專利名稱：：一種用于阿爾茨海默氏癥的中藥組合物及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及中藥組合物及其制備方法，具體涉及一種治療阿爾茨海默氏病的中藥組合物及其制備方法。背景支持隨著世界人口老齡化程度的不斷加深，老年性癡呆已成為繼腫瘤、心臟病、腦卒中之后引起老年人死亡的第四大疾病。由于此病影響患者的認知功能、記憶功能、語言功能、視空間功能、社會生活能力、個人生活自理能力和情感人格等，給社會和患者的家庭帶來很大負擔。現廣泛應用的阿爾茨海默氏病(Alzheimer'sdisease,AD)的治療藥物以化學藥物為主，如多奈哌齊、他克林等，然而上市的化學藥物多數具有較大的副作用，耐受性差，且多數不能阻止AD發展進程，也無法恢復患者己經失去的認知功能，只能延緩患者認知功能減退的速度。此外，AD是多因素復雜性疾病，任何一種作用于單靶位的藥物都難取得滿意的結果，因此發揮中醫藥特色，采用多靶點治療，利用中藥復方對AD多個病理環節起作用將會是較為理想的治療手段。雖然在中藥治療阿爾茨海默氏癥方面人們已經做了很多的探索，并且有欣喜的成果，但是都是限于湯藥的使用，目前國內外尚無治療AD的中藥復方制劑上市。
發明內容本發明的目的在于根據中醫"補腎益髓、安神開竅、健脾益氣、化痰逐瘀"的辨證論治理論組方，以人參寧祌益智為君，地黃菟絲子滋補肝腎，遠志啟腎水上達于心，使心腎交通為臣，石菖蒲開心竅，五味子安心神，川芎通心瘀，地骨皮清心火并制約人參、川芎之"溫燥"共為佐藥。全方邪正兼顧，標本同治，共奏健腦益智強記之功。同時，對各位藥材在提取后通過現代科學技術進行精制，混合制備出中成藥，以提供一種質量穩定、療效確切、安全廉價的治療阿爾茨海默氏病的中藥組合物，及其制備方法。本發明在保證原有方劑的顯著療效的基礎上，通過使用現代科學技術對藥材進行精制，既保留了有明顯作用的活性成分，又可適當的摒棄藥材中多余的無效成分，降低患者對藥物的攝入量，提高藥物的服用方便性，提高了患者長期服用的依從性。本發明所提出的用于治療阿爾茨海默氏病的中藥組合物，其特征在于該制劑由人參、五味子、遠志、川芎、菟絲子、地黃、石菖蒲和地骨皮的提取物為活性成分與藥用輔料組成，并且按含活性成分為0.01%-99.99%與含藥用輔料為99.99%-0.01%的任意配比制成100%的組成。本發明所述制劑為硬膠囊劑、軟膠囊、片劑及顆粒劑中的任意一種。該組合物用于預防和治療阿爾茨海默氏病以及其他以健忘為主癥狀的疾病，也可用于提高記憶力。本發明中，獲得的提取物的生藥配比為人參五味子遠志川芎菟絲子地黃石菖蒲地骨皮=0.1-5:1-10:1-10:0.1-5:5-15:5-15:1-10:1-10。經試驗優選比例為人參五味子遠志川芎菟絲子地黃石菖蒲地骨皮=3:5:5:3:10:10:5:5。藥材可以是其生藥或其炮制品。本發明所述的人參提取物為人參水提物或醇提物或提取后過柱精制物；五味子提取物為五味子水提物或醇提物或提取后過柱精制物；遠志提取物為遠志水提物或醇提物或提取后過柱精制物；川芎提取物為川芎水提物或醇提物或提取后過柱精制物；地黃提取物為地黃水提或醇提物或提取后過柱精制物；石菖蒲、菟絲子和地骨皮提取物為石菖蒲、菟絲子、地骨皮的水提物或水提醇沉提取物與石菖蒲揮發油提取物的組合物。本發明所述人參提取物的制備可以是但不限于如下方法中的任意一種1.將人參藥材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次，每次2-4h,濃縮干燥得人參水提取物。2.將人參藥材粉碎后，加入5-15倍量的40。/。-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。回收乙醇，濃縮干燥得人參醇提取物。3.將人參藥材粉碎后，加入5-15倍量水或40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。濃縮去除W機試劑，上于大孔樹脂柱，水洗脫雜質，10%-100°/。的乙醇洗脫，流速l-5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥得人參過柱精制物。