一種水蛭唾液重復提取的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及水蛭素提取領域，尤其涉及一種水蛭唾液重復提取的方法。
【背景技術】
[0002]水蛭，俗稱螞蟥，它是一種貴重的中藥材，我國古代許多醫學典籍都有記載，明代《本草綱目》中記載:水蛙“主逐惡血、痕血、月閉，破血下積聚，無子，利水通……治折傷墜撲畜血有功”。現代醫學研究表明，水蛭唾腺中含有一種抗血凝物質一一蛭素，能廣泛應用于斷肢再植、抑制癌細胞生長等醫療領域。隨著現代生物技術的應用和提高，蛭素的提取加工和醫學臨床應用，以及中成藥的開發、研制和推廣，對水蛭的需求量逐年增多。但是，現有技術中水蛭素的方法多以對水蛭活體的破壞方法獲得水蛭素，影響所得水蛭素的純度，同時對水蛭資源的供應依賴過大，尤其難以避免水蛭素生產的季節性問題。
[0003]因此，現有技術還有待于改進和發展。
【發明內容】
[0004]鑒于上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種水蛭唾液重復提取的方法，旨在解決現有技術中采用血液直接喂養不能提高水蛭抗病能力的問題。
[0005]一種水蛭唾液重復提取的方法，其中，包括以下步驟:
[0006]在新鮮血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化鈉，混合均勻；
[0007]選用新鮮的動物腸臟，將血液灌入腸中并扎緊；
[0008]將水蛭置于灌有血液的腸臟附近，讓水蛭吸食腸臟內血液；
[0009]水蛭充分吸飽后，改變環境溫度使其吐出唾液，收集獲得水蛭唾液。
[0010]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，改變環境溫度是瞬間或緩慢升溫至30?70°C之間。
[0011]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分別為新鮮血液重量的0.01?10%，所述氯化鈉的添加量為新鮮血液重量的0.02?20%。
[0012]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，氯化鈉在使用前，用水稀釋至濃度為
0.01?40%的氯化鈉溶液。
[0013]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀釋至濃度為0.01?40%的谷氨酸、精氨酸溶液。
[0014]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，所述新鮮血液中還加入了檸檬酸鈉。
[0015]所述的水蛭唾液重復提取的方法，其中，檸檬酸鈉在使用前，用水稀釋至濃度為
0.01?40%的檸檬酸鈉溶液。
[0016]有益效果:本發明所提供的一種水蛭唾液重復提取的方法，該方法可實現連續提取數次，這即節省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活體重復利用，解決了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工藝復雜、高成本的痛點，有助于節約和保護我國野生水蛭資源，有助于大幅降低醫藥用水蛭素原料價格。
【具體實施方式】
[0017]本發明提供一種水蛭唾液重復提取的方法，為使本發明的目的、技術方案及效果更加清楚、明確，以下對本發明進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。
[0018]經過研究發現，水蛭的唾液中也含有水蛭素，而且活性高，因此，本發明中提供一種水蛭唾液重復提取的方法，可連續提取數次，這即節省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活體重復利用，解決了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工藝復雜、高成本的痛點，有助于節約和保護我國野生水蛭資源，有助于大幅降低醫藥用水蛭素原料價格。
[0019]具體地，所述水蛭唾液重復提取的方法，包括以下步驟:
[0020]在新鮮血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化鈉，混合均勻；
[0021]選用新鮮的動物腸臟，將血液灌入腸中并扎緊；
[0022]將水蛭置于灌有血液的腸臟附近，讓水蛭吸食腸臟內血液；
[0023]水蛭充分吸飽后，改變環境溫度使其吐出唾液，收集獲得水蛭唾液。
[0024]其中，所述新鮮血液可以為豬血、牛血、羊血、雞血或驢血。通過在血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化鈉，可以吸引水蛭吸食。其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分別為新鮮血液重量的0.01?10%，所述氯化鈉的添加量為新鮮血液重量的0.02?20%。所述氯化鈉可以為有機鹽或無機鹽，新鮮血液中的含鹽量不同，加入氯化鈉還可以調節血液中的含鹽濃度，吸引水輕吸食。優選地，氯化鈉在使用前，可以用水稀釋至濃度為0.01?40%的氯化鈉溶液，方便混合均勻。所述谷氨酸、精氨酸在使用前，也可以用水稀釋至濃度為0.01?40 %的谷氨酸、精氨酸溶液，方便混合均勻。
[0025]氯化鈉還具有防止血液凝結的作用，優選地，所述新鮮血液中還加入了檸檬酸鈉，有效防止血液凝結，所述檸檬酸鈉的添加為新鮮血液重量的1?2%。所述檸檬酸鈉在使用前，也可以用水稀釋至濃度為0.01?40%的檸檬酸鈉溶液，方便混合均勻。
