專利名稱：降血糖活性的白術糖復合物、生產方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種從中藥材中提取得糖復合物、生產方法和用途，特別是涉及白術糖復合物、生產方法和用途。
本發明的制備方法是將生藥白術浸泡獲得白術水提液，有機溶劑沉淀、沉淀用水溶解，上清液經透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗多糖，粗多糖經柱層析分離獲得白術糖復合物。具體來說，將干燥后的生藥白術粉碎或切片，其目的是為提高浸出率。推薦常溫、常壓浸泡，尤其推薦0～30℃浸泡，浸泡液和水提液的pH值推薦保持在5.0-8.0。
其中生藥白術與浸泡水重量比推薦白術∶水＝1∶5-15，尤其推薦用10-12倍重量或更多的水，推薦浸泡12-72小時，尤其推薦24-72小時，所用水推薦為無離子水。
過濾，濾液經或不經濃縮，用有機溶劑沉淀后離心，離心所得沉淀用水溶解，推薦用1-5倍重量的水溶解。
離心，上清液透析或膜分離，透析時間推薦為24-72小時，透析膜、透析袋其孔徑推薦截留分子量在1000以下，尤其推薦截留分子量為500～1000。
濃縮干燥獲得粗品白術糖復合物，最好采用低溫真空濃縮或冷凍干燥，以便保持白術糖復合物的生物活性。其中干燥或減壓濃縮溫度推薦低于60℃進行。例如在30～60℃干燥或濃縮，壓強推薦控制在0.08～0.1MPa。
所得粗品白術糖復合物再經柱層析進一步分離純化，層析填料推薦為DEAE-纖維素，洗脫液推薦為0.25M NaHCO3溶液，收集糖吸收峰，經膜分離后冷凍干燥獲得精品白術糖復合物。
前述的用有機溶劑沉淀，所述有機溶劑推薦與水互溶的有機溶劑，水提液與有機溶劑的體積比推薦為水提液有機溶劑＝1∶2～6。與水互溶的有機溶劑推薦低碳鏈的醇或酮，例如C1～C6的醇或酮等；尤其推薦乙醇，例如用2～6倍體積的75％～95％的乙醇；沉淀時間推薦為12-72小時，尤其推薦24-72小時。
本發明的白術糖復合物，具有降血糖功能，其可用于制備治療糖尿病的藥品和降血糖的保健品。
本發明首次從白術中提取得到白術糖復合物。本發明的提取分離方法簡便，產率高和適于工業化生產。該多糖適用于口服用藥，具有顯著降低血糖作用。


