專利名稱：一種治療白細胞減少癥的藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種治療白細胞減少癥的藥物及其制備方法，屬于中成藥技術領域。
背景技術：
白細胞減少癥是惡性腫瘤病人放療、化療中的大難題，臨床常常因血液中白細胞數降低，而往往被迫終止治療，從而降低患者的生活質量和醫生的治療效果；國內目前市場治療白細胞減少癥的藥有“復方皂礬丸”、“參芪顆粒”及“十味扶正顆粒”。從處方主要成分功能主治看各具特點。復方皂礬丸主要成分皂礬、西洋參、海馬、肉桂、大棗、核桃仁，主治溫腎健脾，益氣養陰，升血止血。參芪顆粒主要成分人參、黃芪、當歸、天麻、熟地、澤瀉、決明子、鹿角、兔絲子、細辛、枸杞子，主治補氣養血，健脾益腎。十味扶正顆粒主要成分人參、熟地、白術、黃芪等，主治免疫功能下降，氣血雙虧癥，癥見四肢乏力、氣短、心悸、面色蒼白。上述藥物均存在藥效慢，對個別患者藥效不明顯。

發明內容
祖國醫學認為，腫瘤屬慢性消耗性疾病，多為虛證。本藥可扶正培本法扶助人體氣血不足，協調陰陽偏盛偏衰，補益人體虛弱狀態，調整機體內環境，提高患者免疫功能，加強抵御和祛除病邪的能力，減輕對放療和化療引起的毒副反應，并能改善患者的全身狀況和臨床癥狀。
本發明的目的是提供一種更為有效治療白細胞減少癥的藥物。
本發明的另外一個目的是提供該治療白細胞減少癥的藥物的制備方法。
本發明的藥物組合及配比是選擇黃芪、刺五加、人參、白術、熟地黃、阿膠、何首烏、川芎、茯苓、枳實、當歸組合而成。
選用黃芪補氣健脾，升陽益胃。臣刺五加健脾補腎，養心寧神；人參大補元氣，助精養神；白術補脾益氣，消痰逐水；三者配伍可增加培元固本，回護元氣之功。熟地黃養血調經，滋陰補腎；阿膠補血、止血，滋陰潤燥；何首烏補血生精，通便解毒；川芎行氣開郁，活血止痛；四者配伍長于補血養陰，得配補氣藥有陽生陰長，雙補氣血之用。佐用茯苓助參、芪、術健脾，使谷化精微血生，維護后天之本；枳實理氣助地黃、阿膠、首烏、川芎以和調氣血，加強扶正祛邪之力，并使補氣養血免除滋膩之嫌，使補中寓行，則補益更為得力。使以當歸補虛助陽，添精益血，合同諸藥可起到調理陰陽，已達益氣補血，扶正固本之功效。
本發明的重量份配比是黃芪25-30、 刺五加25-30、人參6-10、白術5-9、熟地黃18-23、阿膠 3-7、
何首烏5-9、川芎8-12、茯苓5-9、枳實8-12、 當歸7-11。
本發明的優選重量份配比是黃芪26-28、 刺五加26-28、人參7-9、白術6-8、熟地黃20-22、阿膠5-6、何首烏6-8、 川芎9-11、 茯苓6-8、枳實9-11、 當歸8-10。
本發明藥物可以采用中藥制劑的常規方法制備成任何常規內服制劑。
本發明藥物活性組分的制備方法如下a)按配比量稱取各原料藥，備用。
b)取枳實、當歸、川芎、白術加水10-8倍蒸餾提取揮發油，蒸餾后的藥液另器收集，備用。
c)藥渣與其余熟地黃、何首烏、茯苓加水7、6、6倍量，煎煮三次，依次為2、1、1小時，分次濾過，濾液與蒸溜后的藥液合并，混勻，濃縮至相對密度為1.15-1.17(50℃)，加乙醇至含醇量達50-60％，攪拌，放置12小時以上，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，備用。
d)取黃芪、刺五加、人參加水8、6、6倍量，煎煮三次，依次1.5-2.5、1-2、1-2小時，分次濾過，合并濾液，濾液濃縮至相對密度1.10-1.12(50℃)，放置12小時以上，濾過，濾液備用。
e)將上述濾液混合，濃縮，在50-80℃下干燥制成干浸膏；
f)將干浸膏與阿膠混合就制成了本發明藥物的活性組分。
本發明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時所需的各種常規輔料，如崩解劑、潤滑劑、粘合劑等以常規的中藥制劑方法制備成任何一種常用口服劑型，如丸劑、散劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液等。
