戊烷稀釋，于5℃放置數小時，出現結晶，過濾，干燥，得到32.6g純凈的所期產物。
(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯的另一制備方法將對甲苯磺酸單水合物(2.08g，10.9mmol)，三乙胺(1.51ml，10.9mmol)，三苯基膦(3.81g14.6mmol)和偶氮二羧酸二異丙基酯(2.87g，14.6mmol)加到(1α，2β，3α)-3-羥基-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(3.096g，9.10mmol)的無水甲苯(25ml)溶液中。將該反應物在80℃，充氮下加熱。1小時后，加入另外的三苯膦(1.90g，7.3mmol)和偶氮二羧酸二異丙基酯(1.43ml，7.3mmol)，在3小時后按同一量再加一次。再加熱3小時后，再次加入三苯膦(0.95g，3.65mmol)和偶氮二羧酸二異丙基酯(0.717ml，3.65mmol)。將反應物再加熱1小時，冷卻至室溫，過濾。用甲苯(20ml)洗滌沉淀，將洗液和濾液合并，減壓濃縮，得到一殘留物，后者溶于乙酸乙酯(100ml)中。用水(2×30ml)洗滌該乙酸乙酯溶液，用硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，殘留物在Merck硅膠-60(300ml)上進行層析純化，用己烷/乙酸乙酯(5∶1)洗脫，合并適宜的組份，濃縮至20ml，用30ml己烷稀釋該濃縮液，并在室溫放置過夜。過濾收集結晶，用己烷洗滌，得到2.18g(第一批)純凈的所期產物。
將第一批的母液濃縮至40ml，在室溫下放置過夜。過濾收集結晶(第二批)，減壓干燥，在Merck硅膠-60(300ml)上層析，用含2%乙酸乙酯的甲苯洗脫，得到1.02g(第3批)仍然不純的所期產物。在Merck硅膠-60(300ml)上層析第二批母液，用含2%乙酸乙酯的甲苯洗脫，得到187mg(第四批)仍然不純的所期產物，合并第三批和第四批產物，在己烷/乙酸乙酯中重結晶，得到另外770mg純凈的所期產物。純凈的所期產物的總得量為2.98gH).(1α，2β，3α)-3-〔2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基〕-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯將2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤(784mg，3.25mmol)，18-冠醚-6(573mg，2.17mmol)，碳酸鉀(600mg，4.34mmol)加到(1α，2β，3β)-3-〔〔(4甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇二苯甲酸酯(1.072g，2.17mmol)的二甲基甲酰胺(20ml)溶液中。充氮下，于110℃，將該反應物攪拌24小時。減壓除去溶劑，殘留物在Merck硅膠-60(2.5×20cm)上進行層析，用乙酸乙酯/己烷(3∶1)洗脫，得到400mg純凈的所期產物。合并含有不純凈所期產物的其他組份，再次在Merck硅膠-60(1.5×30cm)上進行層析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脫，又得到52mg所期產物，該產物總得量為452mg。
I).(1α，2β，3α)-3-〔2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基〕-1，2-環丁烷二甲醇將25%的甲醇鈉甲醇溶液(109μl，0.482mmol)加到(1α，2β，3α)-3-〔2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基〕-1，2-環丁烷二甲醇，1，2-二苯甲酸酯(452mg，0.803mmol)的無水甲醇(12ml)溶液中。充氮下，于40℃，將該反應物攪拌1小時，減壓下除去溶劑，加入水(10ml)，用1N鹽酸將PH調至7，減壓下除去溶劑，殘留物用醚(2×20ml)研磨，干燥，得到358mg所期產物粗品，后者可直接用于下一步反應。
