專利名稱：酪磷肽鈣營養液的制作方法
技術領域：
本發明公開了一種促鈣吸收的營養液，尤其是一種酪磷肽鈣的營養液，其屬于含肽類的食品技術領域。
目前市場上銷售的大量補鈣營養品或藥品，大多是以鈣素加V-D的制劑，其療效有限，而且長期使用V-D，在臨床上發現V-D中毒病例已不在少數。V-D介導鈣吸收是舉世公認的促鈣吸收利用的因子，從V-D藥理學看V-D的效應主要集中在體內十二指腸及小腸上部腸道內主動吸收鈣離子，而在小腸下部PH值7.8弱堿性條件下，V-D促鈣吸收作用無或不明顯。然而小腸下部較長的腸道內又是鈣吸收的主要場所，其占體內鈣吸收閾值的70～80％，其鈣吸收機理是依賴腸道內鈣離子濃度梯度差來完成的。在該部位腸道區內呈弱堿性，很容易形成不溶性鈣鹽，這樣就限制了鈣的吸收。有資料證明，人體從飲食中攝取的鈣，其吸收率僅在21-26％。要提高鈣的吸收率，必須阻斷腸道內鈣與磷酸結合形成的不溶性磷酸鈣。然而目前市場上銷售的各種補鈣制品幾乎忽視了體內小腸下部腸道內鈣吸收的主要區域。在該區域V-D不起作用，因此目前的補鈣制品，其補鈣量是盲目的。
本發明的目的是要解決上述補鈣制品的弊端，提供一種不必使用V-D，而既有補鈣功能，又有促鈣吸收功能的雙功能的營養液食品，該食品的營養液能在體內小腸下部腸道區內阻礙不溶性磷酸鈣形成，保持增加腸道內可溶性鈣離子濃度梯度差，以促進鈣的吸收，其促鈣吸收能力要達到40％以上。提供的酪磷肽鈣(以下簡稱CPP-Ca)營養液及其制法要安全，無毒付作用，其中CPP-Ca的制備工藝要有較高的提取收率。
本發明的任務是有以下技術方案完成的，研制了一種酪磷肽鈣營養液，該營養液是由以下組合混配而成的組合物，組分 重量比(份)去離子水 100可溶性鈣鹽(以鈣元素計)0.005～0.5CPP-Ca0.005～0.025甜味劑 0.5～15酸味劑 0.1～0.15
穩定劑 0.01～0.2V-C0.1～0.5防腐劑 適量香味劑 適量以上組分中肽(CPP)∶鈣＝1∶(1～20)，經分批混合溶解，過濾，紫外線滅菌，高壓均質，稀釋定容，灌裝，制成瓶裝產品，該產品呈透明的乳白色膠體溶液。
本酪磷肽鈣營養液，所述的可溶性鈣鹽，其可以是乳酸鈣，葡萄糖酸鈣，泛酸鈣，醋酸鈣，氯化鈣，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養液，所述的CPP-Ca其是由25個氨基酸組成的肽鏈，其分子量4400，其氨基酸序列結構為Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，該肽鏈內含四個Serp(磷酸絲氨酸)，該Serp上含有四個磷酸殘基，其具有生物活性，該殘基可與鈣絡合形成絡合鈣鹽-CPP-Ca，該CPP-Ca產品外觀呈乳白色粉末。
本酪磷肽鈣營養液，所述的CPP-Ca的制備工藝過程是(a)、將酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸餾水中，在調PH值7～9，均質工作壓力8～15MPa高壓均質成糊狀基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，調PH值3～6，在25～65℃溫浴下1～6小時，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加溫90℃保溫5分鐘，滅活胰酶；(d)、分離酶解液在6000～10000p.r.m下，離心5～20分鐘，得取上清液；(e)、上清液過液在-4～4℃下，靜置12～14小時，除去未水解大分子；(f)、按上清液體積量投入CaCL2，按CaCL2料量20～40％(W/V)，充分攪拌反應2～5小時；(g)、按反應液體積∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入無水乙醇，凝聚生成乳白色絮狀物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分離CPP-Ca，高速離心在6000～10000p.r.m10～30分鐘；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥獲得純品CPP-Ca，粉碎包裝備用。
