專利名稱：具有激酶抑制活性的異喹啉衍生物和包含異喹啉衍生物的藥劑的制作方法
背景技術：
發明領域本發明涉及具有Rho激酶抑制活性的異喹啉衍生物，更特別涉及用于治療通過Rho激酶調解的疾病的異喹啉衍生物。
背景技術：
已經揭示，一收到來自各種細胞膜受體的信號Rho就被激活，并且激活的Rho通過ROCK/Rho激酶和進一步的肌動球蛋白系統，作為以下多種細胞現象的分子開關起作用例如平滑肌收縮，細胞運動，細胞粘著，細胞特性的改變(形成肌動蛋白應力纖維)，細胞分裂的控制(胞質分裂亢進或基因轉錄激活)，血小板聚集，白細胞聚集，細胞增殖，致癌作用亢進和惡性腫瘤的擴散等。
平滑肌收縮密切涉及以下的病理學高血壓，心絞痛，血管痙攣，例如心血管收縮和腦血管收縮，哮喘，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，頻尿，陽萎等。細胞運動在惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答等中起重要作用。細胞粘著密切涉及惡性腫瘤的轉移，炎癥和自身免疫病。細胞形態的改變密切涉及大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病等。細胞增殖密切涉及惡性腫瘤，動脈硬化等。因此，Rho密切涉及各種疾病。
ROCK或ROCK I(日本專利公開號135683/1997；和T.Ishizaki等，EMBO J.，15卷，第8期，1885-1893頁(1996))和Rho激酶或ROCK II(日本專利公開號113187/1998；和T.Matsui等，EMBO J.，15卷，第9期，2208-2216頁(1996))作為絲氨酸/蘇氨酸激酶報道，該激酶通過Rho的活化激活并顯示是同功酶(O.Nakagawa等，FEBSLett.，392卷，第2期，189-193頁(1996))。
具有ROCK/Rho激酶抑制活性的化合物包括反-4-氨基(烷基)-1-吡啶基氨基甲酰基環己烷化合物(WO90/05723)，苯甲酰胺化合物(WO95/28387)，Y-27632(Uehata，M.，Ishizaki，T.等，Nature，389990-994頁(1997))，和作為腦血管收縮抑制劑可商購的fasudil氫氯化物(HA-1077，Asahi Kasei Kogyo K.K.)(Ono-Saito，N.，Niki，I.，Hadaka，H.Pharmacol.Ther.，123-131頁(1999))。WO 98/06433公開了ROCK/Rho激酶抑制劑。另外，WO 01/56988公開了具有激酶抑制活性的含氮化合物。
發明概述本發明的一個目的是提供具有Rho激酶抑制活性并用于治療由Rho激酶調解的疾病的化合物。
本發明的另一個目的是提供用于治療由Rho激酶調解的疾病的藥物組合物。
本發明人已經發現某些異喹啉衍生物具有非常優異的Rho激酶抑制活性(藥理學試驗實施例1和3)。本發明人進一步確認異喹啉衍生物對于治療由Rho激酶調解的疾病是非常有效的(藥理學試驗實施例2，4和5)。
因此，根據本發明，提供了由式(I)代表的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中Q代表選自苯基，吡啶基，吡咯基，噻吩基和呋喃基的環狀基團；在環狀基團上的一個或兩個氫原子任選被選自鹵原子，C1-4烷基，硝基和氨基的取代基取代；p是2或3。
根據本發明的另一方面，提供了包含根據本發明作為活性組分的化合物的藥物組合物。
發明詳述化合物這里使用的術語“烷基”意指直鏈或支鏈烷基基團。C1-4烷基的例子包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基和叔丁基。
術語“鹵原子”意指氟，氯，溴或碘原子。
Q優選代表選自以下的環狀基團苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基，4-氟苯基，2，6-二氟苯基，2，6-二氯苯基，4-甲基苯基，4-異丙基苯基，2-硝基苯基，3-硝基苯基，4-硝基苯基，4-氯-2-硝基苯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-氨基苯基，3-氨基苯基，4-氨基苯基，2-氨基-4-氯苯基，1H-2-吡咯基，1H-3-吡咯基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-呋喃基和3-呋喃基。特別優選的是3-硝基苯基和3-氨基苯基。
優選的由式(I)代表的化合物的例子包括其中Q代表3-硝基苯基或3-氨基苯基并且p是2的化合物。
更優選的由式(I)代表的化合物的例子包括以下化合物(1)N5-[1-(2-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(2)N5-[1-(3-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(3)N5-[1-(4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(4)N5-[1-(4-氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(5)N5-[1-(2，6-二氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(6)N5-[1-(2，6-二氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(7)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(8)N5-[1-(4-異丙基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(9)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(10)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(11)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(12)N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(13)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(14)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(15)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(16)N5-[1-(2-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(17)N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(18)N5-[1-(4-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(19)N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(20)N5-[1-(2-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(21)N5-[1-(3-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(22)N5-[1-(4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(23)N-(1-芐基-3-哌啶基)-5-異喹啉基胺；(24)N5-[1-(2，6-二氟芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(25)N5-[1-(2，6-二氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(26)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)-3-哌啶基]胺；(27)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-異丙基芐基)-3-哌啶基]胺；(28)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(29)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(30)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(31)N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(32)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(33)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(34)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(35)N5-[1-(2-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(36)N5-[1-(3-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(37)N5-[1-(4-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(38)N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(39)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-2-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺；(40)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-3-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺；(41)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺；(42)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺；(43)N-[1-(2-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺；(44)N-[1-(3-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺；(45)(3S)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺；和(46)(3R)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺。
在由式(I)代表的化合物中特別優選的化合物的例子包括(3S)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺和(3R)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺和其混合物。
由式(I)代表的化合物的可藥用鹽包括酸加成鹽。酸加成鹽包括與無機酸，例如鹽酸，硫酸，磷酸，氫溴酸和硝酸的鹽；與有機酸，例如馬來酸，富馬酸，蘋果酸，草酸，酒石酸，琥珀酸，檸檬酸，醋酸，乳酸，甲磺酸，對甲苯磺酸和水楊酸的鹽；和與氨基酸例如賴氨酸的鹽。這些酸加成鹽可以通過常規方法，例如通過與堿，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀反應轉化成相應的游離堿。另外，化合物可以生成季銨鹽或與金屬，例如鈉，鉀，鈣，鎂或鋁的鹽。
