本(ben)發明屬于(yu)分子生物技術與(yu)基因工程領域，具體涉及一(yi)種(zhong)干擾bmdm中sbp2蛋白表(biao)達的shrna及其(qi)慢病毒載體與(yu)應用。

背景技術：

1、多(duo)(duo)囊卵(luan)(luan)巢(chao)綜(zong)合(he)征(zheng)(pcos)是(shi)以高雄激素(su)(su)、排(pai)卵(luan)(luan)障(zhang)礙、卵(luan)(luan)巢(chao)多(duo)(duo)囊改變為主要(yao)表(biao)現的(de)代(dai)謝異常綜(zong)合(he)征(zheng)，好發(fa)(fa)于(yu)(yu)育齡(ling)期女(nv)性(xing)。胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗是(shi)該疾病的(de)主要(yao)發(fa)(fa)病機制之(zhi)一(yi),多(duo)(duo)囊卵(luan)(luan)巢(chao)綜(zong)合(he)征(zheng)患(huan)者(zhe)常常伴有慢(man)性(xing)炎(yan)癥(zheng)(zheng)的(de)表(biao)現，而(er)且炎(yan)癥(zheng)(zheng)因子(zi)是(shi)導致胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗主要(yao)作用(yong)機制之(zhi)一(yi)，炎(yan)癥(zheng)(zheng)因子(zi)主要(yao)來源于(yu)(yu)巨噬細胞(bao)，巨噬細胞(bao)分泌的(de)炎(yan)癥(zheng)(zheng)因子(zi)tnf-α、il-6，il-10、tgf-β在白色(se)脂(zhi)肪(fang)組織(zhi)(zhi)胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗通路(lu)中起(qi)到重(zhong)要(yao)作用(yong)。白色(se)脂(zhi)肪(fang)組織(zhi)(zhi)的(de)胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗會引起(qi)巨噬細胞(bao)向m1型極(ji)化(hua)。目(mu)前發(fa)(fa)現sbp2可以調控(kong)肥胖大鼠(shu)胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗脂(zhi)肪(fang)組織(zhi)(zhi)的(de)巨噬細胞(bao)極(ji)化(hua)類型，有望成為pcos中的(de)脂(zhi)肪(fang)組織(zhi)(zhi)炎(yan)癥(zheng)(zheng)和(he)胰(yi)島(dao)(dao)(dao)素(su)(su)抵(di)抗治療(liao)的(de)新(xin)靶點。