J).(1α，2β，3α)-9-〔2，3-二〔羥甲基)環丁基〕鳥嘌呤將(1α，2β，3α)-3-〔2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基〕-1，2-環丁烷二甲醇(358mg，1.0mmol)混懸于甲醇(5ml)中，加入3N(2.5ml)。將反應物在45℃攪拌4小時。減壓下除去溶劑，將殘留物溶于水(20ml)中。用1N的KOH將PH調至7。取出10%，減壓除去溶劑，殘留物用甲醇(3×4ml)和乙酸乙酯(2×4ml)濃縮帶水，加熱下將殘留物溶于水(4ml)中，并將其加到CHP-20P樹脂柱上〔1.1×20cm;Mitsu-bishiChemicalIndustriesLtd.(75-150Micron)〕。依次用水，2%乙腈/水，4%乙腈/水洗脫，得到11mg所期產物。
將剩余的90%反應物減壓濃縮，然后用甲醇(3×20ml)和乙酸乙酯(2×20ml)濃縮帶水，加熱下將殘留物溶解在水(30ml)中，然后加到CHP-20P樹酯柱(2.5×15cm)上，依次用水，2%乙腈/水，4%乙腈/水，10%乙腈/水洗脫，又得到111mg(1α，2β，3α)-9-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-鳥嘌呤，mp＞220℃元素分析C11H15N5O3·1.43HzO計算值C，45.40;H，6.18;N，24.08;H2O，8.83實驗值C，45.66;H，5.95;N，23.82;H2O，8.83實施例2(1α，2β，3α)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇A.(1α，2β.3α)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯將(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(988mg，2mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(20ml)中，充氮下加入腺嘌呤(405mg，3mmol)，18-冠醚-6(538mg，2mmol)和碳酸鉀(276mg，2mmol)。將該反應物在110℃加熱16小時，然后減壓除去溶劑，得到一殘留物，后者在Merck硅膠-60(400ml)上進行柱層析純化，依次用含0.1%，0.5%，5%和10%甲醇的乙酸乙酯進行洗脫，得到522mg仍然不純的產物。將該粗品在Merck硅膠-60(400ml)進行柱層析，用二氯甲烷-甲醇(20∶1)洗脫，得到400mg純凈的(1α，2β，3α)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯。
B.(1α，2β，3α)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇將(1α，2β，3α)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(400mg，0.899mmol)混懸于無水甲醇(20ml)中，加入濃度為25%的甲醇鈉甲醇溶液(123μl，0.539mmol)。將該混合物在40℃攪拌45分鐘，然后減壓下除去溶劑。殘留物在水(20ml)中制漿，用1NHCl將PH調至7.0，除去揮發物，在CHP-20p樹脂上進行柱層析純化，依次用水，0至20%甲醇水梯度液，20%和30%甲醇水溶液洗脫，得到128mg固體狀(1α，2β，3α)-3-(6-氨基-9-嘌呤-9-基)-1，2-環丁烷二甲醇，mp.181-183℃。
元素分析C11H15N5O2·0.1H2O計算值，C，52.63;H，6.10;N，27.09實驗值，C，52.64;H，6.10;N，28.00
實施例3(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-甲基-2，4(1H，3H)嘧啶二酮A.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-5-甲基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮充氬下，將溶于無水二甲基甲酰胺(12.5ml)中的由(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(1.245g，2.52mmol)，胸腺嘧啶(625mg，4.96mmol)，碳酸鉀(1.39g，10.1mmol)和18-冠醚-6(664mg，2.51mmol)組成的混合物，在105℃加熱攪拌16小時，然后在125℃加熱攪拌1小時。補加胸腺嘧啶(310mg，2.2mmol)和碳酸鉀(354mg，2.6mmod)，并在125℃連續攪拌2小時。將該反應混合物冷卻，過濾，用二甲基甲酰胺洗滌不溶物，合并二甲基甲酰胺濾液，蒸發，得到一殘留物，后者用乙酸乙酯研磨，過濾除去固體，將濾液蒸發得到一殘留物，將該殘留物用少量乙酸乙酯(約1∶1)溶解，然后加到用乙烷浸潤的Merck硅膠-60(5×11.5cm)柱上。先用乙酸乙酯-己烷(4∶1)，再用乙酸乙酯洗脫，得到219mg部分純化的所期產物。將該物質在Merck硅膠-60柱(用二氯甲烷浸潤)上層析，用10%，20%，30%，50%的乙酸乙酯-二氯甲烷溶液洗脫，得到166mg純凈的(12，2β，3α)-1-〔2，2-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕-環丁基〕-5-甲基-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮，為白色固體。
