專利名稱：磺酰胺衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的磺酰胺衍生物、其制備方法、其作為藥物的用途以及包含它們的藥物組合物。
更具體地講，一方面本發明提供了游離形式或鹽形式的式I化合物， 其中，R1為苯基、1，2-二氯苯基、3-甲基苯基、3-溴苯基、萘2-基、二氫化茚-5-基、苯并[1，3]二氧雜環戊烯-5-基或1，2，3，4-四氫萘-6-基；R2為氫、鹵素、未取代的C1-C4烷基或取代的C1-C4烷基；R3為氫、鹵素或C1-C4烷基；R4為氫或C1-C4烷基；R5為氫或C1-C4烷基；R6為CH2OH；四唑-5-基；1，2，4-三唑-5-基；1，2，3-三唑-5-基；C(O)OH、C(O)NH2；或為ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-C(O)-或-CH2-，n為0、1、2、3或4；R7為未取代或取代的C1-C4烷基、C(O)OH、C(O)OC1-C4烷基；R8為氫、未取代或取代的C1-C4烷基、未取代或取代的C5-C10芳基或C5-C10雜芳基或C1-C4烷基-C5-C10芳基或C1-C4烷基-C5-C10雜芳基，C5-C10雜芳基包含一個或多個選自N、O和S的雜原子；且m為2、3或4。
由于式I化合物及其鹽中存在不對稱碳原子，所以所述化合物可以以光學活性形式或光學異構體的混合物形式(例如以外消旋混合物形式)存在。所有的光學異構體及其混合物，包括外消旋混合物，都是本發明的一部分。
C1-C4烷基、C5-C10芳基或C5-C10雜芳基被取代時，其取代基可以是一個或多個選自OH、C(O)OH、鹵素、C1-C4烷基、C1-C6烷氧基、芐基、吡啶基或嘧啶基的基團。例如C1-C4烷基可以被OH、C(O)OH、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、芐基、吡啶基或嘧啶基取代；苯基可以被一個或多個鹵素、C1-C4烷基或C1-C6烷氧基取代；芐基可以被一個或多個鹵素或C1-C6烷氧基取代。
本發明的化合物可以以游離形式或鹽的形式存在，所述鹽例如，與例如有機或無機酸(例如三氟乙酸或鹽酸)形成的加成鹽；或當它們含有一個羧基時例如與堿反應可得到的鹽，例如堿金屬鹽如鈉鹽、鉀鹽；或是取代或未取代的銨鹽。根據本發明，用于藥用的藥學可接受的酸加成鹽尤其包括鹽酸鹽或鈉鹽。
在式I中，優選下列定義，這些定義可以是各自獨立的、作為一個整體或是任何組合或亞組合的形式(a)R1為二氫化茚-5-基；(b)R2為氫、Cl、Br、甲基或三氟甲基；(c)R3為Cl或Br；(d)R4為氫或甲基；(e)R5為氫或甲基；(f)R6為CH2OH、C(O)NH2、四唑-5-基、C(O)OH或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-C(O)-或-CH2-；(g)n為0或1；(h)R7為C(O)OH或CH2C(O)OH；(i)R8為苯基、芐基、4，5-二甲氧基苯基、2-氯芐基、2-甲氧基芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、CH2-芐基、CH2-吡啶-3-基或CH2-嘧啶-3-基；和(g)m為2。
一組優選的化合物是這樣的化合物，其中R1為二氫化茚-5-基；R2為氯；R3為Cl或Br；R4為氫；R5為氫；R6為C(O)OH或C(O)NH(CH2)nCHR7R8，其中n為0或1，R7為C(O)OH或CH2C(O)OH，R8為苯基、芐基、4，5-二甲氧基苯基、2-氯芐基、2-甲氧基芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、CH2-芐基或CH2-嘧啶-3-基；并且m為2。
