專利名稱：粒細胞巨噬細胞刺激因子治療宮頸炎及宮頸糜爛的新用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及制備含有重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的外用藥物制劑在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的新用途。上述含有rhGM-CSF的外用藥物制劑上可以是外用溶液、外用軟膏劑、外用凝膠劑及外用栓劑；上述外用制劑對于治療子宮頸炎或子宮頸糜爛或子宮頸炎并發子宮頸糜爛具有良好的療效。
背景技術：
GM-CSF是活化的T細胞、B細胞、巨噬細胞、肥大細胞、內皮細胞及成纖維細胞等細胞產生并分泌的一種酸性蛋白。成熟的rhGM-CSF由127個氨基酸組成，是含144個氨基酸的蛋白前體切去17個氨基酸的信號肽后所得的蛋白質，相對分子量為147000Da，生物活性不受糖基化的影響。
近年來，由于應用基因工程技術可以大量地生產出rhGM-CSF從而促進了對rhGM-CSF的研究并擴大了其臨床應用，它是眾多細胞因子中最為臨床研究者所熟悉、且已正式投放市場的一種產品。GM-CSF最基本作用是刺激粒系造學祖細胞向粒細胞、巨噬細胞增殖分化，并逐漸成熟為具有吞噬功能的細胞。然而其臨床應用并非如此單一，而是非常廣泛，并涉及到很多領域。
目前，rhGM-CSF的臨床應用現狀主要包括以下幾個方面1、rhGM-CSF在腫瘤性疾病治療中的應用(1)實體腫瘤性疾病臨床上，多數腫瘤化療藥物隨劑量增加會增加對骨髓造血功能的毒性作用，導致中型粒細胞減少，增加感染機會。研究者證明在化療后加用GM-CSF，則可縮短中性粒細胞減少的時間，降低感染率；同時，GM-CSF在腫瘤治療方面可以誘導并增強外周血單核-巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷活性。
(2)白血病GM-CSF有促使白細胞祖細胞更多地進入細胞周期的作用，可縮短化療患者中性粒細胞減少期的持續時間，增加化療藥物對白血病細胞的殺滅作用，減少發熱和感染并發癥。
(3)再生障礙性貧血在再生障礙性貧血治療中使用GM-CSF，可是病人感染率降低50％左右。
2、GM-CSF在骨髓移植中的應用GM-CSF能加速造血功能恢復，明顯加速WBC、PMN的恢復，降低感染率、減少抗生素輸注次數而縮短住院時間；同時，還可通過應用rhGM-CSF等細胞因子來調節和促進正常造血干細胞的生長。
3、GM-CSF在抗感染治療中的作用由于GM-CSF有刺激粒系造學祖細胞向粒細胞、巨噬細胞增殖分化，并逐漸成熟為具有吞噬功能細胞的功能，因此臨床上可以協同治療感染性疾病；另外，在艾滋病患者的菌血癥及感染擴散過程中(分枝桿菌侵入到單核巨噬細胞內)，使用GM-CS能夠激活被感染了的巨噬細胞，進而抑制或殺滅細胞內的分枝桿菌，可協同抗生素治療效果。
基于GM-CSF大量的基礎及臨床研究結果，GM-CSF在下述幾方面將具有良好的臨床應用前景1、GM-CSF有促進傷口愈合的作用動物實驗表明，GM-CSF能夠誘導纖維母細胞增殖以及典型肌原細胞的形成；活化中性粒細胞和單核/巨噬細胞、促進內皮細胞有絲分裂和遷移、促進角化細胞的增殖并調節纖維母細胞的表達。因此，在促進傷口愈合過程中起著非常重要的作用。
2、根據GM-CSF對細胞周期與化療周期中的作用特點應用本細胞因子。
利用GM-CSF對造血系統各個生長發育水平細胞均有作用這一特點，在各個化療周期中選擇合適時間，聯合應用GM-CSF，則可大大減少化療毒性而增強化療療效。
3、GM-CSF的免疫增效作用眾多實驗表明，GM-CSF是一種非常有效的免疫佐劑，它可通過全身作用、區域性應用、局部應用、融合蛋白及體外活化抗原表達細胞等五種方式來增強機體對疫苗(抗原)的免疫應答，增強機體對疾病的免疫抵抗能力。
子宮頸炎(cervicitis)及子宮頸糜爛是是育齡婦女的多發病，約有20％或更多的婦女患有此病。子宮頸糜爛發病原因及病理過程比較復雜。其發病常與自身雌激素代謝水平、妊娠期及妊娠后、分娩、流產、服用避孕藥、精神神經因素、細菌(鏈球菌、葡萄球菌及腸球菌)及病毒感染、性生活過于頻繁、機械性損傷等密切相關。病理改變常見子宮頸非特殊性炎癥、子宮頸內膜上皮下有淋巴細胞、漿細胞及單核細胞浸潤、子宮頸柱狀上皮及腺上皮伴有不同程度鱗狀上皮化生等。
