專利名稱：：一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制劑，具體涉及一種包含獨一味的有效部位獨一味總苷和高烏頭的有效部位高烏總堿的藥物組合物及其制劑。
背景技術：
：類風濕性關節炎(RA)是一種以關節病變為主的慢性全身性自身免疫性疾病，常伴有關節外癥狀、關節腔滑膜炎癥、滲液、細胞增殖、肉芽腫形成，軟骨及骨組織破壞，以及最后的關節強直及功能障礙。其具有反復發作，致殘率高等特點，屬于一種常見病、多發病，我國類風濕性關節炎患病率為O.34%-1.46%;病殘率約占患病者的20%-50%。目前，西藥對類風濕性關節炎的治療主要是鎮痛、消炎，藥品包括消炎痛、甲氯滅痛、布洛芬、芬必得、耐普生等。由于類風濕性關節炎是無菌炎癥，上述藥物只能暫時緩解疼痛，消除炎癥，控制風濕活動，但不能徹底根除病灶，因此停藥后復發率很高，患者病情呈疼痛、緩解的交替狀態，如果常期服藥還有副作用，如惡心、嘔吐、食欲減退、耳鳴等。因此，開發高效、低毒的治療類風濕性關節炎藥物有著重要的意義。獨一味是藏、蒙、納西等民族的民間草藥，最早記載于藏醫名著《四部醫典》、《月王醫診》。為唇形科植物Lamiophlomisrotate(Benth)Kudo的根及莖或全草，其味苦、性微寒。該藥分布于我國西藏、青海、甘肅、四川等省區，生長于海拔27004500m的高山草甸、河灘等處。其制劑"獨一味膠囊"收載于05年版《中國藥典》一部，已在臨床上廣泛應用，具有活血止痛，化瘀止血的功效，用于多種外科手術后的刀口疼痛、出血，外傷骨折，筋骨扭傷，風濕痹痛以及崩漏、痛經、牙齦腫痛、出血等。高烏頭(Aconitumsinomonta皿mNakai)屬于毛茛科烏頭屬植物，為西北地區民間草藥，主產于四川、湖北北部、青海、甘肅、陜西等地，其根主要用于鎮痛，治療跌打損傷和殺滅寄生蟲等，是氫溴酸高烏甲素的原料藥材。
發明內容本發明的目的在于提供一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，該藥物組合物能夠產生活血消腫止痛的協同作用，進而提供一種臨床上療效更好、使用更方便的中藥有效部位復方制劑。本發明所采用的技術方案如下—種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，該組合物包含獨一味總苷和高烏總堿。在上述藥物組合物中，所述獨一味總苷中的總環烯醚鵬苷、總苯乙醇苷和總黃酮的重量總和占獨一味總苷重量的50%以上。按獨一味總苷的重量計，總環烯醚萜苷含量可以為10%(重量)30%(重量)，例如19.3%(重量)；總苯乙醇苷含量可以為20%(重量)50%(重量)，例如30.1%(重量)；總黃酮含量可以為10%(重量)20%(重量)，例如13.8%(重量)。在上述藥物組合物中，所述高烏總堿中高烏甲素的重量占高烏總堿重量的50%以上，例如67.1%(重量)。按重量份數計，上述藥物組合物包含獨一味總苷0.1-10份，高烏總堿0.1-10份；優選包含獨一味總苷1-10份，高烏總堿0.2-2份；更優選包含獨一味總苷3-7份，高烏總堿l份。上述獨一味總苷可以由本領域技術人員根據本領域公知的任何方法來制備，包括但不局限于下述制備方法，該方法包括以下步驟(1)取獨一味藥材經溶劑提取；(2)將濃縮的提取液通過大孔吸附樹脂，先用水、低濃度的甲醇或乙醇洗脫，棄去洗脫液；(3)再用高濃度甲醇或乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑并干燥，即得獨一味總苷。上述獨一味總苷的制備方法具體包括以下步驟(1)取獨一味藥材，用水、甲醇、乙醇和/或丙酮，采用溫浸、熱回流和/或滲漉等方法進行提取，收集提取液；(2)減壓濃縮或回收有機溶劑后的提取液通過大孔吸附樹脂，先用水或5%-20%(體積)的低濃度甲醇或乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質，棄去；(3)再用30%-95%(體積)的高濃度甲醇或乙醇洗脫，收集洗脫液，將減壓回收后的洗脫液干燥，即得獨一味總苷。上述高烏總堿也可以由本領域技術人員根據本領域公知的任何方法來制備，包括但不局限于下述制備方法，該方法包括以下步驟(1)取高烏頭藥材經溶劑浸泡后，采用滲漉法提取，收集滲漉液；(2)滲漉液經濃縮后，調節pH值至IO，靜置后離心，將沉淀洗至中性并干燥，即得高烏總堿。上述高烏總堿的制備方法具體包括以下步驟(1)取高烏頭藥材，先用水、甲醇、乙醇和/或丙酮浸泡后，采用滲漉法提取，收集滲漉液；(2)滲漉液減壓濃縮后，用氫氧化鈉調節pH值至10，靜置24小時后，離心，沉淀用水洗至中性，干燥，即得高烏總堿。