B.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-甲基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮將25%的甲醇鈉甲醇溶液(44.7μl，0.196mmol)在充氬攪拌下，于40℃，加到(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-5-甲基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(146mg，0.326mmol)的無水甲醇(4.9ml)混懸液中。4小時后，將該澄清溶液冷卻至室溫，減壓濃縮得到一殘留物，將后者溶于水中。用稀鹽酸將PH調至7，并將該溶液加到用水浸潤的CHP-20P樹酯柱(1.5×21cm)上。依次用水，2%，4%和10%的乙腈水溶液洗脫，蒸發后，凍干除去水，得到58mg(1α，2β，3α)-1-(2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-甲基-2，4(1H，3H)嘧啶二酮，為易潮解固體。
NMR-H1(270MHz，
，四甲基硅甲烷)δ11.11(寬單，1H)，7.64(雙峰，J＝1.1Hz1H)，4.56(多重峰，2H)，4.47(多重峰，2H)，4.47(多重峰，1H)，3.44(多重峰，4H)，2.5(多重峰，
溶劑+1H)，1.85(多重峰，1H)，1.79(雙峰，J＝1.1Hz，3H)。
實施例4(1α，2β，3α)-4-氨基-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-2(1H)-嘧啶酮A.(1α，2β，3α)-4-氨基-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2(1H)-嘧啶酮。
充氬下，將溶于12.5ml無水二甲亞砜中的由(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(1.51g，3.05mmol)，胞嘧啶(678mg，6.10mmol)，碳酸鉀(1.69g，12.2mmol)，18-冠醚-6(804mg，3.04mmol)組成的混合物在112℃攪拌4.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫，加入冰乙酸(0.7ml，12.2mmol)中和，減壓下除去溶劑，殘留物溶于乙酸乙酯中，過濾除去固體，用乙酸乙酯洗滌濾餅，將乙酸乙酯濾液濃縮，得到一殘留物，將后者溶于甲苯中，并加到由甲苯浸潤的Merck硅膠柱(2.5×23.5cm)上。用異丙醇/甲苯洗脫，得到156mg所期產物。
B.(1α，2β，3α)-4-氨基-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-2(1H)-嘧啶酮將(1α，2β，3α)-4-氨基-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2(1H)嘧啶酮(151.3mg，0.349mmol)溶于5.25ml無水甲醇中，然后加入濃度為25%的甲醇鈉甲醇溶液(48μl，0.209mmol)。將該反應物在40℃攪拌75分鐘，冷卻至室溫，減壓下除去溶劑，并將殘留物溶解在水中。用1NHCl將PH調至7.05，并將該水溶液加到用水浸潤的CHP-20P樹酯柱上，然后用0-50%乙腈-水溶液進行連續梯度洗脫。合并適宜的組份，減壓除去溶劑，得到透明玻璃狀所期產物(52mg)。
NMR-H′(270MHZ，CD3
，四甲基硅甲烷)δ7.69(d，J＝7Hz，1H)，6.98(bs，2H)5.71(d，J＝7.6Hz，1H)，4.65(bm，2H)4.37(m，1H)，3.43(m，4H)，2.43(m，1H)，2.31(m，1H)，2.20(m，1H)，1.77(m，1H)。