除以上所述外，本發明還提供了制備式I化合物及其鹽的方法，其包括(a)制備其中R6為C(O)OH的式I化合物的方法，其包括使式II化合物脫保護， 其中R1、R2、R3、R4、R5和m如上所定義，R9為C1-C4烷基；或(b)制備其中R6為C(O)NH2或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-C(O)-，n、R7和R8如上所定義的式I化合物的方法，該方法包括使其中R6為C(O)OH的式I化合物與NH3或式III化合物反應，HNH(CH2)nCHR7R8(III)其中n、R7和R8如上所定義，并任選進一步衍生所得到的化合物；或(c)制備其中R6為CH2OH、四唑-5-基、1，2，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-CH2-，n、R7和R8如上所定義的式I化合物的方法，該方法包括使式IV化合物和式V化合物反應，并將所得到的式I化合物以游離形式或鹽的形式回收，其中式IV化合物的結構式為 其中R1、R2、R3、R4和m如上所定義，其中式V化合物的結構式為 其中R5如上所定義，R6為CH2OH、四唑-5-基、1，2，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-CH2-，n、R7和R8如上所定義，Hal為鹵素。
任選地，可以在方法(b)、(c)或(d)中使用被保護形式的式(III)、(V)或(VI)化合物，并在反應后將所得到的化合物脫保護。
式II化合物是新化合物，并且也是本發明的一部分。它們可以例如通過使式IV化合物(其中R1、R2、R3、R4和m如上所定義)與式VI化合物反應而制備， 其中R5和R9如上所定義，Hal為鹵素。
反應可以依照標準操作例如實施例1中所述的方法(a)和(b)進行。另外，其中R6為雜環基如四唑-5-基的衍生物可以從其中R6為C(O)OH的式I化合物開始、經由適當的酰胺中間體、使用已知的如實施例2中所述的標準操作制備。反應混合物的處理可以按照常規操作進行。化合物的鹽形式是按照本領域技術人員熟知的標準操作制備的。
式III、IV、V和VI的起始化合物是已知的或可以從相應的已知化合物制備而得。
本發明的化合物及其可藥用鹽(下文稱為發明的活性劑)具有藥理活性并且可用作藥物。特別地，本發明的活性劑可顯示抗緩激肽活性。本發明的活性劑，例如實施例1至35的化合物，尤其對人體B1緩激肽受體具有活性。
例如如以下試驗方法中所證明的，本發明的活性劑可置換人體緩激肽B1受體位點的去精氨酸10胰激肽(desArg10kallidin)，證明了它們與緩激肽受體的相互作用。
試驗I緩激肽受體結合試驗在補充了1％非必需氨基酸、2mM L-谷氨酸、100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素和10％胎牛血清的杜伯科改良細胞培養液(Dulbecco’sModified Eagle Medium)中培養WI-38細胞。細胞在175cm2組織培養瓶中生長，使用胰島素使細胞分離，每周約分裂1至2次，比例為1∶2。將WI-38細胞接種于24孔板上，每孔約50000個細胞，并使其生長過夜。為上調B1受體的表達，于試驗前將細胞用100單位/ml的IL-1β處理3小時。結合緩沖液為含有10mM HEPES的Hank’s平衡鹽溶液(pH7.4)加1mM鄰二氮雜菲和0.14mg/ml的桿菌肽。將細胞在500μl含有放射性配體[3H]-desArg10胰激肽的結合緩沖液中于4℃下孵育1小時。用3μM的desArg10胰激肽測定非特異性結合。孵育結束時用含有300mM蔗糖的50mM Tris-HCl緩沖液(pH7.4)將細胞洗滌3次。用0.2％SDS使細胞溶解，并以液閃計數法測定樣品中放射性物質的量。通過使細胞與一定濃度范圍的[3H]-desArg10胰激肽一起孵育可以得到親和常數(Kd)。在置換試驗中，將細胞與約1nM的[3H]-desArg10胰激肽和各種濃度的試驗化合物一起孵育。將化合物溶解于DMSO并以結合緩沖液稀釋直至DMSO的終濃度為0.5％。
對結果進行計算，從所有數值中減去非特異性結合數值并計算每種濃度的化合物的結合量占無化合物時特異性結合的百分比。在ORIGIN軟件中使用對數擬和法(logistic fit)計算IC50值。K1值則是通過Cheng-Prussoff方程(K1＝IC50/(1+([RL]/Kd))由IC50值計算而得，其中[RL]為放射性配體濃度。
肽類拮抗劑desArg10HOE140[(D-Arg-[Hyp3，Thi5，D-Tic7，Oic8]desArg9緩激肽)＝(D-精氨酸-[羥脯氨酸3，thienyamine5，D-四羥基喹啉-3-甲酸7，八氫吲哚-2-甲酸8]去精氨酸9緩激肽)]的K1值為0.063μM，本發明的活性劑的K1值為0.5nM至2μM。
特別地作為抗痛覺過敏藥物的活性可以依照例如以下試驗所述的標準試驗方法證明。