2、secisbp2(也(ye)稱(cheng)為sbp2)是(shi)一(yi)(yi)(yi)(yi)種(zhong)廣泛研究(jiu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)secincorporation因(yin)(yin)子，根據磷(lin)脂氫過氧(yang)化(hua)物(wu)(wu)(wu)谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物(wu)(wu)(wu)酶mrna中(zhong)(zhong)(zhong)120-kda?rna結合(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)能(neng)力進行純(chun)(chun)化(hua)和(he)(he)(he)克隆。sbp2已(yi)被(bei)(bei)證(zheng)明(ming)與(yu)(yu)(yu)位(wei)于mrna的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)3'-非翻(fan)譯區(qu)(utr)內(nei)(nei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)secis元件直接相(xiang)互(hu)作(zuo)用，并(bing)在(zai)體(ti)外和(he)(he)(he)體(ti)內(nei)(nei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)sec摻入過程中(zhong)(zhong)(zhong)發(fa)揮重要作(zuo)用。人sbp2蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)由4kb長的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)mrna編(bian)碼(ma)。它(ta)在(zai)睪丸(wan)中(zhong)(zhong)(zhong)過度表達(da)(da)(da)(da)，而(er)(er)在(zai)所(suo)有其(qi)他組(zu)織中(zhong)(zhong)(zhong)呈現基礎(chu)表達(da)(da)(da)(da)水平，如的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)northern印跡分析所(suo)示。secisbp2突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)導(dao)(dao)(dao)(dao)致(zhi)甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)激素(su)(su)代(dai)(dai)謝(xie)(xie)遺傳缺陷，碘甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)原氨(an)(an)酸脫碘酶2(dio2)低表達(da)(da)(da)(da)，兩(liang)個(ge)(ge)(ge)sbp2突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)家族的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)先證(zheng)者表現出(chu)與(yu)(yu)(yu)甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)功(gong)能(neng)異常(chang)相(xiang)關(guan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)短暫(zan)性(xing)生(sheng)(sheng)長遲(chi)緩，低三碘甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)原氨(an)(an)酸(t3)),高甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)素(su)(su)(t4)和(he)(he)(he)反向t3，和(he)(he)(he)輕度升高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)促甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)激素(su)(su)。具有復合(he)(he)雜(za)合(he)(he)缺陷的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)個(ge)(ge)(ge)體(ti)表現出(chu)大(da)多(duo)數人類硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)還(huan)原合(he)(he)成(cheng)、細(xi)胞活(huo)性(xing)氧(yang)(ros)增加(jia)、晚期精子發(fa)生(sheng)(sheng)失敗、軸性(xing)肌營養(yang)不良(liang)和(he)(he)(he)單核細(xi)胞細(xi)胞因(yin)(yin)子分泌異常(chang)。在(zai)體(ti)內(nei)(nei)，secisbp2被(bei)(bei)發(fa)現對(dui)胚(pei)(pei)胎發(fa)育(yu)(yu)至關(guan)重要。已(yi)觀(guan)察(cha)(cha)到secisbp2純(chun)(chun)合(he)(he)缺失胚(pei)(pei)胎；然(ran)而(er)(er)，它(ta)們(men)在(zai)胚(pei)(pei)胎發(fa)育(yu)(yu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)原腸胚(pei)(pei)形成(cheng)階段失敗了(le)。secisbp2可(ke)能(neng)通過硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)調(diao)節(jie)β-hcg和(he)(he)(he)孕酮的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)分泌。由于pi3k/akt和(he)(he)(he)細(xi)胞外信號調(diao)節(jie)激酶(erk?1/2)信號通路(lu)(lu)均被(bei)(bei)證(zheng)實參(can)與(yu)(yu)(yu)細(xi)胞生(sheng)(sheng)長、增殖和(he)(he)(he)分化(hua)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)進程。sbp2的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)缺失會抑(yi)制人類滋(zi)養(yang)層(ceng)細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)增殖、遷移(yi)/侵襲，β-hcg的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)合(he)(he)成(cheng)和(he)(he)(he)孕酮的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)產生(sheng)(sheng)通過pi3k/akt和(he)(he)(he)erk信號通路(lu)(lu)受(shou)sbp2表達(da)(da)(da)(da)水平的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響。硒(xi)代(dai)(dai)半胱(guang)氨(an)(an)酸插入序列(secis)結合(he)(he)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)2(sbp2)是(shi)一(yi)(yi)(yi)(yi)種(zhong)由secisbp2編(bian)碼(ma)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)質。在(zai)生(sheng)(sheng)理上，它(ta)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)功(gong)能(neng)是(shi)與(yu)(yu)(yu)硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)secis?rna相(xiang)互(hu)作(zuo)用，以(yi)將翻(fan)譯和(he)(he)(he)組(zu)裝因(yin)(yin)子募集(ji)到mrna蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)復合(he)(he)物(wu)(wu)(wu)。