目前，臨床上對于子宮頸炎及子宮頸糜爛的治療，在排除早期宮頸癌之后，多以局部治療為主。對糜爛面積小或炎癥浸潤較淺的病例可用腐蝕性藥物(硝酸銀、鉻酸鉀及中藥)局部敷用；糜爛面積大或炎癥浸潤較深的病例，可用冷凍、激光、或電熨療法；急性子宮頸炎時一般口服廣譜抗生素(如頭孢類抗生素加滅滴靈)治療。無論是物理療法或是局部用藥治療子宮頸炎及子宮頸糜爛，其病理修復過程都是使糜爛面柱狀上皮壞死、結痂、脫落后，被新生的鱗狀上皮覆蓋。上述臨床治療方法的局限性在于藥物都不能深達糜爛面下方的炎性組織，因此患者遠期效果均不滿意，即使有近期療效，不久又可復發。
巨噬細胞在清除壞死組織中起著關鍵作用。GM-CSF可趨化血液循環中的單核細胞進入組織成為巨噬細胞，同時可活化炎癥局部聚集的巨噬細胞和中性粒細胞。活化的巨噬細胞和中性粒細胞可產生和分泌膠原酶、彈性蛋白酶、纖溶酶激活劑等，清除各類壞死組織、細胞碎片、細菌裂解物等；另外，內皮細胞和上皮細胞表面含有GM-CSF受體，GM-CSF可直接促進內皮細胞遷移、增生及活化，使新的鱗狀上皮覆蓋創面，最終使得疾病得到徹底治療。
由于GM-CSF理化性質的特殊性(如易于在腸道中分解等)，目前在臨床治療中均以注射液方式進行使用，迄今為止，還未見GM-CSF外用制劑用于治療子宮頸炎和子宮頸糜爛的研究工作及相關文獻及專利報道。

發明內容
本發明的目的在于提供rhGM-CSF外用制劑的新用途，即在制藥中的新應用。
實際上，本發明涉及rhGM-CSF外用制劑(外用溶液、凝膠劑、軟膏劑及栓劑等)作為制備治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛中的應用。
涉及rhGM-CSF外用制劑(外用溶液、凝膠劑、軟膏劑及栓劑等)作為制備治療子宮頸炎中的應用。
涉及rhGM-CSF外用制劑(外用溶液、凝膠劑、軟膏劑及栓劑等)作為制備治療子宮頸糜爛中的應用。
涉及rhGM-CSF外用制劑(外用溶液、凝膠劑、軟膏劑及栓劑等)作為制備治療子宮頸炎并發子宮頸糜爛中的應用。
為了更好地理解本發明的實質，下面用rhGM-CSF外用制劑在治療子宮頸炎及子宮頸糜爛的藥效學試驗及結果來說明其在制藥領域中的新用途。
1、外用rhGM-CSF溶液、軟膏劑、凝膠劑及栓劑的制備如下外用rhGM-CSF溶液將0.5％白蛋白加入rhGM-CSF原液，加無菌注射用水定容，制成不同濃度的外用rhGM-CSF溶液。
外用rhGM-CSF軟膏劑在稱量過的容器內加入3％明膠、甘油40％、0.15％山梨酸溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，溫度在40℃時加入0.5％白蛋白及rhGM-CSF(2.5μg rhGM-CSF/g基質)，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口，即成rhGM-CSF外用軟膏劑。
外用rhGM-CSF外用凝膠劑在稱量過的容器內加入3％明膠、甘油40％、0.15％山梨酸溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，溫度在40℃時加入0.5％白蛋白及rhGM-CSF(3.0μg rhGM-CSF/g基質)，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口，即成rhGM-CSF外用凝膠劑。
外用rhGM-CSF栓劑在稱量過的容器內加入20％明膠、40％甘油、0.15％山梨酸溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，溫度在40℃時加入0.5％白蛋白及rhGM-CSF(3.5μg rhGM-CSF/g基質)，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝，即成rhGM-CSF外用栓劑。
2、rhGM-CSF外用藥物對宮頸炎并發宮頸糜爛的藥效學試驗rhGM-CSF是長春金賽藥業有限公司研制的已上市藥品。為確定rhGM-CSF對子宮頸炎及子宮糜爛的治療作用，本實驗在建立宮頸炎并發宮頸糜爛的動物模型基礎上，觀察了rhGM-CSF外用制劑對動物子宮頸炎及子宮頸糜爛的影響。采用四周分別連續給藥的方式，停藥后處死動物，取出子宮進行病理組織學分析。結果顯示給藥四周后，模型對照組和空白溶劑組的病理過程無明顯改變；而rhGM-CSF溶液、rhGM-CSF軟膏、rhGM-CSF凝膠劑及rhGM-CSF栓劑治療組的病理過程得到了明顯改善，證明了rhGM-CSF外用制劑對子宮頸炎及子宮頸糜爛具有顯著療效，發現了rhGM-CSF在制藥領域中將其用于治療子宮頸炎及子宮頸糜爛的新用途。
實驗材料藥品rhGM-CSF原料為長春金賽藥業有限責任公司已上市產品。
動物雌性昆明小鼠(18～20g)，購于吉林大學白求恩醫學部動物部。