實施例5〔1α(E)，2β，3α〕-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-(2-溴乙烯基)-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮。
A.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2，4-(1H，3H)嘧啶二酮將尿嘧啶(1.26g，11.23mmol，在50℃干燥16小時)和18-冠醚-6(1.98g，7.49mmol)溶于二甲基亞砜(9ml)中，在50℃，加入碳酸鉀(2.07g，14.98mmol)和(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(3.7g，7.49mmol)。充氮下，加熱至100℃，出現乳化，補加二甲亞砜(3ml)，將該反應物在100℃攪拌24小時。減壓下除去溶劑，得到一殘留物，后者在Merck硅膠-60(700ml)柱上進行層析純化，用甲苯-3%異丙醇/甲苯進行梯度洗脫。合并適宜的組份，得到850mg純凈的所期產物。合并含不純所期產物的組份，濃縮，得到一殘留物，將后者溶于甲苯(1ml)中。收集形成的結晶，干燥，又得到35mg純凈的所期產物。
B.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔羥甲基)環丁基〕-2.4
1H，3H)-嘧啶二酮。
將(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2，4(1H，3H)嘧啶二酮(885mg，2.04mmol)混懸于無水甲醇(25ml)中，加入濃度為25%的甲醇鈉甲醇溶液(264μl，1.22mmol)。充氮下，將該反應物在40℃加熱3小時。減壓下除去溶劑，并將殘留物溶于水(5ml)中。用1NHCl將PH降至7，并將該溶液在0℃放置過夜。將所得沉淀和上清液在單-CHP-20P樹酯柱(200ml)上進行純化，用水，2%乙腈/水，4%乙腈/水進行分步梯度洗脫，得到423mg所期產物。
C.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二〔(羥甲基)環丁基〕-5-碘-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮將(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-2，4(1H，3H)嘧啶二酮(423mg，1.87mmol)混懸于二噁烷(38ml，用堿式鋁純化)，加入碘(950mg，3.74mmol)和0.8M的硝酸(2.5ml2mmol)。將該溶液在95℃攪拌90分鐘，冷卻至室溫，加入硫代硫酸鈉飽和水溶液，直到暗紅色褪去為止。將該反應物減壓濃縮，得到一淡黃色的殘留物。用CHP-20P樹酯(150ml)將該殘留物層析純化，用水→50%乙腈/水進行梯度洗脫，得到557mg所期產物。
D.〔1α(E)，2β，3α)-3-〔1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-1，2，3，4-四氫-2，4，-二氧-5-嘧啶基〕-2-丙烯酸甲酯。
將乙酸鈀(Ⅱ)(17.5mg，0.078mmol)，三苯基膦(40.9mg，0.15mmol)，三乙胺(290μl，2.08mmol)混懸于二噁烷(20ml，經堿式純化)中，并在充氮下，于85℃加熱15分鐘，然后加入〔1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-碘-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(457mg，1.3mmol)和含丙烯酸甲酯(468μl，5.2mmol)的二噁烷(10ml)溶液。充氮下，將該反應物在85℃加熱。4小時后，補加丙烯酸甲酯(234μl，2.7mmol)，再加熱2小時后，反應仍不完全，加入硅藻土(300mg)，并將該熱反應物過濾。減壓下除去溶劑，用無水二噁烷(2×10ml)濃縮帶水使殘留物干燥，然后將殘余物用于下步反應。
重復上述反應，但此時在溶劑中通入氬氣泡除去其中的氧氣。先在充氮下，將由乙酸鈀(Ⅱ)，(17.5mg，0.078mmol)，三苯基膦(40.9mg，0.15mmol)，三乙胺(290μl，2.08mmol)和二噁烷(20ml)組成的混懸液在85℃加熱15分鐘，然后加入上述殘留物，丙烯酸甲酯(468μl，5.2mmol)的二噁烷(10ml)溶液。將該反應物在85℃加熱3小時，加入硅藻土(300mg)，并將該熱反應液過濾，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物加到Merck硅膠-60柱(150ml，用氯仿浸潤)上，用氯仿→5%，7.5%，10%甲醇/氯仿進行分步梯度洗脫純化，合并適宜的組份，得到310mg雜有三乙銨鹽的所期產物。將該混合物溶于水(5ml)和乙酸乙酯(50ml)中，分層，用乙酸乙酯(4×30ml)提取水層，合并乙酸乙酯層，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到232mg所期產物。
