專利名稱：治療風濕性關節炎的藥物組合物及制備和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物及制備方法和質量控制方法，特別涉及一種治療風濕性關節炎的藥物組合物及制備方法和質量控制方法。

背景技術：
風濕性關節炎屬變態反應性疾病，是風濕熱的主要表現之一。多以急性發熱及關節疼痛起病，典型表現是輕度或中度發熱，游走性多關節炎，受累關節多為膝、踝、肩、肘、腕等大關節，常見由一個關節轉移至另一個關節，病變局部呈現紅、腫、灼熱、劇痛，部分病人也有幾個關節同時發病，急性炎癥一般于2-4周消退，不留后遺癥，但常反復發作。若風濕活動影響心臟，則可發生心肌炎，甚至遺留心臟瓣膜病變。
目前西醫治療風濕性關節炎主要應用非甾抗炎藥、免疫抑制劑及激素等藥物，雖然能夠暫時止痛，緩解癥狀，起到一定的治療作用，然而卻不能從根本上治療該病，而且長期用藥還可能破壞人體免疫系統，最終出現不可逆轉的胃、肝、腎等內臟器官嚴重損傷，其產生的副作用絕對不容忽視。
本病屬中醫“痹證”范疇。中醫學認為居處潮濕，觸冒風雨等是產生痹證的外來條件；素體虛弱，氣血不足，腠理不密是產生痹證的內在因素。風寒熱濕之邪乘虛入侵，留滯經絡肌肉關節，氣血閉阻不通，從而產生肢節酸麻疼痛、屈伸不利諸癥，若以熱盛或濕熱蘊蒸為主，則見關節紅、腫、熱、痛；若寒濕偏盛則關節冷痛，遇寒痛增；若久病不愈，還可出現氣血不足，肝腎虧損或病邪深入內臟等變化。
祖國醫學長期以來對“風濕病”的治療有豐富的經驗，積累了許多行之有效的驗方，相較西醫而言，祖國醫學療效確切、使用方便、不良反應小等優勢明顯，因此更適宜在臨床上推廣應用。


發明內容
本發明目的在于提供一種藥物組合物；本發明另一目的在于提供一種治療風濕性關節炎的藥物組合物；本發明的第三個目的在于提供該藥物組合物的制備方法；本發明的第四個目的在于提供該藥物組合物的質量控制方法。
本發明目的是通過如下技術方案實現 本發明藥物組合物的原料藥組成為 生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎補(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細辛50-680重量份、人參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、刺五加50-680重量份、續斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成還可以為 生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、紅花50-680重量份、骨碎補(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細辛50-680重量份、紅參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、五加皮50-680重量份、續斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為 生川烏200-450重量份、生草烏200-450重量份、馬錢子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、烏梢蛇200-450重量份、紅花200-450重量份、骨碎補(制)200-450重量份、烏梅200-450重量份、金銀花200-450重量份、細辛100-330重量份、紅參200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黃柏200-450重量份、沒藥200-450重量份、廣地龍200-450重量份、地楓皮200-450重量份、老鸛草270-600重量份、五加皮200-450重量份、續斷200-450重量份、麻黃200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為 生川烏280重量份、生草烏380重量份、馬錢子(制)300重量份、羌活280重量份、烏梢蛇380重量份、紅花300重量份、骨碎補(制)280重量份、烏梅380重量份、金銀花300重量份、細辛280重量份、紅參380重量份、鹿茸300重量份、黃柏280重量份、沒藥380重量份、廣地龍300重量份、地楓皮280重量份、老鸛草380重量份、五加皮300重量份、續斷280重量份、麻黃380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為 生川烏200重量份、生草烏200重量份、馬錢子(制)200重量份、羌活200重量份、烏梢蛇200重量份、紅花200重量份、骨碎補(制)200重量份、烏梅200重量份、金銀花200重量份、細辛100重量份、紅參200重量份、鹿茸130重量份、黃柏200重量份、沒藥200重量份、廣地龍200重量份、地楓皮200重量份、老鸛草270重量份、五加皮200重量份、續斷200重量份、麻黃200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。
本發明藥物組合物制備方法為步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A； 步驟2、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B； 步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的劑型。
本發明藥物組合物制備方法優選為步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，加水量為藥材體積的8倍，第二次1.5小時，加水量為藥材體積的6倍，第三次1小時，加水量為藥材體積的6倍，合并煎液，濾液濃縮至80℃時相對密度為1.20～1.30的清膏A； 步驟2、生川烏、生草烏、制馬錢子、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成100目的細粉，過篩，得藥粉B； 步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的劑型。
本發明藥物組合物質量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種 a.人參的定性檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚20-30ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇40-60ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液用氨試液25-35ml提取，棄去下層液，用水15-30ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸漬20-40min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水3-10ml濕潤，加三氯甲烷20-40ml，超聲處理20-30分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸氣飽和10-20分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密稱重，回流提取50-75分鐘，放涼后，用40-60％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 相當于含生藥量12.25g的制劑內容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
