一種魚腥藻培養基的制作方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及一種培養基，特別涉及一種魚腥藻培養基，屬于古老油氣勘探實驗技術領域。
【背景技術】
[0002]魚腥藻作為固氮藍藻，很早就被人們發現對水稻有肥效作用，在我國南方水稻種植應用上獲得了不錯的增產效果和客觀的經濟效益。
[0003]從油氣地質有機質富集的角度上看，藍藻作為我國中新元古界有機質生烴的主要母源物質，其生烴潛力和發育規模有待進一步研究。魚腥藻的油脂可以作為再生來源，相當于石油，可作為開發前途的能源之一。
[0004]通常情況下，魚腥藻的快速生長通常會造成有機質累積下降，如何快速增加魚腥藻產量的同時增加油脂含量，需要有合適的培養基進行培育。
[0005]發明/內容
[0006]為了解決上述技術問題，本發明的目的在于提供一種魚腥藻培養基，該魚腥藻培養基可以使魚腥藻在短期快速生長的同時促進有機質大量富集。
[0007]為了實現上述技術目的，本發明提供了一種魚腥藻培養基，該魚腥藻培養基包括Bgl 1培養基、NaN03、和K2HPO4，其中，以Bgl 1培養基的總體積計，NaN03的濃度為3g/L_10g/L，K2HPO4 的濃度為 0.08g/L-0.5g/L0
[0008]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，以Bgll培養基的總體積計，NaN03的濃度為 5g/L-7g/L。
[0009]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，以Bgll培養基的總體積計，Κ2ΗΡ04的濃度為0.lg/L-0.4g/L。
[0010]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻時的光照強度為 20ymol/m2/s-30ymol/m2/s。
[0011]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻時的環境溫度為25°C-27°C。
[0012]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻過程中保持空氣的通入。
[0013]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻過程中空氣的通入速度為150mL/min-250mL/min。
[0014]在本發明提供的魚腥藻培養基中，優選地，該魚腥藻培養基的培育周期為10天-15天;更優選地，該魚腥藻培養基的培育周期為12天。
[0015]本發明提供的魚腥藻培養基可以促使魚腥藻在短時間內大量生長的同時有機質發生富集，解決了魚腥藻在大量生長的同時油脂含量不足的問題，同時為研究油氣地質中研究富磷物質對微古生物有機質富集提供了一種研究方法。
【附圖說明】
[0016]圖1為實施例中魚腥藻培養裝置的結構示意圖。
[0017]圖2為對照例1和實施例1-實施例3中魚腥藻的生長情況對比圖。
[0018]圖3為對照例1與實施例1-實施例3實驗后的油脂含量對比圖。
[0019]主要附圖符號說明
[0020]1進氣口 2出氣口 3密封塞4氣栗
【具體實施方式】
[0021]為了對本發明的技術特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，現對本發明的技術方案進行以下詳細說明，但不能理解為對本發明的可實施范圍的限定。
[0022]將對照例1和實施例1-3中均用在人工氣候培養箱內進行培育，具體裝置的結構如圖1所示，該魚腥藻培養裝置包括進氣口 1、出氣口 2、密封塞3、氣栗4和錐形瓶，光照強度的變化范圍為20ymol/V/s-30ymol/V/s，溫度25°C_27°C，在培育過程中保持空氣的通入，培育的周期均為12天。
[0023]實驗樣品:
[0024]生長指標測定:從接種后每隔1天，分別取不同平行組藻液3mL于島UV-2000分光光度計中檢測0D680。
[0025]測試分析方法
[0026]油脂提取及含量測定:準備一個5mL大小，帶聚四氟乙烯蓋子的玻璃瓶，準確稱取冷凍干燥藻粉Mlmg，將稱得的藻粉轉移至上述玻璃瓶中，并加入磁力攪拌子，加入10 %的二甲基亞砜甲醇溶液(V/V)，在50°C水浴條件下磁力攪拌抽提30分鐘，隨后經4000rpm離心10分鐘，上清液轉移到另一 25mL玻璃瓶中，如是提取兩次，在剩余藻渣中加入乙醚:正己烷混合液(1: 1V/V)，磁力攪拌抽屜30分鐘，之后4000rpm離心，上清液轉移到上述25mL玻璃瓶中，如是提取3次，在5次提取的上清液中加入純水，使正己烷、乙醚、甲醇、水四種比例為1:1:1:1，充分震蕩混合后經1500rpm離心5min，移取上層有機相，下層無機相再次加入乙醚:正己烷混合液(1: 1)，離心提取兩次;準備一個1.5mL容量的玻璃瓶并稱重M2，上層有機相合并后經氮氣濃縮后，轉移濃縮液至上述玻璃瓶，氮氣濃縮至恒重后再冷凍干燥，稱重，總脂含量LC( %DW)計算如下:%Total lipids = 100 X [M3_M2]/M1。