E.〔1α(E)，2β，3α〕-3-〔1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-1，2，3，4-四氫-2，4-二氧-5-嘧啶基〕-2-丙烯酸將〔1α(E)，2β，3α〕-3-〔1-(2，3-二(羥甲基)環丁基〕-1，2，3，4-四氫-2，4-二氧-5-嘧啶基〕-2-丙烯酸甲酯(230mg，0.742mmol)溶于2M氫氧化鈉(3.7ml，7.42mmol)中，在室溫下攪拌1.5小時，然后將該反應物冷卻到4℃，用6N HCl將PH調至2，將該反應物在4℃放置1小時。過濾收集沉淀，用水洗滌，真空下用P2O5干燥16小時，得到120mg所期產物。將母液和洗液濃縮至3ml，并在4℃放置16小時，收集結晶，用水洗滌，真空下用P2O5干燥4小時，又得到7mg所期產物。
F.〔1α(E)，2β，3α〕-3-〔1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-(2-溴乙烯基)-2，4(1H，3H)嘧啶二酮通過對二甲基甲酰胺(2×3ml)的蒸發，使〔1α(E)，2β，3α〕-3-〔1-2，3-二(羥甲基)環丁基〕-1，2，3，4-四氫-2，4-二氧-5-嘧啶基〕-2-丙烯酸(127mg，0.429mmol)干燥，然后將它溶解在二甲基甲酰胺(2ml)中，加入碳酸氫鉀(129mg，1.29mmol)。加入溶于二甲基甲酰胺(1ml)中的N-溴代琥珀酰胺(76mg，0.429mmol)溶液，將該反應物在室溫下攪拌2.5小時。將該反應液過濾，減壓濃縮。殘留物與水(2×5ml)一道濃縮，然后在CHP-20P樹酯(110ml)上進行層析，用水→30%乙腈/水進行梯度洗脫，經減壓濃縮后，得到99mg〔1α(E)，2β，3α〕-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-(2-溴乙烯基)-2，4(1H，3H)嘧啶二酮，mp.155-157℃。
元素分析C12H15N2O4Br·0.31H2O計算值C，42.79;H，4.68;N，8.32實驗值C，42.85;H，4.69;N，8.26實施例6(1α，2β，3α)-2-氨基-9-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-8-溴-1，9-二氫-6H-嘌呤-6-酮。
將0.5ml飽和溴水溶液加到攪拌著的(1α，2β，3α)-9-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕鳥嘌呤(72mg，0.272mmol)的水(9ml)混懸液中。25分鐘后補加溴水溶液(0.5ml)50分鐘后再補加一次。再攪拌15分鐘后，濾出沉淀物質，用水洗滌，在水(3ml)中漿化，加到用水浸潤的CHP-20P柱(24ml)上。用水，4%乙腈/水，8%乙腈/水進行分步梯度洗脫，得到45mg所期產物。將該產物與以同樣規模進行的相同反應所得49mg所期產物合并，合并后的產物用水(7ml)結晶，得到74mg(1α，2β，3α)-2-氨基-9-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-8-溴-1，9-二氫-6H-嘌呤-6-酮，mp.130℃。
NMR(270MHz， ，四甲基硅甲烷)δ10.67(寬單峰，1H)，6.43(寬單峰，2H)，4.59(四重峰，J＝9Hz，1H)，4.55(三重峰，J＝5Hz，1H)，4.48(三重峰，J＝5Hz，1H)，3.59(三重峰，J＝6Hz，2H)，3.44(三重峰，J＝5Hz，2H)，2.56(多重峰，2H)，2.26(多重峰，1H)，2.21(多重峰，1H)。