具體實施例方式
以下通過試驗例來進一步闡述發明所述藥物的有益效果，這些試驗例包括了本發明藥物(以下稱升白康復口服液)的藥效學試驗及急性毒性試驗和長期毒性試驗。
實驗材料藥物本發明藥物由吉林省吉湘神龍保健品實業公司提供；環磷酰胺，批號930609，沈陽藥學院制藥廠生產。碳酸納，批號861028，上海虹光化工廠生產。
動物昆明小鼠，體重18-22g，動物合格證號0002611，購自中國人民解放軍208醫院動物室。
儀器與器材PC-604，血球計數儀，北京埃爾瑪醫用儀器有限公司生產。60Co照射儀，THERATRON“F”型，ATOMIC ENERGY OFCANADN LIMITED，Commercial Rroducts Division P.O.Box93offawa Canada。722光柵紫分光光度計，上海分析儀器廠。
實驗方法及結果實驗例1升白康復口服液對CTX所致小鼠低白細胞血癥的保護作用小鼠，按表1分組并灌胃給藥，除正常對照組及正常給藥組外，其余各組均于第五天腹腔注射CTX(80mg/Kg)造成低白細胞血癥模型，繼續灌胃給藥至第八天，尾靜脈取血測定白細胞總數。結果見表1。
表1表明升白康復口服液各給藥組可對抗CTX所致小鼠白細胞數降低，與CTX組比較差異顯著，并對正常動物無升白作用。
表1對CTX所致小鼠低白細胞血癥的保護作用(X±SD)組別劑量 動物數白細胞總數(只) (1×109/L)正常對照 108.69±2.92CTX 80mg/Kg102.60±0.56△△CTX+升白康復口服液 24.0g/Kg 105.32±1.34**CTX+升白康復口服液 12.0g/Kg 105.39±1.83**CTX+升白康復口服液 6.0g/Kg104.69±1.25**升白康復口服液 24.0g/Kg 108.57±2.88升白康復口服液 12.0g/Kg 107.33±2.35升白康復口服液 6.0g/Kg108.42±2.80注與對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01；△△P＜0.01實驗結果表明，該藥對CTX所致小鼠低白細胞血癥具有明顯地升高白細胞數的作用。
實驗例2升白康復口服液對60Co照射所致小鼠低白細胞血癥的保護作用小鼠，用60Co一次性照射(劑量為4.5GY)后，按表2分組并灌胃給藥，連續七天，第8天尾靜脈取血測定白細胞總數。結果見表2。
表2表明，升白康復口服液各給藥組均能使60Co所至白細胞減少明顯回升，與60Co損傷組比較差異顯著。
表2對60Co照射所致小鼠低白細胞血癥的保護作用 (X±SD)組別 劑量 動物數白細胞總數(只) (1×109/L)正常對照 1010.08±21.2660Co損傷 102.58±0.53△△損傷+升白康復口服液 24.0g/Kg 104.96±0.77**損傷+升白康復口服液 12.0g/Kg 103.80±1.28*損傷+升白康復口服液 6.0g/Kg 103.62±0.94**注與對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01；△△P＜0.01實驗結果表明，該藥對60Co所致小鼠低白細胞血癥具有明顯地升高白細胞數的作用。
實驗例3升白康復口服液對免疫器官及網狀內皮系統(RES)吞噬功能的影響小鼠，隨機按表4分組，各組動物灌胃給藥八天，除對照組外，于給藥的第四天開始注射CTX 10mg/Kg至第八天，與末次給藥后1小時于小鼠尾靜脈注射經稀釋的一得閣墨汁10mg/Kg，其后2min和15min于小鼠眶靜脈采血0.05ml/只，溶于5ml0.1％Na2CO3溶液中，在650nm處比色，計算吞噬指數K及吞噬系數a，并計算胸腺、脾、肝的臟器指數。結果見表3、4。
