一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗佐劑專用白油的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及疫苗佐劑技術領域，具體涉及一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗 佐劑專用白油。
【背景技術】
[0002] 白油又名液體石蠟，是以石油為原料精制所得的礦物油，屬液態烴類混合物。白油 無色無味，化學穩定性及光安定性好，由于白油來源廣泛、價格適宜，因此被廣泛應用于動 物油乳劑疫苗的生產。作為油乳劑疫苗的主要成份，白油可增強滅活疫苗的免疫原性，誘導 機體產生有效的免疫應答。目前，我國重大禽病防控的疫苗多為油乳劑滅活疫苗，所采用的 佐劑多為白油，而白油在肉雞體內完全代謝需要較長時間。在家禽飼養過程中，為了降低禽 病爆發的風險，疫苗使用較為頻繁，由此所導致的畜禽體內白油殘留問題日趨嚴重。
[0003] 此外，由于礦物油不能被機體代謝，因此會產生一系列副作用，導致注射部位肉芽 腫現象，出現炎癥，疫苗被包裹起來形成游離的腫塊，不僅起不到免疫的預期效果，反而還 會引起肉雞出現精神不振，采食下降等免疫應激癥狀，還易引起其他疾病。為了克服這一問 題，一方面應當注重疫苗的合理使用（2009年歐盟食品安全局發表了關于白油添加劑的科 學使用意見，即每天食物中白油總量不得超過12mg/kg · bw;FA0及WHO食品添加劑聯合委員 會也聲明，高粘度的白油在食品中的添加不得超過20mg/kg)，但更為重要的是應當針對佐 劑成分加以改進，以緩解其體內代謝緩慢的問題。

【發明內容】

[0004] 本發明旨在針對現有技術的技術缺陷，提供一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫 苗佐劑專用白油，以解決現有技術中用于疫苗佐劑的白油在生物體內殘留時間較長、殘留 量較大。
[0005] 本發明要解決的另一技術問題是現有技術中用于疫苗佐劑的白油不易被動物吸 收。
[0006] 為實現以上技術目的，本發明采用以下技術方案：
[0007] -種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗佐劑專用白油，所述白油中不含有碳原子 數大于24的烴類化合物。
[0008] 作為優選，所述白油由碳原子數為15~24的烴類化合物組成。
[0009] 進一步優選的，所述烴類化合物是烷烴。
[0010] 進一步優選的，所述白油中鏈烷烴含量為67~70% (w/w)。
[0011 ] 在此基礎上可以分別執行以下優選:所述白油中正構烷經含量為10~25 % (w/w); 所述白油的傾點為-3~12°C;所述白油在40°C時的運動粘度為3.5~8mm2/s。
[0012] 作為優選，所述烴類化合物不是芳烴。
[0013] 在以上技術方案中，用于白油制備的原料均屬于常規有機化合物，可以利用有機 化學領域的一般技術方法獲得。所述白油亦可依照本領域中通用的白油制備方法制備。本 發明通過實驗手段明確了白油中導致生物殘留問題的最主要成分是C24以上的烴類化合 物，進一步發現從白油中剔除此類成分不會影響其作為疫苗佐劑的性能，同時有助于提升 吸收效率。基于以上積極的發現，本發明獲得了更易吸收、殘留量更低的油乳滅活疫苗專用 白油。
[0014] 在此基礎上，以《中華人民共和國獸藥典》（2010版)和《中華人民共和國獸用生物 制品規程》(2000年版)為標準考察了本發明白油與現有技術產品的性能特點：利用不同白 油產品進行呼腸孤滅活疫苗的制備、檢驗、免疫試驗，分別對免疫雞進行采血、分離血清，檢 測抗體效價，同時剖檢注射部位，觀察吸收情況和藥物殘留情況。實驗結果表明，相對于現 有技術產品，本發明提供的專用白油不僅能夠滿足滅活疫苗佐劑使用要求，同時吸收更快、 殘留量少，不吸收情況發生率極低。
