一種蘇丹紅i的檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種蘇丹紅I的檢測方法，具體涉及I，8_萘二胺/Cu2+復合物作為熒光探針定量檢測蘇丹紅I的方法。
【背景技術】
[0002]隨著經濟社會的快速發展，癌癥的發病率和死亡率呈不斷上升的趨勢。蘇丹紅I(Sudan I，分子式:C16H12N2q)，是一種常用的紅色染料，它在1896年由化學家Daddi命名，是一種工業用油溶性偶氮染料，也被工業應用中稱為溶劑黃14或油溶黃R，化學名為1-苯基偶氮-2-萘酚，用于彩色蠟、油脂、汽油、溶劑和鞋油等的增色添加劑及焰火禮花的著色。
[0003]但是蘇丹紅禁止用于食品行業中，因為它被國際癌癥研究機構(IARC)列為致癌物質之一，而常見食品如番茄醬、火腿腸、辣椒醬等經常發現含有蘇丹紅添加劑，因此，快速準確檢測食品中蘇丹紅含量十分重要。
[0004]目前，蘇丹紅I的檢測方法主要采用高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜一質譜法(LC-MS)、電噴霧解析電離質譜法(DES1-MS)和等離子共振光散射法等，由于色譜方法的前處理過程復雜，檢測時間長，檢測費用高，給實際分析帶來不便。

【發明內容】

[0005]針對以上不足，本發明提供了一種蘇丹紅I的檢測方法，通過I，8_萘二胺與Cu2+螯合形成I，8_萘二胺/Cu2+復合物，焚光猝滅，當往該體系中加入蘇丹紅I時，蘇丹紅I能奪取I，8-萘二胺/Cu2+復合物中的Cu2+形成較穩定的蘇丹紅Ι/Cu2+復合物，釋放出I，8-萘二胺，從而使1，8_萘二胺的熒光回升，據此建立了蘇丹紅I的檢測方法。該方法靈敏度高、操作簡單、檢測限低。
[0006]本發明采取的技術方案為:
[0007]—種蘇丹紅I的檢測方法，通過向I，8-萘二胺/Cu2+復合物體系中加入不同濃度的蘇丹紅I水溶液，通過蘇丹紅I水溶液濃度與熒光回升比率F/Fo之間的線型關系定量檢測出蘇丹紅I的濃度；
[0008]Fo和F別為I，8_萘二胺/Cu2+復合物在440nm處的熒光強度和I，8_萘二胺/Cu2+復合物加入蘇丹紅I后在440nm后的熒光強度。
[0009]—種蘇丹紅I的檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟:
[0010]A.配置多組I，8-萘二胺/Cu2+復合溶液體系:取I，8-萘二胺水溶液與Cu2+水溶液混合，反應20?40min;
[0011 ] B.往上述溶液中依次加入ImL濃度為O?7.5 X lO^mol L—1蘇丹紅I水溶液，并加入ImL pH為6.7?7.5的PEPES緩沖溶液，最后用去離子水稀釋至10mL，混合液攪拌放置70?90min后測其熒光強度；
[0012]C.以蘇丹紅I濃度為X軸，對應的熒光回升比率F/Fo為Y軸作圖，得到蘇丹紅I濃度與熒光回升比率F/Fo之間的線性方程，根據線性方程可計算出任意熒光強度所對應的蘇丹紅I濃度；
[0013]所述I，8_萘二胺水溶液的終濃度為1X10—V)1L—1;
[0014]所述Cu2+水溶液的終濃度為3.75 X 10—6mol L—1 ；
[0015]所述蘇丹紅I水溶液的終濃度分別為0、5X10—7mol L—\ 12 X 10—7mol L—1、17 X 10一7mol r\23X10_7mol L—\28 X 10—7mol L—\34 X 10—7mol L—\40 X 10—7mol L—\46 X 10—7molL-、
[0016]所述PEPES緩沖溶液的pH優選為6.7。
[0017]所述線性方程為F = 20.9 X C+736.38且線性相關系數R2為0.9986 ； C表示蘇丹紅I的終濃度。
[0018]所述檢測方法具體包括以下步驟:
[0019]A.配置多組I，8-萘二胺/Cu2+復合溶液體系:取ImL濃度為I X 1^mol L—1的I，8_萘二胺水溶液與ImL濃度為3.75X 10—5H1l L—1的Cu2+水溶液加入到具塞比色管中，反應20min;