本發明藥物組合物質量控制方法優選如下檢測方法中的一種或幾種 a.人參的定性檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 相當于含生藥量12.25g的制劑內容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
本發明藥物組合物舒筋活血，祛風鎮痛，益氣養血，滋補肝腎，溫經散寒，化淤通絡，消腫止痛。用于筋骨麻木，手足拘攣，腰腿疼痛，風濕性關節炎。故方中取大辛、大熱、大毒之生川烏、生草烏合而為君，生川烏祛風溫里散寒，即可發熱肌表之寒濕，善療寒濕阻絡之痹病，又可溫通臟腑之陰寒。功具溫陽通絡以開痹，故除內外之寒濕生草烏功用略同生川烏，但其長于搜風出寒祛濕，且其止痛除痹功較強，合而用之，溫通表里，直中寒濕阻絡癥機，故為君。馬錢子(制)苦、溫，功擅通絡止痛，散結消腫“能搜筋骨入骱之風濕，祛皮里膜外凝結之痰毒”尤其是“其開通經絡，透達關節之力實遠勝于他藥也。”故與二烏相伍，側重舒筋止痛亦為君。伍以大隊濕補通經之淫羊藿、鹿茸、細辛、牛膝、槲寄生、骨碎補(制)、五加皮、烏梢蛇、羌活、續斷、紅參、老鸛草、地楓皮以加強三君藥溫陽祛寒、舒筋通絡、消腫止痛之力；寒主收引，濕阻氣機均易生瘀，故取廣地龍、沒藥、紅花活血化瘀以通達痹阻之經絡。麻黃、桂枝相互辛溫走表，宣肺以化濕，共為臣，君藥諸藥多為辛、香、燥烈之品，耗氣傷津之味，故取烏梅生津斂液，開中寓合，以防止辛散之品傷津燥血，溫郁氣機，易伴郁熱，故取金銀花、黃柏清熱燥濕，又可防止君藥辛溫太過之弊，共為佐。甘草調和諸藥為使，本方藥味雖多，但多而不雜，君臣有序，佐使分明，祛邪為主兼扶正，溫通之中佐清透開合又寓收斂。故而諸藥合用共奏舒筋活血，祛風鎮痛之佳效。
本發明藥物組合物經實驗研究證實有效成份可通過神經系統間接刺激腦垂體，使腎上腺皮質機能亢進，皮質激素分泌增加，抗組織胺分泌以止痛；方中制川烏、制草烏對風濕，類風濕因子有較強的親和力，可以直接殺傷致病因子，祛風除濕，溫經止痛，消腫排膿；抑制關節滑膜細胞增殖，阻斷病情持續發展；改善人體微循環、抑制炎癥反應，減輕疼痛；迅速增強骨髓的免疫機能，激活骨髓健康循環系統，消除風濕疼痛。
通過對比試驗發現，本發明組合物對風濕性關節炎的藥效顯著，并且本發明所述的范圍在可以實現本發明藥效的同時，經過篩選，意外的發現，在組合物的某些范圍內，具備更為突出的藥效。
本發明所提供的中藥組合物的質量控制方法，是通過大量具體創造性試驗篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經濟適用、結果快速，并且對不同的薄層板都能應用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產品進行質量控制，并且用該方法測定的產品相比其他方法測定的產品在藥效上表現的更為穩定。

具體實施例方式 以下實驗例和實施例用于進一步說明本發明但不限于本發明 實驗例1片劑的工藝研究 水提加水量 按處方配置黃柏、骨碎補(制)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃、甘草、槲寄生3份藥材，分三組進行試驗，第一組加水量6倍量、4倍量、4倍量，第二組加水量8倍量、6倍量、6倍量，第三組加水量10倍量、8倍量、8倍量，以出膏量為指標，確定加水量。結果見表1 表1水提加水量
以出膏量為指標，可以看出加水8倍量、6倍量、6倍量出膏量較好，生產中選用加水量8倍量、6倍量、6倍量。
表2主要技術參數
表3三批中試生產數據
從上述試驗可以看出，本發明制備工藝成品率高，穩定可行。
實驗例2人參的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a.取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細，加三氯甲烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，上層液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，斑點情況。結果見表4 表4供試品溶液提取溶劑的選擇 組別 ab c 展開效果 好 有干擾 斑點不清晰 結果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為紅參鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的回流時間 取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細，加乙醚25ml，按下表所列時間超聲處理，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表5 表5超聲處理時間的優選試驗結果 由表5可以看出，回流提取時間選定為15min，能有效檢測樣品中所含的人參甙Re。
(3)供試品溶液的超聲時間 取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，按下表所列時間超聲處理，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表6 表6超聲處理時間的優選實驗結果 由表6可以看出，回流提取時間選定為30min，能有效檢測樣品中所含的人參甙Re。
(4)本檢測方法中展開劑用量配比的優選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水配比為10∶40∶20∶10，15∶40∶22∶10，25∶40∶22∶10，15∶30∶22∶10的10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數分鐘，觀察顏色變化。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表7 表7展開劑用量配比優選實驗結果 從表7可以看出展開劑配比為15∶40∶22∶10時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。
