專利名稱：3α－烷酰氧基－6β－烷酰氧基莨菪烷類化合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及具有M受體激動活性的3α-烷酰氧基-6β-烷酰氧基莨菪烷類化合物及其制備方法。
莨菪烷生物堿是一類具有8-氮二環[3.2.1]辛烷母核的化合物，在現有技術中是一種公知的M膽堿受體阻斷劑，具有抗膽堿活性，臨床上應用非常廣泛，如東莨菪堿治療肺結合咳血(翁文錦等，福建醫學雜志1984:(2):58)，阿托品治療老年性慢性房顫(趙振源等，河南醫藥1984:(1):47)，山莨菪堿治療過敏性紫癜、急性水腫性胰腺炎(分別參見張志文等，實用內科雜志1984:(1):26，高從光等，中華內科雜志1982:(12):755)均收到良好的效果。
近年來，隨著化學、藥理及臨床研究的深入開展，人們發現在草藥包公藤莖中分離得到的莨菪烷類生物堿包公藤甲素(2β-羥基-6β-乙酰氧基-N-去甲莨菪烷)及其類似物的合成物具有M膽堿受體激動活性，但所述的包公藤甲素及其類似物都必須有N-去甲莨菪烷的結構，若不去除莨菪烷母核上氮原子連接的甲基，則所合成的莨菪烷類化合物就沒有M膽堿受體激動劑作用。丁維功等，藥學學報1993,28(4),302-306揭示了這類具有N-去甲莨菪烷的結構的擬膽堿莨菪烷類生物堿。
本發明旨在提供一種新穎的莨菪烷類化合物，所述的化合物具有M膽堿受體激動活性。
本發明的再一個目的是提供所述化合物的制備方法。
本發明的目的通過下列構思來實現一種莨菪烷類化合物，它具有下式結構 其中
R1和R2是相同的或不同的，當R1和R2相同時，它們為有4-15個碳原子的脂肪烷基；當R1和R2不相同時，R1為甲基；R2為有4-15個碳原子的脂肪烷基。
上述的莨菪烷類化合物通過下列反應流程制備 ⅰ)使3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷與鹽酸/乙醇溶液反應，得到3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽；ⅱ)使ⅰ)步驟得到的產物與酰氯反應，得到3α,6β-二烷酰氧基莨菪烷。
當R1和R2不相同時，R1為甲基，該化合物具有下式結構 其中R2為有4-15個碳原子的脂肪烷基。
優選的式Ⅰ和/或式Ⅱ化合物中，R2=CH3(CH2)n,n=4-10的整數。最優選的化合物為3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷，3α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷，或3α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷。
可這樣制備式Ⅱ化合物使3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷與酰氯反應，得到3α-烷酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷。
本發明具有下列優點1．本發明以莨菪烷類生物堿為母體，通過生物電子等排，疏水性能，抗代謝性能等諸多方面的改進，有目的的進行一系列的結構修飾，合成了系列化合物，經藥理篩選，是一類高效的M受體激動劑。
2．本藥物采用國產原料及試劑，合成路線簡單，反應條件溫和，得率較高，成本較低，具有廣闊的應用前景。
下面將結合具體實施例對本發明作更詳細的闡述，實施例中使用的3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷根據謝晶曦等在“山莨菪堿的全合成研究”(科學通報1975,4,197)一文所述的方法得到。實施例中的核磁共振數據用Varian-EM360L型儀測定，質譜用HP5989A GC-MS儀測定。
實施例13α-正戊酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正戊酰氯0.8毫升。滴加完畢后，加熱回流2小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.58。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.17克，產率為82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)3CH3],1.10-2.60[m,12H,C2,4,7-H,(CH2)3CH3],3.15(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.06(m,1H,C3-H)5.47(dd,1H,J=4.0,8.0Hz,C6-H)。
MS(m/z):283(M),198,182,122,94。
實施例23α-正己酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正己酰氯0.8毫升。滴加完畢后，加熱回流2小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v)，TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.58。蒸去溶劑，得到1.27克淡黃色油狀物的標題產物，產率為85％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)4CH3],1.10-2.60[m,14H,C2,4,7-H,(CH2)4CH3],3.13(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):297(M),198,182,122,94。
實施例33α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正庚酰氯0.7毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.59。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.26克，產率為80％。