動物模型動物隨機分兩組，一組用機械性刺激致炎，另一組用藥物(大腸桿菌)致炎，兩周后處死動物，進行病理組織學檢驗，以確定宮頸炎模型的建立。
實驗方法(1)動物分組隨機分成七組，每組30只。分別為a.正常動物組
b.宮頸炎及宮頸糜爛動物模型對照組c.rhGM-CSF溶液治療組d.rhGM-CSF軟膏劑治療組e.rhGM-CSF凝膠劑治療組f.rhGM-CSF栓劑治療組h.陽性藥對照組(2)給藥方法a.給藥周期及給藥途徑4周陰道給藥b.方法受試藥rhGM-CSF溶液、軟膏劑、凝膠劑及栓劑均按20g鼠經陰道給藥0.1g(含rhGM-CSF1.6μg)，給藥4周后處死動物，取出動物子宮，立即放入福爾馬林固定液中固定，做石蠟切片，HE染色，在顯微鏡下做病理組織學檢查。
(3)觀察指標a.藥物對動物體重的變化。
b.觀察給藥4周后藥物對宮頸炎及宮頸糜爛病理組織學的改變。
實驗結果(1)動物體重各組動物在陰道給藥一周、二周、三周或四周后，體重均無顯著性差異。結果詳見表1。
表1.動物陰道給藥一周后體重變化


結果顯示各組平均體重與對照組比較均無顯著性差異表2.動物陰道給藥兩周后體重變化


結果顯示各組平均體重與對照組比較均無顯著性差異表3.動物陰道給藥三周后體重變化


結果顯示各組平均體重與對照組比較均無顯著性差異表4.動物陰道給藥四周后體重變化

結果顯示各組平均體重與對照組比較均無顯著性差異上述四個表格中的實驗結果表明各組平均體重與對照組比較均無顯著性差異；各給藥組與溶劑組平均體重比較均無顯著性差異，t檢驗P值均大于0.05；各組間平均體重比較均無顯著性差異，t檢驗P值均大于0.05。證明各種rhGM-CSF外用制劑在上述劑量下，不會對動物產生明顯的毒副作用，從而證明了上述外用制劑的安全性。
(2)病理組織學結果①正常動物宮頸病理組織學結果鱗狀上皮層及柱狀上皮層大致正常，間質及腺體內膜正常。結果見附圖1。
②宮頸炎及宮頸糜爛動物模型組病理組織學結果炎癥反應明顯，炎細胞浸潤較多，部分柱狀上皮脫失缺損，結構不清，間質血管充血張，炎細胞大量浸潤，腺體擴張，其間有少量炎細胞浸潤，腺腔內分泌物較多，病理組織學結果顯示宮頸有炎癥及糜爛樣改變。結果見附圖2。
③給藥4周后藥物對宮頸炎及宮頸糜爛動物模型病理組織學的改變a.正常動物宮頸病理組織學結果鱗狀上皮層及柱狀上皮層大致正常，有鱗狀上皮老化，間質及腺體內膜正常。
結果見附圖3。
b.宮頸炎動物模型組病理組織學結果鱗狀上皮層變性壞死，大部分脫落缺失，鱗狀上皮層變薄，有炎性細胞浸潤，柱狀上皮層變性壞死，部分上皮缺失，柱狀上皮及間質有大量炎性細胞浸潤，上皮層變薄，結構不清，上皮無明顯增生增厚，間質血管擴張充血，出血較多，腺體擴張，分泌增生有明顯的異形結構，其間有較多炎性細胞浸潤。結果見附圖4。
c.rhGM-CSF溶液組動物宮頸病理組織學結果藥物對動物宮頸病理組織學結果顯示炎癥損傷減輕。結果見附圖5。
d.rhGM-CSF軟膏組動物宮頸病理組織學結果炎癥反應減輕粘膜損傷少。結果見附圖6。
e.rhGM-CSF凝膠劑組動物宮頸病理組織學結果有少量炎性細胞浸潤，炎癥損傷減輕。結果見附圖7。
f.rhGM-CSF栓劑凝膠劑組動物宮頸病理組織學結果鱗狀上皮炎性反應顯著減弱，上皮層增生增厚，有角化層，柱狀上皮結構清晰，無明顯炎細胞浸潤，無變性壞死，增生增厚并不明顯，間質水腫，無明顯增生及炎癥反應，腺體大致正常。結果見附圖8。
g.陽性藥物組動物宮頸病理組織學結果鱗狀上皮層增生增厚，炎性反應不明顯，柱狀上皮部分缺生，但增生明顯，有輕微炎細胞浸潤，間質可見炎細胞浸潤，血管充血擴張，組織增生水腫，腺體增生明顯，數量增多，出現明顯異形結構，管腔擴張，分泌物較多。結果見附圖9。
實驗結論(1)動物給藥4周，動物模型組和空白溶劑對照組的宮頸炎及宮頸糜爛病理組織學無明顯變化。
(2)動物給藥4周，陽性藥物(聚甲酚磺醛陰道栓)對動物宮頸炎及宮頸糜爛具有一定療效。
(3)動物給藥4周，GM-CSF溶液對動物宮頸炎及宮頸糜爛具有顯著療效。
(4)動物給藥4周，GM-CSF軟膏對動物宮頸炎及宮頸糜爛具有顯著療效。
(5)動物給藥4周，GM-CSF凝膠對動物宮頸炎及宮頸糜爛具有顯著療效。
(6)動物給藥4周，GM-CSF栓劑對動物宮頸炎及宮頸糜爛具有顯著療效。
具體實施例方式
下面將描述本發明的幾個實施例，但本發明的內容完全不局限于此。
rhGM-CSF溶液實施例1將羥基乙脂1克、甘油1克、山梨酸0.026克在70±5℃溶解，加入0.5％人血白蛋白，加入rhGM-CSF原液2000μg，加無菌注射用水定容至100克。冷卻，灌裝。
