專利名稱：人生長激素在多系統萎縮癥中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及神經系統疾病領域。更具體地說，本發明涉及人生長激素在制備治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥(MSA)的藥物中的用途。
背景技術：
人生長激素(hGH)也叫somatropin(INN)或somatotropin，是由垂體前葉的促生長細胞產生和分泌的一種蛋白質激素。人生長激素通過作用于蛋白質、碳水化合物和脂質的代謝而對小孩體細胞生長以及成人新陳代謝發揮重要作用。
人生長激素是由191個氨基酸組成的單條多肽鏈(Bewly et al，1972)，具有兩個二硫鍵一個在Cys-53與Cys-165之間，在分子內形成一個大環，另一個在Cys-182與Cys-189之間，在靠近C-端形成一個小環。Martial等(1979)已報導了確認氨基酸序列的DNA序列。純化hGH的凍干形式為白色無定形粉末。它易于溶解(濃度＞10mg/L)在pH值為6.5至8.5的水緩沖液中。
在溶液中的hGH主要以單聚體形式存在，有小部分是二聚體和較高分子量的低聚體。在某些條件下，hGH可被誘導形成大量的二聚體、三聚物或較高的低聚體。
現在已經知道hGH的一些衍生物，包括天然存在的衍生物、變體和代謝產物、主要由遺傳方法產生的生物合成hGH和改造hGH衍生物的降解產物。例如，天然存在的hGH衍生物是GH-V，它是在胎盤中發現的一個生長激素變體。Chen等(1989)描述了基因座的其它成員。
通過重組DNA技術產生了第一種hGH形式，為甲硫氨酰hGH。該化合物實際上是在N-端具有一個附加甲硫氨酸殘基的hGH衍生物(Goeddel等，1979)。
據報導，在垂體和血流內發現了一個天然存在的hGH變體，叫20-K-hGH(Lewis等，1978；Lewis等，1980)。該化合物由信使核糖核酸的變換剪接而產生，缺少Glu-32到Gln-46的15個氨基酸(DeNoto等，1981)。該化合物具有許多但不是全部的hGH性質。
20-K-hGH在垂體中制造，分泌到血液中。它占成人生長激素總產量的約5％，小孩生長激素總產量的約20％。它的促生長活性與22kD生長激素一樣，據報具有與22kD形式相同或更高的分解脂肪活性。它與生長激素受體結合，其親和力與22kD生長激素一樣，催乳(泌乳刺激素樣)生物活性是22kD激素的十分之一。與22kD不同，20-K-hGH的抗胰島素活性較弱。
通過分子的蛋白水解修飾可產生大量的hGH衍生物。hGH代謝的主要途徑涉及蛋白質水解。在殘基130-150周圍的hGH區特別容易進行蛋白質水解，該區內具有切口或缺失的一些hGH衍生物已有報導(Thorlacius-Ussing，1987)。該區處于hGH的大環內，切割一個肽鍵產生兩條在Cys-53和Cys-165上的二硫鍵連接的鏈。據報導，很多這種二鏈形式的生物活性都有提高(Singh等，1974)。利用酶已經人工產生了很多人生長激素衍生物。已經有人利用酶如胰蛋白酶和枯草桿菌堿性蛋白酶及其它酶在分子內各點改造hGH(Lewis等，1977；Graff等，1982)。其中一種衍生物稱為二鏈合成代謝蛋白質(2-CAP)，是用胰蛋白酶以控制方式對hGH進行蛋白水解而形成的(Becker等，1989)。2-CAP被發現具有與完整hGH分子的生物性質極不相同的生物性質，這是因為hGH的促生長活性很大程度上得到了保留，以及對碳水化合物新陳代謝的大部分作用已失去。
蛋白質的天冬酰胺和谷酰胺殘基在適當條件下容易發生脫酰胺反應。已有人指出，垂體hGH可進行此類反應，將Asn-152轉化為天冬氨酸，在較少程度上，將Gln-137轉化為谷氨酸(Lewis等，1981)。業已證明，脫酰胺化hGH在枯草桿菌堿性蛋白酶作用下較易發生蛋白水解反應，提示脫酰胺作用對引導hGH的蛋白水解切割方面有生理學意義。已知生物合成的hGH在某些儲存條件下可發生降解，導致另一個天冬酰胺(Asn-149)脫酰胺。這是脫酰胺的主要位置，但Asn-152也可以發生脫酰胺(Becker等，1988)。生物合成的hGH在Gln-137脫酰胺仍未有報導。
蛋白質的甲硫氨酸殘基容易發生氧化反應，主要生成亞砜。垂體產生的和生物合成的hGH均在Met-14和Met-125位置發生亞砜化反應(Becker等，1988)。也有報導，垂體產生的hGH內Met-170位置上發生氧化反應，但生物合成的hGH則不會。已發現，脫酰胺化hGH和Met-14亞砜化hGH都表現出全部生物活性(Becker等，1988)。
通過酶作用或遺傳方法產生了hGH的截短形式。在胰蛋白酶的控制作用下產生的2-CAP缺少hGH N端的前8個殘基。在適合的宿主中表達之前改造基因，亦產生了hGH的其它截短形式。切除前13個殘基產生一個具有不同生物性質的衍生物(Gertler等，1986)，其中它的多肽鏈被切除。
雖然人生長激素最初是從尸體的垂體腺獲得的，但這些制劑不是電泳性均相，而且用50％純度級的制劑處理病人的血清會出現抗體，由于非有效成分而有免疫原性。重組DNA技術可以在很多不同系統中生產無限量的hGH。若僅存在少量污染蛋白質，則有利于從培養基純化hGH。事實上，已經證明，在實驗規模上用反相HPLC柱單一純化步驟就可以純化hGH(Hsiung等，1989)。
Serono International S.A.生產了重組人生長激素rhGH，叫SEROSTIM，該產品已經獲得食品和藥品管理局(FDA)的加快批準，用于治療AIDS病人的體重減輕和消瘦。SAIZENX是重組人生長激素，可用于小孩GH缺乏癥，例如女孩的特納綜合征(Turner syndrome)，以及用于小孩腎衰竭。PROTROPIN由Genentech，Inc.公司(South San Francisco，CA)生產，在結構上與天然序列hGH稍有不同，它在N-端有一個附加甲硫氨酸殘基。重組hGH一般以凍干形式小瓶出售，內裝有hGH與附加賦形劑(如甘油和甘露醇)，并附有稀釋液小瓶，讓病人在給藥之前將產品配成合適的濃度。重組hGH也可以其它公知形式出售，例如預灌裝注射器等。
通常，重組的天然序列hGH、重組的N-甲硫酰胺基-hGH或者人體內垂體產生的產物在藥物動力學或生物活性方面沒有明顯差異(Moore等，1988；Jorgensson等，1988)。
在研究過程中，內源性生長激素促進了很多關鍵事件和功能，實質上直徑或間接地作用于體內各組織。所以，成熟中樞神經系統(CNS)內的眾多生長激素受體可提供新的治療策略。此外，GH具有代謝作用，這些作用在主要身心發育已完成之后仍然在許多方面具有重要性。雖然GH的作用長期被認為完全經由肝胰島素樣生長因子-1(IGF-1)的產生來介導，但現在已經清楚知道，GH在許多組織中也有直接作用，除了與循環產生的IGF-1，也與局部位置產生的IGF-1(可能與其它許多生長因子)互相協調地起作用。
盡管生長激素主要在垂體內合成，但腦的不同區域也可以異位大量地產生生長激素(Johansson等，2000)。另外，也出現很多生長激素受體、IGF-1和IGF-1受體。在生長激素治療CNS期間，GH、GH依賴性因子和神經傳遞素的CSF水平也發生改變。這提示，神經內分泌機理參與了身體狀況和心理健康的改善，這可以在生長激素治療生長激素缺乏的成人中觀察到。
早期實驗結果表明，GH增大了腦的塑性。例如，以放射標記的GH進行研究，結果表明CNS存在特異性結合位，雖然已經設想分布范圍很寬，但這些結合位的量卻很少，主要在下丘腦區和脈絡叢中找到(Harvey等，1993)。GH在CNS中的生理作用是抑制它自身釋放出來，作為自身反饋循環的一部分(Tannenbaum，1980)。
生長激素缺乏(GHD)的病人較容易產生健康問題。這些病人通常會精神不振、身體運動能力較差、在社會上較孤立(Johannsson等，2000)。另外，他們的睡眠不足，記憶力較正常人差。這些病人的癥狀主要是疲倦、精力差和缺乏主動性、不能集中精神、記憶困難以及易發怒。
在GH治療過程中，精力、情緒和記憶力都有改善。這些改變顯示趨向于正常化，這是因為觀察到病人的精力、情緒和記憶力的水平接近正常人。
GH缺乏癥，特別是GH治療與主要中樞神經傳導素、它們的生物合成酶或它們的受體發生的各類變化有關(Andersson等，1983)，但直至現在仍未確定關于直接作用于這些系統的內源性GH的生理作用。雖然被嚴重忽略，但GH具有很多神經營養作用(刺激神經元和神經膠質增生，增加髓鞘化，以及增大腦面積)，而GH缺乏則導致腦發育缺陷(Elias Eriksson，1985)。
