專利名稱：新的梭鏈孢酸衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一系列新的17，20-二氫梭鏈孢酸衍生物，涉及其鹽和涉及其易水解的酯，涉及這些化合物的制備方法，涉及含有所述化合物的藥物組合物，和涉及這樣的化合物在藥物中的用途。特別地，這些化合物表現出抗微生物活性，因此它們對于治療感染性疾病是有用的。本發明的化合物能夠用于感染的全身治療和與皮膚和眼部相關的感染的局部治療。
背景技術：
梭鏈孢酸的抗菌性能是公知的。也已知結構變化可能引起這樣的活性的顯著降低或完全失去(參見Godtfredsen等，藥物化學雜志(J.Med.Chem.)，Vol.9，p.15-22，1966)。直到現在一般接受的是連接側鏈和四環環系的C-17和C-20碳原子之間的雙鍵對于抗菌活性是必需的。將梭鏈孢酸C-24和C-25之間的雙鍵還原為單鍵導致對該分子的抗菌活性的邊際效應，而產生四氫梭鏈孢酸的C-17和C-20之間的雙鍵的另外的還原作用引起活性的幾乎完全喪失。先前利用分別具有17(R)，20(S)和17(R)，20(R)構象的梭鏈孢酸或者其異構體光-梭鏈孢酸的催化氫化已經制備了四氫梭鏈孢酸系列的兩種差向異構體(參見von Daehne等，高等應用微生物(Adv.Appl.Microbiol.)25，p.95-146，1979，并且在這里引作參考)。
發明概述本發明的目的是提供具有抗微生物活性的梭鏈孢酸的半合成類似物。使用屬于具有必需構象17(S)，20(S)的二氫-和四氫梭鏈孢酸系列的本發明的化合物實現所述目的，所述化合物體外表現出高抗微生物活性和好的穩定性和藥物動力學性質，由此可以在人和動物感染的治療中使用本發明的化合物。
本發明提供通式Ia的化合物 其中Q1，Q2和Q3是相同或不同的并且獨立地代表-(CO)-基團；-(CHOH)-基團；-(CHOR)-基團；-(CHSH)-基團；-(NH)-基團；-(CHNH2)-基團；或-(CHNHR)-基團，其中R代表具有1-4個碳原子的烷基或者具有1-4個碳原子的酰基；并且其中Q2和Q3也可以獨立地代表-(CH2)-基團；Y代表氫，羥基，具有1-4個碳原子的烷基，或者具有1-4個碳原子的酰基；A代表氧或硫原子；R1代表具有1-4個碳原子的烷基，具有2-4個碳原子的烯烴基，(C1-C6)酰基，(C3-C7)環烷基羰基或苯甲酰基，R1任選地被一個或多個鹵原子和/或羥基，烷氧基或疊氮基取代；和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
在式Ia和下面的結構式中，其中C-1和C-2和/或C-24和C-25之間的虛線表示相關原子通過雙鍵或單鍵連接。
本發明的詳細描述本發明的優選化合物是式I的化合物
其中Q1和Q2是相同或不同的并且兩種都代表-(CHOH)-基團；-(CO)-基團；或-(CHSH)-基團；A代表氧或硫原子；R1代表具有1-4個碳原子的烷基，具有2-4個碳原子的烯烴基，(C1-C6)酰基，(C1-C7)環烷基羰基或苯甲酰基，R1任選地被一個或多個鹵原子和/或羥基，烷氧基或疊氮基取代；和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
優選地，Q1和Q2選自-(CO)-和-(CHOH)-。
本發明更優選的化合物是式I的化合物，其中Q1和Q2都代表 基團；或者Q1或Q2之一代表-(CO)-；A代表氧；R1代表(C1-C4)烷基，任選地被一個或多個選自疊氮基，羥基和選自氟，氯和溴的鹵原子的取代基取代，或者R1代表具有1-4個碳原子的酰基或苯甲酰基，兩者都任選地被一個或多個鹵原子優選地選自氟和氯的基團取代。R1優選選自乙基，2，2，2-三氟乙基，2，2，2-三氯乙基，2-疊氮基乙基，2-羥基乙基，丙基和異丙基，1，3-二氟-異丙基，乙酰基，丙酰基，氯代乙酰基和三氟乙酰基，異丙基，叔丁基和乙酰基。也優選其中C-24和C-25之間的鍵是雙鍵的式I和Ia的化合物。
通過所述方法都能夠制備的本發明的化合物的例子如下17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸，11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，3-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯代丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-甲基丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，
16-脫乙酰氧基-16β-環丙基羰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-氯代乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-溴代乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(4’-氟代苯甲酰基氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-環己基羰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-丙烯酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-乙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氯乙基硫基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-叔丁基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-甲氧基甲基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-丙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-異丙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(1’，3’-二氟異丙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-甲氧基甲氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，
16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氯乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
與其中C-17和C-20通過雙鍵連接的天然梭鏈孢酸(1)相反，這里及式I和Ia描述的所有的化合物在C-17和C-20之間具有單鍵。所述兩個不對稱碳原子的構象是17(S)和20(S)。該差向異構體是只在C-17和C-20的構象上不同的四種可能的差向異構體中的一種，并且生物學試驗證明這是唯一表現出潛在活性的差向異構體。
本發明的化合物可以作為其本身或者以鹽或容易水解的酯的形式(下文定義的)使用。這些化合物的鹽特別是藥學可接受鹽，例如堿金屬鹽和堿土金屬鹽，例如鈉鹽，鉀鹽，鎂鹽或鈣鹽，以及銀鹽和與堿的鹽，例如氨氣或合適的無毒的胺，例如低級烷基胺，例如三乙胺，羥基-低級烷基胺，例如2-羥基乙胺，二-(2-羥基乙基)-胺，環烷基胺，例如二環己基胺，或芐基胺，例如N，N’-二芐基乙二胺，和二芐基胺。所述化合物的銀鹽特別用于局部處理。
本發明說明書中使用的術語“易水解的酯”指烷酰氧基烷基，芳烷酰氧基烷基酯，芳酰基氧基烷基酯，例如乙酰氧基甲酯，新戊酰氧基甲酯，苯甲酰氧基甲酯和相應的1’-氧基乙基衍生物，或烷氧羰基氧基烷基酯，例如甲氧羰基氧基甲酯和乙氧羰基氧基甲酯，和相應的1’-氧基乙基衍生物，或者lactonyl酯，例如2-苯并[c]呋喃酮基酯，或二烷基氨基烷基酯，例如二乙基氨基乙酯。術語“易水解的酯”包括體內可水解的本發明的酯。這樣的酯可以使用本領域技術人員公知的方法制備，參見英國專利No.1490852，這里引作參考。
除非另有說明，本說明書中使用的下面的術語具有指出的定義，也可參見IUPAC建議1994http//www.chem.qmw.ac.uk/iupac/class/.。
“烷基”指從烷烴通過從任何碳原子上去除一個氫原子而衍生的任何一價基團，并且包括具有特定碳原子數的分別是伯，仲和叔烷基的正常烷基(n-烷基)小類，包括例如(C1-C4)烷基，(C1-C3)烷基，(C1-C2)烷基，甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基和叔丁基。烷烴指無環支鏈或直鏈的具有通式CnH2n+2的烴，其中n代表整數，因此全都由氫原子和飽和的碳原子組成。
“烯烴基”指具有特定碳原子數的一個或多個合適地為E或Z立體化學的碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈無環烴。該術語包括例如(C2-C4)烯烴基，優選(C2-C4)鏈烯基；(C2-C3)烯烴基，優選(C2-C3)鏈烯基；乙烯基；烯丙基；1-丁烯基；2-丁烯基；和2-甲基-2-丙烯基。此外，“烯烴基”指具有至少一個三鍵的直鏈或支鏈炔烴基部分。該術語包括例如巴豆基和炔丙基。優選稱之為鏈烯基的具有至少一個碳-碳雙鍵的烯烴基。
“芳基”指通過從成環碳原子去除一個氫原子而從單環和多環芳香烴衍生的基團，例如鄰-甲苯基，苯基，萘基。一個芳基中的碳原子數一般是6，7，8，9或10個。
“酰基”概括地指式R-CO-基團，其中R是如上定義的烷基，例如(C1-C6)酰基。
“烷氧基”概括地指式-OR基團，其中R是如上定義的烷基，例如(C1-C5)烷氧基，(C1-C3)烷氧基，甲氧基，正丙氧基，叔丁氧基等。
“鹵原子”指相同或不同的氟，氯，溴和碘；氟，氯和溴在本發明化合物中更有用。
“烷酰基”概括地指式-R-CO-基團，其中R是如上定義的烷基，例如(C1-C8)烷酰基，乙酰基，丙酰基，異丙酰基，丁酰基。“芳烷酰基”概括地指式-R(CH2)n-CO-基團，其中R是如上定義的芳基，n是一個整數，優選選自1，2，3和4。“芳酰基”概括地指式-R-CO-基團，其中R是如上定義的芳基。
“烷酰基氧基烷基”或“芳酰基氧基烷基”概括地指式-CH2-O-CO-R基團，其中R代表(C1-C6)烷基或(C6-C8)芳基。芳基和烷基如上定義。“烷氧羰基-”和“芳氧羰基”指式-CO-OR基團或者“酰基氧基-”指其中R是如上定義的烷基或芳基的R-CO-O-。
因為存在不對稱碳原子，所以根據本發明的化合物中有幾個手性中心。幾個不對稱碳原子的存在在每個手性中心有幾個R或S構型的立體異構體。通式I和Ia，和本說明書中所有的其它結構式(除非另有說明)理解為包括純形式和作為混合物(例如立體異構體混合物)的所有的這樣的立體異構體，除了表達上指出構型。