表3表明，在給CTX后造成免疫功能低下的情況下，給與升白康復口服液對小鼠RES的吞噬功能與CTX組比較均有十分顯著的激活作用，吞噬指數K(P＜0.01)，吞噬系數a(P＜0.05)。
表4表明，CTX能使小鼠胸腺及脾的重量下降，與正常對照組比較，臟器系數有顯著差異(P＜0.01)，而升白康復口服液能使動物的胸腺重量恢復，且高、中二劑量組與CTX組比較差異顯著(P＜0.05)。
表3 對小鼠RES吞噬功能的影響(n＝10)(X±SD)組別 劑量吞噬指數 吞噬系數(g/Kg/d)(K)(a)正常對照 0.029±0.00615.79±1.19CTX10mg/Kg×5 0.023±0.004△15.57±1.47CTX+ 10mg/Kg×5 0.033±0.006**16.75±0.80*升白康復口服液 24.0g/Kg×8CTX+ 10mg/Kg×5 0.035±0.010**16.72±0.83*升白康復口服液 12.0g/Kg×8CTX+ 10mg/Kg×5 0.030±0.004**16.41±0.62升白康復口服液 6.0g/Kg×8注與對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01；△P＜0.05CTX為ip給藥，升白康復口服液為ig給藥。
表4對小鼠免疫器官的影響(n＝10)(X±SD)組別 劑量 胸腺 脾 肝(g/Kg/d) (mg/g)(mg/g) (g/10g)正常對照2.47±0.326.59±1.08 0.57±0.04CTX10mg/Kg×5 1.68±0.36△4.10±0.58△△0.56±0.05CTX+ 10mg/Kg×5 1.80±0.484.33±0.94 0.56±0.03升白康復口服液 24.0g/Kg×8CTX+ 10mg/Kg×5 2.08±0.45*4.18±0.66 0.56±0.02升白康復口服液 12.0g/Kg×8CTX+ 10mg/Kg×5 1.84±0.364.23±0.58 0.57±0.02升白康復口服液 6.0g/Kg×8注與對照組比較*P＜0.05；△P＜0.05CTX為ip給藥，升白康復口服液為ig給藥。
實驗結果表明，該藥對小鼠RES的吞噬功能有顯著的激活作用，增強網狀內皮系統吞噬功能，提高機體免疫能力。
實驗例4升白康復口服液對60Co損傷小鼠骨髓有核細胞數的影響小鼠，用60Co一次性照射(劑量為7.5GY)后，按表5分組并灌胃給藥，連續七天，第8天將小鼠脫臼處死，剝離出股骨，用1ml注射器，吸取一定量的Hank＇s液沖出股骨中的全部骨髓細胞，最后，讓細胞懸液通過帶4號針頭的注射器，使細胞在懸液中充分分散。測定骨髓有核細胞總數。結果見表5。
表5對60Co照射損傷小鼠骨髓有核細胞數的影響(X±SD)組別 劑量 動物數 骨髓有核細胞數(只)(1×109/一只股骨)正常對照 10 12.82±1.4360Co損傷 10 5.07±1.66△△損傷+升白康復口服液 24.0g/Kg 10 9.46±2.65**損傷+升白康復口服液 12.0g/Kg 10 10.24±3.42**損傷+升白康復口服液 6.0g/Kg 10 8.35±2.60**注與對照組比較**P＜0.01；△△P＜0.01實驗結果表明，升白康復口服液能使60Co照射損傷小鼠骨髓有核細胞數顯著增加。
實驗例5升白康復口服液對60Co損傷小鼠骨髓造血干細胞的影響小鼠，用60Co一次性照射(劑量為7.5GY)后，按表6分組并灌胃給藥，連續七天，第8天稱體重，將小鼠脫臼處死，取出脾臟，去除粘連的脂肪，稱重，然后置于Bouin氏液，24小時后，在解剖顯微鏡下計數每個脾臟上正反兩面生成的脾結節數。結果見表6。