本酪磷肽鈣營養液，所述的甜味劑，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖漿，甜菊甙，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養液，所述的酸味劑，其可以是檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養液，所述的穩定劑，其可以是黃原膠，瓜爾豆膠，阿拉伯膠，西黃耆膠，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養液，所述的防腐劑，其可以是山梨酸，蘋果酸鈉。
本酪磷肽鈣營養液，所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠蘿香精，水蜜桃香精。
本酪磷肽鈣營養液的制造方法如下該營養液的組分按下列步驟配制(一)、先將按配方稱量的穩定劑加1/5配方量的甜味劑，干粉混合攪拌均勻，再投入化膠罐加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(二)、將按配方稱量的可溶性鈣鹽投入調配罐中，加去離子水，加溫50～60℃，充分溶解；(三)、將按配方稱量的CPP-Ca，酸味劑，防腐劑，依次投入另一調配罐中，加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(四)、將余下4/5配方量的甜味劑投入化糖罐中，加去離子水在50～60℃溫度下，攪拌充分溶解，再經過濾器投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶解液，經管道紫外線滅菌后泵入中配罐中，再加入適量香味劑，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液泵入高壓均質機，在8-25MPa下均質物料；(七)、將均質的濃配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分沖洗上述各罐和均質機，洗水江入稀配罐，加去離子水定容，待裝瓶備用；
(八)、稀釋定容的營養液，再經管道紫外線滅菌后，灌裝入瓶，再經巴氏滅菌，檢驗合格后制成瓶裝CPP-Ca營養液。
本發明的營養液，其優點在于成功地開發了CPP-Ca鹽作為食品添加劑制成口服營養液，能順利地維持體內的可溶性鈣量的吸收，經實驗測定正常人體表現消化鈣吸收率達46％，達到促進鈣吸收的效果。該營養液經急性毒理實驗，微核實驗，Ames試驗，精子畸形實驗，細菌總數和大腸菌群實驗，這五項實驗證明無任何毒付作用，食用安全可靠。該營養液所含的CPP-Ca是一種具有生物活性的物質，其極易被腸道吸收，經同位素示蹤證實CPP-Ca可被吸收入體內并沉積于骨骼之中。由于CPP-Ca存在于小腸腸道下部，可以有效地阻止腸道內不溶性鈣鹽的形成，這樣就增加了腸道內鈣離子濃度，從而提高了鈣的擴散吸收能力，而此時腸道內并無V-D作用存在，達到了不使用V-D而補鈣的功能。
本發明所采取的CPP-Ca的提取制備方法，由于采用在弱堿性條件下PH7-9下均質酪蛋白溶液，通過高壓短時間的充分均質，使酪蛋白分子充分分散于溶液中，達到充分與胰蛋白酶接觸環境，從而使酶解反應進行得完全迅速，以提高CPP肽鏈切斷率。采用高速離心分離與低溫過濾靜置沉淀后的上清液加入氯化鈣，攪拌充分反應，使Serp上的磷酸殘基絡合形成CPP-Ca鹽。該肽鏈上的鈣鹽具有生物活性。再經無水乙醇以1∶(1-2.3)體積比，凝聚提取CPP-Ca，使提取收率接近了理論提取率15％，達到了14.5％的好收率。
本發明的實施例如下本發明的保護范圍不僅限于實施例中。
本發明的營養液，其中生物活性物質CPP-Ca的制備，如表1所列數據
表1CPP-Ca的制備實例
本發明的營養液具體實施配方，如表2所列配方實例表2CPP-Ca營養液的配方實例(單位kg)
<p>本發明的CPP-Ca營養液實際生產過程是以每批次生產2500L營養液為例。
(一)、先取2.5kg黃原膠與25kg蔗糖，干粉混合均勻，投入化膠罐中，加去離子水200l，加熱50℃±5℃攪拌溶解至半透明狀膠體溶液備用；(二)、取38.75kg乳酸鈣投入調配罐，加去離子水150l，并加熱50℃±5℃充分溶解后備用；(三)、取CPP-Ca 0.25kg，檸檬酸3.75kg、V-C2.5kg，苯甲酸鈉1.25kg，山梨酸0.5kg，依次投入另一調配罐中，加去離水200l，在50℃±5℃溫度下攪拌充分溶解備用；(四)、將余下的100kg蔗糖投入化糖罐中，加去離子水100l，在50℃±5℃下攪拌充分溶解，再將該糖溶液泵入雙聯過濾器過濾后投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶液分別經管道紫外線滅菌后，泵入中配罐中，再在該罐中加入1l草莓香精，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液650l泵入高壓均質機，在25MPa下，將濃配液均質完全；(七)、用1000l去離子水充分沖洗上述各罐和均質機，洗水匯入稀配罐，再加去離子水定容2500l，待裝瓶備用；(八)、將2500l稀釋的營養液，經管道紫外線滅菌后，入灌裝機灌裝入瓶，再經巴氏滅菌，檢驗合格后制成瓶裝CPP-Ca營養液。