在式I和Ia的化合物中，一般來說優選的立體化學如下當Q1和Q2指 基團時，式I和Ia的化合物中C-3和C-11的構型分別是3α和11α。攜帶A基團的C-16原子具有(S)-構型，下文指定為16β。在這里的結構式中，平伏線指大致在該圖平面中的鍵，與該平面之上的原子鍵合的鍵顯示具有該圖平面中的楔形的箭頭末端一個原子起始的黑體楔形；顯示與平面之下原子鍵合的鍵具有短的平行(楔形的)線。該平面之上的取代基為β，并且示為黑體楔形；該平面之下的取代基為α，并且示為短的平行(楔形的)線。
生物活性體外研究證明了本發明的化合物的抗細菌的高效力，所述細菌包括葡萄球菌，鏈球菌，棒狀桿菌和分枝桿菌。生物學試驗證明17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(10)(化合物101)的抗菌活性比得上梭鏈孢酸(1)的活性，如從表1可見上述兩種化合物抗幾種細菌的MIC值。使用含有肉湯的液體培養基在微量滴定板上進行生物學試驗。 梭鏈孢酸 17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸表1
FusS＝梭鏈孢酸敏感；FusR＝梭鏈孢酸抗性；MRSA＝二甲氧基苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌；MSSA＝二甲氧基苯青霉素敏感金黃色葡萄球菌；VanR＝萬古霉素抗性。*凝固酶陰性。
本發明的其它化合物表現出抗幾種細菌的高體外活性。表2證明這些化合物中的一些相對梭鏈孢酸的抗菌活性，表2給出了本發明的化合物的MIC值。使用的方法是歐洲藥典第三版(1997)中測定抗生素效力的方法。這是一種瓊脂擴散方法，其中向瓊脂腔中加入相同體積的試驗溶液。抑制作用帶是使用的梭鏈孢酸類似物的的濃度的函數。用梭鏈孢酸(1)作為參照物質進行所有的試驗。由于使用的實驗方法不同，表2的結果與表1的結果不同。
表2
*MRSA**MRSA和利福平抗性***青霉素抗性此外，與包含17，20雙鍵的相應化合物例如梭鏈孢酸相比，本發明的化合物具有幾個優點式I和Ia的化合物化學上更穩定，可能是由于飽和17，20鍵更低的酸性和不存在羧酸與碳-碳雙鍵的結合。
式I和Ia的化合物當暴露于陽光時更不容易降解。
式I和Ia的化合物在溶液中更穩定下面給出的式10的化合物的乙醇溶液在0℃下貯存1個月保持＞80％的最初活性，而相應的梭鏈孢酸溶液只保持大約70％的最初活性。
式I和Ia的化合物更具親脂性因此更適合局部用制劑。
作為半合成的式I的化合物可以從其另外不適合制藥目的的相對粗梭鏈孢酸粗原料制備。
本說明書中自始至終使用下面標準縮寫AcOH＝乙酸Ac2O＝乙酸酐Ac＝乙酰基Bu＝正丁基tBu，tBu＝叔丁基Et＝乙基Ether＝乙醚Me＝甲基MOM＝甲氧基甲基MOMO＝甲氧基甲基-OPh＝苯基TBAF＝四正丁基銨氟化物TBS＝叔丁基二甲基甲硅烷基TBSCl＝叔丁基二甲基甲硅烷基氯THF＝四氫呋喃TLC＝薄層色譜
TMS＝三甲基甲硅烷基本發明的化合物的制備按照下面圖示1給出的順序從天然存在的梭鏈孢酸起始可以制備17S，20S-二氫梭鏈孢酸(10)首先通過脫酰基之后進行酸化將梭鏈孢酸(1)轉化為內酯(2)。在甲醇水溶液中用NaBH4還原(2)中C-17和C-20之間的雙鍵使在該分子的α-面起順式反應得到內酯(3)。通過在28％氫氧化鈉水溶液存在下加熱內酯(3)定量獲得C-20處的轉化。接著將內酯(4)中的C-3和C-11處的羥基保護為甲氧基甲基(MOM)醚。用LiAlH4還原保護的內酯(5)得到二元醇(6)，其首先用二苯基甲基甲硅烷基將C-21處伯羥基選擇性保護，接著將C-16處的羥基酰化。使用用乙酸緩沖的四丁基氟化物(TBA+F)將(7)脫甲硅烷基作用之后，可以首先用Dess-Martin高碘烷(periodinane)將(8)中的自由羥基氧化為醛，并且進一步用亞氯酸鈉氧化為羧酸(9)。在最后步驟中通過在無水二氯甲烷中用三甲基甲硅烷基溴(TMSBr)處理通過(9)中MOM基團的裂解獲得化合物(10)。
式10的化合物是本發明的化合物(化合物101)，并且還是下文描述的相應于式I的類似物的一般起始化合物。
圖示1
a)乙醇中的NaOH水溶液，回流；AcOH；b)甲醇中的NaBH4水溶液；AcOH；c)乙醇中的NaOH水溶液(28％)，回流；d)二異丙基乙基胺，MOMCl，CH2Cl2，回流；e)LiAlH4，THF，回流；f)(i)Ph2MeSiCl，Et3N，CH2Cl2，0℃；(ii)Ac2O/吡啶；g)TBA+F-，AcOH，THF，回流；h)(i)Dess-Martin高碘烷(periodinane)，CH2Cl2/吡啶；(ii)NaClO2，叔丁醇；i)TMSBr，CH2Cl2。
另外可使用TBS保護基團保護化合物4中的3-羥基官能團而不保護11-羥基也可以制備化合物101。然后以相應于圖示1所示方式使TBS保護的化合物11(圖示2)反應。通過用稀釋的氫氟酸處理化合物16實現TBS基團的最后裂解，得到式10的化合物(化合物101)。
圖示2
a)咪唑，TBSCl，CH2Cl2；b)LiAlH4，THF，回流；c)Ph2MeSiCl，Et3N，CH2Cl2，0℃；d)Ac2O/吡啶；e)TBA+F-，AcOH，THF，回流；f)(i)Dess-Martin高碘烷(periodinane)，CH2Cl2/吡啶；(ii)NaClO2，叔丁醇；g)HF水溶液，乙腈/THF。
通過包括其中如下所述通式II的化合物被轉化為式III的16-溴代化合物的第一步的方法可以制備通式I的化合物。 其中式Q1’和Q2’代表-(CO)-基團， 基團；或 基團，R3代表一般保護基，例如烷酰基，芳烷酰基，烷酰基氧基烷基或芳酰基，或者烷基，氧基烷基，芳基或氧基芳基取代的三取代甲硅烷基；R2是具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，叔丁基，未取代或取代的芳烷基，例如芐基，硝基芐基，烷酰基甲基或芳酰基甲基，例如丙酮基或苯甲酰甲基，烷酰基氧基烷基，或芳酰基氧基烷基，例如乙酰氧基甲基，新戊酰基氧基甲基或苯甲酰基氧基甲基，烷氧基甲基或氰基甲基，烷基，鏈烯基，氧基烷基，氧基鏈烯基，芳基或氧基芳基取代的甲硅烷基，例如三乙基硅，三異丙基硅，二苯基甲基硅，叔丁基二甲基硅，叔丁基二苯基硅，叔丁氧基二苯基硅；C24和C-25之間的虛線具有上述定義。
通過在惰性溶劑中，例如在乙醚，四氫呋喃或二甲基甲酰胺中，在或低于室溫下，使式II的化合物與四溴甲烷/三苯基膦或者與N，N-二甲基亞甲酰胺溴反應進行轉化(參見von Daehne，W.和Rasmussen，P.，1975，GB專利No.1523803)。
通過從文獻得知的方法(參見GB專利No.1490852和GB專利No.1523803)或者通過類似方法，從圖示1中的化合物起始制備式II的化合物。式III的起始化合物可以例如從式10的化合物制備或者更方便地從式9的化合物制備，如圖示3所示。
圖示3 a)乙酸N，N-二甲基甲酰胺-二-叔丁酯，苯，回流；b)2N氫氧化鈉水溶液，EtOH；回流；b)CBr4，PPh3，CH2Cl2。
在下一步中，式III的中間體與式IV的化合物反應，在C-16處轉化構型，生成式V的化合物R1-A-HIV
其中Q1’，Q2’，A，R1，R2和C-24和C-25之間的虛線具有上述定義。根據從文獻得知的方法進行轉化(參見von Daehne，W.和Rasmussen，P.，1975，GB專利No.1523803)。當式V中的A代表氧并且R1與酰基不同時，式IV的反應化合物優選用作溶劑并且在銀鹽或汞鹽例如碳酸銀，三氟乙酸銀或乙酸汞，或者一種堿，例如碳酸鉀，碳酸氫鈉或(C1-C5)醇化鈉，優選甲醇鈉或乙醇鈉的存在下在室溫下或者稍高的溫度下進行反應。如果式V中的A代表硫并且R1與酰基不同，則在惰性有機溶劑優選乙醇或二甲基甲酰胺中，在一種堿，例如氫氧化鉀或氫化鈉的存在下在室溫下或者低于室溫下或稍高的溫度下進行反應。
當式V中的A代表氧并且R1代表酰基時，在惰性溶劑例如苯中在室溫下或者稍高的溫度下與式IV化合物的相應銀鹽進行反應。當式V中的A代表硫并且R1代表酰基時，則式IV的反應化合物優選作為它們的鉀鹽或鈉鹽使用，并且優選在惰性溶劑例如二甲基甲酰胺中，在室溫下進行反應。
通過與式IV的羧酸的反應性衍生物例如酰氯或酸酐反應能夠從式II的化合物制備其中A代表氧和R1代表(C1-C6)酰基或苯甲酰基的式V的化合物。該反應在惰性溶劑例如二甲基甲酰胺或吡啶中在室溫下在堿優選吡啶的存在下進行。
在最后步驟中，根據Q1’，Q2’，R1和R2的性質，或者在甲醇或乙醇水溶液中在堿例如氫氧化鈉或氫氧化鉀或碳酸鹽存在下，或者在四氫呋喃水溶液中在酸例如鹽酸或對甲苯磺酸存在下，通過水解，能夠將式V的化合物轉化為式I的化合物。
其中Q1’，Q2’代表下面基團 或者-(CO)-和R2代表容易水解的酯基的式V的化合物不用進一步轉化本發明的化合物。
其中Q1’和/或Q2’代表下面基團 或者-(CO)-，和R3代表烷酰基，烷氧基烷基，芳烷酰基或芳酰基的式V的化合物通過在酸例如鹽酸，乙酸和對甲苯磺酸存在下在甲醇，乙醇或THF水溶液中水解，或者在路易斯酸例如三甲基甲硅烷基溴化物的存在下在無水非質子有機溶劑例如二氯甲烷中水解，能夠轉化為本發明的化合物。如果R3代表烷氧基或芳基氧基，則通過在堿例如氫氧化鈉或氫氧化鉀或碳酸鹽的存在下在甲醇或乙醇水溶液中水解，能夠將式V的化合物轉化為本發明的化合物。
通過還原也可以將其中Q1’，Q2’各自代表下面基團 或者-(CO)-和R2代表未取代的或取代的芐基，氰基甲基，烷酰基甲基或芳酰基甲基的式V的化合物轉化為式I的化合物。在其中R2代表芐基或氰基甲基的情況下，優選催化氫化，而當R2代表丙酮基，苯甲酰甲基或三氯乙基時可以在乙酸中使用鋅進行還原。當R2是取代的甲硅烷基時可以利用使用稀釋酸的酸解，所述酸是鹽酸，乙酸或甲苯磺酸或氟化物輔助裂解，例如使用乙腈中的氟化氫或THF中的四丁基氟化銨。
或者通過下面的方法可以制備其中A代表氧的通式I的化合物，所述方法包括如下所述其中將通式VI的化合物轉化為式VII的16-酰氧基或16-O-烷基化合物的第一步驟 其中式Q1’，Q2’，R1和C-24和C-25之間的虛線具有上面確定的定義；和R4代表一般保護基團例如烷酰基，芳烷酰基，烷酰基氧基烷基或芳酰基，或者烷基，氧基烷基，芳基或氧基芳基取代的三取代甲硅烷基。
R4優選是甲硅烷基保護基，例如二苯基甲基甲硅烷基或叔丁氧基二苯基甲硅烷基，或者酰基保護基，例如乙酰基或新戊酰基。
對于其中R1代表如上定義的烷基的式VII的化合物，根據本領域技術人員公知的醚制備的一般方法通過使式VI的化合物與烷基鹵化物或alkyltriflate反應進行轉化。
對于其中R1代表酰基的式VII的化合物，根據本領域技術人員公知的一般酰化方法通過在弱堿存在下使式VI的化合物與酰基鹵或相應的酸酐反應進行轉化。通過首先通過公知方法去除R4保護基并且然后通過圖示2中描述的相同反應步驟f和g或者通過相關方法，將式VII的化合物轉化為式I的化合物。
通過本領域技術人員公知的氧化方法，從其中Q1和Q2都代表基團 的式I的相應的化合物，也能制備其中Q1和/或Q2代表-(CO)-的式I的化合物。
本發明進一步涉及制備式I的化合物的方法，其中在濃氫氧化鈉存在下通過加熱這里的式3的內酯定量獲得C-20的轉化。