在一項為期一個月的雙盲安慰劑對照研究中發現，對GH缺乏癥成人進行GH治療，腦脊液(CSF)中的GH平均增加10倍。另外，CSF的IGF-1濃度平均增大約50％，在GH治療期間，CSF多巴胺代謝物高香草酸(HVA)濃度(Harvey等，1993)降低，CSF的β-內啡肽免疫反應性提高。CSF的HVA濃度下降提示，GH影響中樞神經系統的多巴胺周期(turnover)，這與以前所做的動物研究及Burman等做的研究(Burman等，1995)一致。GH治療成人GH缺乏癥期間，這些神經內啡肽改變似乎有可能改善生理健康。
帕金森疊加綜合征，也稱帕金森疊加(英文為Parkinsonism-Plus syndromes或Parkinsonian-Plus或簡單寫成Parkinson-Plus syndromes)，由一組疾病組成，與典型的帕金森氏病不同。帕金森疊加綜合征包括以下疾病進行性核上麻痹癥(PSP)、多系統萎縮癥(MSA)、帕金森氏-肌萎縮側索硬化癥-關島(Guam)癡呆癥、全身性萊維小體病(Lewy body disease)、皮質基底神經節變性(CGD)、阿爾茨海默氏/帕金森氏疊加綜合征、亨廷頓氏病剛性變異型、哈-斯-克二氏病、Gerstmann-Strausler綜合征。
進行性PSP癥狀通常在55歲至70歲之間發作，50歲之前發作較少見。自從第一次對該病描述以來，已經提出了不同組的臨床標準。臨床診斷采用的兩個最具體的癥狀是核上性凝視麻痹(包括不能將視線轉移至戰術性刺激物(tacical stimulus)的能力)和姿勢不穩并伴有早期跌倒。Litvan等在1996提出了一系列標準，其中確立了一些重要的排除標準，例如通過左旋多巴治療有良好的持續的效果、異手綜合征、幻覺癥、皮層癡呆癥、小腦癥狀和早期自主神經功能異常癥狀。據報，特征性顯微病理是蒼白核、黑質、上丘腦、水管周灰質、頂蓋前區、腦干和髓內的神經纖維纏節、神經纖維網線和神經元喪失。
PSP致病可能與細胞骨架組分(神經細絲)隨著神經元和神經膠質細胞內tau蛋白質積聚而異常代謝有關。一般認為，PSP是一種散發病，但也可由遺傳造成，例如tau蛋白質相關的遺傳變異。早期表現為雙側動作緩慢并伴隨著軸向型僵硬，但肢體可能沒有表現出來。病程是漸進的，與帕金森氏病和MSA相比似乎變化較少。男性較容易患上該種疾病并且預后較差，而女性和發病較早的病人有較好的預后。發病多年后，臨床癥狀通常變得更明顯。眼球運動變得緩慢，首先發生在水平方向上，然后是垂直方向。病人很難聚焦或者與醫生的眼睛相遇，由于不自覺持續注視而產生凝視。患病后期，PSP通常會發生核上性眼球局部麻痹，向下看麻痹，對稱性眼震(square wave jerks)。步態開始不穩，手臂外展，轉身時旋轉，身體姿勢挺直。面部呈現典型的“驚訝”表情，由于前額葉功能障礙，所以病人往往不愿承認有嚴重問題。嚴重姿勢不穩最常發生于疾病中期，可以成為一個主要問題。可能發生多發性創傷，由于跌倒而導致手腳骨折，甚至發生致命性外傷。
1968年第一次有人對皮層基底節變性(CBD)進行描述，許多人認為在疾病早期最難診斷。CBD是一種罕見疾病，現在仍沒有可靠的現患率數據。臨床發病的平均年齡是60至65歲。帕金森氏病病人的臨床表現隨著時間慢慢變化。與帕金森氏病不同的病理是存在大的腫脹的無色神經細胞，這是一個主要發現。還發現皮層和基底結構即基底神經中樞、黑質和腦干萎縮。癥狀通常出現在其中一個上肢。接著，同側下肢受影響，再到對側。疾病表現可分為三類1)皮層發病癥狀，2)基底神經中樞發病癥狀或3)其它結構發病癥狀。通常會觀察到肌張力異常。出現單側動作性震顫，此癥狀可能與特發性動作震顫混淆。經過一段時間，震顫變為肌陣攣。有時早期可能表現為運用不能癥，為診斷提供了線索，但血管病變可能產生類似的癥狀。幾年后，可看到有特征性“異常肢體”現象。后期特征是失去皮層感覺，它可用來區別于帕金森氏病的綜合征。疾病后期也表現其它癥狀，例如核上性凝視麻痹、構音困難、吞咽困難、錐體癥狀。不過，癥狀的不對稱性是持續的，因此與PSP綜合征混淆的機會較低。
散發型萊維小體病(DLBD)是繼阿爾茨海默氏病(AD)后成為導致老年人患上退化性癡呆的第二種最常見病因。不過，在臨床上區分這些疾病十分困難。已有記載DLBD早期會步態不穩、僵硬、靜止震顫，而精神病和癡呆癥也一樣。DLBD的特有特征是疾病早期出現復雜的視幻覺。除了認知力逐漸降低外，需要用到以下其中兩個標準來診斷是否是很可能的DLBD以及一個來診斷是否是可能的DLBD。1.認知力隨著注意力和警成性的明顯改變而變化，2.復發，一般為完好形成的視幻覺，以及3.帕金森病運動特征。診斷時不需要的輔助特征包括不停跌倒，昏厥、短暫失去知覺、精神壓抑敏感、系統化妄想以及其它形式的幻覺。
多系統萎縮癥(MSA)是一種神經退化性疾病，其中腦區退化導致運動、平衡、血壓以及性和尿道功能的控制力受損。
MSA是一個獨有的臨床病理實體(Gilman等，1998)。如果主要表現為帕金森病癥，就將病人歸為MSA-P，如果表現為小腦病癥，就將病人歸為MSA-M。MSA-M是混合亞型，包括有錐體或小腦癥狀的病人。
MSA一般出現于50至70歲的人，男性發病率稍高。病人通常首先出現自主神經系統功能障礙。女性最常見的初始癥狀是泌尿生殖器功能障礙，而男性最常見的初始癥狀是陽痿。常見為起坐性低血壓，可引致暈眩、視力模糊、頭或頸痛、打呵欠、短暫性混亂、口齒不清，若低血壓嚴重，病人在休息位置起身可能會暈倒。
MSA在以下幾個重要方面與典型帕金森氏病不同發病早(比帕金森氏病病人早5到10年)，對L-多巴治療呈邊際反應，病程發展很快，診斷后生存機會很少超過7年。而帕金森氏病主要破壞一個系統內的黑質紋狀體通道，MSA則破壞多個神經系統。MSA的發病率是5-15∶100000，占臨床上診斷的特發性帕金森氏病病人的10％。病因仍然不明，現時也沒有治療方案。
有人提出，MSA的癥狀與神經細胞的逐漸退化有關(Holmberg等，1998)。已經發現，MSA病人的腦脊液中神經退化標記物的水平上升。
在運動障礙研究中心中，多系統萎縮癥(MSA)與帕金森氏病的鑒定診斷可能最不相同，全部病人中可能有高達10％以上表現為帕金森氏病癥狀(Quinn 1989)。MSA由三部分組成原發性起坐低血壓(Shy-Drager syndromes)綜合征、紋狀體黑質變性以及橄欖橋腦小腦萎縮。如上所述，多系統萎縮癥(MSA)是一種神經系統退化性疾病，其中腦區退化導致運動、平衡、血壓以及性和尿道功能的控制力受損。
這種疾病的發病不是穩定不變的。最早的發病年齡是40多歲，對經過驗尸確認的病例進行研究發現，平均發病年齡是50歲(Wenning 1996)。男性病人稍占多數。
術語MSA包括一種慢性退化性疾病，是基底神經中樞、錐體通道、小腦、腦干和自主神經系統的不同癥狀組合。MSA不同表現的命名是變化不定的，可能落后于對該疾病的認識。有人提出以術語MSA-SND來稱呼主要表現為帕金森氏病癥狀的病人，而當發現主要為小腦癥狀時，則使用MSA-OPCA來命名(Quinn 1989)。上世紀九十年代期間，對命名法作了進一步討論。MSA-P和MSA-C分別被用來描述以帕金森病癥狀和小腦癥狀為主導的各種疾病表現。亦有人提出了不同組的診斷標準(Quinn 1989)。雖然神經科學者回顧性地估量了臨床診斷MSA的準確率，但至今仍未對這些標準作系統性評定(Litvan等，1997)。在第一次臨床評估中已經發現，鑒定MSA的特異性超過90％，然而，即使重復評估，敏感度仍然很低。
神經病理發現包括殼、黑質、腦橋基底部、下橄欖核、小腦葉片、脊髓中側柱和Onufs核內特異性膠質細胞胞漿包含體、神經膠質過多和神經細胞喪失(Daniel，1999)。該疾病累及的其它區是藍斑、背側迷走核、錐體束和前角細胞(Wenning，1996，Wenning，1997，Van der Ecken等，1960)。
一般地，MSA是一種散發病(Bandmann等，1997)。病程各有不同，進一步反映了它出現的不同名稱。
自主功能障礙常見于MSA中，可表現為暈厥前發作、失禁或性功能障礙(Wenning，1994)。自主功能衰竭的其它較少見特異性癥狀是暈眩、肌肉疼痛、便秘和疲倦。暗灰凍手也增大患上MSA的機會(Klein等，1997)。當重復暈厥而使血壓下降，預后變差。由于行動不便，超過40％病人在5年內需要坐輪椅。
不同個體之間預后差別很大。據報導，發現有患上MSA超過20年的病人(Wenning 1997)，但經過驗尸確認的病例顯示(如果檢驗的病例更多，結果可能會有偏差)，平均生存時間是發病后6至9年(Wenning 1997，Wenning1994)。
對于全部帕金森疊加綜合征，無論是病程早期還是晚期，都發現有抑郁和焦慮癥，通常對抗抑郁藥有良好反應。