(5)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優選 分別取供試品溶液各1μl、2μl、5μl、8μl、15μl，點于同一硅膠G薄層板上，用石油醚(60～90℃)-苯-乙酸乙酯-冰醋酸10∶20∶7∶0.5的展開劑展開，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表8 表8樣品溶液點樣量優選實驗結果 從表8可以看出供試品點樣量在5μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(6)陰性對照試驗 取缺人參的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強。
根據以上實驗確定本發明制劑中紅參的定性檢測方法為 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例3金銀花的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b.取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加甲醇5ml，放置12小時，濾過，取濾液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c.取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加50％甲醇25ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。
另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點情況。結果見表9 表9供試品溶液提取溶劑的選擇 結果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為金銀花鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的浸漬時間 取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列時間浸漬，取上清液作為供試品溶液。另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表10 表10浸漬時間的優選實驗結果 由表10可以看出，浸漬時間選定為30min，能有效檢測樣品中所含的金銀花(綠原酸)。
(3)本檢測方法中展開劑用量配比的優選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為9∶2，9∶3，8∶3，7∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表11 表11展開劑用量配比優選實驗結果 從表11可以看出展開劑配比為8∶3時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。
(4)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優選 分別取供試品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為8∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表12 表12樣品溶液點樣量優選實驗結果 從表12可以看出供試品點樣量在3μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(5)陰性對照試驗 取缺金銀花的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強。
根據以上實驗確定本發明制劑中金銀花的檢測方法為 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例4沒藥的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b.取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加乙醚，超聲20分，濾過，揮干，殘渣加甲醇溶解做供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c.取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加乙醇，超聲30分，濾過，濃縮，做供試品溶液。
另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點情況。結果見表13 表13供試品溶液提取溶劑的選擇 結果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為沒藥鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的浸漬時間 取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列時間浸漬，取上清液作為供試品溶液。另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表14 表14浸漬時間的優選實驗結果 由表14可以看出，浸漬時間選定為30min，即能有效檢測樣品中所含的沒藥。
(3)本檢測方法中展開劑用量配比的優選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為8∶2.0，9∶1.5，10∶1.0，11∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表15 表15展開劑用量配比優選實驗結果 從表15可以看出展開劑配比為9∶1.5時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。
(4)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優選 分別取供試品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為9∶1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，斑點顯色情況。結果見表16 表16樣品溶液點樣量優選實驗結果 從表16可以看出供試品點樣量在2～3μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(5)陰性對照試驗 取缺沒藥的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強。
根據以上實驗確定本發明制劑中沒藥的檢測方法為 取金銀花鑒別項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例5烏頭堿的限量檢查 (1)供試品制備方法 取實施例12所制成品除去糖衣，研細，稱取三份，每份7g，加10％氨水5ml濕潤，分別加三氯甲烷20，25，30，35，40ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液。