由式(I)代表的化合物的可藥用溶劑化物包括水合物。
在由式(I)代表的化合物中，可以存在旋光異構體，其外消旋形式，及順式和反式異構體，并且根據本發明的化合物包括所有的這些異構體。這些異構體可以根據常規方法分離，或對于各個異構體可以通過使用各種材料制備。
化合物的制備根據本發明的化合物可以根據下圖制備。
方案1
其中Pr代表保護基團；Q和p如式(I)中所定義。
其中Q代表苯基的化合物可以通過用合適的官能團，例如叔丁氧羰基保護(R)-(-)-3-吡咯烷醇，其中p＝1，或3-羥基哌啶，其中p＝2，中的仲胺產生，之后在室溫下在DMSO中用三氧化硫/三甲基胺絡合物氧化受保護的化合物，在無水硫酸鈉存在下在乙酸中氧化的化合物與5-氨基異喹啉縮合，用三乙酸氫化鈉還原縮合物以產生中間體，例如用三氟乙酸去保護中間體，之后在堿如碳酸鉀存在下使去保護化合物與烷基氯化物Q-CH2-Cl反應。
方案2 其中Pr代表保護基團；Q和p如式(I)中所定義。
其中Q代表吡咯基，噻吩基或呋喃基的化合物可以通過用合適的官能團，例如叔丁氧羰基保護(R)-(-)-3-吡咯烷醇，其中p＝1，或3-羥基哌啶，其中p＝2，中的仲胺產生，之后在室溫下在DMSO中用三氧化硫/三甲基胺絡合物氧化受保護的化合物，在無水硫酸鈉存在下在乙酸中氧化的化合物與5-氨基異喹啉縮合，用三乙酸氫化鈉還原縮合物以產生中間體，例如用三氟乙酸去保護中間體，之后使用N-[3-(二乙基氨基)丙基]-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和1-羥基苯并三唑用羧酸Q-COOH縮合去保護化合物，隨后用硼烷/四氫呋喃絡合物還原縮合物。
方案3 其中Pr代表保護基團；L代表離去基團；Q和p如式(I)中所定義。
這些化合物可以通過以下方法制備在堿，例如碳酸鉀存在下3-氨基吡啶，其中p＝1，或3-羥基哌啶，其中p＝2，的仲胺與烷基氯化物Q-CH2-Cl反應，其中伯胺已經通過合適的保護基團，例如(3R)-(+)-3-(叔丁氧氨基)吡啶)保護，例如用三氟乙酸去保護反應產物，之后在80℃下在碳酸銫存在下在甲苯中將催化量的乙酸鈀和BINAP加入到去保護化合物和具有離去基團X(例如，當X代表三氟甲基磺酸酯時，該異喹啉可以通過5-羥基異喹啉與三氟甲烷磺酸酸酐反應產生)的異喹啉中。
根據本發明的化合物也可以通過在WO 01/56988中描述的方法制備。
化合物/藥物組合物的應用根據本發明的化合物具有Rho激酶抑制活性(參見藥理學試驗實施例1和3)。因此由式(I)代表的化合物可以用于治療通過Rho激酶調解的疾病。通過Rho激酶調解的疾病包括高血壓，哮喘包括支氣管哮喘，心絞痛，腦血管收縮，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，頻尿，惡性腫瘤，惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答，炎癥，自身免疫病，大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病，慢性腎衰竭，慢性腎炎，糖尿病腎病，IgA腎病，血栓癥相關疾病，風濕癥，陽痿和纖維癥。
根據本發明，提供了用于治療由Rho激酶調解的疾病的方法，包括給包括人的哺乳動物服用有效治療劑量的根據本發明的化合物和可藥用載體的步驟。
另外，根據本發明也提供了根據本發明的化合物的在用于治療由Rho激酶調解的疾病的藥劑生產中的應用。
<高血壓，哮喘等>
已經揭示，一收到來自各種細胞膜受體的信號Rho就被激活并且激活的Rho通過ROCK/Rho激酶和進一步的肌動球蛋白系統在平滑肌收縮中起作用(K.Kimura等，Science，273卷，5272期，245-248頁(1996)；和Kureishi等，J.Biol.Chem.，272卷，19期，12257-60頁(1997))。平滑肌收縮密切涉及以下的病理學高血壓，心絞痛，腦血管收縮，哮喘，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，陽萎，頻尿等(例如高血壓AP.Samlyo等，Rev.Physiol.Biochem.Pharmacol.，134卷，209-34頁(1999)，心絞痛Shimokawa等，Cardiovasc.Res.，43卷，4期，1029-39頁(1999)；和Satoh，H.，和Kawahara，KJpn.J.Pharmacol.，79(增刊)211頁，1999，腦血管收縮Motohiko Sato和Kohzo Kaibuchi日本神經外科協會(Japan Neurosurgical Society)第57屆年會摘要153，1998；N.Ono等，Pharmacol.Ther.，82卷，2-3期，123-31頁(1991)；和Shimokawa等，Cardiovasc.Res.，43卷，4期，1029-39頁(1999)，陽萎Andersson，K.E.和Stief，C.G.和World J.Vrol.15，14-20(1997))。
對于高血壓，ROCK/Rho激酶抑制劑在自發高血壓鼠(SHR)，二腎高血壓鼠和鹽水脫氧皮質甾酮乙酸酯鼠(DOCA鼠)中具有降壓活性(Uehata，M.，Ishizaki，T.等，Nature，389990-994，1997)。
對于哮喘，ROCK/Rho激酶抑制劑在切除支氣管或支氣管哮喘模型動物(WO 93/05021和WO 95/28387)中具有支氣管舒張活性和抗哮喘活性。另外，Rho激酶抑制劑以取決于劑量的方式抑制了在支氣管哮喘模型中通過吸入乙酰膽堿引起的支氣管抗性的增加，并且在體外以取決于濃度的方式抑制了通過在人的外周血的嗜酸性白細胞中的PAF引起的趨向性(Kunihiko litsukaArerugi(過敏)，47943，1998，Kunihiko litsuka和Alihirp YoshiiJournal of The JapaneseRespiratory Society，371996，1999)。另外，Rho激酶也涉及白細胞的轉移。
對于青光眼，已知ROCK/Rho激酶抑制劑涉及兔和牛的小粱網，其通過兔和人的氨甲酰膽堿和睫狀肌的收縮誘發(M.Honjo等，Investigative Ophthalmology and Visual Science，2001，42137-144，和T.Hukigami等，Biochem Biophys Res Commun.2001年10月26號；288(2)296-300)以降低兔的眼緊張(WO 00/09162和M.Waki等，Current Eye Research 2001，22卷，6期，470-474頁)。
對于陽痿，ROCK/Rho激酶抑制劑具有體外鼠陰莖海綿體放松活性和具有體外鼠陰莖海綿體壓力增加活性(Kanchan Chitaley等，NatureMedicine，7卷，1期，119-122(2001))。
根據本發明的化合物事實上具有白細胞轉移抑制活性和降血壓活性(參見藥理學試驗實施例2和5)。
因此，根據本發明的化合物可以用于治療高血壓，哮喘包括支氣管哮喘，心絞痛，腦血管收縮，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，陽萎，頻尿和其它疾病。
<惡性腫瘤，惡性腫瘤的轉移等>
一收到來自各種細胞膜受體的信號Rho就被激活，并且激活的Rho通過ROCK/Rho激酶和進一步的肌動球蛋白系統，作為以下多種細胞現象的分子開關起作用例如細胞運動，細胞粘著，細胞質的改變(形成肌動蛋白應力纖維)，細胞分裂的控制(胞質分裂亢進或基因轉錄激活)，致癌作用亢進和惡性腫瘤的擴散等(P.Keely等，Trends CellBiol.8卷，3期，101-6頁(1998)；和K.Itoh等，Nat.Med.，5卷，2期，221-5頁(1999))。
細胞運動在惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答等中起重要作用。細胞粘著密切涉及惡性腫瘤的轉移，炎癥和自身免疫病。細胞骨架變化密切涉及大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病等。細胞增殖密切涉及惡性腫瘤，動脈硬化等(試驗藥物，17卷，7期(1999))。
特別地，對于細胞轉移成惡性狀態和惡性腫瘤的轉移/擴散，Rho涉及細胞形態的控制，并且另外涉及細胞增殖，特別是涉及從合成前期(G1階段)到合成期(S階段)的細胞循環的進展(Yamamoto，M.，Marui，N.，Oncogene，81449-1455，1993)。另外，已經發現致癌基因，例如Dbl是Rho族(Rho family)的GDP-GTP交換因子(Hart，M.J.，Eva，A.，Nature，354311-314，1991)。另外，已經發現Rac和Rho位于Ras信息傳遞的激活下游(Ridley，A.J.和Hall.，A.Cell，70401-410，1992)。另外，據報道Rac和Rho位于Ras的下游，并涉及通過Ras的癌細胞到惡性狀態的轉變。(Qui，R.G.，Chen，J.，等Nature，374457-459，1995.，Qui，R.G.，Chen，J.，等Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9211781-11785，1995，和Khosravi-Far，R.，Solski，P.A.Mol.Cell.Biol.，156443-6453，1995)。進一步地，已經證明通過ROCK/Rho激酶抑制劑(Y-27632)從Rho到ROCK的途徑涉及癌細胞到惡性狀態的轉變(Sahai，E.，Ishizaki，T.Curr.Biol.，9136-145，1999)。
另外，據報道在各種細胞系統中，例如白細胞，在惡性腫瘤擴散中的細胞運動通過肌動球蛋白系統調節，當控制肌動球蛋白系統和Rho族蛋白的運動裝置和胞內信號傳遞系統調節細胞骨架蛋白和控制各種細胞功能，例如細胞的形態改變，粘著，運動，分裂，傳遞調節等時(K.Itoh等，Nat.Med.，5卷，2期，221-5(1999)；P.Keely等，Trends Cell Biol.8卷，3期，101-6頁(1998))。
另據報道Rho的ROCK下游通過肌動球蛋白系統的激活控制擴散運動(Yashioka，K.，Matsumura，F.J.Biol.Chem.，2735146-5154，1998)。已經證明通過ROCK/Rho激酶抑制劑(Y-27632)控制從Rho到ROCK的途徑抑制了擴散運動(Itoh，K.，Yashioka，K.NatureMed.，5221-225，1999)。
因此，根據本發明的化合物可以用于治療惡性腫瘤，惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答，炎癥，自身免疫病，大腦功能紊亂，骨質疏松和微生物原病。
<腎病>
在Rho GDI昏迷小鼠中發現腎紊亂(Oncogene，1999；18(39)5373-80)。
另外，如上所述，一收到來自各種細胞膜受體的信號Rho就被激活，并且激活的Rho涉及通過ROCK/Rho激酶和肌動球蛋白系統的細胞粘著或白細胞的轉移。細胞粘著和白細胞的轉移涉及炎癥，特別是腎炎(Osamu Fujimoto和Kohzo Kaibuchi，Journal of The JapaneseSociety of Internal Medicine，1999，88(1)；148-54)。
另外，Rho涉及通過HGF，氧化的LDL，血小板，或Na-H交換的腎炎(Mol.Cell.Biol.1995；15(2)1110-22；J.Biol.Chem.1999；274(43)30361-4；J.Biol.Chem.1999；274(40)28293-300；和EMBO J.，1998；17(16)4712-22)。
根據本發明的化合物實際上具有蛋白尿改善活性(參見藥理學試驗實施例4)。
因此，根據本發明的化合物可以用于治療慢性腎衰竭，慢性腎炎，糖尿病腎病和IgA腎病。
<炎癥，血栓癥相關疾病等>