因(yin)(yin)此sbp2倍認(ren)為是(shi)哺乳(ru)動物(wu)(wu)(wu)細(xi)胞中(zhong)(zhong)(zhong)硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)翻(fan)譯的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)重要因(yin)(yin)子。在(zai)一(yi)(yi)(yi)(yi)些(xie)代(dai)(dai)謝(xie)(xie)疾病中(zhong)(zhong)(zhong)，sbp2的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)表達(da)(da)(da)(da)和(he)(he)(he)活(huo)性(xing)受(shou)到突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)異常(chang)調(diao)控。sbp2的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)純(chun)(chun)和(he)(he)(he)錯義(yi)突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)可(ke)能(neng)導(dao)(dao)(dao)(dao)致(zhi)甲(jia)(jia)(jia)狀(zhuang)(zhuang)腺(xian)(xian)激素(su)(su)代(dai)(dai)謝(xie)(xie)異常(chang)。產生(sheng)(sheng)早期終止(zhi)密(mi)碼(ma)子(r128x)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)無義(yi)突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)可(ke)能(neng)導(dao)(dao)(dao)(dao)致(zhi)全長分子合(he)(he)成(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)早期停滯。sbp2的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)dna序列中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)復合(he)(he)雜(za)合(he)(he)子突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)(r120x/r770x)抑(yi)制了(le)sbp2與(yu)(yu)(yu)secis元件的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)結合(he)(he)，并(bing)組(zu)織了(le)sbp2在(zai)硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)放一(yi)(yi)(yi)(yi)種(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)功(gong)能(neng)1。這會誘導(dao)(dao)(dao)(dao)細(xi)胞內(nei)(nei)活(huo)性(xing)氧(yang)物(wu)(wu)(wu)質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)產生(sheng)(sheng)，對(dui)紫外線(xian)輻射輻射誘導(dao)(dao)(dao)(dao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)氧(yang)化(hua)損傷的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)易感性(xing)可(ke)能(neng)介(jie)導(dao)(dao)(dao)(dao)觀(guan)察(cha)(cha)到的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)光敏(min)(min)性(xing)。特別是(shi)，sbp2中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)可(ke)能(neng)導(dao)(dao)(dao)(dao)致(zhi)異常(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)單核細(xi)胞因(yin)(yin)子分泌。sbp2突(tu)變(bian)(bian)(bian)(bian)小(xiao)(xiao)鼠模型(xing)中(zhong)(zhong)(zhong)檢(jian)測到sbp2表達(da)(da)(da)(da)缺失，導(dao)(dao)(dao)(dao)致(zhi)硒(xi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)穩定性(xing)降低。science上的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)(yi)(yi)篇研究(jiu)中(zhong)(zhong)(zhong)指出(chu)sbp2在(zai)飲食誘導(dao)(dao)(dao)(dao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)肥(fei)胖(pang)小(xiao)(xiao)鼠atms中(zhong)(zhong)(zhong)被(bei)(bei)抑(yi)制，并(bing)與(yu)(yu)(yu)脂肪(fang)(fang)組(zu)織炎(yan)癥相(xiang)關(guan)。sbp2缺失啟動了(le)atms的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)代(dai)(dai)謝(xie)(xie)激活(huo)，誘導(dao)(dao)(dao)(dao)細(xi)胞內(nei)(nei)活(huo)性(xing)氧(yang)含量(liang)和(he)(he)(he)炎(yan)癥小(xiao)(xiao)體(ti)，隨后促進il-1β相(xiang)關(guan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)局(ju)部增殖和(he)(he)(he)前炎(yan)癥巨噬細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)浸潤，sbp2再表達(da)(da)(da)(da)可(ke)提高胰(yi)島(dao)素(su)(su)敏(min)(min)感性(xing)。這項研究(jiu)發(fa)現atms中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)sbp2可(ke)能(neng)是(shi)拯救肥(fei)胖(pang)患者胰(yi)島(dao)素(su)(su)抵(di)抗(kang)(kang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)(yi)(yi)個(ge)(ge)(ge)潛在(zai)靶點。然(ran)而(er)(er)，sbp2在(zai)多(duo)囊卵巢綜合(he)(he)癥的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)胰(yi)島(dao)素(su)(su)抵(di)抗(kang)(kang)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)作(zuo)用仍是(shi)未知的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)，所(suo)以(yi)我們(men)想(xiang)探索在(zai)pcos大(da)鼠中(zhong)(zhong)(zhong)sbp2是(shi)否(fou)有表達(da)(da)(da)(da)差異以(yi)及能(neng)否(fou)調(diao)節(jie)脂肪(fang)(fang)胰(yi)島(dao)素(su)(su)抵(di)抗(kang)(kang)，進而(er)(er)找到可(ke)能(neng)治療pcos的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)(yi)(yi)個(ge)(ge)(ge)新的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)炎(yan)性(xing)靶點。