另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。觀察供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點比較斑點顏色，并相互比較。結果見表17 表17溶劑用量考察結果 從表17可以看出三氯甲烷的用量在30ml以上的溶出無明顯變化，且斑點均淺于對照品溶液斑點。
(2)展開劑的選擇 取上述供試品溶液、對照品溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇配比為10∶0.1，9∶0.5，9∶1，8∶2(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深。結果見表18 表18展開劑用量配比優選實驗結果 從表18可以看出展開劑配比為9∶0.5時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象，斑點最均勻。
根據以上實驗確定本發明制劑中烏頭堿的限量檢測方法為 烏頭堿限量 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深。
實驗例6綠原酸的含量測定方法試驗 檢測儀器島津公司SPD-10ATvp型高效液相色譜儀 色譜柱迪瑪公司(Zorbax C18 4.6×150mm，5μm)與C18保護柱 流動相乙睛-0.4％磷酸(v/v)(9∶91)(乙睛為色譜級，磷酸為分析級，水為重蒸水) 檢測波長327nm流速1.000ml/min柱溫室溫 對照品綠原酸 購于中國藥品生物制品檢定所 批號 測定方法取實施例12所制成品按定量檢測項下供試品溶液的制備方法制備樣品液；并按本發明制備方法制備缺金銀花的空白樣品，制備陰性對照液，用微孔濾膜(0.45μm)過濾。分別精密吸取陰性對照液，對照品液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
含量測定方法考察 (1)空白試驗 空白溶液的制備是按處方中藥味的比例，自配不含金銀花、紅花、馬錢子、淫羊藿的群藥，按其工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制備，上述色譜條件測定，結果空白溶液在與綠原酸對照品相同保留時間處未顯色譜峰，故認為無干擾。
(2)穩定性試驗 取綠原酸對照品溶液(0.16mg/ml)，分別于配制后0、2、4、6、12、24小時進樣3ul，依法測定，結果表明，其在24小時內基本穩定，結果見表19 表19穩定性試驗結果
(3)線性關系考察 取綠原酸對照品溶液(0.16mg/ml)搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、7μl注入高效液相色譜儀，測定峰面積，結果見表20，表明綠原酸對照品在0.16μg-1.12μg間呈線性關系，其回歸方程為 Area＝2963859.729*Amt-129002.2925(r＝0.999966789) 表20線性關系考察結果
(4)精密度試驗 精密吸取對照品溶液3μl，重復進樣5次，求得相對標準偏差＜2％，結果見表21 表21精密度試驗結果
(5)重現性試驗 按正文方法，取實施例12所制成品5份，對每份進行測定，求得相對標準偏差＜2％，結果見表22 表22重現性試驗結果
(6)回收率試驗 取實施例12所制成品粉末1g，精密稱定，再精密加入綠原酸(0.16mg/ml)對照品5ml，50％甲醇20ml，按正文供試品溶液的制備方法操作，測定其含量，并計算其回收率，測定結果見表23 表23回收率試驗結果
2.含量測定結果見表24 根據以上數據，將含量限度定為片劑每1g含綠原酸，不得少于0.5mg。
實驗例7療效實驗 本發明藥物組I(根據實施例5處方比例及制法所得藥物) 本發明藥物組II(根據實施例6處方比例及制法所得藥物) 1、性別與年齡 男性239例，女性261例，最小16歲，最大65歲，以20-50歲年齡組最為多見。
2、病程 最短者25天，最長者20年，三年以內最多，共500例。
治療方法按說明書服用，伴月為一療程，一般需服2-3個療程，共分為兩組，本發明藥物組I 200例、本發明藥物組II 200例和對照藥物組(風濕筋骨片)100例。
3、療效判定標準 (1)臨床治愈 癥狀全部消失，功能活動恢復正常，主要參考指標(血沉，抗鏈O，類風濕因子)正常。
(2)顯效 全部癥狀消失或主要癥狀消除，關節功能基本恢復，能參加正常工作和勞動，主要參考指標(各種理化檢查)基本正常。觀察結果見表25 表25總療效統計分析
本發明組與對照藥物組比較P＜0.05 表25結果表明本發明藥物組I與本發明藥物組II治療效果顯著，有效率分別為93％、93.5％，治愈率分別為25.5％、25.0％。
(3)療程與療效比較 表26療效與療程比較分析表

本發明藥物組與對照藥物組比較P＜0.05 表26結果表明本發明藥物組I與本發明藥物組II與對照組藥物比較對本病治療效果不論病程長短，療效均有顯著提高。
(4)主癥指標與療效比較 表27主癥指標與療效比較表
本發明組與對照藥物組比較*P＜0.05 從表27治療前后癥狀對比分析，可見本發明藥物組I與本發明藥物組II與對照組藥物比較對消除關節疼痛，減輕紅腫熱，恢復運動機能等方面均有顯著療效，可使抗0和血沉下降或恢復正常，部分類風濕因子試驗轉陰，對有環形紅斑或硬結者，有消除作用。
4、副作用 本觀察組200例使用本藥均無副作用。
下述實施例均能夠實現上述實驗例所述的效果 實施例1 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的丸劑10000g。
實施例2 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛200g、紅參200g、鹿茸200g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草200g、五加皮200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的膠囊10000粒。
實施例3 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的顆粒劑10000袋。
實施例4 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的滴丸10000粒。
實施例5 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的合劑1000瓶。
實施例6 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，干燥，粉碎，制粒，壓制成10000片，干燥，包衣，即得。
實施例7 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例1中方法制成丸劑。
