專利名稱：一種含有阿維菌素和毒死蜱的樣品測定前的處理方法
技術領域：
本發明屬于農藥殘留量的測定技術領域，涉及阿維菌素和毒死蜱殘留量的同時檢 測方法，特別是含有阿維菌素和毒死蜱殘留的樣品測定前的處理方法。
背景技術：
在我國發生較多的引起農藥殘留中毒的農藥品種主要是有機磷農藥和氨基甲酸 酯類農藥，如氧化樂果、樂果、馬拉硫磷、甲胺磷、久效磷、倍硫磷、百克威、抗芽威和西維因 等。這些農藥是通過抑制昆蟲中樞神經中的膽堿酯酶使之死亡而發揮殺蟲作用的。但這些 農藥對人體內的膽堿酯酶也有抑制作用，它能阻斷神經遞質的傳遞，引起肌肉麻痹造成中 毒。國家雖明文規定劇毒、高毒農藥不得用于蔬菜、瓜果、茶葉和中草藥材，例如氧化樂果、 對硫磷、甲拌磷、甲胺磷、水胺硫磷、呋哺丹等。但某些地區的菜農仍然使用甲胺磷、甲基對 硫磷等劇毒高毒農藥于蔬菜，不時出現消費者因食用含有甲胺磷農藥的蔬菜而急性中毒。農藥殘留指的是在農業生產中施用農藥后一部分農藥直接或間接殘存于谷物、蔬 菜、果品、畜產品、水產品中以及土壤和水體中的現象。農藥殘留問題是隨著農藥大量生產 和廣泛使用而產生的。目前使用的農藥，有些在較短時間內可以通過生物降解成為無害物 質，而一些有機氯類農藥卻難以降解，是殘留性強的農藥。蔬菜農藥殘留超標，會直接危及 人體的神經系統和肝、腎等重要器官。同時殘留農藥在人體內蓄積，超過一定量度后會導致 一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至會誘發血管疾病、糖尿病和癌癥等。由于農藥殘留 對人類和生物危害很大，各國對農藥的施用都進行嚴格的管理，并對食品中農藥殘留容許 量作了規定。阿維菌素是一種大環內酯雙糖類化合物。是從土壤微生物中分離的天然產物，對 昆蟲和螨類具有觸殺和胃毒作用并有微弱的熏蒸作用，無內吸作用。但它對葉片有很強的 滲透作用，可殺死表皮下的害蟲，且殘效期長。由于殺蟲活性強以及殺蟲譜廣的特點，阿維 菌素作為甲胺磷等高毒有機磷類農藥的替代品在全國各地農業生產上得到廣泛的應用。毒死蜱是有機磷類農藥，成分就是毒死蜱，作用于乙酰膽堿酯酶。毒死蜱，原藥為 白色顆粒狀結晶，室溫下穩定，有硫醇臭味，密度1. 398 (43. 5°C )，熔點41. 5 43. 5°C，蒸氣 壓為2. 5mPa(25°C )，水中溶解度為1. ^ig/L，溶于大多數有機溶劑。毒性屬中等毒性殺蟲 劑，具有觸殺、胃毒和熏蒸作用。阿維菌素與毒死蜱混用防治水稻二化螟稻縱卷葉螟效果不錯應掌握在標靶害蟲 低齡期使用抗生素類與有機磷類混配相互增效。毒死蜱在水稻上最大允許殘留量國家標 準0. 10mg/kg阿維菌素最大允許殘留量國家標準(水稻上沒有規定)類蔬菜(除西葫 蘆)0. 02ppm,蕓苔類0. 025ppm,蕪箐甘藍菜頭0. 025ppm,葉狀蔬菜類(除蕓苔類)0. Ippm, 棉籽0. 025ppm,軋棉副產品0. 5ppm。是否能準確的檢測出微量的殘留其關鍵是樣品的前處理方法，樣品處理的好，可 以減少雜質干擾，減少雜質對儀器的污染，提高分析結果的靈敏度和準確度。本專利所建立 的樣品前處理方法為我單位自行研制的方法。

發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足提供一種含有阿維菌素和毒死蜱 殘留樣測定前的處理方法。它是稱樣品20. Og,加水10-20ml，乙睛40_60ml，振蕩提取20_30min，過濾至分液 漏斗中，加氯化鈉5-8g，振蕩3-5min，靜置10-15min后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥， 濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜待測。其中的樣品為小白菜或土壤樣品。其中稱小白菜樣品20. Og,加水IOml，乙睛 40ml，振蕩提取30min，過濾至分液漏斗中，加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后，取上層有 機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜，待測。其中稱土壤樣品20.0g，加水10ml，放置15分鐘，再加水10ml，乙腈60ml，振蕩提 取30min，加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至 干，用甲醇定容并過濾膜，待測它是稱樣品20. 