上述藥物組合物可以制成下列各種劑型，例如注射液、輸液、粉針、滴丸、片劑、緩釋片、控釋片、分散片、口腔崩解片、膠囊劑、軟膠囊劑或顆粒劑。本發明的藥物組合物可以采用一般方法將獨一味總苷和高烏總堿均勻混合后，與任何一種或一種以上藥用輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯聚維酮、羧甲基淀粉鈉、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、甘氨酸等混合制成的上述各種劑型。本發明的藥物組合物原料來源易得，易于產業化，可以根據需要制成各種劑型，為臨床提供了使用更加方便、療效更加有效、質量更加可控的現代中藥，為患者帶來更多的益處，從而產生巨大的社會效益。與現有技術相比，本發明的有益效果是該藥物組合物含有獨一味總苷和高烏總堿，能夠產生抗炎消腫止痛的協同作用，比單獨使用同劑量的獨一味總苷或單獨使用同劑量高烏總堿效果均大大提高，經藥效學試驗證明其療效顯著。具體實施例方式下面結合具體實施方式對本發明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡明本發明，而不是為了限制本發明的范圍。實施例1:獨一味總苷的制備及檢測取獨一味藥材10kg，用10倍量50X(體積)乙醇提取三次，每次l小時，收集提取液，濃縮至約50L，放置室溫，離心，上清液過HPD-300型大孔吸附樹脂，先用水洗脫至無色，除去溶于極性溶劑的雜質，棄去，再用4BV50%(體積)的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，將回收乙醇后的洗脫液減壓干燥，即得獨一味總苷。按獨一味總苷的總重量計，總環烯醚萜苷含量為19.3%(重量)，總苯乙醇苷含量為30.1%(重量)，總黃酮含量為13.8%(重量)。獨一味總苷中各成分的含量測定方法如下(1)總環烯醚萜苷的測定(分光光度法)對照品溶液的制備精密稱取S-O-乙酰基山梔苷甲酯對照品適量，加水制成每lml含8-0-乙酰基山梔苷甲酯對照品0.lmg的溶液。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末50mg，置10ml量瓶中，加蒸餾水溶解至刻度。上已處理好的聚酰胺柱(2g)，用蒸餾水洗脫至100ml量瓶中。精密吸取洗脫液2ml，置10ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，即得供試品溶液。標準曲線的繪制精密量取對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.Oml，分別置10ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，以蒸餾水溶液為空白，在238nm波長處測定吸光度。以吸收度(A)為縱坐標，濃度C(yg，m1—1)為橫坐標，繪制標準曲線。測定法取供試品溶液，以蒸餾水溶液為空白，按照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)，在238nm波長處測定吸光度。(2)總苯乙醇苷的測定(分光光度法)對照品溶液的制備精密稱取類葉升麻苷對照品適量，用30%(體積)乙醇溶解制成每lml含0.5mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末50mg，置10ml量瓶中，加蒸餾水溶解至刻度。上已處理好的AB-8型大孔吸附樹脂柱(柱體積10ml)，先用蒸餾水洗脫50ml，棄去水液。再用30%(體積)乙醇洗脫至50ml量瓶中。精密吸取洗脫液lml，置10ml量瓶中，加30%(體積)乙醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。標準曲線的繪制精密量取對照品溶液0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分別置25ml量瓶中，加30X(體積)乙醇至刻度，搖勻，以30%乙醇(體積)為空白，在334nm波長處測定吸光度。以吸收度(A)為縱坐標，濃度C(yg，m1—1)為橫坐標，繪制標準曲線。測定法取供試品溶液，以30%(體積)乙醇為空白，按照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)，在334nm波長處測定吸收度。