通過文獻描述的方法用公知方法可以制備是I和Ia的化合物的容易水解的酯。
通過還原作用，例如通過使用催化劑例如鈀或鉑的催化氫化，可以從相應的不飽和類似物制備其中C-24和C-25通過單鍵連接的本發明的化合物。象蠟黃酸和頭孢菌素P1這樣的化合物可以被用作制備通式Ia的其它化合物中的起始物。
通過文獻公知的方法(參見GB專利1490852和GB專利1523803)或者通過類似方法從圖示1的化合物起始制備式II的化合物。式III的起始化合物例如可以如圖示3所示從式10的化合物或者更方便地從式9的化合物制備。
本發明的進一步目的是提供在人或獸醫應用中治療感染疾病中有用的藥物組合物。
從該目的來看，本發明的組合物含有作為活性成分的至少一種選自包括其可接受鹽和易水解酯的式Ia和式I的化合物(下文稱之為活性成分)，和可接受藥物載體和/或稀釋劑。
在所述組合物中，治療活性物質與載體的比例是0.5％至95％重量比。所述組合物可以制備成各種存在的藥物形式例如顆粒，片劑，丸劑，糖衣丸，栓劑，膠囊，緩釋片劑，懸浮液，注射劑，并且可以裝入小瓶或試管或類似容器。適合口服，經腸，腸胃外或局部給藥的制藥用有機或無機固體或液體載體和/或稀釋劑可以用來制備含有本發明化合物的組合物水，明膠，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，滑石，植物油和礦物油和脂肪，苯甲醇，樹膠，聚亞烷基二醇，凡士林，可可脂，羊毛脂和其它乳化劑，用于改變滲透壓的鹽或用于保證組合物的合適的pH值的緩沖液可以用作助劑。
此外，所述組合物可以含有在感染疾病的治療中可以適當地與本發明的化合物一起施用的其它治療活性成分，例如其它合適的抗生素，特別是可以提高活性和/或防止產生抗藥性的抗生素。這樣的抗生素包括青霉素，頭孢菌素，四環素，利福霉素，紅霉素，林可霉素，克林霉素和氟代喹諾酮。可以有利地與本發明的化合物組合施用的其它化合物，特別是在局部用制劑中，包括，例如皮質甾類，例如氫化可的松或氟羥脫氫皮質甾醇。或者，這樣的另外的治療活性成分可以伴隨(同時或依次)本發明的組合物施用。
對于顆粒，片劑，膠囊或糖衣丸，本發明的藥物組合物適當地含有25％-98％本發明的活性物質，在口服懸浮液中，相應的量適當地是2％-20％活性成分。
當以與藥學可接受無毒堿的鹽的形式施用化合物時，為了獲得特定的合適的吸收速度，優選的鹽例如是易水解或在水中微溶的鹽。
如上所述，式I和Ia的化合物及其鹽可以制備成存在的藥學形式，包括懸浮液，軟膏和霜劑用于口服治療的藥物制劑也可以是活性成分本身或在水中難以溶解的藥學可接受鹽的形式的懸浮液的形式，所述制劑含有20-100毫克/毫升賦形劑。用于局部處理的藥物制劑可以是含有占制劑0.5-50％量的活性成分的軟膏或霜劑形式。由于本發明化合物對光照的穩定性和相對親脂性，局部用制劑是良好的。
本發明的另一個目的是選擇本發明化合物的劑量，可以施用該劑量使得實現期望的活性而沒有自發性第二作用。在對人的全身治療中，(對成人)根據式I的化合物計算的以含有不少于50毫克至多1000毫克，優選200-750毫克的劑量形式方便地施用化合物及其鹽。
術語“劑量單位”指單元劑量，即單一劑量，其能對患者施用，并且容易操作和包裝，保持為含有活性物質本身或者其與固體或液體制藥稀釋劑或載體的混合物的物理和化學穩定的單位劑量。
在劑量單位形式中，可以以適當間隔一天施用化合物一次或多次，但是總是取決于患者的狀況，并且根據藥劑師給出的說明。
因此，在全身性治療中，日劑量優選是0。5-3克活性成分的量。
與局部用相關的術語“使用單位”指單元劑量，即單一劑量，其能對患者局部施用，在應用中，每平方厘米感染面積使用0.毫克至10毫克，優選0.2毫克至1毫克有關的活性成分。
如果組合物是注射用的，可以提供含有活性成分的腸胃外可接受含水或含油可注射溶液或分散液作為劑量單位的密封安瓿，小瓶或類似容器。
腸胃外用制劑特別用于治療其中期望對治療快速響應的癥狀。在患有炎癥疾病的患者的持續治療中，由于當口服給予藥物時獲得延長的作用，片劑或膠囊可以是合適的藥物制劑形式，特別是緩釋片劑形式。
在對炎癥疾病的治療中，這樣的片劑有利地含有如上所述其它活性成分。
本發明的另一個目的是提供治療患有炎癥疾病的患者的方法，該方法包括對患者每天給藥1-3次施用0.03克-0.7克/千克體重，優選每天0.5克-3克式I或Ia的化合物或者等價量的式I或Ia的化合物的如上定義的鹽。優選地，以如上所述劑量單位形式給予活性成分。
在下面非限制性制備和實施例中進一步描述本發明。
制備和實施例概述所有的熔點都是未矯正的。對于13C核磁共振(NMR)譜(75.6MHz)，除非另有說明，對于相對于內標四甲基硅烷(δ＝0.00)或氘氯仿(對于13C NMRδ＝76.81)的氘氯仿溶液，引用化學位移值(δ)(ppm)。在硅膠上進行層析，使用乙酸乙酯和低沸點石油醚作為洗脫劑。通過在使用之前幾天使貯存分析純溶劑經過4埃分子篩制備無水溶劑。
制備制備116-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(4)在100毫升乙醇中溶解內酯3(20.2克，44mmol)并且加入28％的氫氧化鈉水溶液(100毫升)。將得到的黃色溶液在60℃下加熱1小時。使反應混合物保持室溫并且用濃乙酸將混合物酸化至pH4，得到幾乎無色的溶液。連續攪拌下緩慢加入水(大約100毫升)直到沉淀出無色晶體。在室溫下持續攪拌過夜，并且通過過濾收集晶體，得到20.0克16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(4)。從甲醇-水中重結晶得到18.5克，熔點167-169℃。
13C NMR(CDCl3)181.0，132.9，122.9，84.2，71.4，68.7，49.7，48.7，46.8，42.4，41.4，40.0，38.8，37.4，36.6，36.1，33.9，33.0，32.9，30.4，30.0，25.7，25.7，23.8，22.6，21.0，17.8，17.5，16.0。
制備23，11-雙-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(5)氬氣下在烘箱干燥過的裝有冷凝器的兩口圓底燒瓶中將內酯(4)(34.3克，75mmol)溶解于無水二氯甲烷(350毫升)。加入N，N-二異丙基乙胺(52.3毫升，300mmol)，并且將得到的溶液在室溫下攪拌5分鐘，然后用注射器緩慢注射加入甲氧基甲基氯(22.8毫升，300mmol)。室溫下將反應混合物攪拌15分鐘后回流直到根據TLC監測反應完全(大約4小時)。使反應混合物保持室溫并且用650毫升二氯甲烷轉移到分液漏斗中。依次用水(500毫升)，飽和的碳酸氫鈉(500毫升)，兩次水(2×200毫升)和兩次鹽水(2×500毫升)洗滌有機溶液。用無水硫酸鈉干燥有機溶液，真空下濃縮，得到黃色油狀物，靜置下結晶。將晶體化合物從熱甲醇(200毫升)中重結晶。過濾收集無色晶體，得到31.5克3，11-雙-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(5)，熔點123-125℃。將母液結晶進一步提供6.5克相同化合物，熔點119-121℃。
13C NMR(CDCl3)180.9，132.8，123.0，97.6，95.3，84.3，77.7，77.2，55.8，55.4，50.1，48.5，47.1，42.6，41.6，40.0，39.4，37.1，36.9，36.4，34.0，32.3，30.2，30.1，26.8，25.9，25.7，23.3，23.1，21.3，17.8，17.7，16.1。
制備316β，21-二醇(6)氬氣下在烘箱干燥過的裝有冷凝器的兩口圓底燒瓶中將氫化鋁鋰(3.8克，100mmol)懸浮于無水THF(175毫升)。以引起溫和回流的速度向攪拌的懸浮液加入內酯(5)(26.7克，48.9mmol)的無水THF(150毫升)溶液。該反應混合物在劇烈攪拌下回流3小時后使保持室溫。用乙酸乙酯(125毫升)破壞過量的氫化鋁鋰然后緩慢加入水(125毫升)。用稀鹽酸將得到的懸浮液酸化至pH5。用乙酸乙酯(1000毫升)和水(750毫升)將懸浮液轉移到分液漏斗中。將兩層充分振搖并分離。用乙酸乙酯(1000毫升)萃取含水層并且用鹽水(2×500毫升)將合并的有機層洗滌兩次。用無水硫酸鈉干燥有機層并且真空下濃縮，得到26.6克基本純的標題化合物二醇(6)，為無色粉末。通過從熱甲醇重結晶獲得分析純樣品，熔點120-131℃。
13C NMR，(CDCl3)131.5，124.5，97.3，95.3，78.0，77.3，74.7，64.8，55.7，50.5，49.1，48.5，43.5，41.3，40.5，39.5，36.9，36.6，32.0，31.8，31.4，30.0，26.8，25.9，25.7，23.5，22.9，21.5，18.6，17.7，16.1。
制備421-二苯基甲基甲硅烷基-保護的16β，21-二醇(7)氬氣下在烘箱干燥過的兩口圓底燒瓶中將二醇(6)(5.5克，10mmol)溶解于無水二氯甲烷(50毫升)和三乙胺(2.8毫升，20mmol)。經15分鐘向冷卻的溶液加入二苯基甲基氯甲硅烷(2.3毫升，11mmol)的無水二氯甲烷(20毫升)溶液，使得溫度不超過0℃，并且持續攪拌15分鐘。依次用飽和的碳酸氫鈉(100毫升)，水(100毫升)和鹽水(100毫升)洗滌有機溶液。用無水硫酸鈉干燥有機溶液，減壓下蒸發溶劑，得到9克無色漿液。該粗混合物不用純化即通過溶解于吡啶(15毫升)和乙酸酐(15毫升)而酰化。在塞好的瓶子中將得到的反應混合物在室溫下攪拌過夜。然后真空下濃縮反應混合物，得到淺黃色油狀物。使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析之后得到6.2克基本純的標題化合物(7)，為無色漿液。
13C NMR，(CDCl3)170.1，134.2，129.5，127.6，124.6，97.1，95.0，77.6，77.1，77.0，64.9，55.5，55.1，50.0，48.3，42.5，40.9，40.6，38.9，36.7，36.3，36.2，31.7，31.2，30.3，29.8，26.6，25.6，25.5，23.1，22.8，21.2，21.1，17.8，17.5，15.9，14.0，-3.3。
制備516-乙酸16β，21-二酯(8)21-二苯基甲基甲硅烷基-保護的16β，21-二醇(7)(6.2克，7.9mmol)溶解于四氫呋喃(100毫升)和冰醋酸(0.75毫升)中。向該溶液中加入四丁基氟化銨水合物(4克，15.8mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。然后用200毫升乙酸乙酯將反應混合物轉移到分液漏斗中，兩次用水(2×100毫升)和鹽水(100毫升)洗滌有機溶液。用無水硫酸鈉干燥有機層并且真空下濃縮，得到無色漿液。使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析之后得到4.3克純的標題化合物(8)，為無色漿液。
