本發(fa)明涉及生物醫學，特別涉及一種(zhong)kstd-like酶、工程菌(jun)及其在制(zhi)備用于治療抑(yi)郁癥的(de)(de)藥物中的(de)(de)應用。

背景技術：

1、慢性(xing)心理壓(ya)力(li)(li)是(shi)(shi)抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)最重要的(de)(de)(de)(de)(de)危險因素(su)(su)之一(yi)。約92%的(de)(de)(de)(de)(de)抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)患者在(zai)發(fa)病前經歷過應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)性(xing)事件(jian)(jian)。身體會(hui)激(ji)(ji)活下丘腦-垂(chui)體-腎上腺（hpa）軸以(yi)應(ying)(ying)(ying)對(dui)(dui)(dui)(dui)壓(ya)力(li)(li)。皮質醇(chun)是(shi)(shi)一(yi)種(zhong)應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)激(ji)(ji)素(su)(su)，是(shi)(shi)hpa軸應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)反(fan)應(ying)(ying)(ying)系統的(de)(de)(de)(de)(de)主要效應(ying)(ying)(ying)物(wu)。長期(qi)接觸皮質醇(chun)會(hui)導致抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)狀。20-80%的(de)(de)(de)(de)(de)抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)患者表現出(chu)某種(zhong)形式的(de)(de)(de)(de)(de)皮質醇(chun)水(shui)平升高。值(zhi)得(de)思考的(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)(shi)，并不(bu)是(shi)(shi)每(mei)個面(mian)臨壓(ya)力(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)人(ren)都(dou)會(hui)發(fa)展成抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)。在(zai)經歷過類似創傷或悲劇(ju)事件(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)人(ren)群(qun)(qun)中，只有10-30%的(de)(de)(de)(de)(de)人(ren)患上抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)。個人(ren)對(dui)(dui)(dui)(dui)生(sheng)活中壓(ya)力(li)(li)事件(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)敏感性(xing)和應(ying)(ying)(ying)對(dui)(dui)(dui)(dui)能力(li)(li)被(bei)稱為他們對(dui)(dui)(dui)(dui)壓(ya)力(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)易(yi)(yi)感性(xing)。對(dui)(dui)(dui)(dui)壓(ya)力(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)易(yi)(yi)感性(xing)使(shi)某些人(ren)更(geng)容易(yi)(yi)患上抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)。了(le)解(jie)抑(yi)(yi)郁(yu)癥(zheng)(zheng)(zheng)應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)易(yi)(yi)感性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)異質性(xing)對(dui)(dui)(dui)(dui)于制定預(yu)防和治療策(ce)略至(zhi)關重要。最近的(de)(de)(de)(de)(de)研(yan)究發(fa)現，嚙(nie)齒動(dong)物(wu)體內微生(sheng)物(wu)群(qun)(qun)的(de)(de)(de)(de)(de)耗(hao)竭會(hui)增(zeng)加應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)激(ji)(ji)素(su)(su)。了(le)解(jie)腸道微生(sheng)物(wu)群(qun)(qun)對(dui)(dui)(dui)(dui)應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)激(ji)(ji)素(su)(su)或應(ying)(ying)(ying)激(ji)(ji)易(yi)(yi)感性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)調節，尋找增(zeng)強對(dui)(dui)(dui)(dui)抗壓(ya)力(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)干預(yu)措施仍然是(shi)(shi)一(yi)個艱巨的(de)(de)(de)(de)(de)挑戰。

2、因此，有必要開發一種用于治療抑郁癥(zheng)的藥物(wu)。

技術實現思路

1、本發明目的是(shi)提(ti)供一種(zhong)kstd-like酶、載體及其(qi)在制備(bei)用(yong)于治療抑郁癥的藥物(wu)中的應用(yong)。

2、為了實(shi)現上述目的，本發(fa)明采用如(ru)下技術(shu)方(fang)案：

3、在本發(fa)明的(de)第一方(fang)面，提(ti)供了一種(zhong)kstd-like酶，所(suo)述kstd-like酶的(de)氨(an)基酸序列如seq?id?no.1所(suo)示。