本發明所述五味子提取物的制備可以是但不限于如下方法中的任意一種1.將五味子藥材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次，每次2-4h，濃縮干燥得五味子水提取物。2.將五味子藥材粉碎后，加入5-15倍量的40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。回收乙醇，濃縮干燥得五味子醇提取物。3.將五味子藥材粉碎后，加入5-15倍量水或40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。濃縮去除有機試劑，上于大孔樹脂柱，水洗脫雜質，10%-100%的乙醇洗脫，流速l-5BV/h,收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥得五味子過柱精制物。本發明所述遠志提取物的制備可以是但不限于如下方法中的任意一種1.將遠志藥材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次，每次2-4h,濃縮千燥得遠志水提取物。2.將遠志藥材粉碎后，加入5-15倍量的40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。回收乙醇，濃縮干燥得遠志醇提取物。3.將遠志藥材粉碎后，加入5-15倍量水或40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。濃縮去除有機試劑，上于大孔樹脂柱，水及10%-30%乙醇洗脫雜質，50%-100%的乙醇洗脫，流速l-5BV/h,收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥得遠志過柱精制物。本發明所述川芎提取物的制備可以是但不限于如下方法中的任意一種-1.將川芎藥材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次，每次2-4h，濃縮干燥得川芎水提取物。2.將川芎藥材粉碎后，加入5-15倍量的40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。回收乙醇，濃縮干燥得川芎醇提取物。3.將川芎藥材粉碎后，加入5-15倍量水或40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。濃縮去除有機試劑，上于大孔樹脂柱，水洗脫雜質，10%-100%的乙醇洗脫，流速l-5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥得川芎過柱精制物。本發明所述地黃提取物的制備可以是但不限于如下方法中的任意一種1.將地黃藥材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次，每次2-4h，濃縮干燥得地黃水提取物。2.將地黃藥材粉碎后，加入5-15倍量的40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。回收乙醇，濃縮干燥得地黃醇提取物。3.將地黃藥材粉碎后，加入5-15倍量水或40%-95%乙醇，回流提取2-5次，每次2-4h。濃縮去除有機試劑，上于大孔樹脂柱，水洗脫雜質，10%-100%的乙醇洗脫，流速l-5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥得地黃過柱精制物。本發明所述菟絲子、石菖蒲、地骨皮提取物的制備可以是但不限于如下方法1.石菖蒲藥材中加5-10倍量水浸泡0.5-2h，置于揮發油提取器中提取4-10h,保存揮發油。將水提液過濾，濾液和藥渣分別保存備用。2.將菟絲子和地骨皮藥材混合后加5-10倍量的水，煎煮提取l-3h，過濾后濾液和藥渣分別保存備用。3.將保存的藥渣合并，加入5-10倍量的水，煎煮提取2次，每次l-3h，過濾，合并濾液。4.合并所有濾液，減壓回收溶劑，使藥液比重在1.00-1.40之間，緩慢加入乙醇，使終濃度為30%-75%,過濾，濾液回收溶劑，減壓干燥得到提取物。