13C NMR，(CDCl3)170.3，131.7，124.4，97.4，95.3，77.9，77.3，64.9，55.8，55.4，50.4，48.6，43.7，41.3，40.8，39.1，37.0，36.6，36.5，31.9，31.6，30.9，30.1，26.8，25.9，25.7，23.4，23.1，21.6，21.3，18.3，17.8，16.1。
制備63，11-雙-O-甲氧基甲基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(9)室溫下向16-乙酸16β，21-二酯(8)(6克，6.7mmol)的二氯甲烷(50毫升)溶液加入溶解于無水二氯甲烷(60毫升)的Dess-Martin高碘烷(3.7克，8.7mmol)。將反應混合物攪拌5分鐘。然后向反應混合物倒入1N碳酸氫鈉(50毫升)和1N硫代硫酸鈉(50毫升)，并且將兩層劇烈攪拌10分鐘。用乙酸乙酯(100毫升)將兩層轉移到分液漏斗中。分離這兩層并且用飽和碳酸氫鈉(100毫升)和鹽水(100毫升)洗滌有機層。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到3.7克無色漿液。該粗產物醛(3.7克，6.2mmol)不用純化既溶解于叔丁醇(50毫升)。向該溶液加入水(20毫升)中的2-甲基-2-丁烯(1.48毫升，16.8mmol)，1N磷酸二氫鈉(16毫升)和亞氯酸鈉(1.44克，16mmol)，并且在室溫下將得到的反應混合物劇烈攪拌大約3小時。用乙酸將反應混合物酸化至pH4并且用乙酸乙酯(200毫升)轉移到分液漏斗。振搖兩層并且分離。含水相用乙酸乙酯(2×100毫升)再次萃取兩次。合并的有機萃取液用鹽水洗滌兩次(2×100毫升)，用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到3.4克淺黃色泡沫。使用乙酸乙酯，低沸點石油醚和痕量甲酸的混合物為洗脫劑通過柱層析純化得到2.9克純酸9，標題化合物，為半晶體化合物。
13C NMR，(CDCl3)182.2，170.1，132.4，123.2，97.6，95.3，77.9，77.3，76.4，55.8，55.4，49.9，49.1，45.2，44.5，40.9，40.6，38.8，36.9，36.6，36.5，32.6，31.9，31.5，30.1，26.8，25.7，25.2，23.4，23.2，21.2，20.6，17.7，17.6，16.1。
制備73，11-雙-O-甲氧基甲基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(17)3，11-雙-O-甲氧基甲基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(9)(6.2克，10.8mmol)溶解于無水苯(40毫升)將溶液回流加熱并且經4小時加入溶解于無水苯(20毫升)中的N，N-二甲基甲酰胺乙酸叔丁酯(10.4毫升，43.2mmol)。又將反應回流1小時，冷卻，并且用乙酸乙酯(150毫升)轉移至分液漏斗并且稀釋。有機溶液用水(30毫升)，飽和碳酸氫鈉(30毫升)和鹽水(30毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到無色泡沫，其在硅膠上柱層析純化得到無色泡沫標題化合物叔丁酯17。
13C NMR，(CDCl3)174.3，170.5，131.9，123.8，97.6，95.3，79.8，77.9，77.3，77.2，55.8，55.4，49.7，49.2，47.3，43.8，40.9，40.7，39.0，36.9，36.7，36.3，32.5，32.0，31.5，30.1，28.0，26.8，25.7，25.2，23.4，23.2，21.5，21.2，17.8，17.7，16.1。
制備83，11-雙-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(17)將叔丁酯17(4克，6.8mmol)溶解于乙醇和4N氫氧化鈉(10毫升)。得到的混合物回流1小時，冷卻，用鹽酸酸化至pH4。加入水(50毫升)和乙酸乙酯(50毫升)并且將混合物轉移至分液漏斗。分離兩層，并且用乙酸乙酯(3×50毫升)將含水層反復萃取三次。合并的有機層用無水硫酸鈉干燥并且在真空下濃縮得到標題化合物叔丁酯(18)。
制備93，11-雙-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16α-溴-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(19)將叔丁酯(18)(2克，3.4mmol)和四溴甲烷(1.32克，4mmol)溶解于二氯甲烷(50毫升)并且在0℃下冷卻。小批向冷卻的溶液加入固體三苯基膦(1.05克，4mmol)。1小時之后通過加入三乙胺(3毫升)終止反應。加入二乙醚(50毫升)以沉淀三苯基膦氧化物，其然后被過濾。將有機溶液轉移到分液漏斗并且用水(20毫升)，飽和碳酸氫鈉(20毫升)和鹽水(20毫升)洗滌。有機溶液用無水硫酸鈉干燥并且在真空下濃縮得到標題化合物叔丁酯(19)。
制備103-O-TBS-16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(11)氬氣下在烘箱干燥過的兩口圓底燒瓶中將內酯(4)(15.25克，33.2mmol)溶解于無水DMF(75毫升)。向該溶液加入咪唑(4.5克，66.4mmol)然后加入TBSCl(10克，66.4mmol)。得到的淺黃色反應混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用乙酸乙酯稀釋并且依次用水和鹽水洗滌。有機溶液用無水硫酸鈉干燥并且在真空下濃縮得到黃色油狀物，其在靜置時結晶。晶體化合物從甲醇(100毫升)中重結晶。過濾收集無色結晶，得到14.7克3-O-TBS-16-脫乙酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸內酯(11)，熔點138.5-140℃。
制備1116 β，21-二醇(12)氬氣下在烘箱干燥過的裝有冷凝器的兩口圓底燒瓶中將氫化鋁鋰(2.5克，65mmol)懸浮于無水THF(125毫升)。以引起溫和回流的速度向攪拌的懸浮液加入內酯11(18.4克，32.1mmol)的無水THF(75毫升)溶液。該反應混合物在劇烈攪拌下回流4小時后使保持室溫。用乙酸乙酯(125毫升)破壞過量的氫化鋁鋰然后緩慢加入水(125毫升)。用稀鹽酸將得到的懸浮液酸化至pH5。用乙酸乙酯(500毫升)和水(400毫升)將懸浮液轉移到分液漏斗中。將兩層充分振搖并分離。用乙酸乙酯(500毫升)萃取含水層并且用鹽水(2×500毫升)將合并的有機層洗滌兩次。用無水硫酸鈉干燥有機層并且真空下濃縮，得到19克基本純的標題化合物二醇(12)，為無色粉末。通過從甲醇-水重結晶二醇并且過濾收集無色結晶，冷卻干燥之后獲得14.7克二醇(12)，熔點122-124℃。
制備1221-二苯基甲基甲硅烷基-保護的16β，21-二醇(13)氬氣下在烘箱干燥過的兩口圓底燒瓶中將二醇(12)(14.05克，24.4mmol)溶解于無水二氯甲烷(125毫升)和三乙胺(6.8毫升，48.8mmol)并且在-20℃下冷卻。經1小時向冷卻的溶液加入二苯基甲基氯甲硅烷(25.7毫升，26.8mmol)的無水二氯甲烷(50毫升)溶液。持續攪拌15分鐘。將反應混合物轉移至分液漏斗并且用二氯甲烷稀釋。依次用飽和的碳酸氫鈉(250毫升)，水(250毫升)和鹽水(250毫升)洗滌有機溶液。用無水硫酸鈉干燥有機溶液，減壓下蒸發溶劑，得到17克無色漿液。該粗產物淺黃色漿液使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析純化，得到14.7克21-二苯基甲基甲硅烷基-保護的16β，21-二醇(13)，為無色泡沫。
制備13化合物1421-二苯基甲基甲硅烷基-保護的16β，21-二醇(13)(9克，11.0mmol)通過溶解于吡啶(30毫升)和乙酸酐(15毫升)而被酰化。在塞好的瓶子中將得到的混合物在室溫下攪拌20小時。然后真空下濃縮反應混合物，得到11克淺黃色油狀物。使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析，得到7.9克純的乙酰化化合物(14)。
制備1416-乙酸16β，21-二酯(15)化合物(14)(7.5克，9.2mmol)溶解于100毫升THF，向該溶液加入冰醋酸(3.2毫升)和TBAF(4.69克，18.4mmol)，得到的反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。然后加入用水(100毫升)和乙酸乙酯(200毫升)并且將兩層轉移到分液漏斗中，分離兩層并且用乙酸乙酯(200毫升)反復萃取含水層，合并的有機層兩次用水(2×100毫升)和用鹽水(100毫升)洗滌。用無水硫酸鈉干燥有機層并且真空下濃縮，得到無色漿液。使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析之后得到5.7克純的標題化合物(15)，為無色漿液。
制備153-O-TBS-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(16)A.0℃冷卻下經1小時以小份向16-乙酸16β，21-二酯(15)(5.4克，8.75mmol)的無水THF(125毫升)溶液加入Dess-Martin高碘烷(3.72克，8.75mmol)。將反應混合物攪拌5分鐘。然后向反應混合物倒入1N碳酸氫鈉(90毫升)和1N硫代硫酸鈉(90毫升)，并且將兩層劇烈攪拌10分鐘。用二氯甲烷(400毫升)將兩層轉移到分液漏斗中。分離這兩層并且用飽和碳酸氫鈉(200毫升)和水(200毫升)洗滌有機層。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到5.4克漿液。使用乙酸乙酯和低沸點石油醚的混合物作為洗脫劑進行柱層析之后得到5.0克純的醛。
B.來自制備15A的醛(5.18克，8.4mmol)不用純化既溶解于叔丁醇(50毫升)。向該溶液加入水(20毫升)中的2-甲基-2-丁烯(3.55毫升，33.6mmol)，1N磷酸二氫鈉(34毫升)和亞氯酸鈉(3.84克，34mmol)，并且在室溫下將得到的反應混合物劇烈攪拌過夜。用乙酸將反應混合物酸化至pH4并且用乙酸乙酯(200毫升)轉移到分液漏斗。振搖兩層并且分離。含水相用乙酸乙酯(2×200毫升)再次萃取兩次。合并的有機萃取液用鹽水洗滌兩次(2×100毫升)，用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到6克淺黃色泡沫。使用乙酸乙酯，低沸點石油醚和痕量甲酸的混合物為洗脫劑通過柱層析純化得到4.2克純酸(16)，標題化合物，為半晶體化合物。
實施例實施例117(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(10)(化合物101)
