測定氟康唑的有關物質及特征未知雜質的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，特別是涉及藥品分析方法領域。本發明旨在建立HPLC 法測定氟康挫的有關物質，并對特征未知雜質進行結構確證。本發明采用CERIL-column ODS柱（250mmX4.6mm，5ym)色譜柱；以 0.01mol/L醋酸鈉緩沖液（pH5.0)_ 甲醇（95:5) 為流動相A，乙腈-甲醇（60:40)為流動相B，梯度洗脫；流速I.OmL/min;檢測波長261nm， 柱溫30°C。本發明接著用LC-MS分析特征未知雜質，再用半制備液相色譜分離純化，通過 NMR確定結構。由此，本發明建立的HPLC有關物質分析方法具有良好的方法學驗證結果， 與中國藥典方法比較，雜質檢出能力更強；特征未知雜質為2-(2, 4-二氟苯基）-1，3-二 (1H-1，2, 4-三唑-1-基）-丁 -2-醇。已經發現，本發明建立的方法簡便、靈敏、專屬性好、 雜質檢出能力強，能有效的反應藥品質量。
【背景技術】
[0002] 氟康唑（fluconazole)，分子式C13H12F2N60，分子量 306. 27 ;化學名： a- (2, 4-二氟苯基）-a- (1H-1，2, 4-三唑-1-基甲基）-1H-1，2, 4-三唑-1-基乙醇；英文 化學名：1_(2, 4-difluorophenyl)-l-(lH-l，2, 4_triazol-l-ylmethyl)-lH-l，2, 4-Triazo le-l-ethanol;CAS號 86386-73-4。
[0003] 氟康唑是治療真菌感染的一種藥物，為廣譜抗真菌藥，對人和動物的真菌感染均 有治療作用，目前市場上有片劑、膠囊、粉針劑和注射液幾種劑型。
[0004] 氟康唑為白色或類白色結晶或結晶性粉末；無臭或微帶特異臭，味苦。該品在甲醇 中易溶，在乙醇中溶解，在二氯甲烷、水或醋酸中微溶，在乙醚中不溶。熔點為137~141°C。
[0005] 口服制劑以片劑為例，氟康唑片的適應癥包括：1.念珠菌病：用于治療口咽部和 食道念珠菌感染；播散性念珠菌病，包括腹膜炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外陰陰道炎。尚 可用于骨髓移植患者接受細胞毒類藥物或放射治療時，預防念珠菌感染的發生。2.隱球菌 病：用于治療腦膜以外的新型隱球菌病；治療隱球菌腦膜炎時，本品可作為兩性霉素B聯合 氟胞嘧啶初治后的維持治療藥物。3.球孢子菌病。4.用于接受化療、放療和免疫抑制治療 患者的預防治療。5.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和組織胞漿菌病的治療。其用 法用量為：口服；成人（1)播散性念珠菌病：首次劑量〇. 4g，以后一次0. 2g，一日1次，至少 4周，癥狀緩解后至少持續2周；（2)食道念珠菌病：首次劑量0. 2g，以后一次0.lg，一日1 次，持續至少3周，癥狀緩解后至少持續2周；根據治療反應，也可加大劑量至一次0. 4g，一 日1次；（3) 口咽部念珠菌病：首次劑量0? 2g，以后一次0?lg，一日1次，療程至少2周；（4) 念珠菌外陰陰道炎：單劑量，0. 15g。
[0006] 注射制劑以注射液為例，氟康唑的注射液適應癥是主要用于以下適應癥中病情較 重的患者：1.念珠菌病：用于治療口咽部和食道念珠菌感染；播散性念珠菌病，包括腹膜 炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外陰陰道炎。尚可用于骨髓移植患者接受細胞毒類藥物或放 射治療時，預防念珠菌感染的發生。2.隱球菌病：用于治療腦膜以外的新型隱球菌病；治療 隱球菌腦膜炎時，本品可作為兩性霉素B聯合氟胞嘧啶初治后的維持治療藥物。3.球孢子 菌病。4.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和組織胞漿菌病的治療。
[0007] 氟康唑屬吡咯類抗真菌藥。抗真菌譜較廣。口服及靜注該品對人和各種動物真菌 感染，如念珠菌感染（包括免疫正常或免疫受損的人和動物的全身性念珠菌病）、新型隱球 菌感染（包括顱內感染）、糠秕馬拉色菌、小孢子菌屬、毛癬菌屬、表皮癬菌屬、皮炎芽生菌、 粗球孢子菌（包括顱內感染）及莢膜組織胞漿菌、斐氏著色菌、卡氏枝孢霉等有效。該品的 體外抗菌活性明顯低于酮康唑，但該品的體內抗菌活性明顯高于體外作用。該品的作用機 制主要為高度選擇性干擾真菌的細胞色素P-450的活性，從而抑制真菌細胞膜上麥角固醇 的生物合成。氟康唑對真菌依賴的細胞色素P-450酶具有高度選擇性。一日服用該品0. 5g， 連續28天，已證明對男性的血漿睪丸素濃度及育齡期婦女的留體激素濃度均無影響。
[0008] 氟康唑口服吸收良好，且不受食物、抗酸藥、H2受體阻滯藥的影響。空腹口服該品 約可吸收給藥量的90%。單次口服該品100mg，平均血藥峰濃度（Cmax)為4. 5~8mg/L。 表觀分布容積（Vd)接近于體內水分總量。該品血漿蛋白結合率低（11%~12% )，在體內 廣泛分布于皮膚、水皰液、腹腔液、痰液等組織體液中，尿液及皮膚中藥物濃度約為血藥濃 度的10倍；水皰皮膚中約為2倍；唾液、痰、水皰液、指甲中與血藥濃度接近；腦膜炎癥時， 腦脊液中該品的濃度可達血藥濃度的54%~85%。該品少量在肝臟代謝。主要自腎排泄， 以原形自尿中排出給藥量的80%以上。血消除半衰期（tl/2?)為27~37小時，腎功能 減退時明顯延長。血液透析或腹膜透析可部分清除該品。
[0009] 氟康唑是三唑類的第三代抗真菌藥，也是較少的水溶性抗真菌藥之一。該品種由 輝瑞公司于1981年首先研發成功，1992年國內開始生產并用于臨床。《中國藥典》2010年 版和USP38、BP2015、EP8. 0中均已收載本品種[中國藥典2010年版二部p547 ;USP38p3509 ; BP2015p969 ;EP8. 0p2245]，據文獻報道[VaijanathG.Dongre,PravinP.Karmuse,Pradeep D.Ghugre,etal.Preparativeisolationandstructuralelucidationofimpurities influconazolebyLC/MS/MS[J].JPharmBiomedAnal, 2006, 42(3):334；Vaijanath G.Dongre,PradeepD.Ghugare,PravinP.Karmuse,etal.Isolationandstructural identificationofanimpurityinfluconazolebulkdrugsubstance[J].JPharm BiomedAnal,2007, 45(3) :422；HoudaBourichi,YounessBrik,PhilipeHubert,et al.Solid-statecharacterizationandimpuritiesdeterminationoffluconazol genericproductsmarketedinMorocco[J].JP