已知一收到來自各種細胞膜受體的信號Rho就被激活，并且激活的Rho作為細胞現象，例如血小板聚集，白細胞聚集，和白細胞轉移的分子開關通過Rho激酶和進一步的肌動球蛋白系統起作用(K.Naka等，Blood，90卷，10期，3736-42頁(1997))。血小板聚集，白細胞聚集和白細胞轉移密切涉及血栓，炎癥，纖維癥等。
根據本發明的化合物實際上具有白細胞轉移抑制活性(參見藥理學試驗實施例2)。
因此，根據本發明的化合物可以用于治療炎癥，哮喘，與血栓有關的疾病，例如心梗塞，腦梗塞，動脈硬化管腔閉合，血栓梗阻，和全身性血管凝固綜合癥，風濕癥，和纖維癥。
包含作為活性成分的本發明化合物的藥物組合物可以給人和人以外的動物口服或通過給藥途徑，例如靜脈內給藥，肌內給藥，皮下給藥，直腸給藥，或經皮膚給藥腸胃外服用。因此，包含作為活性成分的根據本發明的化合物的藥物組合物可以配制成根據給藥途徑的合適劑形。
具體地，口服制劑包括片劑，膠囊，粉劑，粒劑，糖漿，丸劑和錠劑，腸胃外制劑包括注射，例如溶液和懸浮液，吸入劑，栓劑，經皮吸收制劑，例如膠布，軟膏，滴眼液，和眼藥膏。
這些各種各樣的制劑可以通過常規方法，例如與通常使用的組分，例如賦形劑，崩解劑，粘合劑，潤滑劑，著色劑，稀釋劑，矯正劑，食用香料，乳化劑，和溶劑化物一起制備。
賦形劑包括例如乳糖，葡萄糖，玉米淀粉，山梨糖醇，和晶態纖維素。崩解劑包括例如淀粉，藻酸鈉，明膠粉，碳酸鈣，檸檬酸鈣和糊精。粘合劑包括例如二甲基纖維素，聚乙烯基醇，聚乙烯基醚，甲基纖維素，乙基纖維素，阿拉伯樹膠，明膠，羥丙基纖維素，和聚乙烯基吡咯烷酮。潤滑劑包括例如滑石，硬脂酸鎂，聚乙二醇，和氫化植物油。
在固體制劑的配置中，使用添加劑，例如蔗糖，乳糖，纖維素糖，D-甘露糖醇，麥芽糖醇，葡聚糖，淀粉，瓊脂，藻酸鹽，甲殼質，脫乙酰幾丁質，果膠，黃嗜膠，阿拉伯樹膠，明膠，骨膠原，酪蛋白，清蛋白，磷酸鈣，山梨糖醇，甘氨酸，羧甲基纖維素，聚乙烯基吡咯烷酮，羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，甘油，聚乙二醇，碳酸氫鈉，硬脂酸鎂和滑石。另外，如需要，片劑可以是其上提供常規涂層的那些，例如糖涂覆的片劑，包囊涂覆的片劑，膜涂覆的片劑，或兩層片劑，和多層片劑。
在半固體制劑的配置中，可以使用動物脂肪和油，例如橄欖油，玉米油，和蓖麻油，礦物脂肪和油，例如礦脂，白礦脂，和硬石蠟，蠟，例如霍霍巴油，巴西棕櫚蠟，和蜂蠟，和部分合成或全部合成的甘油脂肪酸酯，例如月桂酸，肉豆蔻酸，和棕櫚酸等。其可以商購的產品的例子包括Dynamid Nobel生產的Witepsol和Nippon Oils &Fats Co.，Ltd生產的Pharmasol。
在溶液的配置中，可以使用添加劑，例如氯化鈉，葡萄糖，山梨糖醇，甘油，橄欖油，丙二醇，和乙醇。在注射劑的配置中，可以使用無菌水溶液，例如生理鹽水，等滲溶液，油性溶液，例如芝麻油和豆油。如需要，可以與上述溶液一起使用合適的懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉，非離子表面活性劑，溶劑化物，例如苯甲酸芐酯，苯甲醇等。
在滴眼液的配置中，可以使用含水液體制劑或水溶液，并特別是注射用的無菌水溶液。各種添加劑，例如緩沖劑，優選例如減輕刺激的硼酸鹽緩沖劑，乙酸鹽緩沖劑，和碳酸鹽緩沖劑，等滲壓劑(isotonicity)，溶劑化物，防腐劑，增稠劑，螯合劑，pH調節劑(通常，pH優選調整到大約2-8.5)，和芳族化合物，可以適當地添加到滴眼液的液體制劑中。
在藥物組合物中根據本發明的化合物的含量可以根據劑形變化。然而，含量通常是基于全部組合物的大約0.1-100重量％，優選大約1-50重量％。
劑量可以考慮特別的條件，例如年齡，重量，性別，疾病類型，和病人的嚴重程度適當決定，并且制劑可以以例如大約1-500mg的量服用。該劑量可以以每日一次或每日幾次的分割劑量服用。
實施例本發明進一步通過下面的實施例解釋，這些實施例不擬限制本發明。
中間體13-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(R)-吡咯烷醇(東京化學工業有限公司(Tokyo ChemicalIndustry Co.，Ltd)，12.4g，100mmol)溶解于100ml 3N氫氧化鈉的水溶液中。在0℃下向其中滴加二碳酸二叔丁基酯(東京化學工業有限公司，25.0g，120mmol)在四氫呋喃中的溶液(50ml)。用pH試紙測定混合物的pH并發現是11。之后混合物在室溫下攪拌2小時之后濃縮以除去大部分四氫呋喃。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮以產生粗產品。
粗產品和三乙基胺(20ml)溶解于無水二甲基亞砜(100ml)中，并且在室溫下向其中一點一點添加研成粉的三氧化硫/三乙基胺絡合物(Aldrich，28.0g，200mmol)。混合物在室溫下攪拌18小時。之后向反應溶液中添加水(200ml)以停止反應。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮得到粗產品。
粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫，接著用氯仿洗脫僅僅產生中間體(11.25g)。
中間體(3.70g，20mmol)和5-氨基異喹啉(Aldrich，2.48g，17mmol)溶解于100ml乙酸中。向其中添加硫酸鈉(14.2g，100mmol)，并且混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物被冷卻到0℃，向其中一點一點添加三乙酸氫化鈉(Aldrich，4.44g，20mmol)，并且混合物在室溫下攪拌18小時。反應溶液在減壓下濃縮以除去大部分乙酸。之后通過添加飽和的碳酸氫鈉溶液調整反應混合物的pH＝8并通過Celite過濾，濾液分離成有機層和含水層。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮以產生粗產品。
在二氯甲烷中的粗產品被裝入硅膠柱并用己烷洗脫。首先僅用己烷，隨后用己烷/氯仿(1∶1)，最后僅用氯仿進行洗脫，收集到具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分以產生標題化合物(3.70g，12mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.46(s，9H)，1.75-1.94(m，1H)，2.02-2.10(m，1H)，3.35-3.55(m，31H)，3.75-3.86(m，1H)，4.17-4.24(m，1H)，4.705-4.90(m，1H)，6.91(d，J＝7.6Hz，1H)，7.44(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(t，J＝7.9Hz，1H)，7.80-7.90(m，1H)，8.42(d，J＝6.4Hz，1H)，9.20(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z314(M++1)中間體23-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(R)-吡咯烷醇(東京化學工業有限公司，12.4g，100mmol)溶解于100ml 3N氫氧化鈉的水溶液中。在0℃下向其中滴加二碳酸二叔丁基酯(東京化學工業有限公司，25.0g，120mmol)在四氫呋喃中的溶液(50ml)。用pH試紙確定混合物的pH是11。混合物在室溫下攪拌2小時之后濃縮以除去大部分四氫呋喃。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮以產生粗產品。
粗產品和三乙基胺(20ml)溶解于無水二甲基亞砜(100ml)中。在室溫下向其中一點一點添加研成細粉的三氧化硫/三乙基胺絡合物(Aldrich，28.0g，200mmol)。混合物在室溫下攪拌18小時。之后添加200ml水以停止反應。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮以產生粗產品。
粗產品通過用氯仿洗脫的硅膠柱純化。用氯仿進行洗脫，以產生中間體(15.6g)。
中間體(3.70g，20mmol)和5-氨基異喹啉(Aldrich，2.48g，17mmol)溶解于100ml乙酸中。向其中添加硫酸鈉(14.2g，100mmol)，并且混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物被冷卻到0℃。向其中一點一點添加三乙酸氫化鈉(Aldrich，4.44g，20mmol)，并且混合物在室溫下攪拌18小時。反應溶液在減壓下濃縮以除去大部分乙酸。之后通過添加飽和的碳酸氫鈉溶液調整反應混合物的pH＝8并通過Celite過濾，濾液分離成有機層和含水層。含水層用乙酸乙酯萃取三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機層并濃縮以產生粗產品。
溶解于二氯甲烷的粗產品通過硅膠柱純化并用己烷洗脫。首先僅僅用己烷，之后用己烷/氯仿(1∶1)，最后僅僅用氯仿進行洗脫，收集到具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分以產生標題化合物(3.70g，12mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.44(s，9H)，1.48-1.68(m，1H)，1.73-1.83(m，2H)，1.90-2.10(m，1H)，3.10-3.32(m，2H)，3.52-3.65(m，2H)，3.92-3.98(m，1H)，6.86(d，J＝7.6Hz，1H)，7.30(d，J＝8.3Hz，1H)，7.45(t，J＝7.9Hz，1H)，7.54(d，J＝5.8Hz，1H)，8.42(d，J＝5.8Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z328(M++1)實施例1N5-[1-(2氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司(Wako Kagaku Industry，Co.)，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(28mg，0.083mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.98-2.10(m，1H)，2.40-2.52(m，1H)，2.70-2.90(m，1H)，3.00-3.86(m，3H)，4.00-4.15(m，2H)，4.25-4.35(m，1H)，6.59(d，J＝7.6Hz，1H)，7.20-7.28(m，3H)，7.32-7.38(m，2H)，7.63-7.83(m，2H)，8.44(d，J＝5.8Hz，1H)，9.07(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)339(M++1)實施例2N5-[1-(3-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(14mg，0.042mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)2.00-2.10(m，1H)，2.45-2.55(m，1H)，2.70-2.80(m，1H)，3.00-3.45(m，3H)，3.80-3.90(m，2H)，4.25-4.36(m，1H)，6.64(d，J＝7.6Hz，1H)，7.28-7.34(m，3H)，7.37-7.43(m，3H)，7.75-7.85(m，1H)，8.48(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)339(M++1)實施例3N5-[1-(4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向反應溶液中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(11mg，0.03mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)2.00-2.10(m，1H)，2.45-2.55(m，1H)，2.60-2.90(m，1H)，3.00-3.40(m，3H)，3.85-4.00(m，2H)，4.28-4.50(m，1H)，6.62(d，J＝7.3Hz，1H)，7.28-7.44(m，5H)，7.80-8.00(m，1H)，8.48(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)339(M++1)實施例4N5-[1-(4-氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向溶液中滴加4-氟芐基氯(39mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(17mg，0.053mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.80-2.10(m，1H)，2.40-2.53(m，1H)，2.57-2.75(m，1H)，2.90-3.25(m，3H)，3.75-3.88(m，2H)，4.21-4.31(m，1H)，6.64(d，J＝7.6Hz，1H)，7.03(t，J＝8.5Hz，2H)，7.30(d，J＝8.0Hz，1H)，7.35-7.43(m，3H)，7.65-7.78(m，1H)，8.47(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)332(M++1)實施例5N5-[1-(2，6-二氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于丙烯腈中。