實施例8 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 本藥物組合物實施例2中方法制成膠囊劑。
實施例9 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例3中方法制成顆粒劑。
實施例10 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例4中方法制成滴丸劑。
實施例11 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例5中方法制成合劑。
實施例12 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
實施例13 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
實施例14本發明制劑的質量控制方法 取實施例13制成品進行限量檢測和定量檢測 d.烏頭堿的限量檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例15本發明制劑的質量控制方法 取實施例12制成品進行定性檢測 a.人參的定性檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； 實施例16本發明制劑的質量控制方法 取實施例6內容物進行檢測 a.人參的定性檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例17 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，干燥，粉碎，制粒，壓制成10000片，干燥，包衣，即得。
a.人參的定性檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例18 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、三七200g、骨碎補(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細辛100g、人參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、刺五加200g、續斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例2中方法制成膠囊劑。
實施例19 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)480g、羌活280g、烏梢蛇380g、三七480g、骨碎補(制)280g、烏梅380g、金銀花480g、細辛280g、人參380g、鹿茸480g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍480g、地楓皮280g、老鸛草380g、刺五加480g、續斷280g、麻黃380g、甘草480g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝480g、桂枝280g 本藥物組合物實施例4中方法制成丸劑。
實施例20 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、三七350g、骨碎補(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細辛650g、人參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、刺五加420g、續斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
權利要求
1、一種治療風濕病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎補(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細辛50-680重量份、人參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、刺五加50-680重量份、續斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
2、如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其中三七50-680重量份、人參50-680重量份、刺五加50-680重量份分別用如下原料藥替代紅花50-680重量份、紅參50-680重量份、五加皮50-680重量份。
3、如權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、紅花50-680重量份、骨碎補(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細辛50-680重量份、紅參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、五加皮50-680重量份、續斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
4、如權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏200-450重量份、生草烏200-450重量份、馬錢子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、烏梢蛇200-450重量份、紅花200-450重量份、骨碎補(制)200-450重量份、烏梅200-450重量份、金銀花200-450重量份、細辛100-330重量份、紅參200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黃柏200-450重量份、沒藥200-450重量份、廣地龍200-450重量份、地楓皮200-450重量份、老鸛草270-600重量份、五加皮200-450重量份、續斷200-450重量份、麻黃200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。
5、如權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏280重量份、生草烏380重量份、馬錢子(制)300重量份、羌活280重量份、烏梢蛇380重量份、紅花300重量份、骨碎補(制)280重量份、烏梅380重量份、金銀花300重量份、細辛280重量份、紅參380重量份、鹿茸300重量份、黃柏280重量份、沒藥380重量份、廣地龍300重量份、地楓皮280重量份、老鸛草380重量份、五加皮300重量份、續斷280重量份、麻黃380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。