1H NMR δ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)5CH3],1.10-2.65[m,16H,C2,4,7-H,(CH2)5CH3],3.15(m,1H,C5-H),3.40(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):311(M),198,182,122,94。
實施例43α-正辛酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正辛酰氯0.7毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.30克，產率為82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.51(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)6CH3],1.18-2.57[m,18H,C2,4,7-H,(CH2)6CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):325(M),198,182,122,94。
實施例53α-異辛酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加異辛酰氯0.9毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.35克，產率為82％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.53(s,3H,CH3N),0.90[m,6H,(CH2)4CH(CH3)2],1.10-2.70[m,15H,C2,4,7-H,(CH2)4CH(CH3)2],3.25(m,1H,C5-H),3.47(m,1H,C1-H),5.10(m,1H,C3-H),5.47(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):325(M),198,182,122,94。
實施例63α-[2-乙基丁酰氧基]-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加2-乙基丁酰氯0.8毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.17克，產率為78％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.51(s,3H,CH3N),0.93[m,6H,CH(CH2CH3)2],1.13-2.63[m,11H,C2,4,7-H,CH(CH2CH3)2],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.07(m,1H,C3-H),5.47(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):297(M),198,182,122,94。
實施例73α-正壬酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正壬酰氯0.7毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.39克，產率為81％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)7CH3],1.10-2.70[m,20H,C2,4,7-H,(CH2)7CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.36(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):339(M),198,182,122,94。
實施例83α-正癸酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正癸酰氯0.8毫升。滴加完畢后，加熱回流2.5小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.34克，產率為75％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)8CH3],1.10-2.66[m,22H,C2,4,7-H,(CH2)8CH3],3.17(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.00(m,1H,C3-H),5.40(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):353(M),198,182,122,94。
實施例93α-十一酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正十一酰氯0.9毫升。滴加完畢后，加熱回流3小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測,展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.60。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.33克，產率為72％。
1H NMRδ(CDCl3):2.00(s,3H,CH3CO),2.46(s,3H,CH3N),0.83[m,3H,(CH2)9CH3],1.00-2.60[m,24H,C2,4,7-H,(CH2)9CH3],3.10(m,1H,C5-H),3.30(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):367(M),198,182,122,94。