在室溫下向溶液中滴加2，6-氟芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(34mg，0.10mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.78-1.90(m，1H)，2.35-2.45(m，1H)，2.52-2.65(m，1H)，2.88-3.00(m，3H)，3.90(s，2H)，4.11-4.20(m，1H)，4.75-4.85(m，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，6.85-6.95(m，3H)，7.29(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(t，J＝7.9Hz，1H)，7.58(d，J＝6.1Hz，1H)，8.44(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)340(M++1)實施例6N5-[1-(2，6-二氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2，6-二氯芐基氯(49mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(22mg，0.059mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.83-1.95(m，1H)，2.33-2.43(m，1H)，2.65-2.75(m，1H)，2.95-3.15(m，3H)，4.09(s，2H)，4.13-4.24(m，1H)，4.90-5.05(m，1H)，6.67(d，J＝7.6Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8Hz，8.3Hz，1H)，7.28(t，J＝8.3Hz，1H)，7.33(d，J＝8.0Hz，1H)，7.41(t，J＝7.9Hz，1H)，7.61(d，J＝5.9Hz，1H)，8.45(d，J＝6.1Hz，1H)，9.11(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)373(M++1)實施例7N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-甲基芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(16mg，0.050mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)318(M++1)實施例8N5-[1-(4-異丙基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-異丙基芐基氯(42mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(14mg，0.041mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.22(d，J＝6.9Hz，6H)，1.85-1.99(m，1H)，2.40-2.50(m，1H)，2.60-2.75(m，1H)，2.83-3.05(m，3H)，3.81(s，2H)，4.20-4.30(m，1H)，6.64(d，J＝7.8Hz，1H)，7.20(d，J＝8.1Hz，1H)，7.28-7.33(m，3H)，7.40(t，J＝7.8Hz，1H)，7.28-7.33(m，3H)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.70-7.80(m，1H)，8.47(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)346(M++1)實施例9N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(27mg，0.076mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)349(M++1)
實施例10N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(27mg，0.076mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.78-1.90(m，1H)，2.40-2.57(m，2H)，2.72-2.79(m，1H)，2.85-2.96(m，2H)，3.77(s，2H)，4.14-4.24(m，1H)，4.55-4.67(m，1H)，6.69(d，J＝7.6Hz，1H)，7.31(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.49(d，J＝7.8Hz，1H)，7.58(d，J＝6.1Hz，1H)，7.69(d，J＝6.7Hz，1H)，8.11(d，J＝7.3Hz，1H)，8.23(s，1H)，8.47(d，J＝6.1Hz，1H)，9.14(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)349(M++1)實施例11N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(20mg，0.057mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.86-1.94(m，1H)，2.43-2.54(m，1H)，2.84-3.06(m，3H)，3.85(s，2H)，4.20-4.28(m，1H)，4.76-4.90(m，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，7.31(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(t，J＝7.9Hz，1H)，7.41(t，J＝7.9Hz，1H)，7.57(d，J＝8.5Hz，2H)，7.63(d，J＝5.8Hz，1H)，8.18(d，J＝8.8Hz，2H)，8.46(d，J＝5.8Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)349(M++1)實施例12N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯-2-硝基芐基氯(52mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(37mg，0.106mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.80-1.92(m，1H)，2.30-2.55(m，2H)，2.70-2.90(m，3H)，3.99(s，2H)，4.35-4.43(m，1H)，4.68-4.78(m，1H)，6.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.30(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(t，J＝7.9Hz，1H)，7.50(dd，J＝2.2Hz，8.3Hz，1H)，7.55-7.69(m，1H)，7.68(d，J＝6.1Hz，1H)，7.80(d，J＝2.5Hz，1H)，8.49(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)383(M++1)實施例13N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(10mg，0.033mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)305(M++1)實施例14N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(11mg，0.033mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)305(M++1)實施例15N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集到具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(11mg，0.033mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.90-2.00(m，1H)，2.40-2.67(m，2H)，2.88-3.25(m，3H)，3.77(s，2H)，4.20-4.30(m，1H)，4.82-4.98(m，1H)，6.66(d，J＝7.3Hz，1H)，7.28-7.35(m，4H)，7.42(t，J＝7.9Hz，1H)，7.65(s，1H)，8.48(d，J＝5.9Hz，1H)，8.54-8.60(m，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)305(M++1)實施例16N5-[1-(2-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫以收集作為中間體具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司(Kanto Chemical Co.，Inc.)，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(alumina oxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(20mg，0.063mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例17N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(17mg，0.053mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.80-1.94(m，1H)，2.38-2.48(m，1H)，2.52-2.62(m，1H)，2.75-2.86(m，1H)，2.87-3.02(m，1H)，3.64(s，2H)，4.14-4.24(m，1H)，4.75-4.90(m，1H)，6.58(d，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，6.70-6.75(m，2H)，7.09(t，J＝8.1Hz，1H)，7.29(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.59-7.66(m，1H)，8.46(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例18N5-[1-(4-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(12mg，0.037mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例19N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(62mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯-2-硝基芐基氯(50mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(24mg，0.068mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)354(M++1)