(3)總黃酮的測定(分光光度法)對照品溶液的制備精密稱取干燥恒重的蘆丁對照品10.00mg，置50ml量瓶中，加70%(體積)乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末20mg，置10ml量瓶中，用70%(體積)乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。標準曲線的繪制精密量取蘆丁對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oml，分別置25ml量瓶中，加水至6.0ml，加5%(重量/體積)亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6min，加10%(重量/體積)硝酸鋁溶液1ml，混勻，放置6min，加氫氧化鈉試液(lmol*L—010ml，加水至刻度，搖勻，放置15min，以相應的溶液為空白，在500mn波長處測定吸光度。以吸收度(A)為縱坐標，濃度C(yg，m1—1)為橫坐標，繪制標準曲線。測定法取供試品溶液，精密量取1.0ml，置25ml量瓶中，加水至6.0ml，加5X(重量/體積)亞硝酸鈉溶液lml，混勻，放置6分鐘，加10%(重量/體積)硝酸鋁溶液lml，混勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液(lmolL—010ml，加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，以未加10%(重量/體積)硝酸鋁溶液的供溶液為空白，按照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)，在500mn波長處測定吸光度，即得。實施例2:高烏總堿的制備及檢測取高烏頭藥材10kg，加3倍量80X(體積)乙醇浸泡2小時后，移至滲漉桶中，再加10倍量80%(體積)乙醇滲漉，滲漉速度為每小時O.5L，收集滲漉液，減壓濃縮至2L，以2mo1/1氫氧化鈉調節pH值至10，靜置24小時后，攪拌，再繼續靜置48小時，離心，取沉淀加500mlpH10的氫氧化鈉溶液，充分攪拌，離心，再次取沉淀加100mlpH10的氫氧化鈉溶液，充分攪拌，離心，再次取沉淀加200mlpH10的氫氧化鈉溶液，充分攪拌，離心，沉淀用水洗至中性，IO(TC烘干，即得高烏總堿。按高烏總堿的總重量計，高烏甲素含量為67.1%(重高烏總堿中高烏甲素的含量測定(高效液相色譜法)色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.ImoL*mL—1磷酸二氫鈉_甲醇(體積比=45:55)為流動相；檢測波長為252nm;流速0.6mL^in—1;柱溫35°C;進樣量10ilL。對照品溶液的制備精密稱取氫溴酸高烏甲素對照品適量，置50mL量瓶中，加甲醇制成每lmL含0.045mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末8mg，置25mL量瓶中，加入甲醇適量，超聲使完全溶解，甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取lmL置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，O.22iim微孔濾膜濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iiL，注入液相色譜儀，測定，以外標法計算含量，即得。實施例3:藥效學試驗(1)藥效學試驗中采用的樣品的組成如下表1:獨一味總苷、高烏總堿以及兩者合并用藥的劑量分組表7受試藥物劑量(mg生藥/kg)獨一味總苷3.371.680.840.42高烏總械0.750.3750.18750.09383.37/0.753.37/0.3753.37/0.18753.37/0.0938獨一味總苦/1.68/0.751.68/0.3751.68/0.18751.68/0.0938高烏總減0.84/0.750.84/0.3750.84/0.18750.84/0.09380.42/0.750.42/0.3750.42/0.18750.42/0.0938(2)鎮痛試驗1)小鼠醋酸性扭體試驗本實驗設陰性對照組、陽性藥組(曲馬多)，獨一味總苷、高烏總堿單味藥各四個劑量組，以及獨一味總苷和高烏總堿合并用藥的正交試驗組16組。由實驗結果可知，獨一味總苷與高劑量的高烏總堿合并用藥均具有顯著的鎮痛作用(結果見表2)，其中當獨一味總苷與高烏總堿的重量比為3.37:0.75和0.84:0.75時，Q值〉l，顯示出協同作用。