[0026]水蛭在吃飽的情況，通過改變其環境溫度，會使其分泌出大量的唾液，采用此種方法刺激水蛭，既無需添加催吐劑污染唾液成分，也無需對水蛭進行擠壓使其受傷，是一種高效又對水蛭活體傷害不大的方法。改變環境溫度是瞬間或緩慢升溫至30?70°C之間。水蛭在的原始溫度可以為0?25°C，當升溫至30?70°C之間，溫差可達20°C以上，水蛭在經過20°C以上的溫差變化，就會吐出大量唾液。每次每條活體水蛭可以提取1?60次，每次能提取3?12毫升左右，每個月能提取1?6次，唾液中水蛭素含量為20?120AT-(U國際單位)/mL。
[0027]以下通過實施例對本發明做進一步說明。
[0028]實施例1
[0029]從飼養池內撈出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天換水清洗一次，去除活體水蛭表面的雜質，不喂食，如此保持一個月。一個月后，用清水再次清洗活體水蛭，室溫下，將水蛭放置于灌有貯藏槽內，將灌有血液的腸臟放入貯藏槽中，水蛭吸食腸臟內的血液，充分喂飽。對貯藏槽瞬間升溫至50°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬間升溫3次，收集水輕吐出的唾液。
[0030]經過檢測，這些唾液中，水蛭素含量為45AT- (U國際單位)/mL。
[0031]實施例2
[0032]從飼養池內撈出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天換水清洗一次，去除活體水蛭表面的雜質，不喂食，如此保持一個月。一個月后，用清水再次清洗活體水蛭，室溫下，將水蛭放置于灌有貯藏槽內，將灌有血液的腸臟放入貯藏槽中，水蛭吸食腸臟內的血液，充分喂飽。對貯藏槽緩慢升溫至70°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬間升溫3次，收集水輕吐出的唾液。
[0033]經過檢測，這些唾液中，水蛭素含量為50AT- (U國際單位)/mL。
[0034]實施例3
[0035]從飼養池內撈出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天換水清洗一次，去除活體水蛭表面的雜質，不喂食，如此保持一個月。一個月后，用清水再次清洗活體水蛭，室溫下，將水蛭放置于灌有貯藏槽內，將灌有血液的腸臟放入貯藏槽中，水蛭吸食腸臟內的血液，充分喂飽。對貯藏槽瞬間升溫至40°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬間升溫3次，收集水輕吐出的唾液。
[0036]經過檢測，這些唾液中，水蛭素含量為52AT- (U國際單位)/mL。
[0037]應當理解的是，本發明的應用不限于上述的舉例，對本領域普通技術人員來說，可以根據上述說明加以改進或變換，所有這些改進和變換都應屬于本發明所附權利要求的保護范圍。
【主權項】
1.一種水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，包括以下步驟: 在新鮮血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化鈉，混合均勻； 選用新鮮的動物腸臟，將血液灌入腸中并扎緊； 將水蛭置于灌有血液的腸臟附近，讓水蛭吸食腸臟內血液； 水蛭充分吸飽后，改變環境溫度使其吐出唾液，收集獲得水蛭唾液。2.根據權利要求1所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，改變環境溫度是瞬間或緩慢升溫至30?70°C之間。3.根據權利要求1所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，所述谷氨酸、精氨酸的添加量為新鮮血液重量的1?3%，所述氯化鈉的添加量為新鮮血液重量的3?5%。4.根據權利要求1所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，氯化鈉在使用前，用水稀釋至濃度為0.01?40%的氯化鈉溶液。5.根據權利要求1所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀釋至濃度為0.01?40%的谷氨酸、精氨酸溶液。6.根據權利要求1所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，所述新鮮血液中還加入了檸檬酸鈉。7.根據權利要求6所述的水蛭唾液重復提取的方法，其特征在于，檸檬酸鈉在使用前，用水稀釋至濃度為0.01?40%的檸檬酸鈉溶液。
【專利摘要】本發明公開一種水蛭唾液重復提取的方法，包括以下步驟：在新鮮血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化鈉，混合均勻；選用新鮮的動物腸臟，將血液灌入腸中并扎緊；將水蛭置于灌有血液的腸臟附近，讓水蛭吸食腸臟內血液；水蛭充分吸飽后，改變環境溫度使其吐出唾液，收集獲得水蛭唾液。該方法可實現連續提取數次，這即節省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活體重復利用，解決了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工藝復雜、高成本的痛點，有助于節約和保護我國野生水蛭資源，有助于大幅降低醫藥用水蛭素原料價格。
【IPC分類】C07K1/14, C07K14/815
【公開號】CN105418756
【申請號】CN201511008637
【發明人】湯浩強
【申請人】湯浩強
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年12月25日