實施例2將尼泊金甲脂0.01克、甘油0.5克、山梨酸0.026克、月桂氮卓酮2.6克在70±5℃溶解，加入0.8％人血白蛋白，加入rhGM-CSF原液600μg，加無菌注射用水定容至100克。灌裝。
實施例3將尼泊金甲脂0.01克、右旋糖苷1克、山梨酸0.015克在70±5℃溶解，加入1％人血白蛋白加入到rhGM-CSF原液420μg，加無菌注射用水定容至100克。灌裝。
實施例4將尼泊金乙脂0.01克、甘露醇1克、山梨酸0.015克、月桂氮卓酮2.6克在70±5℃溶解，加入0.5％人血白蛋白，加入rhGM-CSF原液150μg，加無菌注射用水定容至100克。灌裝。
rhGM-CSF凝膠劑實施例1將卡波姆10克在70±5℃熔融，加入吐溫-80 2克、甘油50克、氫氧化鈉4克、羥基乙脂1克，補足水量，于115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 1mg，加無菌水至100克。混合均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例2將卡波姆934 1克在70±5℃熔融，加入吐溫-80 0.2克、甘油1克、三乙醇胺2克、尼泊金甲脂0.01克，補足水量，于115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白0.5％及rhGM-CSF 500μg，加無菌水至100克。混合均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例3將羧甲基纖維素鈉1克在70±5℃熔融，加入硫酸軟骨素0.05克、乙二胺四乙酸0.025克、焦亞硫酸鈉0.05克，補足水量，于115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白0.3％及rhGM-CSF 2000μg，加無菌水至100克。混合均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例4將羧甲基纖維素鈉1克在70±5℃熔融，加入甘露醇0.05克、硫酸軟骨素0.05克，補足水量，于115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 700μg，加無菌水至100克。混合均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例5將羧甲基纖維素鈉1克在70±5℃熔融，加入硫酸軟骨素0.05克、右旋糖苷1克，補足水量，于115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白2％及rhGM-CSF 350μg，加無菌水至100克。混合均勻后罐裝，放涼，封口。
rhGM-CSF軟膏劑實施例1將十八醇50克在70±5℃熔融，加入月桂氮卓酮2.6克、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)10克、十二烷基硫酸鈉(SDS)0.1克、山梨酸0.026克溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白0.5％及rhGM-CSF 800μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例2將卡波姆941 1克在70±5℃熔融，加入十二烷基硫酸鈉(SDS)1克、蓖麻油25毫升、三乙醇胺2毫升、甘油10毫升，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 1000μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例3將十八醇60克在70±5℃熔融，加入月桂氮卓酮2.6克、吐溫-802克、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)10克、甘油5克、尼泊金甲脂0.026克，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白3％及rhGM-CSF 200μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口。
實施例4將聚甘油硬脂酸脂V 15克在70±5℃熔融，加入石蠟0.8克、十二烷基硫酸鈉1克、甘油10克、尼泊金乙脂0.01克，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF100μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后罐裝，放涼，封口。