實施例103α-十二酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正十二酰氯0.9毫升。滴加完畢后，加熱回流3小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.61。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.48克，產率為67％。
1H NMRδ(CDCl3):2.03(s,3H,CH3CO),2.52(s,3H,CH3N)0.90[m,3H,(CH2)10CH3],1.10-2.60[m,26H,C2,4,7-H,(CH2)10CH3],3.10(m,1H,C5-H),3.30(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):381(M),198,182,122,94。
實施例113α-十六酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的制備在50毫升三頸瓶中，加入1克3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷、二氯甲烷10毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加正十六酰氯0.9毫升。滴加完畢后，加熱回流3小時，除去溶劑，加水7毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷20毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.61。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.48克，產率為67％。
1H NMRδ(CDCl3):2.06(s,3H,CH3CO),2.54(s,3H,CH3N),0.90[m,3H,(CH2)14CH3],1.10-2.60,[m,32H,C2,4,7-H,(CH2)14CH3],3.13(m,1H,C5-H),3.35(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H)5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):437(M),198,182,122,94。
實施例123α,6β-二正己酰氧基莨菪烷的制備a)3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽的制備在50毫升圓底燒瓶中加入3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷1克，95％乙醇10毫升，鹽酸0.4毫升，水1毫升。裝上回流冷凝管，磁力攪拌器攪拌下，加熱回流8小時，改成減壓蒸餾裝置，除去溶劑，得到淡褐色固體0.75克。產率95％b)3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷的制備在50毫升圓底燒瓶中，加入1克實施例12a)制備的3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加1.8毫升正己酰氯，滴加完畢后，加熱回流5小時，除去溶劑，加水10毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.61。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.28克，產率為70％。
1H NMRδ(CDCl3):2.52(s,3H,CH3N),0.87{m,6H,[(CH2)4CH3]2},1.26-2.58{m,22H,C2,4,7-H,[(CH2)4CH3]2},3.13(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.00(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):353(M),254,238,122,95。
實施例133α,6β-二正庚酰氧基莨菪烷的制備在50毫升圓底燒瓶中，加入1克實施例12a)制備的3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加1.8毫升正庚酰氯，滴加完畢后，加熱回流5小時，除去溶劑，加水10毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.61。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.41克，產率為71％。
1H NMRδ(CDCl3):2.51(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)5CH3]2},1.10-2.60{m,26H,C2,4,7-H,[(CH2)5CH3]2},3.23(m,1H,C5-H),3.45(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.48(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):381(M),268,252,122,95。
實施例143α,6β-二正辛酰氧基莨菪烷的制備在50毫升圓底燒瓶中，加入1克實施例12a)制備的3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加1.7毫升正辛酰氯，滴加完畢后，加熱回流5小時，除去溶劑，加水10毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.62。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.51克，產率為71％。