6、如權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏200重量份、生草烏200重量份、馬錢子(制)200重量份、羌活200重量份、烏梢蛇200重量份、紅花200重量份、骨碎補(制)200重量份、烏梅200重量份、金銀花200重量份、細辛100重量份、紅參200重量份、鹿茸130重量份、黃柏200重量份、沒藥200重量份、廣地龍200重量份、地楓皮200重量份、老鸛草270重量份、五加皮200重量份、續斷200重量份、麻黃200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。
7、如權利要求2-6中任意一項所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為
步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A；
步驟2、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B；
步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的劑型。
8、如權利要求7所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為
步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，加水量為藥材體積的8倍，第二次1.5小時，加水量為藥材體積的6倍，第三次1小時，加水量為藥材體積的6倍，合并煎液，濾液濃縮至80℃時相對密度為1.20～1.30的清膏A；
步驟2、生川烏、生草烏、制馬錢子、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成100目的細粉，過篩，得藥粉B；
步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規輔料，經常規方法，制成臨床接受的劑型。
9、如權利要求2-6中任意一項所述的藥物組合物的質量控制方法，其特征在于該質量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種
a.人參的定性檢測
取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚20-30ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇40-60ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液用氨試液25-35ml提取，棄去下層液，用水15-30ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
b.金銀花的定性檢測
取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸漬20-40min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
c.沒藥的定性檢測
取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
d.烏頭堿的限量檢測
取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水3-10ml濕潤，加三氯甲烷20-40ml，超聲處理20-30分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸氣飽和10-20分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深；
e.綠原酸的定量檢測
照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000；
對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密稱重，回流提取50-75分鐘，放涼后，用40-60％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；相當于含生藥量12.25g的制劑內容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
10、如權利要求9所述的藥物組合物的質量控制方法，其特征在于該質量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種
a.人參的定性檢測
取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
b.金銀花的定性檢測
取相當于含生藥量2.45g的制劑內容物，研細，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
c.沒藥的定性檢測
取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
d.烏頭堿的限量檢測
取相當于含生藥量12.25g的制劑內容物，研細，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深；
e.綠原酸的定量檢測
照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數按綠原酸峰計算應不低于2000；
對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
供試品溶液的制備 取相當于含生藥量3.5g的制劑內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；
相當于含生藥量12.25g的制劑內容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
全文摘要
本發明公開了一種治療風濕性關節炎的藥物組合物及制備和質量控制方法。本發明的藥物組合物原料藥組成為生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、三七、骨碎補(制)、烏梅、金銀花、細辛、人參、鹿茸、黃柏、沒藥、廣地龍、地楓皮、老鸛草、刺五加、續斷、麻黃、甘草、槲寄生、淫羊藿、牛膝、桂枝。制備方法為以上二十五味，黃柏、骨碎補、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A；生川烏、生草烏等其余十三味，粉碎成細粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，制成制劑。
文檔編號A61P29/00GK101569682SQ200810105198
公開日2009年11月4日 申請日期2008年4月29日 優先權日2008年4月29日
發明者付立家, 付建家 申請人:北京亞東生物制藥有限公司