試驗II猴子的抗熱傷害感受試驗(溫水收尾試驗)將劑量為2mg的角叉菜膠于100μl鹽水中經皮下注射至成年恒河猴(Macaca mulatta)的尾端1至4cm處，然后向動物施用含有藥物化合物的100μl賦形劑(50％PEG400-鹽水)或者僅施用賦形劑。
將動物固定于約束椅中，并將剃去毛發的尾部下端(約15cm)浸入至溫度保持在42、46和50℃的溫水中。通過計算機控制的計時器手動記錄收尾反應時間。如果動物在20秒內沒有移動它們的尾部則將此時間記錄為最大截止潛伏時間(maximum cutoff latency)。在所有試驗周期中均進行單次給藥操作。每個試驗周期中先測定各溫度下的對照值，然后基于各試驗條件測定收尾反應時間。以不同順序在三種溫度下對受試動物進行測試1至2次，試驗間隔約1至2分鐘。試驗頻度為每周一次。
在本試驗中，本發明的活性劑在0.01μMol/kg至1mMol/kg的劑量范圍內可有效預防或逆轉由角叉菜膠引發的痛覺過敏。
因此，本發明的活性劑尤其可用作緩激肽B1受體拮抗劑，例如用于治療各種原因或病因引起的疼痛，并可作為抗炎和/或抗水腫藥物用于治療炎癥反應、疾病或病癥以及用于治療過敏反應。就其止痛/抗炎情況而言，它們可用于治療炎性疼痛、用于治療痛覺過敏并且尤其可用于治療嚴重的慢性疼痛。它們例如可用于治療外傷引起的(例如與燒傷、扭傷、骨折等有關的)、手術干預(例如術后止痛劑)導致的疼痛、炎癥和/或水腫；也可用于治療各種起因的炎性疼痛，例如用于治療骨和關節痛(骨關節炎)、類風濕性關節炎、類風濕病、腱鞘炎、痛風、癌癥疼痛、肌筋膜痛(肌肉損傷、纖維肌痛)、慢性神經痛如糖尿病性神經病、幻肢痛和圍手術疼痛(普通外科、婦科手術)。它們還適合作為止痛劑用于治療例如與心絞痛、月經或與癌癥有關的疼痛。作為抗炎/抗水腫藥物，它們還可用于例如治療炎性皮膚病，例如牛皮癬和濕疹。
本發明的活性劑也可以用于其它緩激肽B1受體被上調的病生理情況，例如用于急性移植物排斥反應和腎小球病變的組織中。本發明的活性劑也可以用于減少與(例如食管癌、腎癌和胃癌中的)腫瘤生長有關的血管生成作用。一篇述及緩激肽B1受體作用的綜述的內容在此引入作為參考(Bhoola等人，2001，Biol Chem；38277-89)。
本發明的活性劑也可用作平滑肌松弛劑，例如用于治療例如在治療青光眼/眼內壓異常的過程中、例如在治療局限性腸炎、潰瘍性結腸炎或胰腺炎的過程中出現的胃腸道或子宮痙攣，以及用于治療例如多發性硬化癥中的肌肉強直和戰栗。
對于上述適應癥，例如根據宿主、施用方式、被治療疾病的性質和嚴重程度以及所使用的本發明具體活性劑的相對效力的不同，本發明藥物的適宜劑量當然也隨之改變。例如可以基于已知的體外和體內技術、通過測定特定的活性藥物血漿濃度可保持在治療效果可接受水平的時間長短來確定所需活性藥物的量。通常，口服約0.01至約20.0mg/kg的日劑量在動物中可獲得滿意的結果。在人體中，適宜的日劑量為口服約0.7至約1400mg/天，例如約50至200mg，每日一次或以分劑量形式每天不超過4次或以緩釋形式方便地施用。因此，口服劑量形式可適宜地包含約0.2至約700mg與適當的藥用稀釋劑或載體混合的本發明的活性劑。
或者，本發明的活性劑可例如以乳劑、凝膠等形式經局部施用，例如用于治療如前所述的皮膚病；或例如以干粉形式通過吸入施用，例如用于治療哮喘。
包含本發明的活性劑的組合物的例子包括例如，例如含有0.1至1％(例如0.5％)的式I化合物的鹽酸鹽的固體分散體、水溶液(例如含有增溶劑的水溶液)、微乳以及混懸液。通過適宜的緩沖劑，可以將組合物的pH值緩沖至例如3.5至9.5，例如4.5。
本發明的活性劑也可用作研究用化學品。
本發明的活性劑可以單獨或與其它藥物共同施用于體內，所述其它藥物可有效治療緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病和病癥，包括環氧合酶-2(COX-2)抑制劑如特異性COX-2抑制劑(例如塞內昔布(celecoxib)，COX189和羅非昔布(rofecoxib))，或通常的非甾體抗炎藥物(NSAIDs)(例如乙酰水楊酸、丙酸衍生物)、香草酸(Vanilloid)受體拮抗劑、三環類抗抑郁藥(例如氯米帕明(Anafranil)、阿莫沙平(Asendin)、去甲替林(Aventyl)、阿米替林(Elavil、Endep)、Norfranil、地昔帕明(Norpramin)、去甲替林(Pamelor)、多塞平(Sinequan)、馬來酸三甲丙咪嗪(Surmontil)、替普拉胺(Tipramine)、丙咪嗪(Tofranil)、普羅替林(Vivactil)、雙羥萘酸丙咪嗪(Tofranil-PM))，抗驚厥藥物(例如加巴噴丁)以及GABAB拮抗劑(例如L-巴氯芬)。