實施例20N5-[1-(2-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(19mg，0.054mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)353(M++1)實施例21N5-[1-(3-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(23mg，0.066mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)353(M++1)
實施例22N5-[1-(4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(24mg，0.066mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.48-2.00(m，5H)，2.38-3.05(m，3H)，3.40-4.20(m，3H)，6.63-6.78(m，1H)，7.23-7.52(m，7H)，8.48(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)353(M++1)實施例23N-(1-芐基-3-哌啶基)-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉氨基)-1-吡啶羧酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氟芐基氯(39mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(18mg，0.057mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.40-2.05(m，5H)，2.25-2.98(m，3H)，3.37-4.10(m，3H)，6.65-6.80(m，1H)，7.24-7.58(m，9H)，8.47(d，J＝5.9Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)318(M++1)實施例24N5-[1-(2，6-二氟芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2，6-二氟芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(25mg，0.071mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.48-2.20(m，5H)，2.45-3.22(m，3H)，3.75-4.25(m，3H)，6.70-6.80(m，1H)，6.90-7.02(m，2H)，7.24-7.30(m，3H)，7.43(t，J＝7.9Hz，1H)，7.59-7.66(m，1H)，8.46(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)354(M++1)實施例25N5-[1-(2，6-二氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體1)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2，6-二氯芐基氯(49mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(28mg，0.073mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.45-1.60(m，1H)，1.60-1.80(m，1H)，1.95-2.05(m，1H)，2.30-2.50(m，1H)，2.60-3.00(m，1H)，3.75-3.94(m，3H)，6.71(d，J＝8.1Hz，2H)，7.45(t，J＝8.0Hz，1H)，7.59-7.81(m，1H)，8.42(d，J＝6.1Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)387(M++1)實施例26N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-甲基芐基氯(40mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(20mg，0.060mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.48-2.00(m，5H)，2.32(s，3H)，2.25-2.80(m，3H)，3.35-4.00(m，3H)，6.65-6.80(m，1H)，7.10-7.18(m，3H)，7.22-7.30(m，2H)，7.41(t，J＝8.0Hz，1H)，7.50-7.60(m，1H)，8.47(d，J＝5.8Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)332(M++1)實施例27N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-異丙基芐基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-異丙基芐基氯(42mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(15mg，0.042mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.23(d，J＝7.0Hz，6H)，1.50-2.00(m，5H)，2.20-3.00(m，3H)，2.88(dt，J＝7.0Hz，13.4Hz，1H)，3.35-4.00(m，3H)，6.61-6.73(m，1H)，7.15-7.35(m，5H)，7.39(t，J＝7.6Hz，1H)，7.50-7.60(m，1H)，8.47(d，J＝5.9Hz，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)361(M++1)實施例28N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(20mg，0.055mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.45-1.60(m，1H)，1.65-1.75(m，1H)，1.85-2.00(m，1H)，2.05-2.30(m，1H)，2.50-2.80(m，3H)，3.63-3.86(m，2H)，3.93-4.02(m，1H)，5.00-5.25(m，1H)，6.72(d，J＝7.8Hz，1H)，7.24-7.28(m，2H)，7.40-7.47(m，2H)，7.47-7.55(m，1H)，7.80(d，J＝7.8Hz，1H)，7.95-8.05(m，1H)，8.50(d，J＝6.1Hz，1H)，9.14(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)363(M++1)實施例29N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(29mg，0.080mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)363(M++1)實施例30N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)-3-哌啶基]胺
3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(26mg，0.075mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)363(M++1)實施例31N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯-2-硝基芐基氯(52mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(34mg，0.086mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.44-1.75(m，3H)，1.80-1.95(m，1H)，2.13-2.25(m，1H)，2.50-2.80(m，3H)，3.62-3.70(m，1H)，3.75-3.84(m，1H)，3.85-3.95(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，6.66-6.75(m，1H)，7.23-7.30(m，1H)，7.36-7.50(m，3H)，7.80(s，1H)，7.82-7.92(m，1H)，8.50(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)398(M++1)實施例32N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(23mg，0.072mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例33N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(14mg，0.044mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例34N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯甲基吡啶(41mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(16mg，0.050mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.56-1.90(m，4H)，2.40-2.70(m，3H)，2.70-2.85(m，1H)，3.50-3.75(m，2H)，3.80-3.90(m，1H)，4.80-5.10(m，1H)，6.70-6.80(m，1H)，7.22-