本發明所述大孔樹脂型號可以是.-DlOl，D130,DA201，X5，AB-8，HPD隱IOO,WLD國3，HPD-300。現代藥學研究證明，人參總皂苷提取物、遠志總皂苷提取物以及五味子總木脂素提取物在抑制AchE、提高乙酰膽堿及5-羥色胺水平、抑制A(3的形成或淀粉樣斑塊形成以及保護神5經元免受A|3損傷等方面有明顯作用，而川芎、石菖蒲、菟絲子、地黃以及地骨皮的化學成分也都有調節神經遞質水平保護神經細胞的左右，在治療老年癡呆方面有著顯著療效。因此,本方多成分多靶點治療，可能顯著優于已經上市的化學藥物，成為中成藥治療AD的突破點。同時，我們在保持原有方劑組成的基礎上，對有明確藥理作用的三味藥的有效成分進行提取精制，然后與其他藥材的粗提物按照科學的君臣佐使之配比混合制備出中成藥，既能保證原有方劑的顯著療效，又可以適當的摒棄藥材中多余的無效成分，降低患者對藥物的攝入量，提高了本品服用的方便性，從而提高了患者長期服用的依從性。本品按照現代化醫藥要求遵守嚴格的規范標準，安全、有效、穩定、質量可控、服用方便，是具有現代劑型的新一代中藥，符合并達到國際主流市場標準和中藥現代化的要求。本發明的藥效學研究如下1.讀書膠囊對東莨菪堿所致記憶障礙的影響小鼠60只，？3各半，體重19.4i0.8g，按性別體重分層隨機分為6組，第l、2組分別給蒸餾水，其他組分別給讀書膠囊5、10、20g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃，體積均為20ml/kg，每天l次，共7天。第6天給藥1小時后用Y型電迷路法訓練動物，末次給藥同時除蒸餾水正常對照組腹腔注射5ml/kg生理鹽水外，其余各組動物均腹腔注射東莨菪堿5mg/kg，體積均為5ml/kg，1小時后用Y型電迷路同法測試，記錄10次測試正確次數。表l.讀書膠囊對東莨菪堿所致記憶障礙的影響(f±SD，n=10)藥物(g/kg)訓練次數測試正確次數蒸餾水(正常)20ml11.1±1.77.5±0.7模型組(東莨菪堿5mg/kg)蒸餾水(模型)20ml12.3±1.0+4.1±2.9+++讀書膠囊511.2±1.7*4.3±2.6*1011.0±1.2*4.9士2.2*2010.3±1.3*7.5±1.6***阿尼西坦0.510.5±1.4*7.3±1.6***注與蒸餾水正常比較+/>>0.05;++十/><0.01;與蒸餾水模型組比較叩>0.05;**<0.01。2.讀書膠囊對利血平所致記憶障礙的影響小鼠50只，？c各半，體重19.5士0.9g，按性別體重分層隨機分成5組，第l、2組給蒸餾水，其他組分別給讀書膠囊5、10g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃，體積均為20ml/kg，每天一次，共7天，第6天給藥1小時后用避暗法訓練小鼠，末次給藥同時除蒸餾水正常對照組外，其余各組動物均皮下注射利血平0.5mg/kg，l小時后同法測試，記錄潛伏期和5min內的錯誤次數。6表2.讀書膠囊對利血平所致記憶障礙的影響(f±SD，n=10;i<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與正常蒸餾水比較+++尸<0.01;與模型蒸餾水組比較*P>0.05;<0.053.讀書膠囊對阿撲嗎啡所致記憶障礙的影響小鼠50只，？3各半，體重19.3士0.9g，按性別體重分層隨機分成5組，第l、2組給蒸餾水，其他組分別給讀書膠囊5、20g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃，體積均為20ml/kg，每天一次，共7天，第6天給藥1小時后用避暗法訓練小鼠，末次給藥同時除蒸餾水正常對照組外，其余各組動物均皮下注射阿撲嗎啡0.5mg/kg,l小時后同法測試，記錄潛伏期和5min內的錯誤次數。表3.讀書膠囊對阿撲嗎啡所致記憶障礙的影響(^士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與正常蒸餾水比較+++尸<0.01;與模型蒸餾水組比較*P>0.05;**尸<0.054.