天然萘醌二聚體及其在制備抗菌藥物中的用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥學領域，涉及從中藥材分離得到的天然萘醌二聚體及其在制備抗菌 藥物中的用途，尤其是在抗耐藥金葡菌藥物中的用途。
【背景技術】
[0002] 研究報道，耐甲氧西林金黃葡萄球菌（Methicillin-ResistantStaphylococcusa ureus，MRSA)為醫院內最常見的傳染病菌之一，除了淺表皮膚感染，它還可以引起人體深 度感染。有研究顯示，對所有內酰胺類抗生素如青霉素等藥物具有耐藥性的MRSA，對大環 內酯，氟喹諾酮，四環素等抗生素也都產生了耐藥性，這使得它的感染變得更加難以治療。 目前，可用于治療MRSA的抗生素僅有萬古霉素，然而不幸的是，完全抗萬古霉素MRSA菌株 2002年在美國已經出現。我國近年來由于抗生素廣泛的使用，甚至濫用，特別是萬古霉素 在多家醫院成為常規抗生素類用藥之后，這一形勢變得愈加嚴峻。有關部門和人員認為，除 了采取措施通過限制濫用抗生素以減緩耐藥MRSA增長的速度，同時必須研發新的抗耐藥 MRSA藥物，以防現有的抗菌藥物無法起作用時，細菌感染的大規模爆發。
[0003] 諾氟沙星是一種氟喹諾酮類抗生素，1986年開始被用于臨床。因它對革蘭氏陽性 菌及革蘭氏陰性菌，尤其是金黃色葡萄球菌，具有較強的抑制作用而廣泛用于尿道、呼吸道 等的抗感染治療。也正因為諾氟沙星在臨床及畜牧業的廣泛應用，導致細菌對其產生了嚴 重耐藥性，從而限制了諾氟沙星的應用。研究顯示，細菌產生耐藥性的機制多樣，其中之一 是細菌外排泵。因此，選擇具有NorA外泵基因的MRSA細菌株作為外泵抑制劑的篩選靶標 被認為是尋找具有外泵抑制作用的抗耐藥金葡菌抗生素增敏劑的一種重要途徑。
[0004]中藥軟紫草（Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst.)，是紫草科（Boraginaceae)多年 生草本植物。作為藥用紫草的主要來源，紫草始載于《神農本草經》，列為中品。味苦，性寒。 有涼血、活血、解毒和透疹的功能，主治血熱毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、瘡瘍、濕疹、水火燙 傷等。
[0005] 紫草中的特征性和主要化學成分是萘醌類化合物，到目前為止，從紫草中分離得 到的萘醌類化合物母核結構為5, 8-二羥基-2-異己烯-1，4-萘醌。所不同的是旋光性、側 鏈中羥基的位置和羥基酯化的酸。目前在紫草屬植物中發現的幾類主要化合物在多種紫草 中均有存在，并具有相應的藥理活性。作為紫草的主要成分的萘醌類化合物，具有抗炎、抗 菌、抗腫瘤和抗凝血等多方面的活性。
[0006] 本發明的申請人擬提供與目前報道的二聚體結構不同的為紫草萘醌形成的二聚 體結構化合物，進一步將該萘醌二聚體天然成分與諾氟沙星制備組合藥物，以期降低諾氟 沙星的最低抑菌濃度，對諾氟沙星產生抗耐藥金葡菌的增效作用。
[0007] 于本發明相關的現有技術有：
[0008] [1]BeardenDT,DanzigerLH.Mechanismofactionofandresistancetoquinolones. Pharmacotherapy2001, 21:40-61.
[0009] [2]Holmes，B，etal.Norfloxacin.Drugs. 1985, 30 (6) :482-513.
[0010] [3]MarkhamPN,NeyfakhAA.InhibitionofthemultidrugtransporterNorAInStaph ylococcusaureuspreventsemergenceofnorfloxacinresistance.AntimicrobialAgentsC hemotheropy. 1996,40(11) :2673-2674.
[0011] [4]HooperDC.Emergingmechanismsoffluoroquinoloneresistance.EmergingInf ectiousDiseases. 2001，7:337 - 341.
[0012] [5]WangW.J. ,BaiJ.Y. ,LiuD.P. ,XueL.M. ,ZhuX. Y.TheantiinflammatoryactivityofshikoninanditsinhibitoryeffectonleukotrieneB4 biosynthesis.ActaPharmaceuticaSinica，1994, 29:161-165.
[0013] [6]ShenC.C. ,SyuW.J. ,LiS.Y. ,LinC.H. ,LeeG.H. ,SunC. M.AntimicrobialActivitiesofNaphthazarinsfromArnebiaeuchroma.JournalofNatural Products，2002, 65:1857-1862.
[0014] [7]LiuH，JinYS，SongY，YangXN，YangXW，GengDSandChenHS. ThreenewcompoundsfromArnebiaeuchroma.JournalofAsianNaturalProductsResearc h，2010, 12(4) :286 - 292.。

【發明內容】

[0015] 本發明的目的是提供新的天然萘醌二聚體及其在制備抗菌藥物中的用途，尤其是 在抗耐藥金葡菌藥物中的用途。
[0016] 本發明的天然萘醌二聚體為可用作抗耐藥增效劑的天然物質，其結構特征在于， 構成化合物的單元為一個去氧紫草素與一個具有紫草萘醌類化合物紫草素（Alkanin和 Shikonin)及其衍生物，通過萘環之間結合形成的二聚體結構。
[0017]本發明提供了與目前報道的二聚體結構不同的為紫草萘醌形成的二聚體結構化 合物，進一步將該萘醌二聚體天然成分與諾氟沙星制備組合藥物，以期降低諾氟沙星的最 低抑菌濃度，對諾氟沙星產生抗耐藥金葡菌的增效作用。
[0018] 本發明從軟紫草(又稱新疆紫草）中分離得到萘醌二聚體化合物，經實驗表明，這 些化合物本身不具有抗菌活性，但與諾氟沙星共同給藥，能使抗生素最低抑菌濃度分別降 低4 - 64倍，表現出較強的協同抗耐藥菌作用。
[0019] 本發明的化合物通過下述方法制備：
[0020] 采用紫草科（Boraginaceae)紫草屬（Arnebia)植物軟紫草(又稱新疆紫草 (Arnebiaeuchroma))的根，粉碎,95%乙醇45攝氏度以下浸泡提取，合并提取液減壓濃 縮至乙醇全部揮發完畢，加水至浸膏混懸，用乙酸乙酯萃取；有機相減壓蒸干后用硅膠和 RP-18正反相柱層析多次分離得到紫色固體化合物。
[0021] 本發明所涉及萘醌二聚體化合物1 _ll(C〇mp〇undl-ll)其藥材可通過市購渠道 得到。本發明制得的化合物其理化數據如下所示：
[0022]
[0023] 本發明通過下述實驗表明所述化合物具有抗菌及增效作用：
[0024] C?細菌培養及檢測
[0025]細菌培養在細胞培養室超凈臺中操作，在96孔板中進行細菌培養