至今，只對相對小數的經臨床診斷的研究群體或驗尸病例以實驗方法輔助診斷進行了評估。靈敏度(真陽性預測診斷的數目對患有這種病的病人的測試/總數目)和特異性(真陰性預測診斷的數目對無這種病的病人的測試/總數目)高的方法以及能夠給出客觀定量數據的方法是有前景的，可輔助臨床診斷。
MSA病人通常用MRI結果記錄，這種技術有時用于將MSA-P與帕金森氏病和進行性核上麻痹癥(PSP)區分開來。具體而言，雖然存在靈敏度低的問題，但T2加權MRI順序的低和高殼信號改變的組合被認為對診斷有較高特定性(Schrag，1998；Kraft等，1999)。這些發現可用來區分有陽性左多巴反應的MSA-P病人與帕金森氏病。殼(putamen)的單獨高信號改變常見于MSA，但特異性較低，這是因為它們也見于帕金森氏病和PSP(Schrag等，1998)。還有記載了大腦天幕下異常，可觀察到橫血腦橋纖維、類似一個十字的腦橋高信號和中小腦腳的散發高信號以及共存萎縮癥(Schrag etal.，1998)。這些天幕下變化只能作為臨床診斷的輔助工具，因為它們一般遲于小腦和腦干相關的典型癥狀組合發生，而那些癥狀組合已經能夠將MSA與帕金森氏病和PSP區分開來。
對左多巴的臨床反應是帕金森疾病每組診斷標準的重要特征。多個作者均提出，用脫水嗎啡(Hughes，1990)或左多巴(Hughes等，1991；Rossi等，2000)單劑測試作為不同診斷和預測長期治療效果的工具。
左多巴試驗得到了姿勢-動作-手動記錄結果，為診斷提供更多信息。該試驗是一項復雜的全身運動任務，要求病人無需輔助都具有行走的能力。
最近出現的潛在診斷方法、預后方法和評估治療效果的方法是利用神經細胞退化和膠質過多的標記物(Rosengren等，1994；Rosengren等，1996)。通過腦脊髓液(CSF)中各種高濃度腦特異蛋白質可鑒定到由于中樞神經系統(CNS)的慢性或急性受損而在不同條件下神經細胞的退化和神經膠質反應性(Rosengren etal.，1999)。此外，它們提供的數據與各種帕金森疾病的臨床診斷標準基本上無關。
神經細絲是神經細胞的主要結構組件，在神經細胞中它維持軸突口徑、神經細胞尺寸和形狀。已經檢測到肌萎縮性脊髓側索硬化和阿爾茨海默氏病以及其它神經系統退化性疾病的病人腦脊液中神經細絲水平很高，提示腦脊液中的神經細絲可用作軸突變性(或退化)的標記物(Rosengren，1996)。
GFA蛋白質是一種主要的星形神經膠質蛋白質，大部分在纖維星形膠質細胞中表達。GFA蛋白質在CSF中的濃度受到腦不同病理狀態影響。急性CNS損傷和星形神經膠質細胞分解，都觀察到有高水平的GFA蛋白質(Kosengren等，1994)。導致神經膠質過多的慢性腦病，例如癡呆癥、多發性硬化癥和慢性腦病，GFA蛋白質的水平都上升了(Rosengren等，1994，Rosengren等，1995)。因此提示，GFA蛋白質可用作CNS組織分解和星形神經膠質過多的CSF標記物(Rosengren等，1994)。
Kimber等(1997)報導了利用可樂定(clonidine)診斷試驗來鑒定MSA病人。靜脈注射可樂定后重復測量生長激素(GH)。發現一組MSA病人與帕金森氏病病人相比，他們對可樂定的反應明顯降低，這提示，該試驗可成為中樞自主功能衰竭的指針，表示支配下丘腦活動的髓兒茶胺能神經細胞有損失。在另一項研究中(Kimber等，2000)，注射可樂定后，發現一組MSA病人與對照組和PSP病人組相比，他們的GH濃度顯著降低，因此該診斷試驗可將MSA與其它神經系統退化性疾病區分開來。

發明內容
本發明是基于這樣的發現人生長激素對屬于帕金森疊加綜合征的疾病(即多系統萎縮癥)的病人有積極的效果。所以，本發明涉及一種與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者一種刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質在治療和/或預防帕金森疊加綜合征中的用途。所述物質特別適合治療和/或預防多系統萎縮癥(MSA)，MSA仍然被視為是典型帕金森氏病中無法治療的疾病。
本發明還涉及一種核酸分子在治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是MSA中的用途，其中所述核酸分子包含與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質的編碼序列。
一種載體在治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是MSA中的用途也在本發明范圍之內，其中所述載體能誘導和/或增強內源性產生與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
本發明還涉及一種細胞，用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是MSA，其中所述細胞經過基因改造產生與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
具體實施例方式
本發明的基礎在于發現多系統萎縮癥(MSA)是一種屬于帕金森疊加綜合征的疾病，通過給予有效量的人生長激素可以治療這一現象。
所以，本發明涉及一種與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者一種刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質在制備治療和/或預防帕金森疊加綜合征的藥物中的用途。
在本發明一優選實施例中，帕金森疊加綜合征選自進行性核上麻痹癥(PSP)、多系統萎縮癥(MSA)、帕金森氏-肌萎縮側索硬化癥-關島癡呆癥、全身性萊維小體病、皮質基底神經節變性、阿爾茨海默氏/帕金森氏疊加綜合征、亨廷頓氏病剛性變異型、哈-斯-克二氏病、和Gerstmann-Strausler綜合征。
這些疾病、它們的診斷與相互之間的區分以及與其它神經系統疾病的區分已在背景技術部分作了詳細描述。
在一特別優選實施例中，帕金森疊加綜合征是多系統萎縮癥。MSA是一個獨特的臨床病理實體(Gilman等，1998)，例如其特征在于，與帕金森氏病的病人不同，MSA病人對左多巴(L-dopa)治療一般表現為邊緣反應。在上述背景技術部分已就評價對左多巴的臨床反應的試驗進行了描述。本發明可以是任何類型的MSA，包括MSA-P、MSA-C和MSA-M、MSA-SND或MSA-OPCA，見上述背景技術部分。
本文所用的術語“治療”和“預防”應該被理解為部分或完全阻止、抑制、減輕、改善或逆轉帕金森疊加綜合征的一種或多種癥狀或病因，以及帕金森疊加綜合征所導致的癥狀、疾病或并發癥。當“治療”帕金森疊加綜合征時，在發病后給予本發明的物質，而“預防”是指在給病人診斷或病人出現癥狀前給予本發明的物質。
在本發明一優選實施例中，所述物質選自(a)人生長激素(hGH)；(b)(a)的對hGH受體有激動劑活性的片段；(c)(a)或(b)的突變體，該突變體的序列與(a)或(b)至少有70％的同一性并且對hGH受體有激動劑活性；(d)(a)或(b)的突變體，該突變體是由在溫和條件下能與編碼(a)或(b)的天然DNA序列的互補序列雜交的DNA序列編碼的并且對hGH受體有激動劑活性；或者(e)(a)、(b)、(c)或(d)的對hGH受體有激動劑活性的鹽或功能衍生物。
本發明中使用的術語“人生長激素”或“hGH”表示包括天然存在的或合成的衍生物，如上所述，非限制方式包括20kD和22kD人生長激素、GH-V、以及生長激素基因座的其它成員，詳細描述見背景技術部分。
hGH可以是天然存在的人生長激素，或者它最好是重組hGH。重組hGH可以在任何合適的原核生物或真核生物宿主中表達。例如，大腸桿菌特別適合hGH的表達。酵母、昆蟲或哺乳動物細胞也適合重組生長激素的表達。較佳地，hGH在人或動物細胞如中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中表達。
本文所用的術語“hGH”或“生長激素”還包括功能衍生物、部分或片段、突變體、類似物或鹽，它們保留了生長激素的生物活性，即用作生長激素受體的激動劑。換言之，它們能夠與生長激素受體結合，從而啟動受體的信號傳導活性。
本文所用的術語“功能衍生物”或“化學衍生物”涵蓋用本領域的已知技術通過改變殘基N-端及C-端基團的側鏈上的功能基團或來制備，只要其保留藥用特性，即不破壞本文所述的hGH生物活性(即與hGH受體結合并啟動受體信號傳導的能力)，并且不會導致含有該衍生物的組合物出現毒性就可以包括在本發明中。衍生物可以帶有化學基團，例如碳水化合物或磷酸殘基，只要這樣的衍生物保留了hGH的生物活性和藥用特性。