0g，加水10-20ml，乙睛40-60ml，振蕩提取 20-30min,過濾至分液漏斗中，加氯化鈉5_8g，振蕩3-5min，靜置IOmin后，取上層有機相經 無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜待測。本發明通過阿維菌素和毒死蜱農藥殘留量的添加回收率研究，采用超高效液 相-質譜/質譜聯用儀(UPLC/MS/MQ法，建立簡捷可行的阿維菌素和毒死蜱農藥殘留的分 析方法樣品經乙腈/水提取，濃縮用甲醇定容后，用UPLC/MS/MS測定。本發明更加詳細的測定方法如下1、儀器設備和試劑Waters 液 / 質 / 質聯用儀(UPLC/Quattro Premier XE)、樣品粉碎機、BUCHI 旋轉 蒸發器等。乙腈、甲醇，甲酸，均為色譜純；氯化鈉、無水硫酸鈉(使用前在550°C烘干池，冷 卻后使用)，均為分析純；超純水；標準品阿維菌素(96.7%)，毒死蜱(98. 5% )2、前處理 過程小白菜稱樣品20. Og,加水IOml，乙睛40ml，振蕩提取30min，過濾至分液漏斗中， 加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇 定容并過濾膜待測。土壤稱樣品20.0g，加水10ml，放置10分鐘，再加水IOml,乙腈40ml，振蕩提取 30min,加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干， 用甲醇定容并過濾膜待測。3、儀器分析測定儀器條件色譜系統Waters Acquity超高效液相色譜儀色譜柱Acquity BEH C8 (2. ImmX 50mm, 1. 7 μ m)；柱溫30°C；進樣量5 μ L ；流動相A為乙腈B為水(含0. 甲酸)=90 10 ；流速為 0. 2mL/min。質譜系統Waters Quattro Premier XE三重四級桿質譜儀離子源=ESI (+)；毛細管電壓:3. OKv ；
離子源溫度110°C ；脫溶劑氣溫度400°C ；錐孔反吹氣流量50L/h ；脫溶劑氣流量550L/h ；檢測方式為多反應監測掃描模式(MRM)，如下表
權利要求
1.一種含有阿維菌素和毒死蜱殘留樣測定前的處理方法，其特征在于稱樣品20. Og, 加水10-20ml，乙睛40-60ml，振蕩提取20_30min，過濾至分液漏斗中，加氯化鈉5_8g，振蕩 3-5min，靜置10-15min后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾 膜待測，采用超高效液相-質譜/質譜聯用儀法測定。
2.權利要求1所述殘留樣測定前的處理方法，其中的樣品為小白菜和土壤樣品。
3.權利要求1所述殘留樣測定前的處理方法，其中稱小白菜樣品20.0g，加水10ml，乙 睛40ml，振蕩提取30min，過濾至分液漏斗中，加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后，取上 層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜，待測。
4.權利要求1所述殘留樣測定前的處理方法，其中稱土壤樣品20.0g，加水10ml，放置 15分鐘，再加水IOml,乙腈60ml，振蕩提取30min，加氯化鈉5g，振蕩3min，靜置IOmin后， 取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜，待測。
全文摘要
本發明公開了一種含有阿維菌素和毒死蜱的樣品測定前的處理方法，它是稱樣品20.0g，加水10-20ml，乙睛40-60ml，振蕩提取20-30min，過濾至分液漏斗中，加氯化鈉5-8g，振蕩3-5min，靜置10min后，取上層有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮至干，用甲醇定容并過濾膜待測。本發明公開的殘留樣測定前的處理方法具有測定速度快，設備簡單、測定成本低，準確度、穩定性和可靠性高的特點。
文檔編號G01N30/02GK102121930SQ20101059720
公開日2011年7月13日 申請日期2010年12月20日 優先權日2010年12月20日
發明者劉磊, 張玉婷, 李娜, 李輝, 邵輝, 郭永澤 申請人:天津市農業科學院中心實驗室