【附圖說明】
[0015] 圖1是本發明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗胸肌注射肉雞后，其體 內抗體消長曲線。
[0016] 圖2是本發明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗頸部皮下注射肉雞后， 其體內抗體消長曲線。
[0017] 圖3是本發明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗胸肌注射蛋雞后，其體 內抗體消長曲線。
[0018] 圖4是本發明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗頸部皮下注射蛋雞后， 其體內抗體消長曲線。
【具體實施方式】
[0019] 以下將對本發明的【具體實施方式】進行詳細描述。為了避免過多不必要的細節，在 以下實施例中對屬于公知的結構或功能將不進行詳細描述。
[0020] 以下實施例中所使用的近似性語言可用于定量表述，表明在不改變基本功能的情 況下可允許數量有一定的變動。因此，用"大約"、"左右"等語言所修正的數值不限于該準確 數值本身。在一些實施例中，"大約"表示允許其修正的數值在正負百分之十（10%)的范圍 內變化，比如，"大約100"表示的可以是90至IjllO之間的任何數值。此外，在"大約第一數值到 第二數值"的表述中，大約同時修正第一和第二數值兩個數值。在某些情況下，近似性語言 可能與測量儀器的精度有關。
[0021] 除有定義外，以下實施例中所用的技術和科學術語具有與本發明所屬領域技術人 員普遍理解的相同含義。
[0022] 以下實施例中所用的試驗試劑耗材，如無特殊說明，均為常規生化試劑;所述實驗 方法，如無特殊說明，均為常規方法；以下實施例中的定量試驗，均設置三次重復實驗，結果 取平均值;以下實施例中的％，如無特別說明，均為質量百分含量。
[0023] 實施例1
[0024]選擇的佐劑專用白油ZY-WI技術指標如下：
[0025] (a)芳烴含量為零(質譜法）；
[0026] (b)碳分布 C15-24;
[0027] (c)正構烷烴含量10%;
[0028] (d)C24以上組分含量為0;
[0029] (e)傾點 12°C;
[0030] (〇40。(3運動粘度4.0臟2/8;
[0031] (g)無色無味液體。
[0032] 4種白油（ZY-WI，JK-WM，JK-WD，GC-W;其中JK-WM和JK-WD屬于市售進口白油產品， GC-W屬于市售國產白油產品）佐劑呼腸孤滅活疫苗檢驗結果外觀均為乳白色，劑型油包水， 穩定性合格，其他檢驗項目：無菌、安全、甲醛含量、硫汞含量均合格。
[0033] 4種白油佐劑呼腸孤滅活疫苗免疫效果實驗。每個白油樣品呼腸孤滅活疫苗分別 以0.5mL/只劑量，經胸部肌肉、頸部皮下注射途徑分別接種15日齡白羽肉雞15只和30日齡 蛋雞20只，分別于接種免疫后14、28、42、56(1進行隨機抽樣5只，無菌采血分離血清檢測血清 礦體(HI)效價和疫苗注射部位藥物殘留情況檢查。胸肌免疫吸收剖檢結果見表1。
[0034]表1不同來源白油佐劑呼腸孤滅活疫苗胸肌免疫吸收剖檢結果
[0036] 注：吸收完全無殘留物痕跡；"+"藥物殘留物為少量的針尖大小的乳白色細小 顆粒；"++"藥物殘留物為小米粒大小的乳白色顆粒，且有綠豆粒大小的黃色液體包裹1-2 個；"+++"藥物殘留為如大米粒樣的白色干酪樣顆粒、胸肌殘留面積1/4左右、有條索狀的黃 色液體包裹2-3個、有出血性炎癥。
[0037] 根據胸肌注射藥物殘留剖檢情況，綜合分析結果是：肉雞對實驗白油ZY-WI吸收情 況明顯優于其他