3、想要探(tan)索sbp2蛋(dan)白在(zai)pcos中的(de)重要作用(yong)，如(ru)果(guo)能有效的(de)對該蛋(dan)白的(de)表達進行(xing)干(gan)擾(rao)，那(nei)么(me)能在(zai)一(yi)定程度上了解pcos的(de)發(fa)病(bing)機制。雖然(ran)現有技術中應用(yong)小干(gan)擾(rao)rna對sbp2表達進行(xing)干(gan)擾(rao)，但是敲減效率均(jun)不到50％，為(wei)滿足研究需(xu)要，急需(xu)要一(yi)種(zhong)敲除率高的(de)慢(man)病(bing)毒。

技術實現思路

1、針對現有(you)技術的(de)不足(zu)，本發明提(ti)供(gong)一種(zhong)干擾bmdm中(zhong)sbp2蛋白表達(da)的(de)shrna及其慢(man)病(bing)毒(du)載體(ti)與應(ying)用，所(suo)得shrna敲除率高，由此構(gou)建的(de)慢(man)病(bing)毒(du)載體(ti)與原代(dai)大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)細胞共培養后，加重脂(zhi)肪(fang)炎癥(zheng)和胰島(dao)(dao)素(su)抵(di)抗，為調(diao)節脂(zhi)肪(fang)胰島(dao)(dao)素(su)的(de)分(fen)泌提(ti)供(gong)了(le)依據，為治療多囊卵巢綜(zong)合(he)癥(zheng)提(ti)供(gong)了(le)新的(de)炎性(xing)靶點。

2、為解決現有技(ji)術(shu)問題，本(ben)發(fa)明采取的(de)技(ji)術(shu)方案(an)為：

3、一種干擾(rao)bmdm中sbp2蛋白表達的(de)shrna，所述干擾(rao)bmdm中sbp2蛋白表達的(de)shrna為(wei)lv-secisbp2-rnai(121150-1)，lv-secisbp2-rnai(121151-1)或(huo)lv-secisbp2-rnai(121152-1)。

4、作為(wei)改(gai)進的是(shi)，所述lv-secisbp2-rnai(121150-1)正(zheng)義鏈(lian)如(ru)seq?id?no.1所示(shi)，反義鏈(lian)如(ru)seq?id?no.2所示(shi)，其中(zhong)，ctcgag為(wei)loop序(xu)列。

5、作(zuo)為改(gai)進的是(shi)，所(suo)(suo)述lv-secisbp2-rnai(121151-1)的正(zheng)義鏈(lian)如seq?id?no.3所(suo)(suo)示，反義鏈(lian)如seq?id?no.4所(suo)(suo)示，其(qi)中，ctcgag為loop序列(lie)。

6、作(zuo)為(wei)改進的(de)是，所述lv-secisbp2-rnai(121152-1)的(de)正(zheng)義(yi)鏈如seq?id?no.5所示，反義(yi)鏈如seq?id?no.6所示，其中，ctcgag為(wei)loop序列(lie)。

7、一種慢病毒載體，包(bao)括上述的干擾bmdm中sbp2蛋白表(biao)達的shrna。

8、作為改進(jin)的是，將干擾bmdm中sbp2蛋白(bai)表(biao)達的shrna克隆到慢病毒(du)表(biao)達載體gv493，即可。

9、基于上述(shu)的(de)干擾bmdm中sbp2蛋白表達的(de)shrna或(huo)上述(shu)的(de)慢病毒載體在調節脂(zhi)肪(fang)炎(yan)癥(zheng)或(huo)胰島(dao)素抵抗上的(de)應用。

10、有益效果：

11、與現有(you)技術相比(bi)，本發(fa)明一(yi)種干擾(rao)bmdm中(zhong)sbp2蛋白表(biao)(biao)(biao)(biao)達的(de)shrna及其慢病毒載體(ti)與應(ying)用(yong)，提供了抑制sbp2基因表(biao)(biao)(biao)(biao)達的(de)sirna并(bing)構建了相應(ying)的(de)sirna表(biao)(biao)(biao)(biao)達載體(ti)，在(zai)細胞(bao)模型中(zhong)通過病毒轉(zhuan)染(ran)的(de)方式有(you)效敲減(jian)了bmdm中(zhong)的(de)sbp2蛋白的(de)表(biao)(biao)(biao)(biao)達，敲減(jian)效率高達80％，高于以往(wang)的(de)rna感染(ran)，且在(zai)造模成功的(de)成年(nian)大(da)(da)鼠bmdm中(zhong)，之(zhi)后與造模成功的(de)pcos大(da)(da)鼠原(yuan)代脂(zhi)肪細胞(bao)共培(pei)養(yang)。

