一種定量聯合檢測心肌梗塞的試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型屬于聯合快速檢測試劑領域，具體為一種心肌梗塞定量聯合檢測的試劑盒。
【背景技術】
[0002]肌紅蛋白(Myo)是一種氧結合血紅素蛋白，主要分布于心肌和骨骼肌組織。在急性心肌損傷時，肌紅蛋白最先被釋放入血液中，在臨床癥狀出現約2-3小時后，血中肌紅蛋白可超出正常上限，9-12小時達到峰值，24-36小時后恢復正常。測定血清肌紅蛋白可作為急性心肌梗塞(AMI)診斷早期最靈敏的指標。但其特異性差，在骨骼肌損傷、創傷、腎功能衰竭等疾病時，都可導致其升高。Myo陽性雖不能確診AMI，但可作為早期排除AMI的重要指標。
[0003]心肌酶，心肌損傷或者壞塞后某些酶有不同程度的增高，其中CK-MB特異性最高。CK-MB主要存在于心肌中，一般在心肌損傷后3?8小時升高，9?30小時達高峰，48?72小時恢復正常。且其高峰出現時間與預后程度有一定關系，高峰出現早者預后較好。在20世紀90年代CK-MB被認為是診斷AMI的金標準。
[0004]心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)是心臟中富含的一種新型小胞質蛋白。它具有高度心臟特異性(也就是主要在心臟組織中表達)。心肌缺血性損傷出現后，h-FABP可以早在胸痛發作后1-3小時在血液中被發現，6-8小時達到峰值，血漿水平在24-30小時內恢復正常。h-FABP的特征與肌紅蛋白的相似，但是由于h-FABP更加具有心臟特異性，而且由于其生物學特性它被認為是一種對心肌損傷更準確的診斷指標。
[0005]當心肌細胞膜的完整性受破壞，cTnl先從胞漿內釋放，因此，血清中cTnl水平很快升高，而結合的cTnl由于相對分子質量大，從心肌細胞結構蛋白緩慢持續的釋放，心肌損傷后，2?8h釋放入血，在12?24h達最高峰，且高水平往往維持7?1d。由于cTnl較早出現在血中，且持續時間長，敏感性和特異性強，對于心肌損傷的診斷很有價值。cTnl被美國和歐洲心臟病協會一致評為是診斷急性心肌梗塞的高特異性和高敏感性的確診標志物。
[0006]目前臨床使用的主要是單一檢測指標或者三聯檢測試劑盒，其中包括肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶、肌鈣蛋白的單獨檢測或者聯合檢測，這三項檢測存在一個明顯的缺陷，Myo能夠在心肌梗塞發生的早期l_6h表現出高靈敏性，但其特異性差，cTnl特異性強，但6h以內的靈敏度不高，而加入對h-FABP的檢測能夠提高6h內對心肌損傷診斷的準確性，同時本實用新型是定量檢測肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶、心型脂肪酸結合蛋白、肌鈣蛋白(I)的水平，能夠更準確、更全面、更快速地判斷心肌損傷的程度。

【發明內容】

[0007]本實用新型的目的在于開發一種能夠用于急性心梗診斷的定量聯合檢測試劑盒，達到準確、全面、快速地診斷心急梗塞的發展階段。
[0008]為實現上述目的，本實用新型采用以下技術方案:
[0009]—種定量聯合檢測心肌梗死的試劑盒，包含檢測卡和讀數儀，其中檢測卡由上下兩塊塑料卡殼和置于內部的2條膠體金試紙條組成。并且2條膠體金試紙條的結構相同，如附圖1所示。膠體金試紙條由樣品墊(I)，金標結合墊(2)，NC膜(3)，底板(4)，吸水紙(5)組成，所述金標結合墊、NC膜、吸水紙以水平方向順序相接固定在底板下方，金標結合墊、NC膜、吸水紙相鄰部分各有l_2mm的重疊區域，上述金標結合墊上粘有樣品墊。上塑料卡殼上設有2個加樣孔(9)和2個觀察窗(10)，并且下塑料殼上設有用來固定2條膠體金試紙條的2個定位卡槽。
[0010]所述2個定位卡槽其中一個卡槽放置肌紅蛋白(Myo)和心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)膠體金試紙條，另一個卡槽放置肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌鈣蛋白I(cTnl)膠體金試紙條，兩條膠體金試紙條平行排列置于卡殼中，位置如附圖2所示。
[0011]所述的2條膠體金試紙條分別有對應的加樣孔和觀察窗，并且在上塑料卡殼檢測線位置處標有各檢測項目的名稱。
[0012]所述肌紅蛋白(Myo)和心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)膠體金試紙條的NC膜上從樣品墊方向到吸水紙方向，依次設有檢測線1(7)、檢測線2(6)和質控線(8)。所述檢測線1(7)包被的是肌紅蛋白抗體，檢測線2(6)包被的是心型脂肪酸結合蛋白，質控線(8)包被的是羊抗鼠二抗;金標結合墊上標記有與檢測線配對的肌紅蛋白(Myo)抗體和心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)抗體。
[0013]所述肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌鈣蛋白I(cTnl)膠體金試紙條的NC膜的檢測線I
(7)上包被肌酸激酶同工酶(CK-MB)抗體，檢測線2(6)上包被肌鈣蛋白I(cTnl)抗體，質控線
(8)包被羊抗鼠二抗;金標結合墊上標記有與檢測線配對的肌酸激酶同工酶(CK-MB)抗體和肌I丐蛋白I(CTnI)抗體。
[0014]本實用新型的有益效果為:
[0015]1.多項檢測。本實用新型檢測試劑盒可同時定量檢測肌紅蛋白(Myo)、心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnl)四項指標的水平，能夠更準確更全面地掌握心肌梗塞的發展情況。
[0016]2.定性定量均適用。本實用新型試劑盒可以定性判斷四項指標的陰陽性結果，也可結合讀數儀準確測定四項指標的水平，應用范圍廣，使用更方便。
[0017]3.操作簡便、檢測快速。本實用新型檢測試劑盒適用于測定血清和血漿，點樣后20分鐘內判讀結果，操作簡便，快捷。
[0018]【附圖說明】:
[0019]圖1為本實用新型檢測卡中膠體金試紙條的側面結構示意圖。其中I為樣品墊，2為金標結合墊，3為NC膜，4為底板，5為吸水紙，6為檢測線2，7為檢測線I，8為質控線。
[0020]圖2為本實用新型檢測卡俯視圖，9為加樣孔，10為觀察窗。
[0021]【具體實施方式】:
[0022]下面結合附圖對本實用新型的實施例作詳細說明。本實施例以本實用新型技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但具體的實施例僅用于解釋本實用新型，而不用于限制本實用新型。
[0023]本實用新型中2條膠體金試紙條分別為肌紅蛋白(Myo)、心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)膠體金試紙條和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnl)膠體金試紙條，兩條試紙條并列置于卡殼中，