本發明的用于分別施用組合伙伴的藥物組合物以及用于施用固定組合的藥物組合物(即包含至少兩種組合伙伴的單獨的蓋倫組合物)可以按照本身已知的方式制備，從而適用于經腸道內(如口服或經直腸)和胃腸外施用于哺乳動物包括人類，所述組合物可單獨包含治療有效量的至少一種藥理學活性的組合伙伴或包含其與一種或多種可藥用的載體(尤其是適合于腸道內或胃腸外應用的載體)的組合。
新的藥物組合物含有例如約0.1％至約99.9％、優選約20％至約60％的活性成分。用于腸內或胃腸外施用、用于聯合治療的藥物制劑是例如那些單位劑量形式的藥物制劑，如糖衣片、片劑、膠囊或栓劑，此外還可以是安瓿劑。如果沒有特別指出，這些藥物制劑可按照本身已知的方式制備，例如使用常規的混合、制粒、包糖衣、溶解或凍干工序制備。單一劑量的每種劑型中含有的組合伙伴的單位含量本身可以不必達到有效劑量，因為通過施用多個劑量單位可以達到所需的有效劑量。
特別地，治療有效量的每種組合伙伴可以同時或以任何順序連續施用，并且所述組分可以分別施用或作為固定組合施用。例如，本發明的延緩增殖性疾病的進展或治療增殖性疾病的方法可以包括以聯合治療有效量、優選以協同有效量(例如以與此處所述的量對應的日劑量)、同時或以任意順序連續(i)施用游離或可藥用鹽形式的組合伙伴(a)和(ii)施用游離或可藥用鹽形式的組合伙伴(b)。單獨的組合伙伴可以在治療期間的不同時間分別施用或以分開的或單一的組合形式同時施用。此外，術語“施用”還包括使用可在體內轉化為組合伙伴本身的組合伙伴的前藥。因此，應將本發明理解為包括所有這些同時或交替治療的方案，并且應相應地對術語“施用”進行理解。
所使用的每種組合伙伴的有效劑量可根據所使用的具體化合物或藥物組合物、施用方式、所治療的病癥、所治療病癥的嚴重程度而變化。因此，給藥方案是根據包括施用途徑和患者的腎功能和肝功能等在內的多種因素進行選擇的。普通的內科醫師、臨床醫師或獸醫可容易地確定和開出預防、逆轉或阻止病情進展所需的單一活性成分的有效量。為了在使活性成分的濃度處于可產生療效但無毒性的范圍內的過程中獲得最佳的精密度，需要一個基于活性成分到達靶點的動力學的方案。通常，在動物體內，口服約0.01至約20.0mg/kg的日劑量可取得令人滿意的結果。在人體中，適宜的日劑量為口服約0.7至約1400mg/天，例如約50至200mg，每天單次或以分劑量的形式不超過4次或以緩釋形式方便地施用。因此口服劑量形式可適宜的包含約0.2至約700mg本發明的活性劑。
根據以上所述，本發明還提供了(1)用作藥物的本發明的活性劑，例如在上文所列出的任何具體適應癥中用作緩激肽B1受體拮抗劑；(2)藥物組合物，其包含本發明的活性劑作為活性成分以及可藥用的稀釋劑或載體，該組合物例如可用于治療或預防緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病或病癥；(3)治療或預防緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病或病癥的方法，其包括向有需要的哺乳動物施用治療有效量的本發明的活性劑；
(4)本發明的活性劑作為藥物的用途；(5)本發明的活性劑在制備用于治療或預防緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病或病癥的藥物中的用途；(6)包含治療有效量的本發明的活性劑和第二種藥物的聯合形式，所述第二種藥物為例如用于上文所列出的任何具體適應癥中的藥物。
以下實施例對本發明進行了闡述。
實施例1(S)-3-(2-{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酰氨基)-4-苯基-丁酸的制備將4-溴-2-氯苯胺(3.99g)的乙酸(90ml)溶液在攪拌狀態下于15℃下用濃鹽酸(22ml)、然后在10℃下用亞硝酸鈉(1.29g)的水溶液(4.5ml)進行處理。30分鐘后，同樣在10℃下將混合物加入到攪拌狀態下的二氧化硫(32g)和二氯化銅(1.3g)在乙酸(128ml)和水(6.4ml)的溶液中。繼續攪拌16小時后，用冰冷的水(500ml)將混合物稀釋并用乙酸乙酯(4×100ml)進行萃取。合并萃取液，并用水(4×100ml)、然后用鹽水依次洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發，得到2-氯-4-溴苯磺酰氯的粗品。