表2:小鼠扭體試驗結果8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>2)小鼠水浴甩尾試驗本實驗設陰性對照組、陽性藥組(曲馬多)，獨一味總苷、高烏總堿單味藥各四個劑量組，以及獨一味總苷和高烏總堿合并用藥的正交試驗組16組。由實驗結果可知，獨一味總苷與高劑量的高烏總堿合并用藥均具有顯著的鎮痛作用(結果見表3和4)，其中獨一味總苷高烏總堿的重量比為3.37:0.75和0.84:0.75時，Q值〉l，顯示出協同作用。表3:小鼠水浴甩尾試驗結果(給藥后lh)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表4:小鼠水浴甩尾試驗結果(給藥后2h)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>(3)抗炎試驗1)小鼠腳腫試驗本實驗設陰性對照組、陽性藥組(曲馬多)，獨一味總苷、高烏總堿單味藥各四個劑量組，以及獨一味總苷和高烏總堿合并用藥的正交試驗組16組。由實驗結果可知，高劑量的獨一味總苷與高烏總堿合并用藥均具有顯著的抗炎作用(結果見表5)。其中獨一味總苷高烏總堿的重量比為3.37:0.75和3.37:0.1875時，Q值〉1，顯示出協同作用，抑制率均在50%以上。表5:小鼠腳腫試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>2)小鼠耳腫試驗本實驗設陰性對照組、陽性藥組(曲馬多)，獨一味總苷、高烏總堿單一味藥各四個劑量組，以及獨一味總苷和高烏總堿合并用藥的正交試驗組16組。由實驗結果可知，獨一味總苷與高烏總堿合并用藥均具有顯著的抗炎作用(結果見表6)。其中獨一味總苷高烏總堿的重量比為3.37:0.75和0.84:0.75時，Q值〉l，顯示出協同作用，并且重量比為3.37:0.75時協同作用最好。表6:小鼠耳腫試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(4)上述實驗結果表明本發明的藥物可抑制甲醛所致大鼠實驗性關節炎造成的足跖腫脹；對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用；可明顯降低小鼠的熱剌激甩尾次數和醋酸造成的扭體次數。結論綜合以上試驗結果，最終確定本發明中獨一味總苷和高烏總堿的最佳重量配比為3.37:0.75。實施例4:制劑實施例制劑實施例1:取高烏總堿2g，獨一味總苷8g，混合均勻，采用膠囊制備工藝，即制得含有1份高烏總堿和4份獨一味總苷的膠囊劑型的藥物組合物。制劑實施例2:取高烏總堿5g，獨一味總苷5g，混合均勻，加到20g熔融的聚乙二醇4000中，采用滴丸制備工藝，即制得含有1份高烏總堿和1份獨一味總苷的滴丸劑型的藥物組合物。制劑實施例3:取高烏總堿2g，獨一味總苷8g，混合均勻，加到10g熔融的聚乙二醇6000和10g聚乙二醇4000中，采用滴丸制備工藝，即制得含有1份高烏總堿和4份獨一味總苷的滴丸劑型的藥物組合物。制劑實施例4:取高烏總堿10g，獨一味總苷lg，交聯羧甲基纖維素鈉lg、聚乙烯吡咯烷酮K301g、微晶纖維素2g，混合均勻，壓片，即制得含有1份高烏總堿和0.1份獨一味總苷的分散片劑型的藥物組合物。制劑實施例5:取高烏總堿lg，獨一味總苷10g，溶于500ml注射用水中，采用現有粉針劑制備工藝，即制得含有1份高烏總堿和10份獨一味總苷的粉針劑型的藥物組合物。制劑實施例6:取高烏總堿2g，獨一味總苷10g，溶于1000ml注射用水中，采用注射劑制備工藝，即制得含有1份高烏總堿和5份獨一味總苷的注射液(含輸液)劑型的藥物組合物。制劑實施例7:取高烏總堿10g，三七總苷10g，蔗糖80g，混合均勻，制粒，過篩，干燥，即制得含有1份高烏總堿和1份三七總苷的顆粒劑型的藥物組合物；或將制得的顆粒經進一步壓片，干燥，即制得含有1份高烏總堿和1份獨一味總苷的片劑劑型的藥物組合物。制劑實施例8:取高烏總堿7g，獨一味總苷3g，羥丙基甲基纖維素15g，羧甲基纖維素鈉5g，乳糖5g，混合均勻，制粒，干燥，壓片，即制得含有7份高烏總堿和3份獨一味總苷的緩釋片劑型的藥物組合物。制劑實施例9:取高烏總堿3g，獨一味總苷7g，微晶纖維素24g，羧甲基纖維素鈉6g，微粉硅膠0.lg，混合均勻，壓片，即制得含有3份高烏總堿和7份獨一味總苷的分散片劑型的藥物組合物。制劑實施例10:取高烏總堿15g，獨一味總苷2g，淀粉100g，混合均勻，采用膠囊制備工藝，即制得含有7.5份高烏總堿和1份獨一味總苷的膠囊劑型的藥物組合物。