實施例7(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-碘-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮A.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮將溶解在無水DMSO(12.5ml)中的由(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(1.25g，5.07mmol)，尿嘧啶(0.567g，5.07mmol)，碳酸鉀(1.40g，10.2mmol)，18-冠醚-6(670mg，2.54mmol)組成的混合物在110℃加熱4.5小時。減壓下除去溶劑，用乙酸乙酯將所得半固體研磨2次，合并乙酸乙酯上清液，并濃縮到很小的體積，用等體積己烷稀釋，加到由己烷浸潤的Merck硅膠-60(2.5×25cm)柱上，先用乙酸乙酯/己烷(1∶4)，再用乙酸乙酯/己烷(1∶1)，最后用乙酸乙酯洗脫，得到部分純化的所期產物(250mg)。將該產物加到用二氯甲烷浸潤的硅膠柱(1.5×24.5cm)上進行層析，先用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶4略，再用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶1)，最后用乙酸乙酯洗脫，但未能分離雜質。隨后在用甲苯浸潤的硅膠柱(1.5×25cm)上進行層析，用異丙醇/甲苯(4∶96)洗脫，得到純凈的所期產物(56.5mg)以及含雜質的所期產物。將后者用甲苯重結晶，又得到純凈所期產物(86.3mg，總得量143mg)。
B.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮在充氬下，于40℃，將由(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(苯甲酰氧基)甲基〕環丁基〕-2，4-(1H，3H)嘧啶二酮(142.9mg，0.329mmol)，45μl25%的甲醇鈉甲醇溶液，4.9ml無水甲醇組成的混合物攪拌8.5小時。將該反應物冷卻至室溫，減壓下除去溶劑。將粘稠殘留物部分溶解在幾毫升水中，用稀鹽酸和碳酸氫鈉將PH調至7.00。將該溶液加到水浸潤的CHP-20P樹脂柱(1.5×23.5cm)上，先用水(約50ml)洗脫，然后再用乙腈水溶液(2%，4%，10%)洗脫，得到55.8mg白色固體狀的所期產物。
C.(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-碘-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮將(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-24(1H，3H)嘧啶二酮(54.7mg，0.242mmol)，碘(123mg，0.484mmol)，硝酸水溶液(0.8N，0.256mmol)溶于5ml二噁烷中，并在105℃攪拌85分鐘。冷至室溫后，用硫代硫酸鈉水溶液使該混合物脫色，減壓濃縮成固體。將該固體溶于水中，減壓濃縮(3次)。將所得固體部分地溶解在水中，加到用水浸潤的CHP-20P樹脂柱(1.5×20cm)上。用水(約50ml)洗脫后，再用水-50%乙腈/水對該柱進行連續梯度洗脫，得到67.3mg白色固體狀的(1α，2β，3α)-1-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-5-碘-2.4(1H，3H)嘧啶二酮，mp.170-171℃。
元素分析C10H13IN2O4·0.27H2O計算值C，33.65;H，3.82;N.7.85實驗值C，33.68;H，3.77;N，7.82實施例8.
(1α，2β，3α)-5-氨基-3-〔2，3-二羥甲基)環丁基〕-3，6-二氫-7H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-7-酮A)4-氯苯基化重氮鹽將4-氯苯胺(21.14g，0.166mol)混懸于水(156ml)和12NHCl(46ml)中，在0℃，加入亞硝酸鈉(12.62g，0.182mol)水(156ml)溶液，加料時間為20分鐘，并將反應溫度保護在10℃以下。將4-氯苯基氯化重氯鹽溶液過濾，并在0℃放置30分鐘，然后用于下步反應。