將2-[(2，3-二氫-1H-二氫化茚-5-基)氧基]-乙胺(2.4g)和碳酸銫(18.0g)在無水DMF(52ml)中的懸浮液在攪拌狀態下于室溫下用2-氯-4-溴苯磺酰氯(4.0g)進行處理。5小時后，將反應混合物用溴乙酸甲酯(2.09g)處理，并將混合物再攪拌24小時。用乙酸乙酯(200ml)稀釋反應混合物并用碳酸氫鈉溶液(2×50ml)、水(2×50ml)和鹽水(50ml)依次對其進行洗滌。用硫酸鎂干燥并進行過濾后，使乙酸乙酯蒸發得到油狀物，通過硅膠柱層析法(洗脫液∶乙酸乙酯-環己烷＝1∶3)對其進行純化，得到{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酸甲酯。
在15℃下向攪拌狀態下的{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酸甲酯(2.8g)在四氫呋喃(22ml)-水(22ml)的溶液中滴加1M氫氧化鈉水溶液(28ml)進行處理，將得到的混合物攪拌3小時，然后用冰冷的水(200ml)稀釋、用1M鹽酸酸化至pH1、并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并萃取液，用水(100ml)然后用鹽水依次進行洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發。將得到的固體在正己烷中研磨，過濾收集并使之干燥，得到{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酸[保留時間7.6分鐘/HPLC色譜條件Kingsorb 3 micron，30×4.6mm C18柱，10％至100％乙腈/水(+0.1％三氟乙酸)梯度洗脫10分鐘]。
1H NMR(DMSO-d6)6＝12.88(寬峰s，1H)，7.94(d，1H)，7.90(d，1H)，7.71(d×d，1H)，7.03(d，1H)，6.50(s，1H)，6.43(d×d，1H)，4.26(s，2H)，3.97(t，2H)，3.65(t，2H)，2.79(t，2H)，2.75(t，2H)，1.98(m，2H).
將{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酸(112mg)和(3S)-3-氨基-4-苯基丁酸叔丁酯(50mg)的無水DMF(3ml)溶液在攪拌狀態下于室溫下用N-甲基嗎啉(60μl)、羥基苯并三唑(34mg)和1-乙基-3-[3-(二甲氨基)丙基]碳二亞胺(53mg)進行處理。24小時后，用乙酸乙酯(100ml)稀釋混合物，并依次用水(2×200ml)、碳酸氫鈉溶液和鹽水對其進行洗滌。用硫酸鎂干燥并進行過濾后，將乙酸乙酯蒸發至干。用硅膠柱層析法得到(S)-3-(2-{(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酰氨基)-4-苯基-丁酸叔丁酯的純品(130mg)，然后將其溶解在1∶4的三氟乙酸-二氯甲烷混合物(4ml)中。在室溫下攪拌16小時后，將溶液蒸發至干，并在乙醚中研磨，得到無色沉淀，過濾收集并干燥，得到實施例1的目標化合物[保留時間8.0分鐘/HPLC條件Kingsorb3micron，30×4.6mm C18柱，10％至100％乙腈/水(+0.1％三氟乙酸)梯度洗脫10分鐘，流速＝3ml/分鐘；分子離子MH+＝629]。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝8.1(d，1H)，7.9(m，2H)，7.7(d，1H)，7.3(m，2H)，7.25(m，3H)，7.2(d，1H)，6.5(s，1H)，6.4(d，1H)，4.1(m，1H)，4.0(q，2H)，3.9(t，2H)，3.55(m，1H)，3.4(m，1H)，2.8(m，5H)，2.7(m，1H)，2.3(m，2H)，2.0(m，2H).