例如，這些衍生物可以包括羧基的脂肪酯，通過與氨或者初級胺或次級胺反應形成的羧基的酰胺，氨基酸殘基的游離氨基與酰基(烷基或環碳芳基)形成的N酰基衍生物，以及游離羥基(如絲氨酸或蘇氨酸殘基的羥基)與酰基形成的O酰基衍生物。例如，這些衍生物可以包括能遮蔽抗原位點并且能延長分子在體內滯留期的聚乙二醇側鏈。
特別重要的生長激素是已被衍生化或者與絡合劑結合可以保存長時間。所以，本發明一優選實施例涉及聚乙二醇化人生長激素。經基因改造在體內長時間保持活性的生長激素也是hGH衍生物的例子，屬于本發明的范圍之內。
已經分離和鑒定了N-端被乙酰化的hGH(Lewis等，1979)。尚不清楚乙酰化是否起著調節作用，或者僅是純化過程的附帶現象。不過，可以預測，該分子表現的抗MSA活性與其它hGH衍生物相似。所以，本發明一優選實施例涉及N-端被乙酰化的人生長激素。
本發明的其它優選化學衍生物包括脫酰胺化hGH、一或多個甲硫氨酸殘基被磺化氧化的hGH。
較佳地，本發明的藥物包含人生長激素二聚體，選自通過鏈間二硫鍵連接的二硫化物二聚體、共價不可逆非的二硫化物二聚體、非共價二聚體，及其混合物。
本文的術語“鹽”是指羧基鹽和hGH分子及其類似物的氨基酸加成鹽。羧基鹽可以通過本領域已知的方式形成，包括有機鹽如鈉鹽、鈣鹽、銨鹽、鐵鹽或鋅鹽，以及類似的鹽，有機堿鹽如與氨(如三乙醇胺，精氨酸或賴氨酸，哌啶，普如卡因及類似物質)形成的鹽。酸加成鹽包括與礦酸如鹽酸或硫酸形成的鹽，與有機酸如醋酸或草酸形成的鹽。當然，所有這些鹽都必須保持本發明所需要的hGH的生物學活性，即與hGH受體結合并啟動受體信號傳導的能力。
本發明一優選實施例涉及人生長激素的片段。
本發明生長激素的“片段”指的是分子的保留所希望生物活性的任何部分，即短肽。將hGH分子其中一端的氨基酸除去，并測試剩余部分是否具有作為hGH受體激動劑的性質，可輕易制成片段。從多肽的N端或C端除去一個氨基酸的蛋白酶已為本領域所知，因此，確定片段是否保留了所希望的生物活性僅涉及常規技術。
較佳地，本發明的hGH片段可以含有內部缺失，只要該缺失不會影響到hGH的生物活性，即能夠與hGH受體結合并啟動其信號傳導。本發明優選的片段缺少從谷氨酸32到谷氨酸46的15個氨基酸。
hGH片段的C-端或N-端還可以被截短。缺少人生長激素前8個N-端殘基或前13個N-端殘基的hGH是本發明的優選片段。
美國專利US 5,869,452描述了保留hGH生物活性的短C-端hGH片段。所以，本發明優選使用hGH的C-端片段。根據本發明，至少含有hGH的氨基酸殘基177至191(LRIVQCRSVEGSCGF)的片段hGH177-191是特別優選的。其它優選的是該肽的衍生物，例如美國專利6,335,319或國際專利申請W099/12969中描述的肽突變體，譬如環肽。
另外，具有hGH受體激動劑活性的多肽，可以是hGH、其類似物或突變體、鹽、功能衍生物或片段，還可含有位于hGH多肽側邊的附加氨基酸殘基。只要得到的分子仍然保留了核心多肽的hGH受體激動劑能力，人們運用常規實驗即能確定任何的側翼殘基是否影響了核心肽的基本和新穎特性，即它的受體激動劑特性。
本發明優選使用的一個GH突變體例子是甲硫氨酰基人生長激素(Met-hGH)，它的人生長激素N-端有一個附加甲硫氨酸殘基。
本發明優選使用的hGH突變體包括甲硫氨酰基hGH，它是N-端帶有附加甲硫氨酸殘基的人生長激素。另一個優選突變體是缺少從Glu32到Glu46的15個氨基酸殘基的人生長激素。
本發明的人生長激素“突變體”是指與全長蛋白質或其片段基本上相似的分子。突變體也稱“突變蛋白”。例如，突變體可以是hGH的同種型，如通過變換剪接產生的突變體。運用本領域公知的方法以直接化學合成突變多肽也可方便地制成突變(多)肽。當然，突變人生長激素要至少具有與hGH相似的hGH受體結合和信號傳導啟動活性，因此，不會有與hGH相似的抗-MSA活性。
在編碼合成的人生長激素衍生物的DNA內產生突變，可形成人生長激素的氨基酸序列突變體。例如，這些突變體包括氨基酸序列內殘基的缺失，或者插入，或者替代。任何缺失、插入和替代都可以出現在最終構建體內，只要該最終構建體具有所希望的活性。顯然，在編碼突變肽的DNA內進行突變，必定不會改變讀框。
通過定點誘變(Adelman等作了實驗，1983)編碼肽分子的DNA內的核苷酸，可以在基因水平上制備這些突變體，由此產生編碼該突變體的DNA，然后在重組細胞培養基中表達DNA。突變體通常至少表現出與非突變肽相同的定性生物活性。
本發明的人生長激素“類似物”是指與全長分子或其活性片段基本上相似的非天然分子。本發明用的人生長激素類似物具有抗MSA活性。
根據本發明，在人生長激素內所作的替代類型可基于對不同種屬同源蛋白質之間氨基酸變化的頻率之分析。根據此分析，本發明將保守性替代限定為在以下五組中任一組內的替代I.小的脂肪族非極性或弱極性殘基Ala，Ser，Thr，Pro，GlyII.極性帶負荷的殘基及其酰胺Asp，Asn，Glu，GinIII.極性帶正荷的殘基His，Arg，LysIV.大的脂肪族非極性殘基Met，Leu，IIe，Val，CysV.大的芳香族殘基Phe，Try，Trp
在上述組內，以下替代被認為是“高度保守的”Asp/GluHis/Arg/LysPhe/Tyr/TrpMet/Leu/Ile/Val半保守替代定義為在上述組(I)-(IV)中任兩組之間的置換，上述組(I)-(IV)又分定為大組(A)，包括上述(I)、(II)和(III)，或者大組(B)，包括上述(IV)和(V)。替代不限于遺傳編碼或者甚至是天然存在的氨基酸。當要透過肽合成制備表位時，可以直接利用所希望的氨基酸。此外，使遺傳編碼氨基酸與有機衍生化試劑反應，該試劑能夠與選定側鏈或末端殘基反應，可以修飾該遺傳編碼氨基酸。
最常見的是半胱氨酰殘基與α-鹵代乙酸鹽(和相應的胺，例如氯乙酸或氯乙酰胺)反應，生成羧甲基或羧氨基甲基衍生物。半胱氨酰殘基也可以與以下化合物反應被衍生化溴三氟丙酮、α-溴-β-(5-咪唑酰基)丙酸、磷酸氯乙酯、N-烷基馬來酰亞胺、3-硝基-2-吡啶二硫化物、甲基-2-吡啶二硫化物、對氯苯甲酸汞、2-氯汞-4-硝基酚、或氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1，3-二唑。
組氨酰殘基與pH 5.5至7.0的二乙基焦碳酸酯反應而被衍生化，這是因為該試劑對組氨酰側鏈有相對特異性。也可采用對溴基溴化苯乙酮；反應最好在pH 6.0的0.1M二甲胂酸鈉中進行。
賴氨酰基和氨基末端殘基與琥珀酸或其它羧酸反應。用這些試劑進行衍生化可以產生使賴氨酰殘基的電荷改變的效應。其它使含α-氨基酸的殘基衍生化的適當試劑包括亞胺酯，例如甲基吡啶亞胺甲酯；磷酸吡哆醛；吡哆醛；氯代硼氫化物；三硝基苯磺酸；O-甲基異脲；2，4-丙烷二酮；以及與乙醛酸進行的轉氨酶催化反應。
與一或多種常規試劑(苯乙二醛、2，3-丁二酮和水合茚三酮)反應可修飾精氨酰殘基。精氨酸殘基的衍生化需要在堿性條件下進行反應，這是因為胍功能基團的pKa值很高。此外，這些試劑可與賴氨酸基團以及與精氨酸ε-氨基反應。
對酪氨酰殘基本身的特定修飾已經進行了廣泛研究，特別感興趣的是與芳香族重鹽化合物或者四硝基甲烷反應將光譜標記引入酪氨酰殘基中。最常見的是以N-乙酰基咪唑和四硝基甲烷分別形成O-乙酰基酪氨酰類和ε-硝基衍生物。
通過與碳二亞胺類(R′N-C-N-R′)反應，例如1-環己基-3-[2-嗎啉基-(4-乙基)]碳二亞胺或者1-乙基-3-(4-氮-4，4-二甲基苯基)碳二亞胺，選擇性地修飾羧基側基(天冬氨酰基或谷氨酰基)。另外，天冬氨酰殘基和谷氨酰殘基與銨離子反應，可轉化為天冬酰胺殘基和谷酰胺殘基。
天冬氨酰胺酰殘基和谷氨酰胺酰殘基通常被脫酰胺化為相應的天冬氨酰殘基和谷氨酰殘基。或者，這些殘基在溫和酸性條件下被脫酰胺化。這些殘基的各種形式都在本發明的范圍之內。
在蛋白質中產生氨基酸替代以用來制備本發明用的hGH類似物例如包括以下公知的方法步驟，譬如授予Mark等的美國專利RE 33,653；4,959,314；4,588,585和4,737,462；授予Koths等的美國專利5,116,943；授予Namen等的美國專利4,965,195；授予Lee等的美國專利5,017,691,以及美國專利4,904,584(Shaw等)描述的賴氨酸替代的蛋白質。此外，美國專利6,143,523(Cunningham等)已經描述了生長激素突變體。
在已知文獻，例如美國專利5,851,992；5,849,704；5,849,700；5,849,535；5,843,453；5,834,598；5,688,666；5,654,010；5,635,604；5,633,352；5,597,709；和5,534,617等文件中公開的全部生長激素類似物和模擬物都能夠與生長激素受體結合并啟動生長激素受體的信號傳導，它們都可用在本發明中。