表6對60Co照射損傷小鼠脾臟結節數的影響(n＝10)(X±SD)組別 劑量末次重量 脾臟臟器 脾結節數(g) 系數(mg) (CFU-S/脾)正常對照 26.45±2.91 6.38±1.21 11.80±0.4260Co損傷 22.10±1.15△△1.89±0.56△△2.30±0.68△△損傷+升白康復 24.0g/Kg 23.85±1.44**2.69±1.00*12.10±3.48**口服液損傷+升白康復 12.0g/Kg 23.80±1.44**2.84±0.64**13.90±1.66**口服液損傷+升白康復 6.0g/Kg 22.85±2.032.55±0.74*10.20±3.05**口服液注與對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01；△△P＜0.01實驗結果表明，升白康復口服液能使60Co照射損傷小鼠脾臟生成的脾結節數顯著增加。
實驗例6急性毒性試驗將升白康復口服液配制成2.3g生藥/ml供試驗用，受試小鼠空腹12小時，按40ml/Kg(相當于生藥92.0g/Kg)灌胃該藥，于12小時內灌胃給藥二次，觀察7天，逐日記錄給藥后動物出現的反應。
結果表明，給藥后，小鼠外觀體征、行為活動、精神狀態、飲食二便、體重變化等均未見有異常改變；口、眼、鼻處無異常分泌物；無一死亡；斷頭處死，解剖肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、
例組別 0w 1w2w 3w 4w數對照 161.35± 194.05±213.20±224.00±20 131.80±14.56組14.29 25.5126.7625.4812胸腺、睪丸、子宮均未發現病理改變。
實驗結果表明，小鼠口服升白康復口服液最大耐受量在184g/Kg以上(按公斤體重計算相當于人臨床劑量的373倍)，口服是安全的。
高劑實驗例158.25± 191.90±210.05± 227.40±20量組7長期毒性試 16.69 19.0723.7824.88中劑驗162.85± 190.05±208.90± 224.55±20量組 (一)受 17.37 31.4834.0431.58試動物般狀態和體重的影響經過三組動物在給藥兩個月及停藥二周后(每組1/3動物)這一期間的連續觀察，升白康復口服液高、中、低劑量組動物均活動自如、毛色光澤、外觀清潔(口、眼、鼻處無不良分泌物)、飲食尿便正常、發育良好，與對照組比較未見任何表現，各組動物體重增長情況詳見表5。
表7 長期毒性經時動物體重變化情況(x±s)8.40±15.39132.80±15.84低劑 167.55± 195.15±206.55±225.80±20 135.05±15.86量組 17.68 23.6524.8128.45組別 例數5w 6w7w8w9w對照 236.25± 245.55± 254.80±257.55±266.55±20組 36.04 40.56 41.13 42.87 53.38高劑量 20 238.05± 248.85± 258.05±266.60±267.00±
組 23.86 28.53 35.17 35.96 43.19中劑量 20231.35± 242.10± 253.90± 261.25± 266.85±組 40.45 42.29 51.40 54.57 51.84低劑量 20241.15± 249.15± 269.45± 273.05± 273.05±組 36.93 40.61 50.48 46.14 46.14(二)受試動物血常規的影響血液學檢測結果表明，連續給藥兩個月及停藥后二周，升白康復口服液高、中、低劑量組大鼠的RBC、WBC、Pit、Sg、Ly計數，HCT、HGB含量等各項生理指標都在正常值范圍內；與對照組比較均無明顯差異(P＜0.05＝詳見表8。