rhGM-CSF栓劑實施例1將明膠10克、甘油10克在70±5℃熔融，加入葡萄糖0.7克、硼酸0.7克、苯甲酸鈉0.2克，混合均勻，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 800μg，加無菌水至50克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例2將明膠10克、甘油10克在70±5℃熔融，加入甘露醇0.7克、山梨酸0.025克、苯甲酸鈉0.2克，混合均勻，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 500μg，加無菌水至50克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例3將明膠10克、甘油10克在70±5℃熔融，加入聚乙二醇400 3.3克、山梨酸0.025克，混合均勻，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF 100μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例4將明膠20克、甘油40克在70±5℃熔融，加入山梨酸0.15克，混合均勻，溶漲過夜，次日補足水量(按40％)，115℃、滅菌20分鐘，將溫度降至40±2℃，加入人血白蛋白2％及rhGM-CSF1000μg，加無菌水至100克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例5將脂肪酸甘油酯在70±5℃熔融，將山梨酸0.026克、甘油1克加至熔融的基質中，混合均勻，115℃、滅菌20分鐘，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白1％及rhGM-CSF溶液100μg，加水定容至100克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例6將半合成甘油酯在70±5℃熔融，將尼伯金乙酯0.01克、甘油1克、羧甲基纖維素納0.01克加至熔融的基質中，混合均勻，115℃、滅菌20分鐘，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白0.5％及rhGM-CSF溶液1000μg，加水定容至100克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
實施例7將脂溶性基質半合成甘油酯在70±5℃熔融，將苯酚0.1克、甘油1克、羥基乙酯0.1克加至熔融的基質中，混合均勻，115℃、滅菌20分鐘，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白2％及rhGM-CSF溶液750μg，加水定容至100克，攪拌均勻后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。


圖1.正常動物宮頸病理組織學結果磷狀上皮層及柱狀上皮層大致正常，間質及腺體內膜正常。
圖2.宮頸炎動物模型組宮頸病理組織學結果炎癥反應明顯，炎細胞浸潤較多，部分柱狀上皮脫失缺損，結構不清，間質血管充血。
圖3.正常動物宮頸病理組織學結果磷狀上皮層及柱狀上皮層正常，有磷狀上皮老化，間質及腺體內膜正常。
圖4.宮頸炎動物模型組病理組織學結果炎性細胞浸潤較多，柱狀上皮層變性壞死，柱狀上皮及間質有大量炎性細胞浸潤。
圖5.GM-CSF溶液組動物宮頸病理組織學結果炎癥損傷減輕。
圖6.GM-CSF軟膏組動物宮頸病理組織學結果炎癥反應減輕，粘膜損傷少。
圖7.GM-CSF凝膠劑組動物宮頸病理組織學結果有少量炎性細胞浸潤，炎癥損傷減輕。
圖8.GM-CSF栓劑組動物宮頸病理組織學結果無明顯炎細胞浸潤，無變性壞死，增生增厚并不明顯，腺體正常。
圖9.給藥四周后，陽性藥物組動物宮頸病理組織學結果鱗狀上皮層增生增厚，炎性反應不明顯，柱狀上皮部分缺生，有輕微炎細胞浸潤。
權利要求
1.重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)在制備治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛外用制劑的新用途。