7.50(m，5H)，7.50-7.60(m，1H)，8.47(d，J＝6.1Hz，1H)，8.55(s，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)實施例35N5-[1-(2-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加2-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(18mg，0.054mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)333(M++1)實施例36N5-[1-(3-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(22mg，0.066mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)333(M++1)實施例37N5-[1-(4-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-硝基芐基氯(43mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(17mg，0.054mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)333(M++1)實施例38N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，69mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加4-氯-2-硝基芐基氯(50mg，0.25mmol)的丙烯腈溶液(1ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(2ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮。產生的鹽進一步溶解于氯仿/甲醇(10∶1)溶液中，并通過具有短長度的硅膠柱過濾該溶液。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
在80℃下中間體溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，113mg，0.50mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(1ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(aluminaoxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(18mg，0.049mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)368(M++1)實施例39N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-2-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向其中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加吡咯-2-甲酸(28mg，0.25mmol)，并進一步向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中。在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(12mg，0.026mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.60-1.73(m，1H)，1.82-2.00(m，2H)，2.02-2.12(m，1H)，3.64-3.88(m，5H)，3.93-4.02(m，1H)，4.14-4.24(m，1H)，4.90-5.00(m，1H)，6.23(s，1H)，6.58(s，1H)，6.86(d，J＝7.6Hz，1H)，6.92(s，1H)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H)，747(t，J＝7.9Hz，1H)，7.59(s，1H)，8.43(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H)，9.45-9.55(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)307(M++1)實施例40N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-3-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加吡咯-3-甲酸(28mg，0.25mmol)，并進一步地向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中。在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(15mg，0.049mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.55-1.70(m，1H)，1.75-1.88(m，1H)，1.90-2.10(m，2H)，3.62-3.90(m，6H)，4.08-4.16(m，1H)，6.40(s，1H)，6.70-6.85(m，2H)，7.18-7.24(m，1H)，7.28(d，J＝8.1Hz，1H)，7.38-7.46(m，1H)，7.56-7.64(m，1H)，8.42(d，J＝6.1Hz，1H)，8.66-8.82(m，1H)，9.12(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)307(M++1)實施例41N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加噻吩-2-甲酸(32mg，0.25mmol)，并進一步向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中，并在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml 1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(7mg，0.022mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)324(M++1)實施例42N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加噻吩-3-甲酸(32mg，0.25mmol)，并進一步向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中，并在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml 1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(18mg，0.056mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)324(M++1)實施例43N-[1-(2-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加呋喃-2-甲酸(32mg，0.25mmol)，并進一步向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中，并在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml 1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(12mg，0.039mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)308(M++1)實施例44N-[1-(3-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺3-(5-異喹啉基氨基)-1-吡啶甲酸叔丁基酯(中間體2)(66mg，0.20mmol)溶解于1ml氯仿中。向其中添加三氟乙酸(1ml)，并且混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，之后向濃縮物中添加二異丙基乙基胺(65mg，0.50mmol)，并且混合物溶解于1ml丙烯腈中。在室溫下向其中添加呋喃-3-甲酸(32mg，0.25mmol)，并進一步向其中添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(51mg，0.30mmol)，1-羥基苯并三唑(46mg，0.30mmol)和二甲基氨基吡啶(2mg)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(2ml)，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生中間體。
中間體溶解于四氫呋喃(1ml)中，并在0℃下向其中滴加硼烷-四氫呋喃絡合物(Kanto化學有限公司，1mol/l，四氫呋喃溶液)(1ml)。反應混合物在60℃下攪拌3小時，之后冷卻到0℃，并向其中滴加2ml 1N鹽酸水溶液。反應混合物進一步在60℃下攪拌1小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉水溶液(1ml)，并用乙酸乙酯萃取混合物。有機層通過無水硫酸鈉干燥，溶劑通過在減壓下蒸發除去以產生殘余物。氯仿中的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿/甲醇洗脫。首先僅僅用氯仿，隨后用氯仿/甲醇(20∶1)，最后用氯仿/甲醇(10∶1)進行洗脫，收集具有Rf＝0.5的UV吸收的餾分以產生標題化合物(18mg，0.059mmol)。
質譜值(ESI-MS，m/z)308(M++1)實施例45(3S)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺
5-氫化異喹啉(Aldrich，4.35g，30mmol)和吡啶(3.16g)溶解于無水氯仿中(50ml)，并在0℃下向其中滴加三氟甲磺酸(10g，35mmol)。攪拌反應混合物3小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉溶液。用乙酸乙酯萃取含水層三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。僅僅用氯仿進行洗脫，收集到具有Rf＝0.7的UV吸收的餾分以產生中間體A(7.55g，27mmol)。
向(3S)-(-)-3-(叔丁氧氨基)吡咯烷(東京化學工業有限公司，1.86g，10mmol)中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，2.07g，15mmol)，混合物溶解于10ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(東京化學工業有限公司，1.88g，11mmol)的丙烯腈溶液(3ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(10ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿并隨后用氯仿/甲醇(20∶1)進行洗脫，收集到作為中間體B(3.0g，9.3mmol)的具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分。
