專利名稱：戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種抗體檢測試劑盒，具體涉及戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒。
背景技術：
戊型肝炎病毒(h印atitis E virus，戊型肝炎)是非甲非乙型急性肝炎的病原體， 主要經糞口途徑傳播，也有報道可以通過血液傳播。人對戊型肝炎普遍易感，病人發病癥狀嚴重，病死率高，青壯年戊肝病死率可達1 % 2 %，遠較其它各型肝炎高，孕婦戊肝病的死亡率可高達20%左右，給人類健康造成嚴重威脅。ELISA檢測法是目前用于檢測血清戊型肝炎抗體最常用的一種方法，其中以間接 ELISA用途最廣，現在已有商品化的試劑盒。用于檢測戊型肝炎的抗原有3種即組織培養全病毒抗原，合成肽抗原和表達抗原，目前最受關注的是表達抗原。常用的表達抗原有 0RF22的表達抗原，0RF23的表達抗原以及同時含有0RF22和0RF23編碼產物的重組表達抗原。Uchida等應用結構基因0RF22區中部的一段重組表達蛋白作為抗原的抗戊型肝炎 ELISA法檢測52例戊肝病人血清，戊型肝炎陽性率為67. 31% .Tsarve等構建了含有巴基斯坦戊型肝炎SAR255株完整戊型肝炎0RF22基因組的重組桿狀病毒63222IV22，ELISA法監測接種戊型肝炎的8種靈長類動物的血清學轉變，證實應用此法檢測戊型肝炎具有高度靈敏性和特異性。國內何志強等利用大腸桿菌表達的部分0RF22蛋白，建立的雙抗原夾心EL ISA方法，該方法與利用同一抗原的間接ELISA比較，結果符合良好，且s/co (OD/cutoff) 比值較間接法更高。但ELISA法操作復雜、檢測時間長，需要對待測樣品進行稀釋、溫育、分離、洗滌和顯色等操作，大概需要用兩個小時以上。

實用新型內容本實用新型的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一種可以快速定性檢測血清樣本中的戊型肝炎病毒IgG抗體的戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒。為了實現上述目的，本實用新型提供的技術方案為戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內設置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內設置有試紙條；所述試紙條由反應板切割而成；所述試紙條寬4mm ；所述反應板由膠板、反應膜、 鼠抗人IgG單抗金結合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應膜是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組HEV-^Vg和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；所述反應膜設置在膠板上；所述膠板上部設置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應膜；所述膠板下部依次設置有鼠抗人IgG單抗金結合物墊和樣品墊；所述鼠抗人IgG單抗金結合物墊寬0. 9cm ；所述鼠抗人IgG單抗金結合物墊的上部壓住反應膜；所述樣品墊位于鼠抗人 IgG單抗金結合物墊的下部；所述樣品墊的上部壓住鼠抗人IgG單抗金結合物墊。本實用新型的有益效果為戊型肝炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有快速、簡便、 準確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于戊型肝炎病毒IgG的檢測和控制效果明顯。

圖1為本實用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒的盒體示意圖。圖2為本實用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒的鋁箔袋示意圖。圖3為本實用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒的未切割前的反應板示意圖。圖4為本實用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒的切割后試紙條的示意圖。其中，1為膠板，2為反應膜，3為粗纖維濾紙，4為鼠抗人IgG單抗金結合物墊，5為
樣品墊。
具體實施方式
實施例1戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內設置有鋁箔袋；鋁箔袋內設置有試紙條；試紙條由反應板切割而成；試紙條寬4mm ；反應板由膠板1、反應膜2、鼠抗人IgG單抗金結合物墊4、粗纖維濾紙3和樣品墊5組成；反應膜2是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組HEV-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG 抗體包被的；反應膜2設置在膠板1上；膠板1上部設置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙3 ；粗纖維濾紙3的下部壓住反應膜2 ；膠板1下部依次設置有鼠抗人IgG單抗金結合物墊4和樣品墊5 ；鼠抗人IgG單抗金結合物墊4寬0. 9cm ；鼠抗人IgG單抗金結合物墊4的上部壓住反應膜2 ；樣品墊5位于鼠抗人IgG單抗金結合物墊4的下部；樣品墊5的上部壓住鼠抗人 IgG單抗金結合物墊4。一、生產工藝條件的確定1、反應膜包被條件的優化1. 1檢測線包被濃度和膠體金標記鼠抗人IgG稀釋比例的選擇按照上述確定好的標記條件進行標記，將其體積濃縮至原體積(原體積以膠體金體積計算)的1/10，再以不同的稀釋比例稀釋濃縮液，用稀釋液浸泡金標墊，1.5ml/條，干燥后與以不同檢測線包被濃度，0. 1 μ 1/mm的包被量包被好的戊型肝炎反應膜進行配對，檢測內控血清。實驗方案如表1，實驗結果如表2、3:表1實驗方案設計[0019]
權利要求1.戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，其特征在于盒體內設置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內設置有試紙條；所述試紙條由反應板切割而成；所述試紙條寬4mm ；所述反應板由膠板、反應膜、鼠抗人IgG單抗金結合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應膜是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組HEV-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；所述反應膜設置在膠板上；所述膠板上部設置有1. 5cm 寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應膜；所述膠板下部依次設置有鼠抗人IgG單抗金結合物墊和樣品墊；所述鼠抗人IgG單抗金結合物墊寬0. 9cm ；所述鼠抗人IgG單抗金結合物墊的上部壓住反應膜；所述樣品墊位于鼠抗人IgG單抗金結合物墊的下部；所述樣品墊的上部壓住鼠抗人IgG單抗金結合物墊。
專利摘要本實用新型公開了一種戊型肝炎病毒IgG抗體膠體金法檢測試劑盒，包括硝酸纖維素膜檢測線包被的重組抗原HEV-Ag、質控線上包被的羊抗鼠IgG抗體和金標墊上包被的由膠體金標記的鼠抗人IgG單抗，所述重組戊型肝炎病毒抗原濃度大于2mg/ml，用SDS-PAGE測定；所述羊抗鼠IgG抗體濃度大于4mg/ml；所述鼠抗人IgG單抗濃度大于2mg/ml，用SDS-PAGE測定，上樣量在10μl條件下為兩條帶。本實用新型的有益效果為戊型肝炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有快速、簡便、準確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于戊型肝炎病毒IgG的檢測和控制效果明顯。
文檔編號G01N33/531GK202196065SQ20112027511
公開日2012年4月18日 申請日期2011年7月29日 優先權日2011年7月29日
發明者李習榮 申請人:北京中檢安泰診斷科技有限公司