表8連續給藥兩個月后血常規檢測結果(n＝20；x±s)檢測項目 對照組 高劑量組中劑量組 低劑量組RBC(1012/L) 4.17±0.48 4.38±0.90 4.16±0.98 4.70±0.36HCT31.66±3.14 33.17±5.54 31.64±6.3233.24±4.10(ml/100ml)HGB(g/L) 14.35±0.73 14.39±0.70 14.02±1.4913.88±1.27Pit(109/L)354.0±29.89344.0±26.75334.0±37.77 344.8±33.19WBC(109/L)8.72±2.54 9.22±2.15 8.39±1.99 8.69±2.22Sg(％) 22.6±3.27 22.2±1.55 22.2±2.94 21.5±2.41Ly(％) 77.4±3.27 77.8±1.55 77.8±2.94 78.5±2.41(三)對肝、腎功能的影響升白康復口服液連續給藥兩個月及停藥二周后的兩批動物分別取血，對ALT、BUN肝、腎功能有關的血液生化指標進行檢測，結果見表9。
表9對肝、腎功能的影響(x±s)組別例數 ALT(u/l)BUN(mmol/L)
對照組2064.80±11.987.43±1.23高劑量2060.50±10.947.32±1.81中劑量2058.30±8.78 7.99±1.09低劑量2071.30±14.176.63±0.51(四)主要器官臟器系統的影響將受試動物分兩批(連續給藥兩個月和停藥后二周)處死，摘取心、肝、脾、肺、腎，用精密電子天平稱重后，分別計算出各器官的臟器系數(臟器重/每百克體重)，結果見表10。
表10 長期毒性試驗動物主要器官臟器系統(n＝20；x±s)組別心 肝 脾 肺對照組 0.37±0.05 3.30±0.24 0.31±0.08 0.80±0.09升白康復口服液 0.33±0.04 3.22±0.27 0.30±0.08 0.80±0.0835.0g/Kg升白康復口服液 0.37±0.04 3.26±0.26 0.34±0.09 0.82±0.1118.0g/Kg升白康復口服液 0.38±0.04 3.53±0.34 0.32±0.06 0.80±0.099.0g/Kg組別腎 腎上腺 睪丸及副睪 卵巢及子宮(mg/100g) n＝10 n＝10對照組 0.33±0.03 11.68±4.68 0.79±0.12 0.25±0.06升白康復口服液 0.30±0.04 9.33±0.27 0.74±0.06 0.25±0.0535.0g/Kg升白康復口服液 0.34±0.04 12.52±3.16 0.72±0.04 0.23±0.0218.0g/Kg升白康復口服液 0.36±0.05 11.62±3.30 0.76±0.11 0.25±0.069.0g/Kg(五)病理解剖學和病理組織學檢查將受試動物分兩批(連續給藥兩個月和停藥兩周)處死后，取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、睪丸及副睪、卵巢及子宮，進行大體及鏡下組織病理學檢查，四組動物的上述主要臟器、器官標本肉眼觀察，其外觀、形態、大小、顏色正常，未發現充血、腫脹及壞死等異常現象；光鏡下檢查，亦未見組織萎縮、增生、炎細胞浸潤及細胞退行性變等明顯的病理變化及中毒性改變。
以上五組實驗表明，1.本發明長期毒性試驗期間，受試動物的外觀體征、行為活動、飲食尿便等生理指標均無異常改變。2.對受試動物的生長發育無不良影響，四組大鼠體重增長基本一致。3.對血液及造血系統、肝功能、腎功能均無不良影響。4.對主要臟器、器官無明顯毒副作用。5.停藥后無繼發性反應發生。
以下通過實施例來進一步闡述本發明藥物的制備方法。
實施例1本發明藥物的口服液制備a)稱取各原料藥，黃芪270g、刺五加270g、人參80g、白術70g、熟地黃200g、阿膠50g、何首烏70g、川芎100g、茯苓70g、枳實100g、當歸90g備用。