中間體A(1.0g，3.1mmol)溶解于2.5mmol的氯仿中，向其中添加2.5ml三氟乙酸，并且混合物在室溫下攪拌3小時。在減壓下濃縮反應混合物以除去大部分三氟乙酸。之后通過添加3N氫氧化鈉溶液調整反應混合物的pH為10。用乙酸乙酯萃取含水層三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥，之后濃縮物穿過氧化鋁(alumina oxide 90neutral)柱，以產生粗產品。
中間體A(858mg，3.1mmol)，以上的粗產品，乙酸鈀(Wako Kagaku工業公司，113mg，0.50mmol)，外消旋BINAP(Aldrich，311mg，0.50mmol)和碳酸銫(Wako Kagaku工業公司，1.63g，5mmol)懸浮于無水甲苯(5ml)中，在80℃氬氣氛圍下攪拌懸浮液18小時。向其中添加乙酸乙酯(5ml)并通過Celite過濾混合物。濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿并隨后用氯仿/甲醇(20∶1)進行洗脫，收集到作為中間體C(624mg，1.67mmol)的具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分。
中間體C(624mg，1.67mmol)溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，1.13g，5mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(5ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(alumina oxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(488mg，1.53mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.80-1.94(m，1H)，2.38-2.48(m，1H)，2.52-2.62(m，1H)，2.75-2.86(m，1H)，2.87-3.02(m，1H)，3.64(s，3H)，4.14-4.24(m，1H)，4.75-4.90(m，1H)，6.58(d，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，6.70-6.75(m，2H)，7.09(t，J＝8.1Hz，1H)，7.29(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.59-7.66(m，1H)，8.46(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)旋轉功率[α]25D＝+111(C＝0.25)實施例46(3R)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺5-氫化異喹啉(Aldrich，4.35g，30mmol)和吡啶(3.16g)溶解于無水氯仿中(50ml)，并在0℃下向其中滴加三氟甲磺酸(10g，35mmol)。攪拌反應混合物3小時，之后向其中添加飽和的碳酸氫鈉溶液。用乙酸乙酯萃取含水層三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。僅僅用氯仿進行洗脫，收集到具有Rf＝0.7的UV吸收的餾分以產生中間體A(7.55g，27mmol)。
向(3R)-(+)-3-(叔丁氧氨基)吡咯烷(東京化學工業有限公司，1.86g，10mmol)中添加碳酸鉀(Wako Kagaku工業公司，2.07g，15mmol)，混合物溶解于10ml丙烯腈中。在室溫下向其中滴加3-硝基芐基氯(東京化學工業有限公司，1.88g，11mmol)的丙烯腈溶液(3ml)，并且混合物再攪拌18小時。向其中添加水(10ml)，之后濃縮混合物以除去大部分丙烯腈。含水層用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿并隨后用氯仿/甲醇(20∶1)進行洗脫，收集到作為中間體B(2.7g，8.5mmol)的具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分。
中間體A(1.0g，3.1mmol)溶解于2.5mmol的氯仿中，向其中添加2.5ml三氟乙酸，并且混合物在室溫下攪拌3小時。在減壓下濃縮反應混合物以除去大部分三氟乙酸。之后通過添加3N氫氧化鈉溶液調整反應混合物的pH為10。用乙酸乙酯萃取含水層三次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥，之后濃縮物穿過氧化鋁(alumina oxide 90neutral)柱，以產生粗產品。
中間體A(858mg，3.1mmol)，以上的粗產品，乙酸鈀(Wako Kagaku工業公司，113mg，0.50mmol)，外消旋BINAP(Aldrich，311mg，0.50mmol)和碳酸銫(Wako Kagaku工業公司，1.63g，5mmol)懸浮于無水甲苯(5ml)中，在80℃氬氣氛圍下攪拌懸浮液18小時。向其中添加乙酸乙酯(5ml)并通過Celite過濾混合物，并濃縮濾液以產生粗產品。
溶解于氯仿的粗產品被裝入硅膠柱并用氯仿洗脫。首先僅僅用氯仿并隨后用氯仿/甲醇(20∶1)進行洗脫，收集到作為中間體C(624mg，1.67mmol)的具有Rf＝0.6的UV吸收的餾分。
中間體C(624mg，1.67mmol)溶解于3ml 1N鹽酸中。向其中一點一點添加二氯化錫水合物(Kanto化學有限公司，1.13g，5mmol)，并且混合物在80℃下攪拌3小時。反應混合物冷卻到0℃，并向其中滴加30％氨溶液(5ml)。添加乙酸乙酯，并通過Celite過濾混合物。濾液分離成有機層和含水層，含水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機層通過硫酸鈉干燥并濃縮以產生粗產品。粗產品通過氧化鋁(alumina oxide 90 neutral)上的色譜柱使用氯仿/甲醇(10∶1)洗脫進一步純化以產生標題化合物(462mg，1.45mmol)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)1.80-1.94(m，1H)，2.38-2.48(m，1H)，2.52-2.62(m，1H)，2.75-2.86(m，1H)，2.87-3.02(m，1H)，3.64(s，3H)，4.14-4.24(m，1H)，4.75-4.90(m，1H)，6.58(d，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，6.70-6.75(m，2H)，7.09(t，J＝8.1Hz，1H)，7.29(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.59-7.66(m，1H)，8.46(d，J＝6.1Hz，1H)，9.13(s，1H).
質譜值(ESI-MS，m/z)319(M++1)旋轉功率[α]25D＝-103(C＝0.25)在實施例1-46中制備的化合物在鹽酸-甲醇溶液中處理并之后濃縮，濃縮物用乙醚洗滌以產生相應的鹽酸化物。
在實施例1-46中制備的化合物和中間體1和2分別具有下面的化學結構。









藥理學試驗實施例1Rho激酶抑制活性重組Rho激酶根據日本專利公開號113187/1998的公開內容制備，即通過用桿狀病毒感染昆蟲細胞，其中加入由牛Rho激酶催化區和谷胱甘肽S-轉移酶組成的cDNA編碼融合的蛋白質，并使昆蟲細胞能夠產生重組Rho激酶制備。通過向底物中添加Rho激酶和ATP(γ32P-ATP)而將底物(核糖體的S6激酶底物，S6 231-239)磷酸化，其中ATP在γ位置的磷已經被用放射性同位素標記。這使得底物被用放射性同位素標記。
之后，底物被吸附在濾紙上。ATP用磷酸溶液洗掉，然后用液體閃爍計數器測量磷酸化底物的量。
試驗化合物的抗酶活性通過在酶促反應前添加試驗樣品測定，測定底物磷酸化抑制的百分比，并作為IC50測定對于抑制50％的磷酸化所必需的試驗化合物的濃度。
結果顯示于下表中。
試驗化合物 IC50(μM)實施例10.09920.06330.06640.09350.07360.1470.09680.2090.5710 0.2011 0.6612 1.313 0.4814 0.5915 1.116 0.2117 0.2818 0.2319 0.2420 0.2121 0.2722 0.1923 0.2424 0.23
25 1.226 0.1827 0.5328 0.5829 1.930 1.831 2.332 1.333 1.034 1.535 0.2736 0.3137 0.2938 0.4039 0.02340 0.6741 0.1942 0.03143 0.2044 0.1145 0.3146 0.023藥理學試驗實施例2白細胞轉移抑制活性過度表達人類衍生的組織細胞淋巴瘤(U937/CCR2)的小鼠衍生的CCR2懸浮于0.1％的含BSA的RPMI 1640介質中，其中已添加試驗化合物(5×106/ml)，并且懸浮液培養20分鐘。其中已添加MCP-1配位體(1μM)和試驗化合物的化學溶液(500μl)(0.1％的含BSA的RPMI 1640介質DMSO 1％)被添加到24孔平板中。其上放CHEMOTAXICELL，并向上層添加200μl的細胞懸浮液，接著在37℃下在5％的CO2氛圍下轉移一小時。已經被轉移到低室的細胞的數量用顆粒計數分析儀(CDA-500，SYSMEX CORPORATION)計數，并通過下式計算轉移抑制百分比轉移抑制(％)＝(1-存在試驗化合物時轉移細胞的數目/不存在試驗化合物時轉移細胞的數目)×100結果顯示于下表中。
試驗化合物(濃度10μg/ml)轉移抑制(％)實施例1 862 903 1014 985 937 10316 9917 9418 9419 8220 6921 9722 8045 7446 104藥理學試驗實施例3來自體內的實驗給SD大鼠(N＝4)口服水或試驗化合物的鹽酸鹽在生理鹽水中的溶液(30mg/kg)。服用3小時后收集血液樣本。用生理鹽水將血清稀釋8倍并添加到根據在藥理學試驗實施例1中描述的方法的Rho激酶，底物和標記的ATP中，測定磷酸化底物的數量。根據下式計算Rho激酶抑制抑制(％)＝(1-服用試驗化合物情況下底物的數量/服用水情況下底物的數量)×100結果顯示于下表中。
試驗化合物 抑制(％)實施例1757實施例4517*實施例4642*(*服用4小時后血液收集)
藥理學試驗實施例4對于使用WKY大鼠的抗GBM腎炎模型的蛋白尿改進活性給8周大的WKY雄鼠尾靜脈內(caudointravenously)服用抗GBM抗體以誘發腎炎，該抗GBM抗體通過用大鼠衍生的GBM組分免疫家兔產生。從服用抗體后24小時起3天，以一日兩次每次30mg/kg的劑量口服在實施例45和46中制備的每一種鹽酸化物在純化水中的溶液。服用抗體3天后，收集二十四小時尿以測定尿的蛋白質水平。6只大鼠的平均尿蛋白質水平和標準誤差顯示于下表中。
組尿蛋白質水平(mg/kg，體重)對照組491.9±48.1實施例45服用組91.2±21.5實施例46服用組73.6±9.1標準組66.3±8.4服用抗體4天后，通過放血殺死大鼠，之后收獲腎并在4％的低聚甲醛中固定以制備染色樣本。下一步，使用小鼠-抗-大鼠巨噬細胞單克隆抗體(ED-1)免疫染色如此獲得的樣本。計算每一個腎小球ED-1陽性細胞的數量。在每一組中6只大鼠ED-1陽性細胞的數量的平均值和標準誤差顯示于下表中。
組細胞數量對照組4.80±0.75實施例45服用組2.20±0.65實施例46服用組1.38±0.68標準組0.00±0.00同樣，給7周大的WKY雄鼠尾靜脈內服用抗GBM抗體以誘發腎炎。從服用抗體后24小時起3天，以一日兩次每次30mg/kg的劑量口服在實施例45和46中制備的每一種鹽酸化物在純化水中的溶液。服用抗體4天后，收集二十四小時尿以測定尿的蛋白質水平。6只大鼠的平均尿蛋白質水平和標準誤差顯示于下表中。
