一種準確穩定的總膽固醇檢測試劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及臨床體外檢測試劑技術領域，特別設及一種準確穩定的體外檢測總膽 固醇含量的試劑。
【背景技術】
[0002] 總膽固醇是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和，是臨床血脂分析的重要指 標，血漿膽固醇主要存在低密度脂蛋白（LDL)中，其次為高密度脂蛋白（皿L)和極低密度脂 蛋白（VLDL)，乳糜微粒（CM)中含量最少。在人體血漿中，膽固醇有兩種存在形式，即膽固醇 醋和游離膽固醇兩種，前者約占70%，后者占30%。
[0003] 血漿和組織中所含膽固醇經常處于交換狀態，其交換率因不同組織而異，由于膽 固醇不斷進、出血液，所W血漿膽固醇不僅反映膽固醇攝取與合成的情況，還反映攜帶膽固 醇的各種脂蛋白的合成速度，W及影響脂蛋白代謝的受體的情況。CH0的測定對于血脂疾 病的診斷具有重要的臨床意義，血液膽固醇的測定可用作肝臟功能、膽汁功能、腸吸收功能 和冠狀動脈疾病的診斷指標。血液膽固醇增高多見于腎病綜合癥、糖尿病、甲狀腺功能減退 等；膽固醇降低常見于貧血、肝硬化、甲亢、營養不良等。血清總膽固醇超過5. 70mmol/L可 考慮為高膽固醇血癥，高膽固醇血癥容易引起動脈粥樣硬化，造成堵塞性屯、腦血管疾病。
[0004] 總膽固醇的測定方法目前已超過200種，可分為化學試劑比色法、酶分析法、巧光 法、氣相和高效液相色譜法等五大類。由于氣相和高效液相色譜法條件高，臨床實驗室最常 用的是化學試劑法和酶法。其中化學試劑法主要采用硫磯鐵法，由于該法所用試劑有腐蝕 性，需有機溶劑抽提，并且操作步驟繁瑣。目前，酶法檢測血清或血漿中的總膽固醇被廣泛 采用。W下是酶法測定的基本原理：
在實際研究及檢測過程中，我們會發現在酶促反應的第=步，即反應（3)中，由于產物 紅紫色色素的不穩定，導致總膽固醇檢測結果不穩定，準確性差。目前，市場上流通的酶法 檢測試劑盒普遍存在該性能缺陷。
【發明內容】
[0005] 針對上述酶法總膽固醇檢測試劑盒存在的性能缺陷，本發明提供一種檢測結果穩 定，重復性好的總膽固醇檢測試劑盒。
[0006] 本發明是通過W下措施實現的： 一種穩定的總膽固醇檢測試劑，只包含一個組分，屬于單試劑，其原料含量如下：
[0007] 本發明的優點是： 本發明在原始配方的基礎上加入適量的酶保護劑海藻糖和試劑穩定劑AE0-9,使得該 試劑的檢測結果有了很好的準確性與穩定性。
【附圖說明】
[000引圖1為實施例1和實施例2的線性相關性圖。
[0009] 圖2為實施例1與實施例2穩定性對比圖。
【具體實施方式】
[0010] 下面結合實施例對本發明作進一步的說明。
[0011] 實施例1
計算；總膽固醇含量(111111〇1/〇 =(測定/min~^標準/min)XC標準。
[001引實施例2
[0013]一種穩定的總膽固醇檢測試劑準確性驗證 對同一高值血清樣本其總膽固醇的濃度約為200mgAlL該樣本用生理鹽水進行稀釋， 實施梯度如表2所示。
[0014]表 2
分別利用實施例1和實施例2試劑對各濃度梯度樣本進行檢測，結果如圖1所示，實施 例2隨稀釋濃度呈線性變化，相關系數為r=0. 9994,說明實施例2的試劑對于各個濃度的樣 本檢測結果都比較準確；對比而言，實施例1的線性相關系數為r=0. 97K0. 9900,各個濃度 的檢測結果的準確性差。
[0015]一種穩定的總膽固醇檢測試劑穩定性驗證 將實施例1、2按照常規檢測試劑盒的包裝規格進行分裝，均放置于2-8°C環境中，連續 檢測其試劑的穩定性。，分別用實施例1、實施例2的試劑對同一穩定樣本進行檢測，每月一 次，連續檢測18個月，記錄實驗結果。檢測結果如圖2所示。
[0016] 如圖2所示，兩種實施例的試劑均會隨著時間的推移穩定性有所衰弱，但實施例1 的穩定性在12個月W內，幾乎不衰減。相比而言，實施例2試劑的穩定性在第7個月開始 衰減比較顯著。說明在加入適量酶保護劑海藻糖和試劑穩定劑AEO-9后，試劑的穩定性明 顯提局。
[0017]本實驗結合常規酶法檢測總膽固醇的原理，在原始配方的基礎上，再加入適量的 酶保護劑海藻糖和試劑穩定劑AE0-9,既保護了催化物酶的活性，又穩定了最終產物，明顯 增強了試劑檢測的準確度和穩定性。
【主權項】
1. 一種準確穩定的總膽固醇檢測試劑，其特征在于，包括以下含量的組分： MOPSO 緩沖液，pH7. 0， 50mmol/L 4-氨基安替比林 0. 1-1. Ommol/L 膽固醇酯酶 1-2KU/L 膽固醇氧化酶 1-2KU/L 過氧化物酶 1-2KU/L 3, 5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉 2_5mmol/L 氯化鎂 2_5mmol/L 海藻糖 1-10 g/L 脂肪醇聚氧乙烯醚 1-10 g/L。
【專利摘要】本發明提供一種準確穩定的總膽固醇檢測試劑，包括以下含量的組分：MOPSO緩沖液，50mmol/L；安替比林，0.1-1.0mmo1/L；膽固醇酯酶，1-2KU/L；膽固醇氧化酶，1-2KU/L；過氧化物酶，1-2KU/L；3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉， 2-5mmol/L；氯化鎂，2-5mmol/L；海藻糖，1-10g/L；脂肪醇聚氧乙烯醚，1-10g/L；本發明提供的試劑的檢測結果有很好的準確性與穩定性。
【IPC分類】G01N33/92
【公開號】CN104977418
【申請號】CN201510168644
【發明人】甘宜梧, 張永英, 李靜, 趙新, 王春艷
【申請人】山東博科生物產業有限公司
【公開日】2015年10月14日
【申請日】2015年4月10日