專利名稱：一種巴西蘇木紅素的提純方法
技術領域：
本發明屬于天然產物分離領域，尤其是涉及一種從蘇木中提純活性物質巴西蘇木紅素的方法。蘇木(lignumsappan，LS)，又稱蘇枋木，蘇赤木，紅柴，紅蘇木，戈梅芳，為豆科 (Leguminosae)植物蘇木(Caesalpinia sappan L)的干燥心材，在我國主要分布于廣西、廣東、臺灣、貴州、云南、四川等地。《中藥大辭典》中記載，蘇木具有活血化瘀、消腫止痛、抗菌消炎、利膽消石之功效。主治產后瘀血、血滯腹痛、經閉、跌打損傷、產后脹悶、心腹絞痛、中風半身不遂。近年來，對蘇木的化學成分和藥理活性都已有大量研究。藥理實驗證實，蘇木具有收縮心血管、抗腫瘤、免疫抑制、降血糖作用。其主要成分巴西蘇木紅素，文獻報道有抗補體、抗氧化、免疫抑制以及對離體心臟具有明顯的肌肉收縮功能。巴西蘇木紅素(Brazilein，C16H12O5),又名氧化巴西蘇木素，是巴西蘇木素 (Brazilin, C16H14O5)的氧化后產物，兩者是蘇木藥材中提取分離得到的兩種結構極為相似的化合物。巴西蘇木素在空氣中即可氧化為巴西蘇木紅素。A.巴西蘇木素；B.巴西蘇木紅素巴西蘇木紅素淡黃色粉末，易溶于甲醇、乙酸乙酯、乙醚，可溶于水。現有技術中，巴西蘇木紅素的提取分離主要有以下兩種方法。專利“藥物化合物巴西蘇木紅素制備方法和用途”(申請號200710122084. 6)，該專利采用堿液加熱提取，提取液調酸沉淀，收集沉淀物用醇溶解后，采用硅膠柱和凝膠柱等色譜手段分離，該方法采用堿液提取，又經加酸處理，產生的廢液難以處理，且經柱色譜純化周期長，制備量少；專利“蘇木紅素的新用途”(申請號200410004758. 9)，該專利采用95%乙醇提取，提取液濃縮，加甲醇溶解，上聚酰胺樹脂或硅膠柱分離，該方法采用聚酰胺樹脂分離得到巴西蘇木紅素純度較低，采用硅膠柱分離周期長。
發明內容
一種巴西蘇木紅素的提純方法，其特征在于包含以下步驟將蘇木粉碎，加入提取罐中，以乙醇液為溶媒采用連續逆流法提取，提取液濃縮至浸膏，用乙酸乙酯溶解，溶液與
背景技術：
硅膠拌勻，低溫烘干后加入至石油醚中回流提取3 5次，濾出硅膠，再加入至乙酸乙酯中回流提取3 6次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品，最后采用高效制備液相色譜法純化，收集目標洗脫液，蒸干即得產品。所述的乙醇液為75 95%乙醇水溶液，用量是藥材的8 20倍。所述的連續逆流提取分為3 6個單元，提取溫度50 80°C，提取時間為1 池。所述的高效制備液相色譜流動相為乙腈-0. 3%磷酸(12 18 82 88)。本發明的優勢在于采用連續逆流提取，節約溶劑，提取率高；采用石油醚脫脂， 再經乙酸乙酯回流得到較純的巴西蘇木素類物質，其主要成分巴西蘇木紅素含量高；以制備型高液相為分離手段，可以獲得純度在98%以上的巴西蘇木紅素，且單針分離時間短，非常適合大批量的制備，可實現批量制備。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取蘇木藥材1kg，粉碎，置于提取罐中，加入20L75%乙醇液作為溶媒采用連續逆流法提取，提取分為3個單元進行，在50°C條件下提取池，提取液濃縮至浸膏，用適量乙酸乙酯溶解，溶液與500g硅膠拌勻，60°C條件下烘干后加入至石油醚中回流提取3次，濾出硅膠，再加入至乙酸乙酯中回流提取6次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品；用甲醇溶解，經0. 45 μ m微濾膜過濾得樣品液，經制備型高液相色譜進行純化，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為15cm、直徑為7cm，通過六通閥進樣，進樣體積為25ml，以乙腈-0.3%磷酸(12 88)為流動相，控制流動相流速為150ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為^Onm，收集目標流分，濃縮至干，得含量98. 8%的巴西蘇木紅素5. 7g。