[0020]B.往上述溶液中依次加入ImL濃度為O?7.5X10—6H1l L—1蘇丹I水溶液，并加入ImLpH為6.7的PEPES緩沖溶液，最后用去離子水稀釋至10mL，混合液攪拌放置70min然后測其熒光強度；
[0021]C.以蘇丹紅I濃度為X軸，對應的熒光回升比率F/Fo為Y軸作圖，得到蘇丹紅I濃度與熒光回升比率F/Fo之間的線性方程F = 20.9XC+736.38且線性相關系數R2為0.9986。，根據線性方程可計算出任意熒光強度所對應的蘇丹紅I濃度；
[0022]所述蘇丹紅水溶液的終濃度分別為0、5X10—7mol L—1、12 X 10—7mol L—\l7X10—7mol r\23X10_7mol L—\28 X 10—7mol L—\34 X 10—7mol L—\40 X 10—7mol L—\46 X 10—7molL-、
[0023]上述檢測方法中，隨著蘇丹紅I濃度的增大，1，8_萘二胺/Cu2+復合體系的熒光強度逐漸增強。
[0024]所述檢測方法可以排除其它金屬離子的干擾，檢測限可達到4.35nmolL—S所述其它金屬離子包括 Ag+，Na+，Cd2+，Zn2+，Al3+，Co2Mg2+, K+，Ca2+，Ni2+和 Hg2+金屬離子。
[0025]本發明現對于現有技術，具有以下優點:
[0026]1.本方法不需要合成新材料，通過1，8-萘二胺/Cu2+復合體系構成的熒光探針實現對蘇丹紅I高靈敏型檢測，其操作簡單；
[0027]2.本發明提供了一種新型的基于熒光分光光度法檢測蘇丹紅I的方法，操作簡單方便、快速、檢測限更低。
【附圖說明】
[0028]圖1為I，8_萘二胺溶液中加入不同濃度銅離子溶液的熒光光譜圖；
[0029]圖2為Cu2+濃度對體系熒光回升效率的影響圖；
[0030]圖3為I，8_萘二胺/Cu2+復合體系中加入不同濃度蘇丹紅I溶液后的熒光光譜圖；[0031 ]圖4為蘇丹紅I濃度與I，8_萘二胺/Cu2+復合體系熒光回升比率關系圖；
[0032]圖5為pH對體系熒光回升效率的影響圖；
[0033]圖6為I，8_萘二胺在Cu2+和其他金屬離子存在時，加入蘇丹紅I的熒光回升強度圖。
【具體實施方式】
[0034]實施例1
[0035]I，8-萘二胺/Cu2+復合溶液的熒光測試
[0036]向終濃度為IX 10—6H1l L—1的I，8-萘二胺溶液中分別加入終濃度為0、I X 1θΛιο1L—S I.5 X 10—6mol ^,2.25X10^01 L—1，3.0 X 10—6mol L—S3.75X 10—6mol L—1，4X 10—6molL—1AXKT6mOl L—1J-OXKT6mol L—1，7.5 X 10—6mol L—1 的Cu2+溶液，分別測試各復合溶液體系的熒光光譜。
[0037]試驗結果如圖1所示，I，8_萘二胺溶液具有很強的熒光強度，當加入Cu2+后，I，8_萘二胺的熒光強度隨著Cu2+濃度的增加而逐漸降低，說明Cu2+對I，8_萘二胺的熒光有猝滅作用。
[0038]I，8_萘二胺與Cu2+的濃度不僅能影響體系的熒光強度，還能影響實驗的靈敏度。考慮到上述兩方面因素，實驗中選擇I，8_萘二胺的濃度為10—V)1 L—'Cu2+濃度對體系熒光回升效率的影響如圖2所示。從圖2.5中可以看出，當Cu2+的濃度為3.7 5 X I O—6mo I L—1時，體系的熒光回升效率最大。因此，實驗中選取終濃度為3.75X 10—V)1 L—1的Cu2+溶液進行蘇丹紅I的檢測實驗。
[0039]實施例2
[0040]—種蘇丹紅I的檢測方法，所述方法包括以下步驟:
[0041 ] A.配置多組I，8-萘二胺/Cu2+復合溶液體系:取ImL濃度為I X 1^mol L—1的I，8_萘二胺水溶液與ImL濃度為3.75X 10—5H1l L—1的Cu2+水溶液加入到具塞比色管中，反應20min;
[0042]B.往上述溶液中依次加入ImL濃度為O?7.5 X 10—Vol L—1蘇丹紅I水溶液，并加入ImLpH為6.7的PEPES緩沖溶液，最后用去離子水稀釋至10mL，混合液攪拌放置70min然后測其熒光強度；
[0043]所述蘇丹紅I水溶液的終濃度分別