B.6-氯-5-〔(4-氯苯基)偶氮〕-2，4-嘧啶二胺將4-氯-2，6-二氨基嘧啶(21.68g，0.150mol)混懸于水(750ml)和乙酸(750ml)中，并加入乙酸鈉(300g)。攪拌20分鐘后形成溶液，然后，冷卻下，用30分鐘的時間加入上述4-氯苯基氯化重氮鹽(10.166mol)溶液，加料速度使反應溫度保持在18℃。將該反應物在室溫下攪拌過夜，濾出橙色結晶，用水(4×400ml)洗滌，減壓下干燥，得到17.6g6-氯-5-〔(4-氯苯基)偶氮〕-2，4-嘧啶二胺。將母液在5℃冷卻20小時，收集結晶，減壓下干燥，又得到6.94g6-氯-5-〔(4-氯苯基)偶氮〕-2，4-嘧啶二胺c.6-氯-2，4，5-嘧啶三胺，將6-氯-5-〔(4-氯苯基)偶氮〕-2，4-嘧啶二胺(24.55g，0.0906mol)混懸于乙醇(640ml)水(640ml)和乙酸(64ml)中，充氮下，將該混懸液加熱到70℃。用1小時，慢慢地加入75g粉塵狀鋅粉，然后將該反應物在70℃再攪拌1小時，冷卻至室溫，并在充氮下過濾。將濾液冷卻至0℃，用10%的NaOH(400ml)將PH調至10。通過硅藻土過濾除去沉淀出的氫氧化鋅，用冰乙酸將暗紅色濾液中和至PH7，濃縮至300ml體積。加入水(50ml)，將反應物冷卻至0℃，用10%NaOH將PH調至9，將該溶液在5℃放置3天。收集結晶，先用水(50ml)，再用醚(50ml)洗滌，減壓下，于35℃，干燥16小時，得到10.94g所期產物。
D.7-氯-1H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-5-胺將6-氯-2，4，5-嘧啶三胺(10.94g，0.0686mol)和硝酸三異戊酯(9.20g，0.0686mol)溶于二惡烷(500ml，通過堿式鋁新樣純化)中，充氮下，于90℃，將該溶液加熱攪拌2小時。將該反應混合物冷卻，用活性炭處理，過濾，濃縮至150ml體積。加入石油醚(250ml，bp.35-60℃)，濾出沉淀，用石油醚(50ml)洗滌，減壓下，于40℃，用P2O5干燥16小時，得到9.23g粗制所期產物，然后將后者用于下步反應。
E.7-(苯甲氧基)-1H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-5-胺充氮下，用20分鐘，將片狀金屬鈉(3.7g，0.162mol)加到芐醇(117ml，1.13mol)中，然后將該反應物在80℃加熱90分鐘。待所有金屬鈉溶解后，將反應物在室溫放置16小時。然后加入7-氯-1H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-5-胺(9.23g，0.0541mol)，并將該反應物在60℃加熱5小時。將該反應物冷卻，在5℃放置16小時。加入水(500ml)使沉淀溶解，然后用醚(3×200ml)提取該混合物。用濃鹽酸將水層調至PH7，然后用1N HCl調至PH5.5。濾出沉淀，在室溫下用P2O5減壓干燥，得到8.05g所期產物。
F.(1α，2β，3α)-3-〔5-氨基-7-苯甲氧基)-3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-3-基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯。
充氮下，將60%NaH(78mg，1.96mmol)混懸于二甲基甲酰胺(4ml)中，加入7-(苯甲氧基)-1H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-5-胺(474mg，1.96mmol)。10分鐘后，加入(1α，2β，3β)-3-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基〕氧基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(880mg，1.78mmol)，將該反應物在80℃加熱24小時。減壓下除去溶劑，用乙酸乙酯(3×30ml)研磨殘留物，過濾。合并乙酸乙酯提取液，濃縮，得到一殘留物，將后者用Merck硅膠-60(100ml)純化，用10%乙酸乙酯/己烷→100%乙酸乙酯進行分步梯度洗脫，用50%乙酸乙酯/己烷洗脫水所期產物，得到205mg(1α，2β，3α)-3-〔5-氨基-7-(苯甲氧基)-3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕-嘧啶-3-基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯。
G.(1α，2β，3α)-3-〔5-氨基-7-(苯甲氧基)-3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕-嘧啶-3-基〕-1，2-環丁烷二甲烷將(1α，2β，3α)-3-〔5-氨基-7-(苯甲氧基)-3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-3-基〕-1，2-環丁烷二甲醇，二苯甲酸酯(250mg，0.363)溶于無水甲醇(6ml)中，加入濃縮為25%的甲醇鈉甲醇溶液(50μl，0.218mmol)。在充氮下，將該反應物在40℃加熱1小時，然后加入水(2ml)，用1MHCl將PH調至7，將該反應物減壓濃縮，得到粗制的所期產物。