較佳地，hGH突變體或類似物帶有核心序列，該核心序列與天然序列或其生物活性片段相同，它的氨基酸序列與天然氨基酸序列至少有70％的同一性，并保留了其生物活性。更好的是，該序列至少有80％、90％的同一性，最好的是與天然序列至少有95％的同一性。
通過比較確定的“同一性”反映了兩個或多個多肽序列或聚核苷酸序列之間的關系。一般來說，同一性是指在所比較的序列長度上兩個聚核苷酸的核苷酸對核苷酸的精確性，或兩個多肽序列的氨基酸對氨基酸的精確性。
對于不是精確一致的序列來說可以確定其“％同一性”。通常情況下將所要比較的兩個序列排列在一起來得出兩個序列之間的最大相關性。可以通過在一個或兩個序列上插入“空格”來增加排列的整齊程度。％同一性可以在所比較的每一序列的全長上確定(所謂的通用排列)，這種排列方法特別適于長度一致或很接近的序列，或者在較短的特定的長度上確定(所謂的局部排列)，這種排列方法比較適于長度不同的序列。
比較兩個或多個序列同一性和同源性的方法是本領域所熟知的。因此Wisconsin序列分析軟件包，9.1版(Devereux J等，1984)中的程序如BESTFIT和GAP可用于確定兩個多聚核苷酸的％同一性和兩個多肽序列的％同一性及％同源性。BESTFIT利用的是Smith和Waterman(1981)的“局部同源性”算法，找出兩個序列之間的最簡單區域的相似性。其它確定序列同一性和/或相似性的程序也是本領域所熟知的，如BLAST家族的程序(Altschul SF等，1990，Altschul SF等，1997，可以通過NCBI的主頁查到，網址是www.ncbi.nlm.nih.gov)和FASTA(Pearson WR 1990；Pearson 1988)。
根據本發明突變體優選的變化是已知的“保守替代”。生長激素或蛋白質多肽的保守氨基酸替代可以包括同組氨基酸內的同義氨基酸替代，同組氨基酸內的氨基酸具有相似的物理化學性質，其成員之間的替代可以保持分子的生物學功能(Grantham，1974)。現在已經清楚氨基酸的插入和缺失也可以在預先確定的序列上進行而不改變蛋白質的功能，特別是插入或缺失的只是少量氨基酸，如30個以內，優選10個以內，以及不刪除或替換維持功能的關鍵氨基酸，如半胱氨酸殘基。通過這種缺失和/或插入得到的蛋白質和突變體也包括在本發明的范圍之內。
本發明的類似物或突變體也可通過以下程序確定。現有技術已經知道了天然序列的DNA，可在文獻中找到(Martial等，1979)。由任何核酸如DNA或RNA(其中該核酸在溫和的或嚴謹的條件下能與天然DNA或RNA的補體雜交)編碼的多肽都被考慮在本發明的范圍之內，只要該多肽保留了天然序列的生物性質。
嚴謹的條件是雜交實驗所使用溫度、一價陽離子摩爾濃度和雜交溶液中甲酰胺百分比的函數。為了測定任何給定一組條件的嚴謹程序，首先采用Meinkoth等(1984)的公式計算有100％同一性的雜交物穩定性，以DNA-DNA雜交物的熔化溫度Tm表示Tm＝81.5℃+16.6(LogM)+0.41(％GC)-0.61(％form)-500/L其中，M是一價陽離子的摩爾濃度，％GC是DNA中G和C核苷酸的百分比，％form是雜交溶液中甲酰胺的百分比，而L是堿基對中雜交物的長度。Tm與根據100％同一性的雜交物計算的溫度相比每降低1℃，可允許的錯配數量增大約1％。所以，如果任一給定雜交實驗中在特定的鹽和甲酰胺濃度下Tm比根據Meinkoth公式計算出的100％同一性雜交物的溫度Tm低10℃，即使錯配率高達約10％，仍會發生雜交。
此處所指的高度嚴謹雜交條件指的是容許最多約15％序列趨異率的條件，而溫和嚴謹雜交條件指的是容許最多約20％序列趨異率的條件。不起限制作用，高度(低于雜交Tm計算值12-15℃)和溫和(低于雜交Tm計算值15-20℃)嚴謹條件是在低于雜交Tm計算值的適當溫度下采用2×SSC(標準檸檬酸鹽鹽水溶液)和0.5％SD溶液。最終條件的嚴謹性主要由于洗滌條件，特別是當采用的雜交條件允許穩定性差的雜交物與穩定性好的雜交物一起形成的時候。然后，使用高度嚴謹的洗滌條件除去穩定性較差的雜交物。與上述的高度嚴謹至溫和嚴謹洗滌條件一起使用的常見雜交條件是含有6XSSC(或6XSSPE)、5XDenhardt′s試劑、0.5％SDS、100μg/ml變性鮭魚精子DNA片段的溶液，溫度低于Tm約20至25℃。如果用混和探針，優選用四甲基氯化銨(TMAC)代替SSC(Ausubel，1987-1998)。
本發明還提供制造人生長激素衍生物的重組方法，這些衍生物也可通過常規蛋白質合成方法制造，而這些合成方法已經為本領域技術人員所知。
人生長激素、或其片段、突變體、類似物或功能衍生物或鹽可以各種劑量給藥。
在一優選實施例中，生長激素以每人約0.1至10mg的日劑量或每人約0.5至6mg的日劑量給藥。
在另一優選實施例中，生長激素以每人約1mg的日劑量給藥。
在又一優選實施例中，生長激素每日或每隔一日給藥。
根據本發明，生長激素也可以交替日劑量的方式給藥，第一次劑量比第二次劑量高。較佳地，第一次劑量是每人約1mg，第二次劑量是每人約0.5mg。
在本發明再一優選實施例中，生長激素的每周劑量是每人約6mg或每人約5mg或每人約4.5mg。
本發明生長激素治療的實施可通過給予外源性生長激素，或者給予一種物質，該物質能抑制內源性生長抑素(somatostatin)的分泌來直接或間接刺激內源性生長激素產生。
所以，在本發明一優選實施例中，與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質被用來制備治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物，所述物質選自(a)人生長素釋放激素(hGHRH)；(b)(a)的對hGHRH受體有激動劑活性的片段；(c)(a)或(b)的突變體，該突變體的序列與(a)或(b)至少有70％的同一性并且對hGHRH受體有激動劑活性；(d)(a)或(b)的突變體，該突變體是由在溫和條件下能與編碼(a)或(b)的天然DNA序列的互補序列雜交的DNA序列編碼的并且對hGHRH受體有激動劑活性；或者(e)(a)、(b)、(c)或(d)的對hGHRH受體有激動劑活性的鹽或功能衍生物。
已經知道，人生長素釋放激素(hGHRH)刺激hGH釋放。所以，給予GHRH或其保留了GHRH生物活性(即刺激生長激素釋放的能力)的功能衍生物、鹽、突變體、類似物或片段，都能間接地獲得hGH的生物活性。所以，例如除了GHRH之外，也可使用符合上述定義的GHRH功能衍生物、具有與GHRH至少70％序列同一性，更好80％或90％同一性，或者最好95％同一性但仍保留了GHRH生物活性的GHRH類似物或突變體、或者突變體或類似物，該突變體或類似物是由DNA編碼的多肽，所述DNA在溫和嚴謹條件或者最好在高度嚴謹條件下與編碼GHRH的天然DNA雜交，所述這些都符合上述給出的定義。
在本發明一優選實施例中，hGH或GHRH的功能衍生物、或其任何活性片段、突變體或類似物，包含至少一連接于一個或多個官能基團的部分，所述官能基團以氨基酸殘基上一個或多個側鏈的形式出現。優選聚乙二醇(PEG)連接。可用在本發明的優選的PEG化GHRH(也叫GRF)分子例如已在WO99/27897中有描述。還可對本發明的物質進行烷基化，以延長停留在體內的半衰期。
本發明特別優選采用長效制劑，例如活性物質半衰期(TH)超過30小時的制劑。
文獻中公開的能刺激生長激素釋放的任何GHRH或者GHRH類似物或激動劑都可應用于本發明，例如美國專利5,792,747；5,776,901；5,696,089；5,137,872；5,767,085；5,612,470；5,846,936；和5,847,066公開的那些。也可參見Thorner等(1997)，Felix等(1995)，Alba-Roth等(1988)，Friend等(1997)。
能夠促進生長激素體內釋放的其它物質而又可用在本發明中的包括美國專利5,807,985；5,804,578；5,795,957；5,777,112；5,767,118；5,731,317；5,726,319；5,726,307；5,721,251；5,721,250，等等公開的那些。
