具有顯著抗腫瘤活性的八個卡山烷型二萜類化合物的制作方法
【專利摘要】本發明涉及通過植物化學的提取分離手段從豆科云實屬植物喙莢云實[Caesalpina?minax?Hance]的種子苦石蓮中分離得到8個新的卡山烷型二萜類化合物及此類化合物對胃腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌的細胞毒作用、及其在腫瘤的臨床預防和治療中的應用。
【專利說明】具有顯著抗腫瘤活性的八個卡山烷型二萜類化合物
【技術領域】:
[0001]本發明涉及通過植物化學的提取分離手段從豆科云實屬植物喙莢云實[Caesalpinia minax Hance]的種子苦石蓮中提取分離得到8個新的卡山燒型二職類化合物及此類化合物對胃腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌的細胞毒作用、及其在腫瘤的臨床預防和治療中的應用。
【背景技術】:
[0002]苦石蓮為豆科云實屬植物_莢云實(Caesalpinia minax Hance)的種子。_莢云實俗稱南蛇勒，龍爪刺，為低矮灌木，生于海拔150-680m的山地、山谷、河谷或路邊灌叢中，在我國主要分布于西南和華南地區的廣西、云南、貴州、廣西、廣東及海南等地.苦石蓮性涼，味苦，有清熱化濕，活血散瘀，止痛之功效，是我國南方民間常用草藥，其在民間主要用于治療風熱感冒、流感、肝炎、痢疾、淋濁、癰腫、皮膚瘙癢、瘡癬、跌打損傷、毒蛇咬傷等，為我國中藥典籍《中華本草》等收錄，同時被廣西中藥材標準、貴州中藥材標準、四川中藥材標準等收載，是寶貴的傳統壯藥。研究表明，苦石蓮中的特征性成分及活性成分主要為卡山烷型(cassane) 二職及其內酯類化合物。經藥理活性研究，這類化合物具有很好的抗菌，抗病毒和抗瘧疾，抗腫瘤等活性。
[0003]本發明所涉及的化合物1-VIII均為新化合物，其抗腫瘤活性為首次發現，迄今為止，以上研究成果尚未有專利或文獻報道。
[0004]本發明的目的在于充分利用我國特有的含有卡山烷型二萜的植物資源，深入進行研究開發，尋找具有獨特化學結構，抗腫瘤活性強，且毒副作用小的該類化合物，以期為臨床研究提供新型抗腫瘤藥物。

【發明內容】
:
[0005]本發明提供卡山烷型二萜類化合物在制藥中的應用。
[0006] 本實驗室利用現代分離技術和結構測定手段對豆科云實屬植物喙莢云實的種子苦石蓮進行化學成分研究過程中，從中分離得到8個新的卡山烷型二萜，分別為Ia，6 a -diacetoxy-5a-hydroxy-15-carboxymethyl-12-oxocassa-7(8),13(14)-diene(I)；I a ,6 a ,7 β -triacetoxy-5a -hydroxy-15-carboxymethyl-12-oxocassa-13 (14)-diene
(II)；I a , 6 a , 7 β -triacetoxy-5a -hydroxy-16,16-dimethoxy-12-oxocassa_13 (14)-diene (III) ； I a -acetoxy-7-oxo-14-methylvoucapane-5 (6),8(14),9(11)-diene (IV)；I a，6 a -diacetoxy-5a ,7 β -dihydroxy1-14-methyIvoucapane-8(14),9(11)-diene(V)；
Ia ,2 a -diacetoxy-5a -hydroxyl-12 a -methoxy-14a -methylcassa-13 (15)-en_16,12-olide (VI) ； I a-acetoxy-5a ,7 β-dihydroxy1-12 a-methoxycassa-14 (17),13(15)-diene-16,12-olide(VII) ；I a ,6 a -diacetoxy-5a ,7 β -dihydroxyl-12 a -methoxycassa-14 (17), 13 (15) -diene-16,12-olide (VIII)。通過對這些化合物進行體外抗腫瘤藥效學研究，發現其對人胃腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌均有一定的抑制作用，見下表:[0007]
【權利要求】
1.具有抗腫瘤活性的八個卡山烷型二萜類化合物，其特征在于其是由豆科植物喙莢云實的種子苦石蓮中提取分離得到的，化學結構式為:
2.權利要求1所述的八個化合物1-VIII經腫瘤藥效學實驗證明，具有顯著抗腫瘤活性，結果見下表:
3.權利要求1所述的8個卡山烷型二萜(化合物1-VIII)的制備方法，包括以下步驟: 廣西南寧采得喙莢云實的種子苦石蓮8.0kg,由廣西藥用植物研究所袁經權研究員鑒定為[Caesalpinia minax Hance]。苦石蓮8.0kg粉碎后，甲醇加熱回流提取二次,每次二小時，合并提取液，減壓回收溶劑，濃縮后得總浸膏2020g。苦石蓮總浸膏用氯仿-甲醇溶解后，與100~200目的硅膠拌樣，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，最終得到石油醚部分130g，氯仿部分325g，乙酸乙酯部分160g，丙酮部分305g，甲醇部分llOOg。(提取流程見附圖5所示)。取氯仿部分經硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑1: 0-1: I梯度洗脫，得到12個餾分(Fr.A-L)，從中選取餾分C (15.4g)，餾分D (8.9g)，餾分E (6.Sg)經LH20凝膠柱層析，以氯仿-甲醇40: 60洗脫除去色素。餾分C經反相MCI柱層析，以甲醇-水(30: 70-100: 0)梯度洗脫，得到8個組分(C1-C8)。C7-C8經薄層檢識后合并，合并組分以甲醇-水(60: 40)經反相高壓制備色譜分離，得到化合物I (9.0mg)。餾分D經反相MCI柱層析，以甲醇-水(30: 70-100: 0)梯度洗脫，得到6個組分(D1-D6)。D2-D3經薄層檢識后合并，合并組分經300~400目硅膠柱層析，氯仿-石油醚(I: 1-1: 0)梯度洗脫，得到化合物11(7.8mg)，化合物111(5.5mg)。D4-D5經薄層檢識后合并，合并組分經300~400目硅膠柱層析，氯仿-石油醚(I: 1-1: 0)梯度洗脫，得到化合物IV(8.0mg)，化合物V(6.3mg)餾分E經中壓制備液相，以甲醇-水(40: 70-100: 0)梯度洗脫，得到4個組分(E1-E4)。E2組分以甲醇-水(68: 32)經反相高壓制備色譜分離，得到化合物VI (3.2mg)。E3-E4組分以甲醇-水(60: 40)經反相高壓制備色譜分離，得到化合物VII (6.2mg), VIII (6.8mg)。
【文檔編號】C07C69/21GK103910633SQ201310005537
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2013年1月8日 優先權日:2013年1月8日
【發明者】許旭東, 馬國需, 袁經權, 曹麗, 吳海峰, 張小坡, 田瑜, 吳麗珍, 鄭慶霞, 孫照翠, 鐘明亮, 楊峻山 申請人:中國醫學科學院藥用植物研究所