讀書膠囊對模型小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶活性的影響小鼠喂養1周后跳臺法每批篩選60只，雌雄各半，隨機分為6組，分別為正常組、模型組、模型+多奈哌齊組、模型+讀書膠囊小劑量組、模型+讀書膠囊中劑量組、模型+讀書膠囊大劑量組。共兩批。多奈哌齊組給予多奈哌齊0.3g/kg，讀書膠囊大中小劑量組分別給予讀書膠囊50g/kg、25g/kg、12.5g/kg。以上均配制成0.5ml液體，灌胃(ig)給藥，每日一次，連續10天。正常組和模型組均灌以等量生理鹽水。末次給藥lh后，正常組腹腔注射生理鹽水10ml/kg，各模型組腹腔注射東茛菪堿3mg/kg。24h后脫臼法處死小鼠，取腦(去除小腦)置預冷的生理鹽水中漂洗，除去血跡，濾紙拭干，稱重后將腦迅速浸入冷生理鹽水中(生理鹽水體積總量為組織總量的9倍)，用玻璃勻漿器在冰浴中制成10°/。的組織勻漿，將勻漿以3000r/min離心10min，取上清，按膽堿酯酶試劑盒說明處理，用752型分光光度計測定。表4.讀書膠囊對東茛菪堿模型小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶活性的影響(3f±S)組別動物數AchE活性Oimol/ml)正常組100.73±0.17模型組101.02±0.12+多奈哌齊組100.88±0.11*小劑量組100.92±0.10中劑量組100.85±0,09**大劑量組100.78±0.12**注與正常組比較+<0.01;與模型組比較*/<0.05;**尸<0.05.讀書膠囊對AD大鼠模型腦內神經細胞的保護取SD大鼠30只，隨機分為a.假手術對照組、b.模型組、c.模型+讀書膠囊組，每組IO只。對大鼠行腦定位右半球單側注射bc組大鼠注射ApMo和鵝膏蕈氨酸(IBO)的混合液(每鼠lHL，含APMo4嗎和IB01嗎，溶于生理鹽水)a組同側注射等量無菌生理鹽水。術后第4天起c組大鼠按12.5g/kg灌胃給予讀書膠囊，ab組大鼠喂等體積生理鹽水。連續用藥30天。脫臼法處死大鼠后取出腦組織，4%多聚甲醛固定后，經浸洗、酒精梯度脫水、透明、浸蠟、包埋、切片(8pm)、脫蠟、復水等步驟后，分別取切片進行常規HE染色和NISSL染色，光鏡下觀察注射區神經細胞的形態。HE染色觀察在假手術組腦切片中，海馬結構完整，形態清晰，細胞數量豐富(x40);神經元體積較大，大多數為球形，核圓形，呈淡紫色，核仁明顯(x400)。模型組中，祌經元數量減少，胞體退化，胞核固縮深染，核小呈扁圓形或三角形，核仁不明顯，胞質較少，少量細胞出現空泡性變化(x400)。藥物組動物用藥30天后，神經元的數量較模型組明顯增多，形態也較完整(x400)。尼氏體染色觀察假手術組大腦皮層分層明顯，細胞清晰可見，細胞排列緊密且數目多，樹突和軸突結構清晰，細胞核圓形淡染，核仁染成藍色，大小清晰可見，胞漿透明，在核周區尼氏體含量豐富，突觸結構完整(x100)。模型組中海馬CA2區細胞大量缺失且皮層細胞數目明顯減少，分層不明顯(x100)，形態不完整的細胞數目較多，尼氏體溶解，核仁不明顯甚至消失，突觸結構不清晰(x400)。藥物組動物海馬結構相對較完整(x40)，細胞密度明顯增多，但有些祌經元樹突結構缺失，尼氏體較豐富，突觸可見，核仁較清晰(x400)。與模型組比較差異十分明顯。具體實施方式實施例1本實施例以生藥組成為人參、川芎各90g，遠志、五味子、石菖蒲、地骨皮各150g，8菟絲子、地黃各300g制備活性成分提取物。1.將人參粉碎后加入720ml60%乙醇，回流提取3次，2h/次。合并提取液，過濾后回收乙醇，上于DIOI大孔樹脂柱上，先用3BV水洗脫至無糖，然后用70%的乙醇洗脫，流速2.5BV/h,收集洗脫液，回收溶劑，減壓千燥。2.五味子藥材粉碎后加入1200ml80%乙醇，回流提取2次，2h/次。提取液過濾后回收溶劑，上于AB-8大孔樹脂柱上，3BV的水洗脫雜質，然后用95%的乙醇洗脫，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥。3.遠志藥材粉碎后加入1200ml的80%乙醇，回流提取2次，2h/次。