H.(1α，2β，3α)-5-氨基-3-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-3，6-二氫-7H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-7-酮，將前述(1α，2β，3α)-3-〔5-氨基-7-(苯甲氧基)-3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕-嘧啶-3-基〕-1，2-環丁烷二甲醇粗品在1.5ml甲醇中漿化，然后加入3NHCl(600μl)。將該反應物在40℃加熱4小時，然后在室溫放置16小時，用1NKOH將PH調至7，將該溶液減壓濃縮，得到一殘留物，將該殘留物在CHP-20P樹酯(34ml)上層析，用水→70%乙腈/水作梯度洗脫，得到64mg(1α，2β，3α)-5-氨基-3-〔2，3-二(羥甲基)環丁基〕-3，6-二氫-7H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕-嘧啶-7-酮，mp.＞200℃。
元素分析C10H14N6O3·2.5H2O計算值C，38.57;H，6.15;N，26.99實驗值C，39.17;H，4.98;N，26.51實施例9治療體外培養細胞的病毒感染為確定受試化合物預防數種病毒感染的有效濃度，用培養細胞系統進行了實驗。下文介紹該實驗，并將結果列于表1。
縮寫HSV-1(單純性皰疹病毒1，StrainSchooler)，HSV-2(單純性皰疹病毒2，Strain186)，VZV(水痘帶狀泡疹病毒，StrainELLEN)，HCMV(人類巨細胞病毒，StrainAD169)，MuLV(鼠類白血病病毒，StrainCAS)，蝕斑減少試驗在加入含有受試化合物雙倍稀釋液的保養介質前，在6井培養皿(Costar，Cambridge，MA)中，用1小時時間，使病毒(HSV-1，HSV-2，HCMV和VZV)吸附于WI-38細胞培養物單細胞層。將HSV-1和HSV-2在37℃培養4天后和將HCMV和VZV在37℃培養6-7天后，根據固定并經染色的單細胞層，評價抑制蝕斑生長的情況。以病毒對照組為基準，將能使蝕斑減少至少50%所需的藥物濃度確定為ID50值。
按照Rowe et al和Shannon et al的介紹，用稍加改進的方法，采用MuLV進行抗病毒試驗。在6井皿中，每井接種約2×105個SC-1細胞。在37℃培養過夜后，用DEAE-Detran，在37℃使該培養細胞致敏1小時，用MuLV漂洗，培養。再次給該培養物供給含有不同濃度受試化合物的生長介質。在37℃下，3天(或更長)后，再次給培養物供給加了受試化合物的新鮮介質，并于37℃再培養3天。然后洗滌培養物，以除去介質，用紫外光照射，在含有適宜濃度受試化合物的細胞生長介質的每個井中，接種約5×105個XC細胞，然后將該培養物再培養4天，并且在XC細胞復蓋表面的第二天給該培養物再次供應含受試化合物的生長介質。最后將該培養物漂洗，染色，并計算合胞體蝕斑。
參考文獻Rowe，W.P，Pugh，W.E.，andHartley，J.W.，(1970)，PlaqueAssayTechniquesforMurineLeukemiaViruses，Virology，421136-1139.
Shannon，W.M，Brockman，R.W.，WestbrookL.，Shaddix，S.，andShabel，F.M.，(1974)InhibitionofGrossLeukemiaVirus-InducedPlaqueFormationinXCCellsby3-Deazauridine，J.Natl.，CancerInst.，52199-205.
權利要求
1.制備式1化合物及其藥物上可接受的鹽的方法，式1為，
式中R1是
式中R2是氫，甲基，氟，氯，溴，碘，羥基或氨基，R3是氟，氯，溴，碘，氫，甲基，三氟甲基，乙基，正丙基，2-氟乙基，2-氯乙基，或
式中R4是氯、溴、碘、氫，甲基或三氟甲基；R5是烷基，R6是氫，烷基，取代烷基，或芳基，R7和R8各自為氫，
該方法包括式2化合物與任意保護的式R1化合物反應，除去保護基，得到式1化合物，式2為
式中P是保護基，X是離去基團。
全文摘要
式1化合物及其藥物上接受的鹽呈現抗病毒作用，式1為
文檔編號C07D473/30GK1036575SQ8910197
公開日1989年10月25日 申請日期1989年3月30日 優先權日1988年3月30日
發明者羅伯特·扎勒, 威廉·A·斯盧薩齊克 申請人:E.R.斯奎布父子公司