2.如權利要求1所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。
3.如權利要求2所述的rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液，其組分包括rhGM-CSF、溶劑、pH調節劑、穩定劑、抑菌劑、保濕劑、抗氧化劑、和/或促吸收劑。
4.如權利要求2及3所述的陰道溶液，以重量％計外用制劑具有下列組成rhGM-CSF(0.0001-0.1％)、溶劑(60-90％)、pH調節劑(0.5-5％)、穩定劑(0.1-3％)、抑菌劑(0.1-5％)、抗氧化劑(0.01-2％)、保濕劑(0～30％)、和/或促吸收劑(0.01-3％)。
5.如權利要求2所述的rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道軟膏劑，其組分包括rhGM-CSF、軟膏基質、pH調節劑、穩定劑、抑菌劑、抗氧化劑、保濕劑、和/或促吸收劑。
6.如權利要求2及5所述的陰道軟膏劑，以重量％計外用制劑具有下列組成比例rhGM-CSF(0.0001-0.1％)、軟膏基質(60-90％)、pH調節劑(0.5-5％)、穩定劑(0.1-3％)、抑菌劑(0.1-5％)、抗氧化劑(0.01-2％)、保濕劑(0.5～30％)，和/或促吸受劑(0.01-3％)。
7.如權利要求2所述的rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道凝膠劑，其組分包括rhGM-CSF、凝膠基質、pH調節劑、穩定劑、抑菌劑、抗氧化劑、保濕劑，和/或促吸受劑。
8.如權利要求2及7所述的陰道凝膠劑，以重量％計外用制劑具有下列組成比例rhGM-CSF(0.0001-0.1％)、凝膠基質(30-90％)、pH調節劑(0.5-5％)、穩定劑(0.1-3％)、抑菌劑(0.1-5％)、抗氧化劑(0.01-2％)、保濕劑(0.5～30％)，和/或促吸受劑(0.01-3％)。
9.如權利要求2所述的rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道栓劑，其組分包括rhGM-CSF、栓劑基質、pH調節劑、穩定劑、抑菌劑、抗氧化劑、和/或促吸受劑。
10.如權利要求2及7所述的陰道栓劑，以重量％計外用制劑具有下列組成比例rhGM-CSF(0.0001-0.1％)、栓劑基質(60-90％)、pH調節劑(0.5-5％)、穩定劑(0.1-3％)、抑菌劑(0.1-5％)、抗氧化劑(0.01-2％)、和/或促吸受劑(0.01-3％)。
11.如權利要求2所述，rhGM-CSF在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑中藥物的有效濃度范圍為0.0001％-0.1％；給藥方法為每天給藥一次，連續給藥28天。
12.如權利要求2所述，rhGM-CSF在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑中藥物有效濃度的最佳范圍為0.0005％-0.05％；給藥方法為每天給藥一次，連續給藥28天。
13.如權利要求2所述，rhGM-CSF外用制劑的輔料包括溶劑、基質、pH調節劑、穩定劑、抑菌劑、抗氧化劑、防腐劑、保濕劑和/或促吸收劑。
14.如權利要求3及4所述的陰道溶液中其中的溶劑成分可以是無菌注射用水、生理鹽水、生理環境緩沖液等，或其他適宜物質。
15.如權利要求5及6所述的陰道軟膏劑制劑中軟膏基質成分可以是天然甘油酯類豚脂、植物油、氫化植物油、硫酸化氫化蓖麻油；烴類凡士林、石蠟、地蠟、液體石蠟；類脂羊毛脂、羊毛醇、蜂蠟、白蜂蠟、鯨蠟、膽固醇；水包油型基質一價皂、鯨蠟醇、硬脂醇、十二烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉、甘油單硬脂酸酯、聚甘油硬脂酸酯、吐溫-(20、21、40、60、61、65、80、81、85)聚氧乙烯(40)硬脂酸酯；水溶性基質可以是甘油明膠、淀粉甘油、海藻酸鈉、聚乙二醇、甲基纖維素、羥甲基纖維素鈉，或其他適宜物質。
16.如權利要求7及8所述的陰道凝膠劑制劑中凝膠基質成分可以是水溶性基質包括甘油、、丙二醇(10～85％)、卡波姆(0.5～3％)、海藻酸鹽、明膠、西黃耆膠、透明質酸鈉、聚維酮、泊洛沙姆、殼聚糖、聚乙烯醇、聚維酮、甲基纖維素、羥丙甲纖維素、羥乙纖維素、羥丙纖維素、羧甲基纖維素、黃原膠、殼聚糖、磷脂，或其他適宜物質；油性基質可以是液狀石蠟、聚氧乙烯、脂肪、膠體硅、鋁皂、鋅皂，或其他適宜物質。