與hGH受體結合并啟動該受體信號傳導的任何其它分子也可應用于本發明。例如，已經研制了小分子(有時也叫促分泌劑)，它們能夠與hGH受體結合，導致它們降解，并啟動信號傳導，其中信號啟動與使用能結合該受體的天然hGH得到的相同。這樣的分子是已知的，例如可從美國專利5,773,441；5,798,337；5,830,433；5,767,124；以及5,723,616獲知。也可參見Bowers等(1991)，Thorner等(1997)，Camanni等(1998)，Smith等(1993)和Ghigo等(1998)。
所以，本發明包括與hGH受體結合并啟動該受體信號傳導，在治療帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥方面獲得與給予天然hGH相同的最終定性效果的任何物質。
眾所周知，胰島素樣生長因子(IGF)屬于生長激素的信號傳導級聯。目前為止對兩個IGF(稱作IGF-I和IGF-II)進行了描述。IGF-1介導大部分GH的促生長活動。IGF-1是一種強效促有絲分裂生長因子，與胰島素原有很高的同源性。它與特異性受體結合，后者又以較低的親和力與胰島素結合。GH刺激IGF-1產生的主要部位是肝臟，而多個肝外組織也合成IGF-1。IGF-1通過負反饋調節來調節GH基因表達和分泌，與通過甲狀腺和腎上腺激素抑制各自的垂體營養激素相似。
所以，本發明還涉及IGF(胰島素樣生長因子)在制備治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途。較佳地，IGF選自IGF-I或IGF-II。
業已知道，IGF與特異性結合蛋白形成復合物，稱作IGF結合蛋白(IGFBP)。有人指出，這些結合蛋白具有四種功能，包括在脈管系統和十字形完整毛細管膜中運送IGF，使IGF定位在特異性組織和細胞類型上，控制IGF與細胞表面受體的相互作用，以及調節IGF的生物作用(Clemmons等，1993)。具體地說，胰島素樣生長因子(IGF)-結合蛋白-3(IGFBP-3)是IGF循環水平的主要決定因子，在臨床上用于評價GH缺乏癥以及用于預測對GH治療的反應。
所以，本發明一優選實施例的藥物還包含IGFBP。較佳地，IGFBP是IGFBP-3。
IGF-I、IGF-II、IGFBP與人生長激素或GHRH，或者它們的片段、突變體、功能衍生物或鹽的組合用來治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥，屬于本發明的范圍之內。這些物質可相繼、分開或同時使用。
本發明還涉及核酸分子在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中該核酸分子含有能與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者能刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質的編碼序列。
該核酸分子還可以包含表達載體的序列，例如以基因療法來給予本發明的hGH。
較佳地，本發明的藥物通過皮下途徑給予。
通過肌肉注射給予藥物也是優選的。
在另一優選實施例中，以自動注射器給予藥物。自動注射器是有利于皮下給予藥物的設備。自動注射器已為本領域所知，例如商品名為Easyject的那些，特別適用于hGH的給藥。本發明也可采用本領域公知的特殊設備而使用無針頭給藥方式。
本發明還涉及一種載體在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中所述載體能誘導和/或增加內源性產生能與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者能刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
載體可含有在需要表達本發明物質的細胞內發揮功能調節組件。這些調節序列或組件可以是例如啟動子或增強子。將調節序列通過同源重組插入到基因組的適當位點，使調節序列與要誘導或要增強表達的基因操作性相連。該技術通常被稱為“內源性的基因活化(EGA)”，見WO91/09955的描述。
本發明還涉及一種細胞在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中所述細胞經過基因改造產生能與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者能刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
本發明還涉及治療帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的方法，該方法包括把有效量的與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH的釋放或加強內源性hGH的活性的物質給予有需要的病人。
根據本發明給予的藥物組合物可含有至少一種藥用形式的本發明的人生長激素，還可以選擇添加藥用載體、賦形劑、穩定劑或輔助劑。
這些組合物可以能達到它們預定目的的任何方式給予。給予本發明組合物的數量和方案由本領域治療帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的一般技術人員輕易地確定。
本發明范圍的組合物包括全部含有至少一種本發明的人生長激素或衍生物、類似物或突變體，其有效量能達到其預定目的。不同個體的需要是可變的，本領域技術人員能夠確定每種組分有效量的最佳范圍。典型的日劑量包括約0.001至約0.1mg/kg體重。當給予MSA病人時，實施hGH抗-MSA療法時可伴隨該疾病需要的其它療法。
在本發明一優選實施例中，hGH的日劑量是約0.1至10mg或者約0.5至6mg。另一個優選日劑量是每人約1mg人生長激素。
在一優選實施例中，hGH以交替劑量的方式給藥，第一次劑量比第二次劑量高。較佳地，第一次劑量約1mg，第二次劑量約0.5mg。根據病人需要，hGH的每周劑量最好約6mg或約5mg或約4.5mg。
例如，給藥可以是腸胃外給藥方式，譬如皮下、靜脈內、肌肉內、口服、腹腔內、氣溶膠、經皮、鞘內、或直腸內給藥途徑。給藥劑量取決于接受者的年齡、健康狀況和體重、過往或當前治療的類型、治療的頻率及所要達到的效果。
本發明優選的給藥途徑是皮下注射和肌內注射。更優選的給藥途徑是口服。藥物治療應當理解，所提供的治療方案在實際應用時并不是絕對的，只要有臨床價值就足夠了。如果其它藥物對特定個體是無效的，而有一種治療效果比競爭藥物低的藥物，若可以與其它藥物聯用能夠增強整體治療水平，或者它比其它競爭藥物更安全，那么該藥物是值得考慮的。
應當理解，本發明組合物的合適劑量取決于接受者的年齡、健康狀況、體重、當前的治療措施、治療的頻率及所要達到的效果。不過，最優選的劑量可視特定受試者而定，而最優劑量由領域技術人員確定，無需進行過多實驗。一般包括對標準劑量進行調節，例如，若病人體重較輕，可減少劑量。
每次治療所需的總劑量可分多次給予或者單次給予。組合物可單獨給予或者結合針對該疾病或其癥狀的其它治療藥物一起給予。
除了本發明的化合物外，藥物組合物可含有適當的藥用載體(如賦形劑、運載體和/或輔助劑)，以有利于將活性化合物加工成藥用制劑。
根據到目前所描述的全部發明內容，本領域技術人員在不需要額外實驗及不背離本發明的精神和范圍的前提下可以在寬范圍的等效參數、濃度和條件內實施本發明。
雖然結合特定實施方式闡述了本發明，應理解，還可以對本發明作修改。本申請包含根據本發明的原則，包括本發明沒有描述的內容但已為本發明所屬領域所知或習慣常識以及可應用于所附權利要求書范圍內陳述的必要特征，而對本發明所作的任何變化、用途或適應性改動。
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及文字。另外，本文所引用參老文獻內的完整內容也被全部納入本文作為參考。
對已知方法步驟、常規方法步驟、已知方法或常規步驟的參考并不是表示承認本發明的的任何方面、任何描述或實施方式在相關領域內被包括、被指導或被建議。
前面對具體實例的描述對本發明的普遍本質作了如此全面的披露，以致于其它人可以通過運用本領域技能內的知識(包括本文所引用的參考文獻的內容)，在沒有過分試驗的情況下，在不脫離本發明的總體概念的情況下，很容易地修改或變動這些具體實例以便用于各種應用。因此，基于本文所給的教導和指導，這些變動和修改被認為被包括在所公開的實施例的等價范疇內。應理解，本文的措詞或術語是為了描述而非用于限制，所以本說明書的術語或措詞應由熟練技術人員，根據本文所給的教導和指導并結合本技術領域一般技術人員的知識，作出解釋。
根據到目前所描述的發明內容，可以很容易地理解下面的示范性臨床研究實施例，這些實施例是以說明的方式來提供的，并不意味著對本發明進行限定。