圖1是氣相色譜測得的單糖組成的標準圖譜，作為對照使用，圖中數據如表1所示表1

圖2是氣相色譜測得的本分明的樣品的單糖組成，圖中數據如表2所示表2

具體實施方式
實施例1白術根莖粉碎后，稱取200g，加入去離子水2000ml，室溫浸泡48小時，其間多次攪拌利于有效成分浸出。浸泡液先用四層紗布過濾，然后濾液離心，轉速4500r/min，離心時間8min。上清液減壓濃縮，溫度控制范圍50℃-55℃，濃縮體積至600ml。在600ml濃縮液中，加入95％乙醇3600ml進行醇沉，醇沉時間為24小時。醇沉結束后，輕輕傾出上清液，沉淀部分離心分離，轉速4500r/min，離心時間8min。取出沉淀物加入500ml去離子水溶解，溶解后同樣離心除去不溶物。上清液用截留分子量為1000的膜進行透析分離，可采用流動的自來水，透析時間48小時。透析后減壓濃縮，溫度控制范圍50℃-55℃，濃縮體積至200ml，然后冷凍干燥，即獲得白術糖復合物。產率為1.0％左右。元素分析C＝40.57％，H＝6.42％，N＝2.69％；糖含量41.44％；糖醛酸含量28.35％；蛋白質含量21.95％。
實施例2將生藥白術1公斤洗凈干燥，粉碎，用10升無離子水室溫浸泡24小時，過濾。殘渣用5升無離子水繼續浸泡24小時，過濾，合并濾液，60℃減壓濃縮至2-4升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇終濃度為80％，醇沉24小時。離心，沉淀用2.5升水溶解，離心，無離子水透析48-72小時。60℃減壓濃縮后冷凍干燥，即獲得白術糖復合物12克。元素分析C＝37.99％，H＝6.20％，N＝2.19％；糖含量52.7％；糖醛酸含量15.9％；蛋白質含量16.7％。
實施例3將生藥白術500g洗凈干燥，粉碎，用5升無離子水室溫浸泡24小時，過濾。殘渣用3升無離子水繼續浸泡24小時，過濾，合并濾液，60℃減壓濃縮至2升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇終濃度為85％，醇沉24小時。離心，沉淀用1升水溶解，離心，無離子水透析48-72小時。60℃減壓濃縮后冷凍干燥，即獲得白術糖復合物6.2克。元素分析C＝45.02％，H＝6.01％，N＝1.05％；糖含量58.0％；糖醛酸含量28.1％；蛋白質含量11.0％。
實施例4白術粗多糖500mg溶于10ml蒸餾水中，離心(4500r/min，8min)。取上清液上玻璃柱(3.0cm*30cm)，先用蒸餾水洗脫，流速為0.6ml/min，洗脫10小時后改為0.25M NaHCO3溶液洗脫，同樣速度洗脫12小時，收集糖峰，膜分離后冷凍干燥獲得白術糖復合物。得率20～25％。元素分析C＝37.62％，H＝6.59％，N＝1.36％；糖含量42.6％；糖醛酸含量32.3％；蛋白質含量11.4％。
實施例5白術多糖降血糖藥效學實驗結果第0天第5天 第10天體重 血糖 體重血糖 體重 血糖對照組200.6±3.14.18±0.45 233.6±6.7 4.54±0.60 262.0±7.83.91±0.54模型組191.4±7.222.53±2.49216.8±13.3 21.39±2.86 229.2±21.4 19.62±2.33低劑量192.4±6.621.89±2.71222.5±14.1 18.03±8.46*238.5±20.7 14.51±5.54***中劑量193.8±7.720.01±3.48227.3±10.4 16.12±6.70*235.3±18.2 13.18±5.83***高劑量190.9±9.920.36±2.45220.9±17.1 17.60±4.98 228.0±32.1 13.53±6.02**注與給藥前比較，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001.
給藥第4天，低劑量組2只大鼠血糖恢復正常，中劑量組2只大鼠血糖恢復正常，高劑量組1只大鼠血糖恢復正常。給藥第10天，中劑量組3只大鼠血糖恢復正常，高劑量組3只大鼠血糖恢復正常。
權利要求
1.一種具有降血糖活性的白術糖復合物，其特征如下元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白質含量10％～25％。
2.如權利要求1所述的白術糖復合物，其特征是其單糖組成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。
3.如權利要求1所述的白術糖復合物的生產方法，其特征是包括將中藥材用水浸泡、有機溶劑沉淀、沉淀用水溶解，經透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗品白術糖復合物，粗品經柱層析分離獲得精品白術糖復合物。
4.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是生藥白術切片或粉碎。
5.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是所用水為無離子水。
6.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是有機溶劑是與水互溶的有機溶劑，水提液與有機溶劑的體積比為水提液∶有機溶劑＝1∶2～6。
7.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是所述的有機溶劑是與水互溶的有機溶劑。
8.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是透析用透析膜、透析袋及超濾膜，其孔徑控制在分子量1000以下。
9.如權利要求3所述生產白術糖復合物方法，其特征是透析后的上清液干燥或濃縮溫度等于或低于60℃進行。
10.如權利要求1所述生產白術糖復合物的用途，其特征是用于制備治療糖尿病的藥品和降血糖的保健品。
全文摘要
本發明涉及一種從中藥材白術中提取的糖復合物、其生產方法和用途。本發明采用浸泡獲得白術水提液，有機溶劑沉淀、沉淀用水溶解，上清液經透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗品，粗品經柱層析分離獲得精品白術糖復合物。本發明方法工藝簡單、產率高，適宜工業化生產。該白術糖元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白質含量10％～25％；單糖組成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。該多糖無毒副作用，具有明顯的降血糖功能作用。
文檔編號A61K31/7004GK1398630SQ02136740
公開日2003年2月26日 申請日期2002年8月30日 優先權日2002年8月30日
發明者田庚元, 單俊杰 申請人:中國科學院上海有機化學研究所, 浙江京新藥業股份有限公司