制成的CPP-Ca營養液，經人體消化吸收實驗，其實驗報告如下CPP-Ca人體消化吸收試驗總結報告I一、實驗對象先取學院在校學生，年齡18～22歲，健康狀態良好，30名作為實驗對象，隨機分成二組，分別為實驗組及對照組。
二、實驗期限共分二期，食物適應期二天，實驗期二天，在實驗期內收集成食物、糞便，待檢測。
三、實驗食物按全價食物制訂出整個實驗期內食譜，固定就餐內容及量，實驗對象將食物全部食盡。實驗期內，將每餐留出一分作分析檢測。其中，實驗期中午飯、晚飯實驗組服葡萄糖酸鈣400mg和表1實例2制備的CPP-Ca10mg，對照組服葡萄糖酸鈣400mg，不服CPP-Ca。
四、糞便采集以活性碳標記物分別在收集糞便前及后內服，收采實驗期糞便，稱總重，拌勻，取出部分檢測，計算排出Ca總量。
五、檢測分析及數據處理檢測方法按高錳酸鉀滴定法檢測，檢測時用質控樣品GBW-08551豬肝粉同時測定，測得數據。經統計學處理，算出人體Ca的表現消化吸收率。六.實驗結果
七、結論本實驗結果，實驗組(服用10mgCPP-Ca組)Ca的消化吸收率為40.54±6.56％，對照組(未服CPP-Ca組)Ca的消化吸收率為29.13±12.75％。二組的表現消化吸收率差異有極顯著意義。
CPP-Ca消化吸收率試驗報告II一、實驗對象選取某學院在校學生，年齡22-24歲，健康男子12名為實驗對象，隨機分成二組，分別為實驗組和對照組。
二、實驗期限
共分二期，食物適應期二天，實驗期二天，在實驗期內收集好食物、糞便。
三、實驗食物按全價食物制訂出整個實驗期內食譜，固定就餐內容，實驗對象將食物全部食盡。實驗期內，將每餐留出一分作分析檢測。每日早餐實驗組服用表1實例5制備的CPP-Ca和含Ca飲料，對照組服含Ca飲料。
四、糞便采集以活性碳標記物內服，收集實驗期糞便，稱總重，拌勻，取出部分檢測，計算排出Ca總量。
五、成分分析及數據處理每個樣品做2個平行樣，按高錳酸鉀滴定法檢測，經統計學處理，算出Ca的表現消化吸收率。六、實驗結果
七、結論由本實驗結果，可以說明，服用CPP-Ca組Ca的消化吸收率43.126±2.190高于不服CPP-Ca組25.372±11.933％，差異有顯著性。
權利要求
1.一種酪磷肽鈣營養液，其特征在于該營養液是由以下組分混配而成的組合物，組分重量比(份)去離子水100可溶性鈣鹽(以鈣元素計) 0.005～0.5CPP-Ca 0.005～0.025甜味劑 0.5～15酸味劑 0.1～0.15穩定劑 0.01～0.2V-C 0.1～0.5防腐劑適量香味劑適量以上組分中肽(CPP)∶鈣＝1∶(1～20)，經分批混合溶解，過濾，紫外線滅菌，高壓均質，稀釋定容，灌裝，制成瓶裝產品，該產品呈透明的乳白色膠體溶液。
2.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的可溶性鈣鹽，其可以是乳酸鈣，葡萄糖酸鈣，泛酸鈣，醋酸鈣，氯化鈣，其中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的CPP-Ca其是由25個氨基酸組成的肽鏈，其分子量4400，其氨基酸序列結構為Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，該肽鏈內含四個Serp(磷酸絲氨酸)，該Serp上含有四個磷酸殘基，其具有生物活性，該殘基可與鈣絡合形成絡合鈣鹽-CPP-Ca，該CPP-Ca產品外觀呈乳白色粉末。