4、在本發明的第二方面，提供了一(yi)種核(he)酸分子，所(suo)(suo)述核(he)酸分子為編碼所(suo)(suo)述的kstd-like酶的基因。

5、進(jin)一步地，所(suo)(suo)述核酸分子的核苷(gan)酸序(xu)列如seq?id?no：2-3所(suo)(suo)示。

6、在本發明(ming)的第三方面，提供了一種含有所(suo)述的編碼基因(yin)的載體。

7、在本發明的第(di)四(si)方面，提供了一種含有(you)所述(shu)載(zai)體的工(gong)程(cheng)菌(jun)。

8、進一步地，所(suo)述工(gong)程菌(jun)采用的(de)(de)宿(su)主菌(jun)包括枯草(cao)芽孢桿(gan)菌(jun)、大腸(chang)桿(gan)菌(jun)（dh5α、top10、bl21和(he)?rosetta）或者其他常用菌(jun)中的(de)(de)一種。優選(xuan)地，所(suo)述工(gong)程菌(jun)包括表達所(suo)述的(de)(de)kstd-like酶的(de)(de)枯草(cao)芽孢桿(gan)菌(jun)。

9、在本發明的(de)第五方面(mian)，提供了一(yi)種(zhong)含有(you)所(suo)述載體的(de)細胞系。

10、在本發明的(de)(de)第六方面，提供了一種所(suo)(suo)述(shu)(shu)(shu)的(de)(de)kstd-like酶、所(suo)(suo)述(shu)(shu)(shu)的(de)(de)核(he)酸分子或所(suo)(suo)述(shu)(shu)(shu)的(de)(de)載體或者所(suo)(suo)述(shu)(shu)(shu)的(de)(de)宿(su)主菌或所(suo)(suo)述(shu)(shu)(shu)的(de)(de)細胞系在制備(bei)用(yong)于治療抑郁癥的(de)(de)藥(yao)物中(zhong)的(de)(de)應用(yong)。

11、進一步地，所(suo)述抑郁癥(zheng)包括抵(di)抗心理(li)壓力所(suo)致的(de)情緒(xu)低落或抑郁癥(zheng)。

12、在本(ben)發明的(de)第七方面，提供了一種抗(kang)病(bing)毒的(de)藥物，所(suo)述藥物的(de)活性(xing)成分(fen)包括所(suo)述的(de)kstd-like酶、或(huo)者所(suo)述的(de)核酸分(fen)子(zi)或(huo)所(suo)述的(de)載體或(huo)者所(suo)述的(de)工程菌或(huo)所(suo)述的(de)細胞系(xi)。

13、本發明實施例中的一(yi)個或多個技術方案，至少(shao)具有(you)如下技術效果或優點：

14、本發明提供一種kstd-like酶、載體及其(qi)在制備用(yong)于治療抑(yi)郁癥(zheng)的(de)(de)(de)藥(yao)物中(zhong)的(de)(de)(de)應(ying)用(yong)，本申(shen)請發現了(le)表(biao)達具有皮質(zhi)醇降解(jie)能力的(de)(de)(de)kstd-like酶，后將(jiang)該酶的(de)(de)(de)基因序列構建到益生(sheng)菌(jun)枯草芽孢桿菌(jun)（b.?subtilis）中(zhong)，得(de)到了(le)重(zhong)組益生(sheng)菌(jun)b.?subtilis?tongji。該菌(jun)優于普通的(de)(de)(de)益生(sheng)菌(jun)b.?subtilis，能在體外(wai)降解(jie)皮質(zhi)醇，并保(bao)護小鼠抵御(yu)壓力所(suo)致(zhi)的(de)(de)(de)皮質(zhi)醇升高和抑(yi)郁樣行(xing)為。因此，表(biao)達kstd-like酶的(de)(de)(de)益生(sheng)菌(jun)b.?subtilis?tongji可以(yi)作為抵抗心(xin)理壓力所(suo)致(zhi)的(de)(de)(de)情緒低(di)落(luo)或(huo)抑(yi)郁癥(zheng)的(de)(de)(de)干預(yu)措施。