組尿蛋白質水平(mg/kg，體重)對照組1559.4±121.7實施例45服用組779.4±133.9實施例46服用組327.6±55.2標準組68.9±4.0藥理學試驗實施例5降血壓活性提供15周大的自發高血壓雄鼠(SHR，Charles River Japan，Inc.)。給大鼠口服實施例45或46的化合物的鹽酸化物在純化水中的溶液。服用試驗化合物前和服用試驗化合物3-4小時后立刻測定SHR的收縮壓。通過下式計算血壓下降百分比血壓下降(％)＝{(服用試驗化合物前血壓-服用試驗化合物后血壓)/服用試驗化合物前血壓}×100結果顯示于下表中。
對于四只SHR血壓下降以血壓下降百分比和標準誤差表達。
試驗化合物血壓下降(％)實施例45 10.2±3.1實施例46 25.1±4.權利要求
1.由式(I)代表的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中Q代表選自苯基，吡啶基，吡咯基，噻吩基和呋喃基的環狀基團；在環狀基團上的一個或兩個氫原子任選被選自鹵原子，C1-4烷基，硝基和氨基的取代基取代；p是2或3。
2.根據權利要求1的化合物，其中Q代表選自以下的環狀基團苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基，4-氟苯基，2，6-二氟苯基，2，6-二氯苯基，4-甲基苯基，4-異丙基苯基，2-硝基苯基，3-硝基苯基，4-硝基苯基，4-氯-2-硝基苯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-氨基苯基，3-氨基苯基，4-氨基苯基，2-氨基-4-氯苯基，1H-2-吡咯基，1H-3-吡咯基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-呋喃基和3-呋喃基。
3.根據權利要求1或2的化合物，其中p是2。
4.根據權利要求1或2的化合物，其中p是3。
5.根據權利要求1的化合物，其中Q代表3-硝基苯基或3-氨基苯基和p是2。
6.根據權利要求1的化合物，其選自以下化合物(1)N5-[1-(2-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(2)N5-[1-(3-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(3)N5-[1-(4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(4)N5-[1-(4-氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(5)N5-[1-(2，6-二氟芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(6)N5-[1-(2，6-二氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(7)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(8)N5-[1-(4-異丙基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(9)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(10)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(11)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(12)N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(13)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(14)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(15)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]胺；(16)N5-[1-(2-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(17)N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(18)N5-[1-(4-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(19)N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉基胺；(20)N5-[1-(2-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(21)N5-[1-(3-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(22)N5-[1-(4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(23)N-(1-芐基-3-哌啶基)-5-異喹啉基胺；(24)N5-[1-(2，6-二氟芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(25)N5-[1-(2，6-二氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(26)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-甲基芐基)-3-哌啶基]胺；(27)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-異丙基芐基)-3-哌啶基]胺；(28)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(29)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(30)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-硝基芐基)-3-哌啶基]胺；(31)N5-[1-(4-氯-2-硝基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(32)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(33)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(34)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(4-吡啶基甲基)-3-哌啶基]胺；(35)N5-[1-(2-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(36)N5-[1-(3-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(37)N5-[1-(4-氨基芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(38)N5-[1-(2-氨基-4-氯芐基)-3-哌啶基]-5-異喹啉基胺；(39)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-2-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺；(40)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(1H-3-吡咯基甲基)-3-哌啶基]胺；(41)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(2-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺；(42)N-(5-異喹啉基)-N-[1-(3-噻吩基甲基)-3-哌啶基]胺；(43)N-[1-(2-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺；(44)N-[1-(3-呋喃基甲基)-3-哌啶基]-N-(5-異喹啉基)胺；(45)(3S)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺；和(46)(3R)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺。
7.根據權利要求1的化合物，其選自(3S)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺和(3R)-N5-[1-(3-氨基芐基)四氫-1H-3-吡咯基]-5-異喹啉胺和其混合物。
8.包含根據權利要求1-7任何一項的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物的藥物組合物。
9.根據權利要求8的藥物組合物，用于治療通過Rho激酶調解的疾病。
10.根據權利要求9的藥物組合物，其中通過Rho激酶調解的疾病選自高血壓，哮喘包括支氣管哮喘，心絞痛，腦血管收縮，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，頻尿，惡性腫瘤，惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答，炎癥，自身免疫病，大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病，慢性腎衰竭，慢性腎炎，糖尿病腎病，IgA腎病，血栓癥相關疾病，風濕癥，陽痿和纖維癥。
11.根據權利要求1-7任何一項的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物在生產治療通過Rho激酶調解的疾病的藥物中的應用。
12.根據權利要求11的應用，其中通過Rho激酶調解的疾病選自高血壓，哮喘包括支氣管哮喘，心絞痛，腦血管收縮，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，頻尿，惡性腫瘤，惡性腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答，炎癥，自身免疫病，大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病，慢性腎衰竭，慢性腎炎，糖尿病腎病，IgA腎病，血栓癥相關疾病，風濕癥，陽痿和纖維癥。
13.治療通過Rho激酶調解的疾病的方法，包括給哺乳動物服用有效治療量的根據權利要求1-7任何一項的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物和可藥用載體。
14.根據權利要求13的方法，其中通過Rho激酶調解的疾病選自高血壓，哮喘包括支氣管哮喘，心絞痛，腦血管收縮，外周循環紊亂，先兆早產，青光眼，視野收縮，頻尿，惡性腫瘤，腫瘤的擴散/轉移，動脈硬化，視網膜病，免疫應答，炎癥，自身免疫病，大腦功能紊亂，骨質疏松，微生物原病，慢性腎衰竭，慢性腎炎，糖尿病腎病，IgA腎病，血栓癥相關疾病，風濕癥，陽痿和纖維癥。
全文摘要
本發明的目的是提供具有Rho激酶抑制活性和對于治療通過Rho激酶調解的疾病有用的化合物。根據本發明的化合物是由下式(I)代表的那些或其可藥用鹽或溶劑化物其中Q代表苯基，吡啶基，吡咯基，噻吩基或呋喃基；這些基團任選被一個或兩個鹵素或烷基，硝基或氨基取代；和p是2或3。
文檔編號C07D409/14GK1694879SQ0382509
公開日2005年11月9日 申請日期2003年9月12日 優先權日2002年9月12日
發明者巖洼昌幸, 岡田雄治 申請人:麒麟麥酒株式會社