氬氣下在烘箱干燥過的兩口圓底燒瓶中將式9的化合物(2克，3.3mmol)溶解于無水二氯甲烷(50毫升)并且在-20℃下冷卻。向該溶液中加入4埃分子篩(6克)并且連續攪拌下緩慢注入三甲基溴硅烷(2.7毫升，20mmol)。攪拌反應混合物直到反應完全(大約5小時)。然后用乙酸乙酯和水將反應混合物轉移到分液漏斗并且震蕩兩層并分離。用乙酸乙酯(3×20毫升)萃取含水層三次并且用鹽水(30毫升)洗滌合并的有機層。用無水硫酸鈉干燥有機溶液并且真空下濃縮得到1.4克化合物101，為無色固體。從甲醇-水中重結晶得到1.2克無色結晶，熔點195-195.5℃。
13C NMR，(CD3OD)，173.1，131.8，126.2，78.3，72.6，69.4，50.8，50.6，46.6，41.9，41.8，39.6，38.2，38.0，37.1，36.2，35.2，33.1，31.1，27.2，25.9，23.7，23.6，22.6，21.2，17.9，16.5。
實施例1a17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(10)(化合物101)的另一種制備方法在圓底聚四氟乙烯燒瓶中將式16的化合物(3.6克，5.7mmol)溶解于THF(15毫升)和4％氟化氫水溶液(10毫升)。室溫下將反應混合物攪拌2天。然后用27％氫氧化鈉溶液將反應中和至pH8并且最后用乙酸調節至pH4。然后用乙酸乙酯和水將反應混合物轉移到分液漏斗，振搖兩層并且分離。含水相用乙酸乙酯(3×50毫升)萃取三次，合并的有機層用鹽水(50毫升)洗滌。用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到4克粗產物101，為無色固體。使用乙酸乙酯，低沸點石油醚和痕量甲酸的混合物為洗脫劑通過柱層析純化得到3.1克純17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(10)(化合物101)，標題化合物，為結晶化合物。從甲醇-水中重結晶得到2.9克無色結晶，熔點195-196℃。
13C NMR，(CD3OD)，173.1，131.8，126.2，78.3，72.6，69.4，50.8，50.6，46.6，41.9，41.8，39.6，38.2，38.0，37.1，36.2，35.2，33.1，31.1，27.2，25.9，23.7，23.6，22.6，21.2，17.9，16.5。
實施例217(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸(化合物102)在5％碳酸鈣上鈀(30毫克)的存在下在大氣壓氫氣下氫化化合物101(280毫克，0.54mmol)的乙醇(3毫升)溶液。劇烈攪拌反應混合物直到消耗理論量的氫氣，并且過濾去處催化劑。向濾液中滴加水，得到255毫克晶體17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸，熔點138.5-140℃。
13C NMR，(DMSO-d6)210.7，176.6，169.1，131.2，123.7，75.3，69.0，57.7，48.9，43.8，43.6，43.3，41.8，41.7，37.7，37.2，34.4，32.6，30.1，27.9，25.3，24.8，22.7，20.6，20.4，20.1，17.4，16.3，16.0。
實施例311-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物103)A.3-O-甲酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸在5℃→50℃從含有甲酸酐，二氯甲烷(4.4毫升)和二甲基氨基吡啶(30毫克)的乙酸酐和甲酸(2∶1，v/v)制備的混合酸酐的溶液中溶解17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(260毫克，0.5mmol)，并且在室溫下攪拌20小時。真空下濃縮混合物，并且將油狀殘余物溶解于乙酸乙酯(25毫升)，用水(10毫升)和鹽水(10毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮，得到250毫克3-O-甲酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，為油狀產物，其靜置下結晶。
B.3-O-甲酰基-11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向溶解于乙酸(2.5毫升)中的來自A的粗產物3-O-甲酰基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸加入鉻酸(65毫克，0.65mmol)的水(0.65毫升)溶液，并且在室溫下將得到的綠色反應混合物攪拌3小時。用二乙醚(40毫升)稀釋反應混合物，用水(20毫升)洗滌并且用鹽水(2×10毫升)洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮，得到255毫克3-O-甲酰基-11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，為無色油狀物。
C.11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向0℃下冷卻的來自B的粗產物3-O-甲酰基-11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸的甲醇(3毫升)溶液加入固體碳酸鉀(130毫克)，并且將得到的懸浮液劇烈攪拌1小時。用2N鹽酸將反應混合物酸化至pH3，用乙酸乙酯(40毫升)，并且轉移到分液漏斗，用水(15毫升)洗滌并且用鹽水(2×10毫升)洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥有機層并且真空下濃縮，得到淺黃色油狀產物，其使用低沸點石油醚，乙酸乙酯，和痕量甲酸的混合物為洗脫劑通過柱層析純化。從甲醇-水得到無色半結晶產物11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
13C NMR，(CD3OD)，180.5，172.1，77.9，72.5，69.2，50.8，50.6，47.2，46.2，41.8，40.2，39.6，38.2，38.0，37.0，36.0，34.5，33.0，31.1，29.1，25.7，23.7，23.6，23.1，23.0，22.6，20.8，17.7，16.5。
實施例43-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物104)將17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(260毫克，0.5mmol)溶解于四氫呋喃(10毫升)并且在0℃冷卻。以小份加入Dess-Martin高碘烷(250毫克，0.59mmol)，并且將反應混合物攪拌5小時。然后將有機溶液和10％硫代硫酸鈉水溶液(15毫升)劇烈攪拌，用水(10毫升)和鹽水(10毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到無色漿液。使用石油醚-乙酸乙酯-甲酸作為洗脫劑進行柱層析純化得到215毫克3-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例516-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物105)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸化合物18(288毫克，0.5mmol)溶解于二氯甲烷(2毫升)，丙酸酐(2毫升)和吡啶(2毫升)的化合物中，并且在室溫下攪拌過夜。真空蒸發溶劑得到基本純的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸無色油狀物。
B.16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向來自A的叔丁酯的四氫呋喃(5毫升)的溶液加入2N鹽酸水溶液(5毫升)并且在室溫下攪拌過夜。然后用乙酸乙酯(25毫升)稀釋反應混合物并且轉移到分液漏斗。分離兩層并且將有機層用水(2×5毫升)洗滌兩次并且用鹽水(2×5毫升)洗滌兩次。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
13C NMR，(CDCl3)180.9，173.4，132.4，123.3，76.2，71.4，68.8，49.4，45.2，44.3，40.7，40.6，38.3，37.2，36.4，36.2，34.4，32.8，32.6，30.4，30.0，27.4，25.7，25.4，23.9，22.6，20.9，17.7，17.3，15.9，8.9。
實施例616-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物106)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯向溶解于吡啶(4毫升)的化合物18(588毫克，1mmol)加入3-氯丙酰氯(0.29毫升，3mmol)，并且將混合物在室溫下攪拌過夜。真空蒸發溶劑得到基本上純的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯無色油狀物。
B.16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向來自A的叔丁酯的四氫呋喃(5毫升)的溶液加入2N鹽酸水溶液(5毫升)并且在室溫下攪拌過夜。然后用乙酸乙酯(25毫升)稀釋反應混合物并且轉移到分液漏斗。分離兩層并且將有機層用水(2×5毫升)洗滌兩次并且用鹽水(2×5毫升)洗滌兩次。有機層用硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例7-1416-脫乙酰氧基-16β-乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物107-114)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-乙酰氧基衍生物根據實施例6A給出的方法并且用表3列出的酰基氯代替3-氯丙酰氯，制備表3給出的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-乙酰氧基衍生物。
表3