b)取枳實、當歸、川芎、白術的粗粉加水10-8倍蒸餾提取揮發油，蒸餾后的藥液另器收集，備用。
c)將上述藥渣與其余熟地黃、何首烏、茯苓加水6-8、6-8、6-8倍量，常壓煎煮三次，依次為2、1、1小時，分次濾過，濾液與蒸溜后的藥液合并，混勻，濃縮至相對密度為1.15-1.17(50℃)，加乙醇至含醇量達50-60％，攪拌，放置12小時以上，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，備用。
d)取黃芪、刺五加、人參加水7-9、5-7、5-7倍量，常壓煎煮三次，依次2、1.5、1.5小時，分次濾過，合并濾液，濾液濃縮至相對密度1.10-1.12(50℃)，放置12小時以上，濾過，濾液備用。
e)將上述濾液混合攪勻加90-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，在45-50℃下干燥制成干浸膏。
f)取阿膠加水3倍量加熱溶解，與上述備用液合并，濃縮至約800ml，放冷，濾過。取蔗糖100g、山梨酸鉀3g，用蒸餾水150ml溶解，并將提取的揮發油用乙醇按1∶10的比例溶解，于上述藥液混勻，加水至1000ml，攪勻，靜置24小時，濾過，灌裝，滅菌，即得口服液。
實施例2本發明藥物的片劑制備制成千浸膏前制備方法與實施例1相同，加阿膠混合，粉成細粉，加入輔料制成顆粒，并干燥，噴入揮發油，壓制成片。
權利要求
1.一種治療白細胞減少癥的藥物，其特征在于它是由下列藥物組合及重量份配比制成黃芪25-30、 刺五加25-30、 人參6-10、白術5-9、 熟地黃18-23、 阿膠3-7、何首烏5-9、 川芎8-12、茯苓5-9、枳實8-12、當歸7-11。
2.根據權利要求1所述的一種治療白細胞減少癥的藥物，其特征在于它是由下列藥物組合及優選重量份配比制成黃芪26-28、 刺五加26-28、人參7-9、白術6-8、 熟地黃20-22、阿膠5-6、何首烏6-8、 川芎9-11、 茯苓6-8、枳實9-11、 當歸8-10。
3.一種治療白細胞減少癥的藥物的制備方法，它包括下列步驟a)按配比量稱取各原料藥，備用；b)取枳實、當歸、川芎、白術加水10-8倍蒸餾提取揮發油，蒸餾后的藥液另器收集，備用；c)藥渣與其余熟地黃、何首烏、茯苓加水7、6、6倍量，煎煮三次，依次為2、1、1小時，分次濾過，濾液與蒸溜后的藥液合并，混勻，濃縮至相對密度為1.15-1.17(50℃)，加乙醇至含醇量達50-60％，攪拌，放置12小時以上，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，備用；d)取黃芪、刺五加、人參加水8、6、6倍量，煎煮三次，依次1.5-2.5、1-2、1-2小時，分次濾過，合并濾液，濾液濃縮至相對密度1.10-1.12(50℃)，放置12小時以上，濾過，濾液備用；e)將上述濾液混合，濃縮，在50-80℃下干燥制成干浸膏；f)將干浸膏與阿膠混合就制成了本發明藥物的活性組分。
全文摘要
一種治療白細胞減少癥的藥物及其制備方法，屬于中成藥技術領域，其藥物由黃芪、刺五加、人參、白術、熟地黃、阿膠、何首烏、川芎、茯苓、枳實、當歸組合而成，經提取、過濾等步驟可制成藥用制劑；其有益效果是1.本發明長期毒性試驗期間，受試動物的外觀體征、行為活動、飲食尿便等生理指標均無異常改變。2.對受試動物的生長發育無不良影響，四組大鼠體重增長基本一致。3.對血液及造血系統、肝功能、腎功能均無不良影響。4.對主要臟器、器官無明顯毒副作用。5.停藥后無繼發性反應發生。
文檔編號A61P35/00GK1593483SQ20041001093
公開日2005年3月16日 申請日期2004年6月18日 優先權日2004年6月18日
發明者張廣學, 劉德順, 張福營 申請人:吉林省華洋藥業股份有限公司