17.如權利要求9及10所述的陰道栓劑制劑中栓劑基質成分可以是油性基質包括可可脂、香果脂、半合成椰油酯、混合脂肪酸甘油酯、Witepsol、Massa.Estarinum、硬脂酸丙二醇酯，或其他適宜物質；水溶性基質包括甘油明膠、聚乙二醇(0.1～2％)、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯、吐溫61、吐溫60、卡波姆(0.5～3％)，或其他適宜物質。
18.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的蛋白保護劑可以是甘露醇、甘油、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、人血白蛋白(0.01～2％)、環糊精，或其他適宜物質。
19.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的促吸受劑可以是月桂氮酮、甲酰二甲胺、二甲基亞砜、煙酸乙酯、丙二醇、尿素、阿斯巴甜、曲拉酮(Triton X-114，)、維生素E琥珀酸酯、新橘皮苷二氫查耳酮、橘皮苷、桉葉油醇、N-甲基-2-吡洛酮、肉豆蔻酸異丙酯，或其他適宜物質。
20.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的保濕劑可以是甘油、丙二醇，或其他適宜物質。
21.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的抗氧劑可以是亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、偏重亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、甲醛合次硫酸氫鈉，或其他適宜物質。
22.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的抑菌劑可以是山梨酸、苯酚、甲酚、氯甲酚、丙酸、苯甲酸、脫氫醋酸、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、乙烯吡洛烷酮碘，或其他適宜物質。
23.如權利要求2所述，rhGM-CSF藥物在治療子宮頸炎和/或子宮頸糜爛的外用藥物制劑可以是陰道溶液、陰道凝膠劑、陰道軟膏劑或陰道栓劑等。其中外用制劑中所使用的pH調節劑可以是鹽酸、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、枸櫞酸、醋酸、醋酸鈉、馬來酸、馬來酸鈉、枸櫞酸鈉、硼酸、硼酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉，組氨酸，或其他適宜物質。
24.如權利要求2所述的軟膏劑制劑，其制備方法是將基質卡泊姆在70±5℃熔融，將山梨酸、甘油等分別加至熔融的卡泊姆基質中，混合均勻，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白及rhGM-CSF溶液，冷卻，罐裝。
25.按照權利要求2所述的凝膠劑制劑，其制備方法是將基質卡波姆在70±5℃熔融，將山梨酸、甘油等分別加至熔融的基質中，混合均勻，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白及rhGM-CSF溶液，冷卻，罐裝。
26.按照權利要求2所述的栓劑制劑，其制備方法是將基質甘油明膠在70±5℃熔融，將山梨酸、甘油等分別加至熔融的基質中，混合均勻，待溫度降至40±2℃時，加入人血白蛋白及rhGM-CSF溶液加入到上述基質中，最后灌模，冷卻，成型，脫模，包裝。
27.如權利要求2所述的rhGM-CSF外用制劑，其特征在于通過陰道給藥用于治療子宮頸炎。
28.如權利要求2所述的rhGM-CSF外用制劑，其特征在于通過陰道給藥用于治療子宮頸糜爛。
29.如權利要求2所述的外用制劑，其特征在于通過陰道給藥用于治療子宮頸炎并發子宮頸糜爛。
全文摘要
本發明涉及重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(rhGM－CSF)在制備外用藥物的新用途。制備的該外用藥物特別是在治療子宮頸炎和子宮頸糜爛上的新用途。
文檔編號A61P15/02GK1899605SQ20051008586
公開日2007年1月24日 申請日期2005年7月19日 優先權日2005年7月19日
發明者金磊, 裴瑾, 趙立欣, 王班, 段明華 申請人:長春金賽藥業有限責任公司