實施例縮寫清單AE 不良事件AST天冬氨酸轉氨酶ALT丙氨酸轉氨酶CNS中樞神經系統CPMP 專賣醫藥產品委員會CRA臨床研究專員CRF病例報告表CSF腦脊髓液DER藥物事件報告(表)FDA食品和藥品管理局(US)GCP良好臨床操作規范GFAP 膠質細胞纖維酸蛋白質GH 生長激素GHD生長激素缺乏GLP良好實驗室操作規范hCG人絨毛膜促性腺激素5-HIAA 5-羥基吲哚乙酸HVA高香草酸ICH國際醫藥法規協合會IEC獨立倫理委員會IGF-1 胰島素樣生長因子1IGFBP-3胰島素樣生長因子結合蛋白3
IRB 機構審查委員會IU 國際單位IV 靜脈內L-DOPA 左旋多巴LTP 長時程增強MG 毫克MRA 醫學研究專員MSA 多系統萎縮癥NFL 神經纖絲蛋白NHP 諾丁漢健康調查表PLM 姿勢-運動手動試驗r-hGH 重組人生長激素RNA 核糖核酸SAE 嚴重不良事件TD 治療主管TPN 腸胃外營養總量UPDRS 帕金森氏病統一評分量表WHO 世界衛生組織研究大綱題目皮下給予重組人生長激素(r-hGH)治療多系統萎縮癥(MSA)的二期、單中心、雙盲、隨機、安慰劑對照研究項目階段二期病癥多系統萎縮癥主要目標1)實驗室通過分析腦脊髓液中神經退化標記物膠質細胞纖維酸蛋白質(GFAP)和神經纖絲蛋白(NFL)來測定r-hGH的治療效果(Holmberg等，1998)。
2)臨床(a)與安慰劑組相比的穩定性，以帕金森氏病統一評分量表測量的功能評價進行比較(見下文)；(b)與安慰劑組相比的穩定性，以自主神經試驗結果進行比較。
次要目標(a)評價此病人群體的r-hGH安全性和耐受性；(b)用姿勢-運動手動試驗(PLM)檢測不同組別之間疾病進展的任何差別；(c)用諾丁漢健康調查表(NHP)測定生活素質的改善(見下文)樣品大小40名可評價的病人研究藥物Saizen[重組人生長激素(r-hGH)]治療方案每周三次，每次1mg，連續12個月(若病人的病情極為嚴重，在6個月時可增大劑量，交替注射日劑量1mg和0.5mg)。
給藥途徑皮下程序在納入本研究之前，病人需先完成臨床上是否很有可能是MSA的診斷標準。將會有6次隨訪，分別在研究前評價、研究第1天、研究第3、6、9和12個月。在研究前的評估、第6個月和第12個月分析腦脊髓液的GFAP和NFL。在研究第1天、第6個月和第12個月，病人被要求完成NHP問卷調查，用UPDRS評估他們的功能性，并進行自主神經試驗。
除了以下提到的特定程序之外，還通過常規的臨床跟進、常規的血液學、臨床化學以及尿分析來獲得安全性和功效性數據。
目標本研究的目標是主要目標●實驗室通過分析腦脊髓液中神經退化標記物膠質細胞纖維酸蛋白質(GFAP)和神經纖絲蛋白(NFL)來測定r-hGH的治療效果(Holmberg等，1998)。即，接受r-hGH的病人中GFAP和NFL的穩定性以及安慰劑組中作為連續降解跡象的這些標記物的增量。
●臨床
■與安慰劑組相比的穩定性，以帕金森氏病統一評分量表測量的功能評價進行比較(見下文).；■與安慰劑組相比的穩定性，對自主神經試驗結果進行比較(見附錄1)。次要目標●評價此病人群體的r-hGH安全性和耐受性；●用姿勢-運動手動試驗(PLM)檢測不同組別之間疾病進展的任何差別(見下文)；●用諾丁漢健康調查表(NHP)測定生活素質的改善(見下文)。
研究群體本研究包括40名病人。每個病人必須●在特定時間框架內符合以下章節規定的全部入選和排除標準，●接受指定的療程并完成本方案訂明的所要求的活動，以及●完成他或她的病例報告表(CRF)，接受并按贊助者要求的標準回答了全部問題。
入選標準要符合本研究的入選資格，每個病人必須在研究第1天之前28日內完成下列標準1)完成臨床上很可能有MSA的診斷標準(見下文)，2)預期壽命至少有一年，3)年齡應該在30至75歲之間，4)在研究期間愿意并能夠遵循本方案，5)在進行任何與研究有關的程序而不屬于病人正常醫療保健的一部分之前，簽署書面同意書，明白病人可在任何時間退出本研究，對將來的醫療保健無任何損害，6)女病人必須(a)絕經期后或經外科消毒，或(b)在本研究期間采用激素避孕、子宮內裝置、殺精子劑膜或殺精子劑避孕套，和(c)必須沒有懷孕或不能正在哺乳。
確認女病人沒有懷孕必須在研究第1天前的28日篩選期內通過陰性血清/尿hCG懷孕測試來確定。如果病人是絕經期后或經外科消毒的，不必進行懷孕測試。
排除標準符合以下任一標準的病人將會排除在本研究之外1.臨床顯示血液或腦脊髓液伴隨有感染或炎癥疾病；2.血清肌氨酸酐、AST或ALT≥2.5x正常范圍上限值(這些數值不能超出研究第1天之前1個月)；3.有或者曾經有糖尿病(I型或II型)；4.有或者曾經有任何活躍的惡性病；5.甲狀腺機能減退(除非經甲狀腺激素替代療法充分治療后)；6.良性顱高壓；7.曾有腕管綜合癥病史，但沒有經過外科治療；8.因為非惡性器官或者系統性疾病或者明顯的癌癥副作用而有較低醫療風險的病人不符合條件。臨床上有明顯心臟疾病(即定義的心臟癥狀明顯受限，需要額外休息以控制癥狀)的病人不符合條件；9.在進行實驗前3個月內已經進行了另一項試驗性藥物或者參與了任何一項實驗程序；10.曾經對r-hGH過敏；11.曾經用r-hGH治療。
病人數目和治療組的分配本研究以40名病人為研究對象，他們將以雙盲方式隨機接受皮下注射SAIZEN或安慰劑1mg，持續12個月(若病人的病情極為嚴重，在6個月時可增大劑量，交替注射日劑量1mg和0.5mg)。對每個病人實施的治療方案由計算機產生的隨機清單決定。病人用具袋和密封小瓶都加上病人獨有的識別號碼。
當發現病人符合本研究的標準并完成全部研究前程序，就會按在研究第1天完成全部基線評價后按年月日順序連續地給他/她分配一個獨有的識別號碼。分配病人號碼之前，全部病人都應以他們的首個大寫字母和出生日期識別。一旦病人在隨機選擇后退出本研究，他或她的識別號碼將不再重新分配。用藥研究成品規格、制備、儲存和標簽本研究采用的藥物(SAIZEN或安慰劑)由Serono提供，為裝在玻璃小瓶內的多劑制劑，含有24IU(8.8mg)r-hGH加上賦形劑(蔗糖、磷酸85％和用磷酸85％稀釋的磷酸或氫氧化鈉)，或者為僅含有賦形劑的相匹配的安慰劑玻璃小瓶。重構溶劑裝在注射筒內，含有在注射用水中的Metac resol 0.3％(w/v)。
一小瓶研究藥物與1.51ml稀釋劑重構。本研究采用Easyiect自動注射器，與重構試劑盒和針頭一起提供給病人。
凍干產物在25℃或以下的溫度下貯存，避免與光接觸。所有研究的藥物都貯存在安全的地方，最好貯于鎖緊的可控溫度的冷藏柜或冷凍房間內。研究藥物只能由研究人員、配藥員或適當時候由經研究人員授權的特別職員發放。與推薦儲存條件有任何偏離都應立即向贊助者報告，并且中斷使用這種研究藥物，直至贊助者授權繼續使用。
一旦藥物用滅菌稀釋劑重構后，都應當貯存在2℃至8℃(36至46)之間，并在21日內使用。
標簽和包裝要符合當地有關規定。
研究藥物給藥的劑量、途徑和進度每個病人最好在睡覺時接受一次皮下注射，每周三次(最好安排在星期一、星期三和星期五)，劑量為1mg，持續12個月。不過，如果在第6個月隨訪時病人在下述任一臨床癥狀或結果明顯變差，可增大劑量為交替注射，交替日劑量為1mg和0.5mg。
●構音困難、吞咽困難、局部麻痹、協調性、僵硬、平衡、行走能力、尿失禁或性功能變差；●腦脊髓液的NFL水平上升；
●心血管反射試驗結果更差。
注射位置應在腹、手臂和腿之間轉換。由研究人員酌情，教導病人或其家人/配偶施行注射。
要求病人在每日記錄卡上記錄注射時間、注射數量以及任何局部或系統的不良事件。
合并治療在本研究期間不允許使用抗凝血藥物處理(阿斯匹林除外)。
除了上述例外，出于對病人健康需要，并且不影響本研究藥物的效果的情況下，可由研究人員酌情給予任何用藥。所有合并治療給予的藥物與給藥劑量信息、途徑、給藥日期和原因必須在病例報告表的適當位置上記錄在案。另外，在研究期間進行的任何非計劃內的診斷、治療和外科程序(包括這些程序的日期、跡象和說明及其結果)也必須在病例報告表的合并程序部分上記錄在案。
使用任何植物/天然產物或其它“民間療法”、維生素、營養補充物和其它所有合并用藥都必須如常規藥物那樣記錄在病例報告表中。
因為這是一項非住院研究，所以要求病人在每日記錄卡上記錄自行用藥的詳細情況。
知情同意書每個有可能符合條件的病人都被告知本研究的目標和全部要求。在進行研究前的測試(這些測試一般不會在病人常規治療過程中進行)之前，研究人員利用病人資料小冊子/知情同意書將向病人完整地解釋本研究。如果病人愿意參與本研究，在病人經過充分時間考慮決定參與以及查詢詳情后，被要求簽署知情同意書。知情同意書由病人和研究人員/副研究人員共同簽署和親自寫上日期。病人保留一份簽署后的知情同意書副本，正本保存在原始資料文件中。雖然護理人員可向病人闡釋該試驗，但研究人員/副研究人員必須參加與病人的討論，并且必須在知情同意書上簽署和親自寫上日期。