1H NMRδ(CDCl3):2.52(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)6CH3]2},1.10-2.60{m,30H,C2,4,7-H,[(CH2)6CH3]2},3.15(m,1H,C5-H),3.33(m,1H,C1-H),5.03(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):409(M),282,266,122,95。
實施例153α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷的制備在50毫升圓底燒瓶中，加入1克實施例12a)制備的3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽，二氯甲烷15毫升，接上回流冷凝管，裝上無水氯化鈣干燥管。磁力攪拌器攪拌，滴加1.6毫升正壬酰氯，滴加完畢后，加熱回流5小時，除去溶劑，加水10毫升，用濃氨水調節pH=9-10，二氯甲烷30毫升分三次萃取，分離出有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸餾除去二氯甲烷，殘留物用G60層析柱分離，洗脫劑為丙酮/甲醇=95/5(v/v),TCL檢測，展開劑為丙酮/甲醇=3/2(v/v)，碘化鉍鉀為顯色劑，Rf=0.62。蒸去溶劑，得到淡黃色油狀物的標題產物1.66克，產率為73％。
1H NMRδ(CDCl3):2.53(s,3H,CH3N),0.90{m,6H,[(CH2)7CH3]2},1.16-2.55{m,34H,C2,4,7-H,[(CH2)7CH3]2},3.17(m,1H,C5-H),3.34(m,1H,C1-H),5.06(m,1H,C3-H),5.43(dd,1H.J=4.0,8.0Hz,C6-H)MS(m/z):437(M),296,280,122,95。
試驗1離體平滑肌受體分析法取荷蘭種豚鼠，體重250-300克，雌雄不限，猛擊頭部至昏迷，自回盲部上端5厘米處取回腸一段，浸于Kreb’s液中，洗去內容物，剪去腸系膜，套在直徑為7厘米的玻璃棒上，用一小棉簽自腸系膜處與腸段成切線方向剝離縱腸肌，使之與內層環肌分離。取1.5厘米長的肌束，一端固定于通氣鉤上，另一端連接于肌力換能器上，置于恒溫37±1℃浴池內，負荷為350毫克，并持續通入95％O2+5％CO2，描記等張收縮曲線。用累積濃度-效應曲線法進行樣品對豚鼠離體縱腸肌收縮的量-效關系的研究，所得的量效曲線按D/R式(改良Lineweaver-Burk式)，使之求得提供樣品pD2和最大效應(E最大)。
以上樣品引起縱腸肌收縮均可被非特異性M受體阻斷藥阿托品所競爭性拮抗，提示實施例中樣品屬M受體激動劑。
試驗2轉人M受體亞型CHO細胞的放射配基試驗用轉人M受體亞型m1,m2的CHO細胞系培養于EME培養基(含10％小牛血清、4微摩爾/升谷氨酸、0.1微摩爾/升脯氨酸以及青霉素、鏈霉素各1000單位)。待培養瓶細胞長滿后，棄培養基，用PBS(pH7.4)緩沖液洗兩次，加冰冷的磷酸緩沖液刮下細胞，用Teflon玻璃勻漿器勻漿，20,000g離心20分鐘，沉淀再次勻漿成細胞膜懸浮液。飽和曲線每一反應管的蛋白量分別為0.06mg(m1)、0.10mg(m2),3H-QNB濃度從0.05-0.5nmol/l(ml)或0.8nmol/L(m2)，非特異結合管加0.1微摩爾/升阿托品。競爭曲線用選擇性M1拮抗劑為PZP和選擇性M2拮抗劑methotramine，濃度范圍均為10-7摩爾/升至10-4摩爾/升。
數據處理分別用單位點質量作用定律和單位點競爭結合模型。
結果實施例3IC50:m1=170+14nM,m2=580±50nM提示實施例3樣品對M1受體激動作用具有相對選擇性。
試驗3小鼠毒性試驗(LD50測定)取體重20±2克的健康昆明種小鼠50只，隨機分成5組，每組10只(雌雄各半)，于受試前一日晚禁食，按預試劑量間隔分別腹腔注射不等濃度的實施例3樣品(0.5ml/20克)，即觀察動物反應和死亡情況，延續7天。按Blisss法計算半數致死量(LD50)。中毒反應為濕糞、小便失禁、流涎、呼吸急促以及興奮、抽搐等副交感亢進表現。實施例3樣品LD50為622(508-762)mg/kg。
以上結果證明所測樣品化合物屬高效M受體激動劑。
權利要求
1．一種莨菪烷類化合物，它具有下式結構 其中R1和R2是相同的或不同的，當R1和R2相同時，它們為有4-15個碳原子的脂肪烷基；當R1和R2不相同時，R1為甲基；R2為有4-15個碳原子的脂肪烷基。
2．根據權利要求1所述的化合物，其中R1和R2相同，為有4-15個碳原子的脂肪烷基。
3．根據權利要求1所述的化合物，其中當R1和R2不相同時，它具有下式結構 其中R2為有4-15個碳原子的脂肪烷基。
4．根據權利要求3所述的化合物，其中R2=CH3(CH2)n,n=4-10的整數。
5．根據權利要求1所述的化合物，其中所述的化合物是選自下列的化合物3α,6β-二正己酰氧基莨菪烷，3α-正庚酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷，或3α,6β-二正壬酰氧基莨菪烷。
6．如權利要求2所述的化合物的制備方法，該方法包括ⅰ)使3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷與鹽酸/乙醇溶液反應，得到3α,6β-二羥基莨菪烷鹽酸鹽；ⅱ)使ⅰ)步驟得到的產物與酰氯RCOCl反應，其中R=R1=R2，得到3α,6β-二烷酰氧基莨菪烷。
7．如權利要求3所述化合物的制備方法，該方法包括使3α-羥基-6β-乙酰氧基莨菪烷與酰氯RCOCl反應，其中R=R2，得到3α-烷酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷。
全文摘要
本發明揭示了一種莨菪烷類化合物,其中R
文檔編號C07D451/00GK1323798SQ0011568
公開日2001年11月28日 申請日期2000年5月15日 優先權日2000年5月15日
發明者劉慧中, 陸陽, 陳紅專, 崔永耀 申請人:上海第二醫科大學