B.16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸的16β-乙酰氧基衍生物根據實施例6B給出的方法并且用表2列出的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-乙酰氧基衍生物代替3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯，制備表4給出的16-脫乙酰氧基-16β-乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
表4
化合物107-113的13C NMR數據化合物107，13C NMR，(CD3OD)180.7，175.9，132.3，123.4，76.3，71.4，68.8，49.4，45.2，44.0，40.8，40.6，38.3，37.2，36.4，36.2，34.5，33.6，32.7，32.6，30.4，30.0，25.7，25.3，23.9，22.7，20.9，19.1，18.1，17.8，17.5，15.9化合物108，13C NMR，(CHCl3)180.3，173.9，132.3，123.4，76.4，71.4，68.9，49.4，45.2，44.3，40.7，40.6，38.3，37.2，36.4，36.2，34.5，32.7，32.6，30.4，30.0，25.7，25.4，23.9，22.7，21.0，17.7，17.4，15.9，12.7，8.0化合物109，13C NMR，(CD3OD)180.1，168.0，133.2，124.7，79.9，72.5，69.1，50.8，50.7，46.7，46.2，41.8，41.7，41.6，39.7，38.1，38.0，37.1，35.9，34.4，33.1，31.1，26.4，25.9，23.7，23.6，22.5，17.8，17.7，16.5化合物110，13C NMR，(CHCl3)180.5，166.4，154.3，132.4，123.3，78.7，71.5，68.8，49.5，49.3，45.2，44.5，40.7，40.6，38.4，37.2，36.4，36.2，34.3，32.7，32.5，30.4，29.9，25.7，25.4，23.8，22.7，20.9，17.7，17.4，15.9化合物111，13C NMR，(CD3OD)179.8，167.2，134.1，133.1，131.6，131.0，129.4，124.9，78.7，72.5，69.2，50.8，50.7，46.7，45.9，42.2，41.9，39.8，38.1，38.0，37.1，36.1，34.4，33.1，31.1，26.3，25.9，23.7，23.6，22.5，18.1，17.8，16.5化合物112，13C NMR，(CD3OD)179.8，166.2，167.3，133.8，133.1，128.0，124.8，116.3，78.9，72.5，69.2，50.8，50.7，46.7，46.0，42.1，41.9，39.8，38.1，38.0，37.1，36.1，34.4，33.1，31.1，26.4，25.9，23.7，23.6，22.5，18.2，17.8，16.5化合物113，13C NMR，(CHCl3)180.0，174.9，132.3，123.4，76.1，71.4，68.8，49.4，49.3，45.2，44.0，42.7，40.9，40.5，38.4，37.2，36.4，36.1，34.5，32.7，30.4，30.0，29.1，28.1，25.8，25.7，25.3，25.1，23.9，22.6，20.9，17.8，17.5，15.9實施例1516-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物115)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯向氫氧化鉀(250毫克)和異丙基硫醇(0.75毫升，8mmol)的乙醇(25毫升)溶液加入3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16α-溴-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(19)(700毫克，1mmol)，并且將該懸浮液攪拌4天。然后，加入水(大約10毫升)以完全沉淀期望的化合物。過濾收集沉淀并且用冷的乙醇和水(2∶1)的混合物洗滌并且干燥，得到3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
B.16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向上述叔丁酯的四氫呋喃(5毫升)的溶液加入2N鹽酸水溶液(5毫升)并且在室溫下攪拌過夜。然后用乙酸乙酯(25毫升)稀釋反應混合物并且轉移到分液漏斗。分離兩層并且將有機層用水(2×5毫升)洗滌兩次并且用鹽水(2×5毫升)洗滌兩次。有機層用硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例16-1916-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸的16β-硫醚衍生物(化合物116-119)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-硫醚根據實施例15A給出的方法并且用表5列出的硫醇代替異丙基硫醇，制備表5給出的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-硫醚。
表5
B.16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸的16β-硫醚衍生物根據實施例15B給出的方法并且用表5列出3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯的16β-硫醚代替3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯，制備表6給出的16-脫乙酰氧基-16β-烷硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
表6
實施例2016-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸(化合物120)根據實施例2的方法，用16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸代替17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，制備16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸。
實施例2116-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物121)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯向3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16α-溴-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(19)(700毫克，1mmol)的二甲基甲酰胺(6毫升)溶液加入硫代乙酸鉀(228毫克，2mmol)，并且將該反應混合物在室溫下攪拌20小時。然后用乙酸乙酯(50毫升)稀釋反應混合物并且轉移到分液漏斗，用水(2×10毫升)洗滌兩次并且用鹽水(10毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
B.16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向來自A的叔丁酯的四氫呋喃(5毫升)的溶液加入2N鹽酸水溶液(5毫升)并且在60℃下劇烈攪拌4小時。使反應混合物保持室溫，用乙酸乙酯(25毫升)稀釋并且轉移到分液漏斗。分離兩層并且將有機層用水(2×5毫升)洗滌兩次并且用鹽水(2×5毫升)洗滌兩次。有機層用硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，為無色泡沫。
實施例2216-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物122)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯根據實施例17A給出的方法但是用硫代苯甲酸鉀代替硫代乙酸鉀，獲得3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
B.16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸根據實施例17B給出的方法但是用3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯代替3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯，獲得16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例2316-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物123)向3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16α-溴-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸苯乙酮酯(750毫克，1mmol)的乙醇(10毫升)的懸浮液加入碳酸銀(550毫克，2mmol)，避光下將該反應混合物在室溫下攪拌18小時。過濾不溶物質并且用乙醇(2×2毫升)洗滌兩次。向合并的濾液和洗滌液中加入5N氫氧化鈉水溶液(4毫升)，將混合物回流2小時。使反應混合物保持室溫并且用4N鹽酸酸化。真空去除大部分乙醇，向殘余物加入乙酸乙酯(50毫升)和水(20毫升)。將兩層劇烈攪拌30分鐘，轉移到分液漏斗并且分離。用乙酸乙酯(50毫升)萃取水相。合并的有機萃取液用水(20毫升)和鹽水(20毫升)洗滌，無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮，得到油狀殘余物。氬氣下將粗產物溶解于無水二氯甲烷并且在0℃下冷卻。向冷卻的混合物加入4埃分子篩(1克)和三甲基溴硅烷(1.1毫升，8.8mmol)，將得到的混合物攪拌5小時。然后，用乙酸乙酯(50毫升)和水(20毫升)稀釋反應混合物并且轉移到分液漏斗。振蕩兩層并且分離。用乙酸乙酯(50毫升)萃取水相并且用鹽水(30毫升)洗滌合并的有機萃取液，無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮，得到16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