合并提取液，過濾后回收乙醇，上于D101大孔樹脂柱，3BV的水和30%的乙醇洗脫雜質，最后用70%的乙醇3BV洗脫，流速3BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥。4.地黃藥材粉碎后加入1500ml70Q/。乙醇，回流提取2次，1.5h/次。提取液過濾后回收溶劑，上于D101大孔樹脂柱上，3BV的水洗脫雜質，然后用50%的乙醇洗脫，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥。5.川芎藥材粉碎后加入720ml75。/。乙醇，6(TC以下回流提取2次，2h/次。提取液過濾后回收溶劑，上于HPD-300大孔樹脂柱上，3BV的水洗脫雜質，然后用50%的乙醇洗脫，流速2.5BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥。:6.石菖蒲藥材加4000ml水浸泡lh，置于揮發油提取器中提取6h，保存揮發油。將水提液過濾，濾液和藥渣分別保存備用。7.將菟絲子和地骨皮藥材混合后加8倍量的水，煎煮提取2h，過濾后濾液和藥渣分別保存備用。8.將6、7中保存的藥渣合并，加入8倍量的水，煎煮提取2次，每次2h，過濾，合并濾液。9.合并6、7、8中的所有濾液，減壓回收溶劑，使藥液比重在1.0-1.4之間，緩慢加入乙醇，使終濃度為50%,過濾，濾液回收溶劑，減壓干燥得到浸膏I。10.將人參、五味子、遠志、地黃、川芎提取物、浸膏I與石菖蒲揮發油混合均勻。實施例2本實施例以生藥組成為人參、川芎各I50g,遠志、五味子、石菖蒲、地骨皮各250g,菟絲子、地黃各500g制備讀書膠囊。按實施例1的方法制備出活性成分提取物，加入羧甲基淀粉鈉、二氧化硅、硬脂酸鎂，混勻，制粒，裝入膠囊，即得。實施例3本實施例以生藥組成為人參、川芎各150g，遠志、五味子、石菖蒲、地骨皮各250g，菟絲子、地黃各500g制備讀書片。按實施例1的方法制備出活性成分提取物，加入羧甲基淀粉鈉，混勻，制粒，然后加入二氧化硅、硬脂酸鎂，壓片即得。權利要求1.一種中藥組合物，活性成分由人參、地骨皮、地黃、遠志、菖蒲、川芎和五味子的提取物組成。2.如權利要求1所述的中藥組合物，其特征為所述組合物給藥劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑和丸中的任意一種。3.如權利要求1和2所述的中藥組合物，其特征在于獲得的提取物的生藥配比為人參五味子遠志川芎菟絲子地黃石菖蒲地骨皮=0.1-5:1-10:1-10:0.1-5:5-15:5-15:1-10:1-10。4.如權利要求3所述的生藥配比，優選比例為人參五味子遠志川芎菟絲子地黃石菖蒲地骨皮=3:5:5:3:10:10:5:5。5.如權利要求1所述的中藥材可以是原生藥或其炮制品。6.如權利要求1和2所述的組合物，其特征在于所述的人參提取物為人參水提物或醇提物或提取后過柱精制物；五味子提取物為五味子水提物或醇提物或提取后過柱精制物；遠志提取物為遠志水提物或醇提物或提取后過柱精制物；川芎提取物為川芎水提物或醇提t)或提取后過柱精制物地黃提取物為地黃水提或醇提物或提取后過柱精制物；石菖蒲、菟絲子和地骨皮提取物為石菖蒲、菟絲子、地骨皮的水提物或水提醇沉提取物與石菖蒲揮發油提取物的組合物。7.如權利要求1和2所述的組合物用于治療阿爾茨海默病。8.如權利要求1和2所述的組合物還可用于治療以健忘為主癥狀的其他疾病，也可用于提高記憶力。全文摘要本發明提供一種治療阿爾茨海默氏病的中藥組合物及其制備方法。組合物活性成分由人參、地骨皮、地黃、遠志、菖蒲、川芎和五味子的提取物組成，提取物制備采用大孔吸附樹脂、聚酰胺樹脂等先進技術精制純化。其劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑之一。該組合物用于預防和治療阿爾茨海默氏病以及其他以健忘為主癥狀的疾病；本品也可用于提高記憶力。文檔編號A61K36/88GK101502601SQ20091001972公開日2009年8月12日申請日期2009年3月19日優先權日2009年3月19日發明者董世波,陳彤彤申請人:山東省醫藥工業研究所