4.根據權利要求3所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的CPP-Ca的制備工藝過程是(a)、將酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸餾水中，在調PH值7～9，均質工作壓力8～15MPa，條件高壓均質成糊狀基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，調PH值3～6，在25～65℃溫浴下1～6小時，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加溫90℃保溫5分鐘，滅活胰酶；(d)、分離酶解液在6000～10000p.r.m下，離心5～20分鐘，得取上清液；(e)、上清液過夜在-4～4℃下，靜置12～14小時，除去未水解大分子；(f)、按上清液體積量投入CacL2，投CacL2料量20～40％(W/V)，充分攪拌反應2～5小時；(g)、按反應液體積∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入無水乙醇，凝聚生成乳白色絮狀物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分離CPP-Ca，高速離心在6000～10000p.r.m10～30分鐘；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥獲得純品CPP-Ca，粉碎包裝備用。
5.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的甜味劑，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖漿，甜菊甙，其中的一種或幾種。
6.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的酸味劑，其可以是檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，其中的一種或幾種。
7.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的穩定劑，其可以是黃原膠，瓜爾豆膠，阿拉伯膠，西黃耆膠，其中的一種或幾種。
8.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的防腐劑，其可以是山梨酸，蘋果酸鈉。
9.根據權利要求1所述酪磷肽鈣營養液，其特征在于所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠蘿香精，水蜜桃香精。
10.根據權利要求1所述的酪磷肽鈣營養液的制造方法，其特征在于該營養液的組分按下列步驟配制(一)、先將按配方稱量的穩定劑加1/5配方量的甜味劑，干粉混合攪拌均勻，再投入化膠罐加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(二)、將按配方稱量的可溶性鈣鹽投入調配罐中，加去離子水，加溫50～60℃，充分溶解；(三)、將按配方稱量的CPP-Ca，酸味劑，防腐劑，依次投入另一調配罐中，加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(四)、將余下4/5配方量的甜味劑投入化糖罐中，加去離子水在50～60℃溫度下，攪拌充分溶解，再經過濾器投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶解液，經管道紫外線滅菌后泵入中配罐中，再加入適量香味劑，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液泵入高壓均質機，在8-25MPa下均質物料；(七)、將均質的濃配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分沖洗上述各罐和均質機，洗水泵入稀配罐，加去離子水定容，待裝瓶備用；(八)、稀釋定容的營養液，再經管道紫外線滅菌后，灌裝入瓶，再經巴氏滅菌，檢驗合格后制成瓶裝CPP-Ca營養液。
全文摘要
本發明公開了一種酪磷肽鈣營養液，該食品主要含有酪磷肽鈣，可溶性鈣鹽以及其它甜味劑，酸味劑，穩定劑和抗氧化劑。其中肽∶鈣比為1∶(1～20)，采用高科技提取純化工藝，從酪蛋白中提取酪磷肽，再經加鈣制取具有生物活性的酪磷肽鈣，以提高人體腸道區內鈣離子擴散吸收作用，達到鈣的表現消化吸收率46％以上。該營養液的保健功能是補充鈣元素，促進鈣吸收，而不必使用V-D。
文檔編號A61K38/16GK1162489SQ9710269
公開日1997年10月22日 申請日期1997年2月25日 優先權日1997年2月25日
發明者宋漢梁, 王仁元, 張恒生, 張心明, 丁玉芳, 牛立新 申請人:青島蓋寶特保健品有限公司