實施例11:取高烏總堿10g，獨一味總苷lg，植物油25g，混勻，用明膠作囊殼材料，壓制成軟膠囊，即制得含有1份高烏總堿和0.1份獨一味總苷的軟膠囊劑型的藥物組合物。權利要求一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，該組合物包含獨一味總苷和高烏總堿。2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述獨一味總苷中的總環烯醚萜苷、總苯乙醇苷和總黃酮的重量總和占獨一味總苷重量的50%以上。3.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于，按獨一味總苷的重量計，總環烯醚萜苷含量為10%(重量)30%(重量)，例如19.3%(重量)；總苯乙醇苷含量為20%(重量)50%(重量)，例如30.1%(重量)；總黃酮含量為10%(重量)20%(重量)，例如13.8%(重量)。4.根據權利要求1至3中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述高烏總堿中高烏甲素的重量占高烏總堿重量的50%以上，例如67.1%(重量)。5.根據權利要求1至4中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，按重量份數計，該藥物組合物包含獨一味總苷O.l-10份，高烏總堿0.1-10份；優選包含獨一味總苷1-10份，高烏總堿0.2-2份；更優選包含獨一味總苷3-7份，高烏總堿1份。6.根據權利要求1至5中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述獨一味總苷的制備方法包括以下步驟(1)取獨一味藥材經溶劑提取；(2)將濃縮的提取液通過大孔吸附樹脂，先用水、低濃度的甲醇或乙醇洗脫，棄去洗脫液；(3)再用高濃度甲醇或乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑并干燥，即得獨一味總苷。7.根據權利要求1至6中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述獨一味總苷的制備方法包括以下步驟(1)取獨一味藥材，用水、甲醇、乙醇和/或丙酮，采用溫浸、熱回流和/或滲漉等方法進行提取，收集提取液；(2)減壓濃縮或回收有機溶劑后的提取液通過大孔吸附樹脂，先用水或5_20%(體積)的低濃度甲醇或乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質，棄去；(3)再用30-95%(體積)的高濃度甲醇或乙醇洗脫，收集洗脫液，將減壓回收后的洗脫液干燥，即得獨一味總苷。8.根據權利要求1至7中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述高烏總堿的制備方法包括以下步驟(1)取高烏頭藥材經溶劑浸泡后，采用滲漉法提取，收集滲漉液；(2)滲漉液經濃縮后，調節pH值至IO，靜置后離心，將沉淀洗至中性并干燥，即得高烏總堿。9.根據權利要求1至8中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述高烏總堿的制備方法包括以下步驟(1)取高烏頭藥材，先用水、甲醇、乙醇和/或丙酮浸泡后，采用滲漉法提取，收集滲漉液；(2)滲漉液減壓濃縮后，用氫氧化鈉調節pH值至10，靜置24小時后，離心，沉淀用水洗至中性，干燥，即得高烏總堿。10.根據權利要求1至9中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物的劑型為注射液、輸液、粉針、滴丸、片劑、緩釋片、控釋片、分散片、口腔崩解片、膠囊劑、軟膠囊劑或顆粒劑c全文摘要本發明提供一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制劑，該組合物包含獨一味總苷和高烏總堿。該藥物組合物原料來源易得，易于產業化，可以根據需要制成各種劑型，為臨床提供了使用更加方便、療效更加有效、質量更加可控的現代中藥，為患者帶來更多的益處，從而產生巨大的社會效益。與現有技術相比，本發明的有益效果是該藥物組合物含有獨一味總苷和高烏總堿，能夠產生抗炎消腫止痛的協同作用，比單獨使用同劑量的獨一味總苷或單獨使用同劑量高烏總堿效果均大大提高，經藥效學試驗證明其療效顯著。文檔編號A61P19/02GK101711805SQ20081015210公開日2010年5月26日申請日期2008年10月8日優先權日2008年10月8日發明者夏春英,孫衛,張鐵軍,申秀萍,許浚申請人:天津藥物研究院