實施例2:取蘇木藥材^ig,粉碎，置于提取罐中，加入16L95%乙醇液作為溶媒采用連續逆流法提取，提取分為6個單元進行，在80°C條件下提取lh，提取液濃縮至浸膏，用適量乙酸乙酯溶解，溶液與800g硅膠拌勻，50°C條件下烘干后加入至石油醚中回流提取5次，濾出硅膠，再加入至乙酸乙酯中回流提取3次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品；用甲醇溶解，經0. 45 μ m微濾膜過濾得樣品液，經制備型高液相色譜進行純化，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為15cm、直徑為7cm，通過六通閥進樣，進樣體積為25ml，以乙腈-0.3%磷酸(18 82)為流動相，控制流動相流速為lOOml/min，紫外在線檢測，檢測波長為^Onm，收集目標流分，濃縮至干，得含量98. 3%的巴西蘇木紅素13. 7g。實施例3:取蘇木藥材^g，粉碎，置于提取罐中，加入50L80%乙醇液作為溶媒采用連續逆流法提取，提取分為5個單元進行，在65°C條件下提取池，提取液濃縮至浸膏，用適量乙酸乙酯溶解，溶液與3kg硅膠拌勻，70°C條件下烘干后加入至石油醚中回流提取4次，濾出硅膠，再加入至乙酸乙酯中回流提取5次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品；用甲醇溶解，經0. 45 μ m微濾膜過濾得樣品液，經制備型高液相色譜進行純化，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為15cm、直徑為7cm，通過六通閥進樣，進樣體積為25ml，以乙腈-0.3%磷酸(15 85)為流動相，控制流動相流速為120ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為^Onm，收集目標流分，濃縮至干，得含量98. 的巴西蘇木紅素33. lg。實施例4 取蘇木藥材10kg，粉碎，置于提取罐中，加入150L85%乙醇液作為溶媒采用連續逆流法提取，提取分為6個單元進行，在75°C條件下提取2.證，提取液濃縮至浸膏，用適量乙酸乙酯溶解，溶液與6kg硅膠拌勻，55°C條件下烘干后加入至石油醚中回流提取5次，濾出硅膠，再加入至乙酸乙酯中回流提取5次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品；用甲醇溶解，經0. 45 μ m微濾膜過濾得樣品液，經制備型高液相色譜進行純化，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為15cm、直徑為7cm，通過六通閥進樣，進樣體積為25ml，以乙腈-0.3%磷酸(14 86)為流動相，控制流動相流速為180ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為^Onm，收集目標流分，濃縮至干，得含量98. 5%的巴西蘇木紅素61. 4g。
權利要求
1.一種巴西蘇木紅素的提純方法，其特征在于包含以下步驟將蘇木粉碎，加入提取罐中，以乙醇液為溶媒采用連續逆流法提取，提取液濃縮至浸膏，用乙酸乙酯溶解，溶液與硅膠拌勻，低溫烘干后加入石油醚中回流提取3 5次，濾出硅膠，再加入乙酸乙酯回流提取3 6次，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品，最后采用高效制備液相色譜法純化，收集目標洗脫液，蒸干即得產品。
2.根據權利要求1所述的一種巴西蘇木紅素的提純方法，其特征在于所述的高效制備液相色譜流動相為乙腈-0. 3%磷酸(12 18 82 88)。
全文摘要
本發明提供一種巴西蘇木紅素的提純方法，該方法包括以下步驟將蘇木粉碎，加入提取罐中，采用連續逆流法提取，提取液濃縮至浸膏，用乙酸乙酯溶解，溶液與硅膠拌勻，低溫烘干后加入至石油醚中回流提取，濾出硅膠，再加入乙酸乙酯回流提取，提取液除溶后得到巴西蘇木紅素粗品，最后采用高效制備液相色譜法純化，收集目標洗脫液，蒸干即得產品。本方法具有制備周期短、產品純度高的優點。
文檔編號C07D311/94GK102241660SQ20111011785
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月6日 優先權日2011年5月6日
發明者劉東鋒, 吳艷波, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司