13C NMR，(CD3OD)181.2，132.8，125.1，82.9，72.5，69.4，66.4，50.8，47.5，46.6，41.9，39.3，39.1，38.2，37.9，37.1，36.1，34.4，33.1，31.1，26.5，25.9，23.8，23.6，22.7，17.8，17.3，16.5，15.2。
實施例24-2916-脫乙酰氧基-16β-烷氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物124-129)通過用表6列出的醇代替實施例21的方法中的乙醇，獲得表7列出的16-脫乙酰氧基-16β-烷氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
表7
化合物126，13C NMR，(CD3OD)181.1，132.9，125.0，99.3，83.6，72.5，69.4，56.3，50.9，50.6，47.7，46.7，41.9，41.3，39.3，38.2，37.9，37.0，36.2，34.2，33.1，31.1，26.5，25.9，23.8，23.5，22.7，17.8，17.3，16.5。
實施例3016-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物130)A.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯向3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16α-溴-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(19)(1400毫克，2mmol)的乙二醇一乙酸酯和二乙酸酯的1∶1混合物(8毫升)溶液加入碳酸銀(1.1克，4mmol)。避光下，室溫下將混合物攪拌3天。減壓去除溶劑后，用甲醇(40毫升)稀釋液體殘余物，加入碳酸鉀，并且在室溫下將混合物攪拌30分鐘。真空濃縮混合物，并且將得到的油狀殘余物溶解于二乙醚(40毫升)和水(40毫升)，并且用稀鹽酸中和。分離兩層，并且用二乙醚(20毫升)反復萃取含水層。合并的有機層用水(20毫升)和鹽水(20毫升)洗滌，無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮。通過使用乙酸乙酯和低沸點石油醚作為洗脫劑進行柱層析純化粗產物，得到3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
B.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-溴乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯向來自A的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(670毫克)溶液加入苯基N，N-二甲基溴甲亞胺(740毫克，3.2mmol)，得到的混合物在室溫下攪拌16小時。用二乙醚(30毫升)稀釋后將混合物轉移至分液漏斗，并且用水(3×10毫升)洗滌三次和用鹽水(10毫升)洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮。通過使用乙酸乙酯和低沸點石油醚作為洗脫劑進行柱層析純化淺紅色殘余物，得到3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-溴乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
C.3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯來自B的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-溴乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(370毫克，0.5mmol)和疊氮化鋰(125毫克，2.5mmol)的二甲基甲酰胺(8毫升)的溶液在室溫下攪拌18小時。用二乙醚(40毫升)稀釋該溶液，并且用水(3×10毫升)洗滌三次和用鹽水(10毫升)洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥并且真空下濃縮，得到3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯。
D.6-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸向3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯(300毫克，0.4mmol)的四氫呋喃(5毫升)的溶液加入2N鹽酸水溶液(5毫升)并且在60℃下加熱4小時。使反應混合物保持室溫，用乙酸乙酯(25毫升)稀釋并且轉移到分液漏斗。分離兩層并且將有機層用水(2×5毫升)洗滌兩次并且用鹽水(2×5毫升)洗滌兩次。有機層用硫酸鈉干燥并且真空下濃縮得到16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例3116-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物131)根據實施例30D的方法，用來自實施例30A的3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯代替3，11-二-O-甲氧基甲基-16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸叔丁酯，制備16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸。
實施例3217(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(400毫克，0.77mmol)溶解于甲醇(0.4毫升)和丙酮(1.2毫升)并且用4N氫氧化鈉中和。緩慢加入二乙醚直到沉淀出無色結晶。過濾收集350毫克無色結晶并且在空氣中風干。
13C NMR，(CD3OD)173.1，131.8，126.2，78.3，72.6，69.4，50.8，50.6，46.6，41.9，41.8，39.6，38.2，38.0，37.1，36.2，35.2，33.1，31.1，27.2，25.9，23.7，23.6，22.6，21.2，17.9，16.5。
實施例3317(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸二乙醇胺鹽17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(450毫克，0.87mmol)溶解于丙酮(1毫升)和二乙醇胺(0.1毫升，1mmol)并且在室溫下貯存24小時。然后緩慢加入二乙醚，并且將得到的溶液在2℃下貯存幾天，得到380毫克半結晶化合物。
實施例34霜劑16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽1克凡士林 7.5克液體石蠟7.5克鯨蠟 2.5克脫水山梨糖醇單棕櫚酯 2.5克聚氧乙烯山梨糖醇單棕櫚酯 2.5克水 26.5克50克將凡士林，石蠟，鯨蠟，脫水山梨糖醇單棕櫚酯和聚氧乙烯山梨糖醇單棕櫚酯加熱至70℃并且在連續攪拌下緩慢加入水。持續攪拌直到霜劑冷卻。將16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽研制到霜劑基質中并且用軋制機均勻化。將霜劑裝入鋁可折疊試管中。
實施例35軟膏16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽1克液體石蠟 6.9克鯨蠟醇 0.2克無水羊毛脂 2.3克凡士林 39.6克50克石蠟，鯨蠟醇，羊毛脂和凡士林在70℃溶化。冷卻到40℃以下之后，研制16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽。將軟膏裝入涂漆可折疊鋁管中。
實施例36膠囊16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽25克微晶纖維素 14.5克硬脂酸鎂 0.5克40克將各成分通過60目篩并且混合10分鐘。將混合物裝入硬明膠膠囊中，膠囊裝填重量是400毫克。
實施例37片劑16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽 25克AvicelTM12克STA-Rx150012克硬脂酸鎂 1克50克將16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽，AvicelTM和STA-Rx混合在一起，通過0.7mm篩篩選，然后與硬脂酸鎂混合將混合物壓制成片，每片500毫克。
實施例38懸浮液16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽1克檸檬酸0.09克磷酸一氫鈉0.14克蔗糖 5克TweenTM800.01克山梨酸鉀 0.04克羧甲基纖維素鈉 0.1克水 足量至100毫升懸浮液將晶體磨碎并且懸浮于10毫升水中檸檬酸，磷酸一氫鈉，蔗糖，山梨酸鉀和TweenTM80的溶液中，如果需要，稍微加熱。將羧甲基纖維素鈉溶解于4毫升沸水。冷卻后，將其加給其它成分。在混合器中將該懸浮液均勻化，并且加入最后的水至100毫升總體積。
實施例39軟膏A16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽1克B一種化合物氫化可的松，去炎松或氟輕松 0.5克液體石蠟 6.9克鯨蠟醇0.2克無水羊毛脂 2.3克凡士林 39.1克50克石蠟，鯨蠟醇，羊毛脂和凡士林在70℃溶化。冷卻到40℃以下之后，研制A和B。將軟膏裝入涂漆可折疊鋁管中。
實施例40軟膏A16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽 1.5克B四環素1.5克液體石蠟 13.8克鯨蠟醇 0.4克無水羊毛脂 4.6克凡士林 78.2克100克石蠟，鯨蠟醇，羊毛脂和凡士林在70℃溶化。冷卻到40℃以下之后，研制A和B。將軟膏裝入涂漆可折疊鋁管中。