12、本(ben)發明構建(jian)的(de)慢病毒的(de)表達效(xiao)率高(gao)，且構建(jian)工藝穩定、具有良(liang)好的(de)適用性，通過病毒轉染和(he)共培養，能在體(ti)外直觀的(de)顯示出sbp2在pcos脂(zhi)肪(fang)細(xi)胞炎癥和(he)胰島素抵抗病理性進程(cheng)的(de)重要(yao)作用，實(shi)驗(yan)周期短且操作簡(jian)便(bian)，為(wei)在體(ti)實(shi)驗(yan)提供更充(chong)足的(de)依據。

技術特征：

1.一種(zhong)干擾(rao)bmdm中sbp2蛋白(bai)表(biao)達(da)的shrna，其特征在于(yu)，所述(shu)干擾(rao)bmdm中sbp2蛋白(bai)表(biao)達(da)的shrna為lv-secisbp2-rnai(121150-1)，lv-secisbp2-rnai(121151-1)或(huo)lv-secisbp2-rnai(121152-1)。

2.根據權利要求1所(suo)(suo)述的一種(zhong)干擾bmdm中sbp2蛋(dan)白表達的shrna，其特征在于，所(suo)(suo)述lv-secisbp2-rnai(121150-1)正(zheng)義鏈(lian)如seq?id?no.1所(suo)(suo)示(shi)，反義鏈(lian)如seq?id?no.2所(suo)(suo)示(shi)，其中，ctcgag為loop序列(lie)。

3.根據權利(li)要求(qiu)1所(suo)述的一種干擾bmdm中sbp2蛋白表達的shrna，其特(te)征在(zai)于(yu)，所(suo)述lv-secisbp2-rnai(121151-1)的正(zheng)義(yi)鏈(lian)如seq?id?no.3所(suo)示，反義(yi)鏈(lian)如seq?id?no.4所(suo)示，其中，ctcgag為loop序列。

4.根(gen)據權利要(yao)求(qiu)1所述(shu)的(de)一(yi)種干擾bmdm中(zhong)(zhong)sbp2蛋白(bai)表(biao)達的(de)shrna，其特征在于，所述(shu)lv-secisbp2-rnai(121152-1)的(de)正義鏈(lian)如(ru)(ru)seq?id?no.5所示(shi)，反義鏈(lian)如(ru)(ru)seq?id?no.6所示(shi)，其中(zhong)(zhong)，ctcgag為(wei)loop序列。

5.一種慢病毒載(zai)體，其特征(zheng)在于，包括如(ru)權(quan)利要求1所述的干擾bmdm中sbp2蛋白表達的shrna的載(zai)體。

6.根據權(quan)利要求5所述的一種慢(man)病毒載(zai)體，其(qi)特(te)征在于(yu)，將干擾bmdm中(zhong)sbp2蛋(dan)白表達(da)的shrna克隆到慢(man)病毒表達(da)載(zai)體gv493，即(ji)可(ke)。

7.基于權利要(yao)求1所述的干擾bmdm中(zhong)sbp2蛋白表達的shrna或(huo)權利要(yao)求5所述的慢病毒載(zai)體在(zai)調節脂肪炎癥或(huo)胰島素抵抗上的應用。

技術總結
本發明公開了一種干擾BMDM中SBP2蛋白表達的shRNA及其慢病毒載體與應用。所述干擾BMDM中SBP2蛋白表達的shRNA為LV?Secisbp2?RNAi(121152?1)、LV?Secisbp2?RNAi(121150?1)或LV?Secisbp2?RNAi(121151?1)；通過將干擾BMDM中SBP2蛋白表達的shRNA克隆到慢病毒表達載體GV493中獲得慢病毒載體。所得慢病毒載體與原代大鼠脂肪細胞共培養后，加重脂肪炎癥和胰島素抵抗，為調節脂肪胰島素的分泌提供了依據，為治療多囊卵巢綜合癥提供了新的炎性靶點。

技術研發人員：李然然,閆洪超,嚴曉楠,王靜,徐洋,方麗莎,郝永欣,周新
受保護的技術使用者：徐州醫科大學
技術研發日：
技術公布日：2024/9/19