在以下實施例中，按照與實施例1類似的方法制備了式I化合物，其中R1為二氫化茚-5-基，R5為氫或甲基，m為2。
在以下實施例中，根據實施例1的方法制備了式I化合物，其中R1為二氫化茚-5-基，R4為氫，R6為ZNH(CH2)nCHR7R8，m為2。
實施例22，4-二氯-N-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-N-(1H-四唑-5-基甲基)苯磺酰胺的制備在0℃、氮氣環境下，將3-氨基丙腈(0.190g，2.71mmol，1.2當量)的無水二甲基甲酰胺溶液(1ml)、苯并三唑(0.305g，2.26mmol，1當量)和1，3-二環己基碳二亞胺(0.466g，2.26mmol，1.0當量)加入到攪拌狀態下的{(2，4-二氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)乙基]-氨基}-乙酸(1.0g，2.26mmol，1.0當量)的二甲基甲酰胺溶液(10ml)中，使混合物過夜自然升至室溫。將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)中、用碳酸鈉溶液萃取、然后用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并有機萃取液，用水(3×25ml)、然后用鹽水(25ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到粗品(1.18g)。在乙醚(2×50ml)中研磨粗品，過濾收集(0.826g)，然后用硅膠柱層析法(洗脫液為5％甲醇-二氯甲烷)純化，得到N-(2-氰基-乙基)-2-{(2，4-二氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酰胺的純品。
在室溫、攪拌狀態下向N-(2-氰基-乙基)-2-{(2，4-二氯-苯磺酰基)-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-氨基}-乙酰胺(0.732g，1.47mmol，1.0當量)的無水四氫呋喃溶液(15ml)中加入三苯基膦(0.387g，1.47mmol，1.0當量)、偶氮二羧酸二乙酯(0.256g，1.47mmol，1.0當量)和三甲基硅烷疊氮化物，并攪拌過夜。再將均為1當量的三苯基膦、偶氮二羧酸二乙酯和三甲基硅烷疊氮化物加入到反應混合物中，加熱至40℃(油浴溫度)持續6小時。將反應混合物冷卻至0℃，緩慢加入過量的硝酸鈰(IV)銨溶液(5.5％，120ml，12mmol)，濃縮反應混合物并在室溫下于乙酸乙酯(300ml)中攪拌過夜。將溶液過濾、用硫酸鎂干燥并濃縮，得到油狀粗品(2.25g)，用硅膠柱層析法對得到的粗品進行純化(洗脫液乙酸乙酯-正己烷(先1∶2、后1∶1、最后1∶0))，得到2，4-二氯-N-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基甲基]-N-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]苯磺酰胺的純品。
在室溫下將1M NaOH溶液(0.63mmol，1.0當量)加入到攪拌狀態下的2，4-二氯-N-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基甲基]-N-[2-(二氫化茚-5-基-氧基)-乙基]苯磺酰胺(0.325g，1當量)的四氫呋喃溶液(3ml)中，并將反應混合物攪拌過夜。用1M HCl溶液將反應混合物酸化至pH3，然后用乙酸乙酯(20ml)萃取。用1M HCl溶液(2×5ml)、然后用鹽水(1×10ml)洗滌有機萃取液，用硫酸鎂干燥，并使之濃縮，得到固體粗品(0.211g)，將得到的粗品在乙醚中研磨，過濾并用乙醚洗滌，抽干。將所得的固體通過制備HPLC純化，得到2，4-二氯-N-[2-(二氫化茚-5-基氧基)-乙基]-N-(1H-四唑-5-基甲基)苯磺酰胺的純品。
在以下實施例中，按照與實施例2或方法c(見第3頁)類似的方法制備了式I化合物，其中R1為二氫化茚-5-基，m為2。
特征數據以上各表的化合物具有以下HPLC保留時間[分鐘]和/或分子離子質荷比