[0027]對照例1
[0028]本實施例提供了一種魚腥藻培養基，是將15mL的0D值為0.03的魚腥藻種接種于標準的85mL的Bgl 1的培養基中，設置三個平行組。
[0029]實施例1
[0030]本實施例提供了一種魚腥藻培養基，是將15mL的0D值為0.03的魚腥藻種接種于標準的85mL的Bgl 1的培養基中，具有該0D值的魚腥藻種設置三個平行組；
[0031 ]加入NaN03(濃度為5g/L)，K2HP04(濃度為0.16g/L)。
[0032]實施例2
[0033]本實施例提供了一種魚腥藻培養基，是將15mL的0D值為0.03的魚腥藻種接種于標準的85mL的Bgl 1的培養基中，具有該0D值的魚腥藻種設置三個平行組；
[0034]加入NaN03(濃度為6g/L)，K2HP04(濃度為0.24g/L)。
[0035]實施例3
[0036]本實施例提供了一種魚腥藻培養基，是將15mL的0D值為0.03的魚腥藻種接種于標準的85mL的Bgl 1的培養基中，具有該0D值的魚腥藻種設置三個平行組；
[0037]加入NaN03(濃度為7g/L)，K2HP04(濃度為0.32g/L)。
[0038]實驗結果
[0039]參見圖2，參照對比例1，實施例1-實施例3的生長量明顯增多，且生長量為實施例3>實施例2>實施例1>參照例1，說明此范圍的氮磷濃度，氮磷濃度越高，越有利于微囊藻的生長和增值。
[0040]參見圖3，參照對比例1，實施例1-實施例3的油脂含量呈倍數增多，且油脂增加量為實施例3 >實施例2 >實施例1 >對比例1，說明此范圍的氮磷濃度，氮磷濃度越高，越有利于微囊藻油脂的累積。
[0041]以上實施例說明，本發明的魚腥藻培養基可以使魚腥藻在短期快速生長的同時促進有機質大量富集。
【主權項】
1.一種魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基包括Bgl 1培養基、NaN03、和K2HP〇4，其中，以Bgll培養基的總體積計，NaN03的濃度為3g/L-10g/L，K2HP04的濃度為0.08g/L-0.5g/L02.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，以Bgll培養基的總體積計，所述NaN03 的濃度為 5g/L-7g/L。3.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，以Bgll培養基的總體積計，所述Κ2ΗΡ04的濃度為0.lg/L-0.4g/L04.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻時的光照強度為 20ymol/m2/s-30ymol/m2/s。5.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻時的環境溫度為25°C_27°C。6.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻過程中保持空氣的通入。7.根據權利要求1或6所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基在培養魚腥藻過程中空氣的通入速度為150mL/min-250mL/min。8.根據權利要求1所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基的培育周期為10天-15天。9.根據權利要求8所述的魚腥藻培養基，其特征在于，該魚腥藻培養基的培育周期為12天。
【專利摘要】本發明提供了一種魚腥藻培養基。該魚腥藻培養基包括Bg11培養基、NaNO3、和K2HPO4，其中，以Bg11培養基的總體積計，NaNO3的濃度為3g/L-10g/L，K2HPO4的濃度為0.08g/L-0.5g/L。該魚腥藻培養基可以促使魚腥藻在短時間內大量生長的同時富集有機質，克服了魚腥藻在大量生長的同時油脂含量降低的缺陷，同時為研究火山噴發和上升流帶來的富營養物質能夠促進中新元古界母源生烴物質-藍細菌生長和有機質富集提供了一種研究方法和思路。
【IPC分類】C12N1/20
【公開號】CN105483044
【申請號】CN201511021395
【發明人】馬奎, 王銅山, 石書緣, 黃擎宇, 趙偉波
【申請人】中國石油天然氣股份有限公司
【公開日】2016年4月13日
【申請日】2015年12月31日