技術特征：

1.一種kstd-like酶，其特征在于，所(suo)述kstd-like酶的氨(an)基(ji)酸序(xu)列如(ru)seq?id?no.1所(suo)示。

2.一種(zhong)核酸分子(zi)，其特(te)征在于，所述核酸分子(zi)為(wei)編碼(ma)權利要求1所述的kstd-like酶(mei)的基因。

3.根據(ju)權(quan)利要(yao)求2所述的核酸分(fen)子(zi)，其特征在(zai)于，所述核酸分(fen)子(zi)的核苷酸序列如seq?idno：2-3所示(shi)。

4.一種含(han)有(you)權利要求2-3任一所述的編碼基因的載體(ti)。

5.一(yi)種含有權利要(yao)求(qiu)4所述載(zai)體的工程(cheng)菌。

6.根(gen)據(ju)權(quan)利要(yao)求(qiu)5所述的(de)(de)工程菌，其特征在于，所述工程菌包括表達權(quan)利要(yao)求(qiu)1所述的(de)(de)kstd-like酶的(de)(de)枯草(cao)芽孢桿菌。

7.一種含有權利要求(qiu)4所述載體的細(xi)胞系。

8.一種權(quan)利(li)(li)要(yao)求(qiu)1所(suo)述(shu)(shu)的(de)kstd-like酶、權(quan)利(li)(li)要(yao)求(qiu)2-3任一所(suo)述(shu)(shu)的(de)核酸(suan)分子或(huo)權(quan)利(li)(li)要(yao)求(qiu)4所(suo)述(shu)(shu)的(de)載體或(huo)者(zhe)權(quan)利(li)(li)要(yao)求(qiu)5-6任一所(suo)述(shu)(shu)的(de)工(gong)程菌(jun)或(huo)權(quan)利(li)(li)要(yao)求(qiu)7所(suo)述(shu)(shu)的(de)細胞系在制備用(yong)于治療抑郁癥的(de)藥物中(zhong)的(de)應用(yong)。

9.根據權(quan)利(li)要求8所述(shu)的(de)應用，其特征(zheng)在(zai)于，所述(shu)抑(yi)郁(yu)癥包(bao)括抵抗(kang)心理壓(ya)力所致的(de)情緒低落或抑(yi)郁(yu)癥。

10.一種抗抑郁癥的(de)(de)藥(yao)物(wu)，其(qi)特征在(zai)于，所述(shu)藥(yao)物(wu)的(de)(de)活(huo)性成(cheng)分包(bao)括權(quan)(quan)利要求1所述(shu)的(de)(de)kstd-like酶、或(huo)者權(quan)(quan)利要求2-3任(ren)一所述(shu)的(de)(de)核酸分子或(huo)權(quan)(quan)利要求4所述(shu)的(de)(de)載體或(huo)者權(quan)(quan)利要求5-6任(ren)一所述(shu)的(de)(de)工程菌(jun)或(huo)權(quan)(quan)利要求7所述(shu)的(de)(de)細胞系(xi)。

技術總結
本發明提供了一種kstD?like酶、工程菌及其在制備用于治療抑郁癥的藥物中的應用，所述kstD?like酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。通過全基因組測序發現該菌表達的kstD?like酶發揮著降解皮質醇的作用，后將該酶的基因序列構建到益生菌枯草芽孢桿菌（B.subtilis）中，得到了重組益生菌B.subtilis?Tongji。該菌優于普通的益生菌B.subtilis，能在體外降解皮質醇，并保護小鼠抵御壓力所致的皮質醇升高和抑郁樣行為。因此，表達kstD?like酶的益生菌B.subtilis?Tongji可以作為抵抗心理壓力所致的情緒低落或抑郁癥的干預措施的藥物。

技術研發人員：李迪,程黎明,王雄
受保護的技術使用者：華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院
技術研發日：
技術公布日：2024/10/10