實施例41眼凝膠17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸10克芐烷銨氯化物 0.1克木炭 5克甘露糖醇 50克乙二胺四乙酸鈉 0.5克氫氧化鈉 足量無菌水 至100克在裝有攪拌器和內置勻漿器的不銹鋼容器中在注射用水中溶解乙二胺四乙酸二鈉和甘露糖醇。加入木炭934P，將容器排空并且在緩慢攪拌下將分散液高壓滅菌并且高速勻漿。冷卻到70℃，停止攪拌器和勻漿器。加入破碎的17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸，滅菌-排空容器，并且緩慢攪拌下使17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸沉降。70℃下高速勻漿10分鐘。冷卻到30℃以下，并且低速勻漿。緩慢攪拌下加入注射用水中芐烷銨氯化物的無菌溶液。通過加入注射用水中1.050千克氫氧化鈉無菌溶液中和木炭934P。低速攪拌并勻漿5分鐘。如果需要，調節pH至5.4-5.8。將眼凝膠轉移到貯存罐，用氮氣壓和低速勻漿轉移系統。裝填之前在室溫下貯存。將眼凝膠無菌裝入滅菌試管中，裝填重量是3.5克。
權利要求
1.通式Ia的化合物 其中Q1，Q2和Q3是相同或不同的并且獨立地代表-(CO)-基團；-(CHOH)-基團；-(CHOR)-基團；-(CHSH)-基團；-(NH)-基團；-(CHNH2)-基團；或-(CHNHR)-基團，其中R代表具有1-4個碳原子的烷基或者具有1-4個碳原子的酰基；并且其中Q2和Q3也可以獨立地代表-(CH2)-基團；Y代表氫，羥基，具有1-4個碳原子的烷基，或者具有1-4個碳原子的酰基；A代表氧或硫原子；R1代表具有1-4個碳原子的烷基，具有2-4個碳原子的烯烴基，(C1-C6)酰基，(C3-C7)環烷基羰基或苯甲酰基，R1任選地被一個或多個鹵原子和/或羥基，烷氧基或疊氮基取代；和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
2.根據權利要求1并且具有通式I的化合物 其中Q1和Q2是相同或不同的并且兩者都代表-(CHOH)-基團；-(CO)-基團；或-(CHSH)-基團；A代表氧或硫原子；R1代表具有1-4個碳原子的烷基，具有2-4個碳原子的烯烴基，(C1-C6)酰基，(C1-C7)環烷基羰基或苯甲酰基，R1任選地被一個或多個鹵原子和/或羥基，烷氧基或疊氮基取代；和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
3.根據權利要求1或2的化合物，其中Q1和Q2都代表 基團。
4.根據前面權利要求的化合物，其中當Q1和Q2都代表 基團時，C-3和C-11的立體化學分別是3α-OH和11α-OH，并且攜帶A基團的C-16具有16β構型-(S)。
5.根據前面權利要求任一項的化合物，其中Q1或Q2之一代表-(CO)-。
6.根據前面權利要求任一項的化合物，其中A代表氧。
7.根據前面權利要求任一項的化合物，其中R1代表(C1-C4)烷基，其任選地被一個或多個選自疊氮基，羥基和選自氟，氯和溴的鹵原子的取代基取代。
8.根據前面權利要求任一項的化合物，其中R1代表被一個或多個選自氟和氯的鹵原子取代的(C1-C4)烷基。
9.根據前面權利要求任一項的化合物，其中R1選自乙基，2，2，2-三氟乙基，2，2，2-三氯乙基，2-疊氮基乙基，2-羥基乙基，丙基和異丙基，1，3-二氟-異丙基，叔丁基，乙酰基，丙酰基，氯代乙酰基和三氟乙酰基。
10.根據前面權利要求任一項的化合物，其中R1選自乙基，2，2，2-三氟乙基，2-疊氮基乙基，異丙基，叔丁基和乙酰基。
11.根據前面權利要求任一項的化合物，其中C-24和C-25之間的鍵是雙鍵。
12.選自下面的式I的化合物17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物101)，17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸(化合物102)，11-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物103)，3-脫氫-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物104)，16-脫乙酰氧基-16β-丙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物105)，16-脫乙酰氧基-16β-(3’-氯代丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物106)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-甲基丙酰氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物107)，16-脫乙酰氧基-16β-環丙基羰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物108)，16-脫乙酰氧基-16β-氯代乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物109)，16-脫乙酰氧基-16β-溴代乙酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物110)，16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物111)，16-脫乙酰氧基-16β-(4’-氟代苯甲酰基氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物112)，16-脫乙酰氧基-16β-環己基羰基氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物113)，16-脫乙酰氧基-16β-丙烯酰氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物114)，16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物115)，16-脫乙酰氧基-16β-乙基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物116)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氯乙基硫基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物117)，16-脫乙酰氧基-16β-叔丁基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物118)，16-脫乙酰氧基-16β-甲氧基甲基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物119)，16-脫乙酰氧基-16β-異丙基硫基-17(S)，20(S)，24，25-四氫梭鏈孢酸(化合物120)，16-脫乙酰氧基-16β-乙酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物121)，16-脫乙酰氧基-16β-苯甲酰基硫基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物122)，16-脫乙酰氧基-16β-乙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物123)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氟乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物124)，16-脫乙酰氧基-16β-丙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物125)，16-脫乙酰氧基-16β-異丙氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物126)，16-脫乙酰氧基-16β-(1’，3’-二氟異丙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物127)，16-脫乙酰氧基-16β-甲氧基甲氧基-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物128)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’，2’，2’-三氯乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物129)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-疊氮基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物130)，16-脫乙酰氧基-16β-(2’-羥基乙氧基)-17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸(化合物131)，和其藥學可接受鹽和其易水解酯。
13.根據權利要求12的選自17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸鈉鹽和17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸二乙醇胺鹽的化合物。
14.純形式的式I或Ia的化合物的立體異構體；或者這樣的立體異構體的混合物。
15.含有根據權利要求1-14任一項的化合物的藥物組合物，單獨含有所述化合物或者還含有藥學可接受的無毒載體和/或助劑，和任選地，還有一種或多種其它治療活性成分。
16.含有式10的17(S)，20(S)-二氫梭鏈孢酸的藥物組合物，單獨含有所述化合物或者還含有藥學可接受的無毒載體和/或助劑，和任選地，還有一種或多種其它治療活性成分。
17.局部用制劑形式的根據權利要求15或16的藥物組合物。
18.軟膏形式的根據前面權利要求的藥物組合物。
19.對需要抗菌處理的患者治療的方法，該方法包括對所述患者施用有效量的一種或多種根據權利要求1-14任一項的化合物，任選地同時或伴隨一種或多種其它治療活性成分。
20.根據權利要求1-14任一項的化合物在制備藥物中的用途。
21.根據權利要求1-14任一項的化合物在制備用于全身性治療炎癥的藥物中的用途。
22.根據權利要求1-14任一項的化合物在制備用于皮膚和/或眼炎癥的局部治療的藥物中的用途。
23.根據權利要求22的用途，其中所述藥物任選地含有一種或多種其它治療活性成分。
24.根據權利要求22或23的用途，其中所述藥物是要伴隨一種或多種其它治療活性成分施用。
全文摘要
本發明涉及用于治療感染的藥物組合物特別是用于治療皮膚感染或眼部感染的局部用組合物中使用的新的17,20－二氫梭鏈孢酸衍生物(Ia)。
文檔編號C07J13/00GK1378554SQ00814188
公開日2002年11月6日 申請日期2000年10月12日 優先權日1999年10月15日
發明者T·杜沃爾德, W·馮迪尼 申請人:里奧藥物制品有限公司