HPLC條件Kingsorb 3micron，30×4.6mm C18柱，10％至100％乙腈/水(+0.1％三氟乙酸)梯度洗脫10分鐘。
本發明中使用的優選的式I化合物為實施例5的化合物。這些化合物是緩激肽的強拮抗劑，在體外KI值為約0.3μM。
權利要求
1.游離形式或鹽形式的式I化合物 其中，R1為苯基、1，2-二氯苯基、3-甲基苯基、3-溴苯基、萘-2-基、二氫化茚-5-基、苯并[1，3]二氧雜環戊烯-5-基或1，2，3，4-四氫萘-6-基；R2為氫、鹵素、未取代的C1-C4烷基或取代的C1-C4烷基；R3為氫、鹵素或C1-C4烷基；R4為氫或C1-C4烷基；R5為氫或C1-C4烷基；R6為CH2OH；四唑-5-基；1，2，4-三唑-5-基；1，2，3-三唑-5-基；C(O)OH、C(O)NH2；或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-C(O)-或-CH2-，n為0、1、2、3或4；R7為未取代或取代的C1-C4烷基、C(O)OH、C(O)OC1-C4烷基；R8為氫、未取代或取代的C1-C4烷基、未取代或取代的C5-C10芳基或C5-C10雜芳基或C1-C4烷基-C5-C10芳基或C1-C4烷基-C5-C10雜芳基，C5-C10雜芳基包含一個或多個選自N、O和S的雜原子；并且m為2、3或4。
2.游離酸形式或鹽形式的權利要求1的化合物，其中R1為二氫化茚-5-基，R2為Cl，R3為Br，R4為H，R5為H，并且R6為C(O)OH。
3.用于制備權利要求1所定義的式I化合物的方法，其包括a)制備其中R6為C(O)OH的式I化合物的方法，其包括使式II化合物脫保護， 其中R1、R2、R3、R4、R5和m如權利要求1所定義，R9為C1-C4烷基；或(b)制備其中R6為C(O)NH2或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-C(O)-，n、R7和R8如權利要求1所定義的式I化合物的方法，該方法包括使其中R6為C(O)OH的式I化合物與NH3或式III化合物反應，HNH(CH2)nCHR7R8(III)其中n、R7和R8如權利要求1所定義，并任選進一步衍生所得到的化合物；或(c)制備其中R6為CH2OH、四唑-5-基、1，2，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-CH2-，n、R7和R8如權利要求1所定義的式I化合物的方法，該方法包括使式IV化合物和式V化合物反應，并將所得到的式I化合物以游離形式或鹽的形式回收，其中式IV化合物的結構式為 其中R1、R2、R3、R4和m如權利要求1所定義，其中式V化合物的結構式為 其中R5如權利要求1所定義；R6為CH2OH、四唑-5-基、1，2，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基或ZNH(CH2)nCHR7R8，其中Z為-CH2-，n、R7和R8如權利要求1所定義；并且Hal為鹵素。
4.用作藥物的游離形式或可藥用鹽形式的權利要求1所定義的式I化合物。
5.游離形式或可藥用鹽形式的權利要求1所定義的式I化合物在制備用于治療或預防緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病或病癥的藥物中的用途。
6.藥物組合物，其含有游離形式或可藥用鹽形式的權利要求1所定義的式I化合物以及載體。
7.治療或預防緩激肽B1受體的活化在其中發揮作用或被涉及的疾病或病癥的方法，其包括向有需要的哺乳動物施用治療有效量的游離形式或可藥用鹽形式的權利要求1所定義的式I化合物以及載體。
8.游離形式或鹽形式的式II化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5和m如權利要求1所定義，R9為C1-C4烷基。
9.包含治療有效量的游離形式或可藥用鹽形式的權利要求1所定義的式I化合物和第二種藥物的聯合形式，所述第二種藥物是例如用于說明書中所列出的任何具體適應癥的藥物。
全文摘要
本發明涉及具有式I的新的磺酰胺衍生物，其中R
文檔編號C07C311/19GK1509269SQ02809890
公開日2004年6月30日 申請日期2002年5月13日 優先權日2001年5月14日
發明者T·W·哈特, T·J·里奇, T W 哈特, 里奇 申請人:諾瓦提斯公司