簽署了知情同意書但隨后又不參與本研究的全部病人都要填寫一份簡短病例報告表。這些病人除了記錄他們的種族、性別和退出本研究的原因外，還要加上他們的首個大寫字母和出生日期。
研究前評價在研究第1天(即第一次注射r-hGH那天)前28日內，必須對病人進行評價以確定他們是否適合本研究。此評價應包括●醫學評審和醫學病史，足夠符合入選和排除標準(應提供實驗結果，以滿足排除標準2，即肌氨酸酐、AST/ALT)。
●進行腰椎穿刺，抽取腦脊髓液樣品。把該樣品送往當地實驗室分析GFAP和NFL水平。
研究第1天在研究第1天進行第一次注射r-hGH之前，收集/進行和記錄下列基線數據和評價結果。它們包括●與MSA無關的全部醫學病史；●所要研究的病癥史，包括診斷日期、(若知道的話)亞型和過往治療；●收集人口數據，包括出生日期、種族和性別；●身體檢查，包括體重和生命體征；●與當前疾病相關的醫學癥狀、合并用藥情況和程序；●常規血液學、臨床化學、內分泌學、尿分析和hGH抗體；●要求病人完成諾丁漢健康調查表關于生活質量的問卷調查(見下文)。研究人員或研究護理員就此方面向病人解釋；●研究人員通過帕金森病統一評分量表(UPDRS)來評價病人的功能能力(見下文)；●研究人員按下述方法進行姿勢-運動手動試驗(PLM)。
●研究人員進行自主神經試驗(控制性強迫呼吸的心率變化、血壓和對傾斜的心率反應)。
研究第3個月在研究第3個月月尾進行以下程序(預定隨防前后一個星期以內)●身體檢查，包括生命體征；
●不良事件、合并用藥情況和程序的評價；●常規血液學、臨床化學和尿分析；研究第6個月在研究第6個月月尾進行以下程序(預定隨防前后一個星期以內)●身體檢查，包括生命體征；●常規血液學、臨床化學、內分泌學、尿分析和hGH抗體；●不良事件、合并用藥情況和程序的評價；●進行腰椎穿刺，抽取腦脊髓液樣品。把該樣品送往當地實驗室分析GFAP和NFL水平；●要求病人完成諾丁漢健康調查表關于生活質量的問卷調查(見下文)。研究人員或研究護理員就此方面向病人解釋；●研究人員通過帕金森病統一評分量表(UPDRS)來評價病人的功能能力；●研究人員進行自主神經試驗(控制性強迫呼吸的心率變化、血壓和對傾斜的心率反應)。
如果病人在下述任一臨床癥狀或結果明顯變差，可增大劑量為交替注射，交替日劑量為1mg和0.5mg。
●構音困難、吞咽困難、局部麻痹、協調性、僵硬、平衡、行走能力、尿失禁或性功能變差；●腦脊髓液的NFL水平上升；●心血管反射試驗結果更差。
研究第9個月在研究第9個月月尾進行以下程序(預定隨防前后一個星期以內)●身體檢查，包括生命體征；●不良事件、合并用藥情況和程序的評價；●常規血液學、臨床化學和尿分析；研究第12個月(或隨后退出)在研究第12個月尾進行以下程序(預定隨防前后一個星期以內)，即用r-hGH治療結束時，或者病人退出本研究之前●身體檢查，包括生命體征；●常規血液學、臨床化學、內分泌學、尿分析和hGH抗體；●不良事件、合并用藥情況和程序的評價；●進行腰椎穿刺，抽取腦脊髓液樣品。把該樣品送往當地實驗室分析GFAP和NFL水平；●要求病人完成諾丁漢健康調查表關于生活質量的問卷調查(見下文)。研究人員或研究護理員就此方面向病人解釋；●研究人員通過帕金森病統一評分量表(UPDRS)來評價病人的功能能力；●進行姿勢-運動手動試驗(PLM)。
●進行自主神經試驗(控制性強迫呼吸的心率變化、血壓和對傾斜的心率反應)。
若持續出現不良事件，例如臨床上發現明顯的實驗異常，應該更頻繁地重復適當的安全性評價，和/或當出現臨床跡象時(或者由研究人員酌情)進行額外試驗直至問題解決，或者從給予最后一劑研究藥物后經過30天，以時間短的為準。
提前中斷研究和替換政策中斷標準告知病人他們有權在任何時間退出本研究，對其醫療護理無任何損害，而且他們無需陳述理由。所有退出都必須完整地記錄在CRF中，由研究人員跟進。
另外，如果認為退出研究對病人最有利，研究人員可以讓該病人退出。
在本研究的整個過程中，基于以下原因必須中斷對病人的研究●研究人員認為由于使用本研究藥物而導致(修正后)WHO三級或四級中毒。基于以下原因可以中斷對病人的研究●進入深切治療部治療；●違反研究方案，包括不配合和錯過了跟進；●嚴重并發癥或并發癥明顯加重；●不良事件；或
●行政管理原因。
如果病人無法回來復診或跟進，應該嘗試聯絡病人以確保不回來的原因不是由不良事件引起。同樣，如果病人例如以個人理由決定中斷研究，應該嘗試弄清楚真正的原因并非不良事件(應該記住病人沒有義務陳述中斷研究的理由)。
若研究藥物治療被提早中斷，必須在CRF的適當部分記錄中斷研究的主要原因，并且盡力完整透徹地填寫意見和報告。按照第6.7節所述的方法，在病人退出后完成最后評估。應該跟進任何不良事件，直到不良事件得到消除，或者直到給予最后一劑研究藥物后經過30天，以時間短的為準。
替換政策假如病人放棄或退出本研究，他或她的號碼將不再分配。因為需要40名可評價病人來評價本研究，所以必須替換所有不符合條件的病人(不滿足入選標準而錯誤地包括在內的病人)。
不良事件報告定義不良事件(AE)定義為發生在被給予藥學產品的病人或臨床研究受試者上任何不利的醫學復發，不一定是由該治療引起的。因此，不良事件可以是任何不利和非預期出現的表象(包括異常的實驗結果)、癥狀或者與使用醫學(研究中)產品的時間有關聯的疾病，而不論是否與該醫學(研究中)產品有關。報告在臨床研究過程中符合上述定義的所有不良事件以及任何嚴重的不良事件，需要記錄在CRF的適當部分中。重要的是，這包括不良事件持續的時間(發作及消除日期)、嚴重程度、與藥物的關系(可能的、很可能的、不太可能的---見下文)、頻率以及任何伴隨的治療(或者其它給合實施的措施)。
很可能的(probable)在給予藥物后一段合理時間內發生的包括實驗測試異常在內的臨床事件，不太可能用并發疾病或者其它藥物或化學物來解釋，停藥(停止攻擊)后出現臨床合理的反應。符合此定義的不需要重新攻擊的信息。
可能的(possible)在給予藥物后一段合理時間內發生的包括實驗測試異常在內的臨床事件，并發疾病或者其它藥物或化學物也可能造成這樣的結果。有關停藥的信息可以不填寫或模糊。
不太可能的(unlikely)包括實驗測試異常在內的臨床事件，時間上與藥物給予有關，但不太可能有因果關系，由其它藥物、化學物或潛在疾病也可以作出合理的解釋。
不良事件的嚴重性根據修正的WHO毒性等級表來分級。如果發生的不良事件不在這些標準的清單內，研究人員可以用以下定義來評價它的嚴重性輕度病人明白該事件或癥狀，但該事件或癥狀較容易忍受。
中度病人的不適足以影響或減低他或她的日常活動能力。
重度機能嚴重受損病人無法進行日常活動。
有生命危險的不良事件危及病人生命。
不良事件數據來自病人自愿提供的任何信息或者通過向病人查詢。另外，使用每日記錄卡也可以獲取不良事件數據。
嚴重不良事件嚴重不良事件(SAE)定義為任何不利的醫學復發，以任何劑量該復發●導致死亡；●有生命危險(即病人在不良事件發生時有可能死亡。這不包括如果不良事件加重而假設可能引致死亡的事件)；●導致住院或住院時間延長；●導致永久或重度殘廢或喪失活動能力；●是先天性異常或出生缺陷；或者●是另一種嚴重醫學病癥(即該種病癥可能沒有即時生命危險或者即時導致死亡或住院，但明顯有重大臨床意義。它可能危及病人，或者可能需要介入以防止其它任一嚴重后果。這些事件的例子是在急癥室或家中(不致住院)對過敏性支氣管痙攣、血液惡質病或驚厥進行深切治療，或者發展為藥物依賴或藥物濫用。)
臨床實驗參數常規血液學臨床化學血紅蛋白鈉紅細胞壓積 鉀紅細胞計數 尿素白細胞計數 肌氨酸酐嗜中性細胞1總膽紅素淋巴細胞1總蛋白質單核細胞1鈣嗜曙紅細胞1AST(SGOT)和/或ALT(SGPT)嗜堿性細胞1堿性磷酸酶血小板 葡萄糖紅細胞沉降速率1內分泌學電泳1自由甲狀腺素(FT4)尿分析(浸漬片)促甲狀腺素(甲狀腺刺激素TSH)蛋白質 皮質醇葡萄糖 睪丸激素(男性)酮類卵泡刺激素(FSH)PH 黃體生成激素(LH)血液生長激素(GH)胰島素樣生長因子I(IGF-1)胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)胰島素生長激素抗體1這些試驗僅在基線隨訪時進行所有上述試驗都將按照以下研究進度所述的頻率進行。
收集血液樣品和血清制備當地實驗室程序血液學、血液化學、內分泌學抽取30ml血液(6支血清試管，每支4ml，3支血漿EDTA試管，每支3ml)。按照常規醫院程序在實驗室分析樣品的血紅蛋白、白細胞、血小板、分化(differentials)和葡萄糖。所有其它樣品80℃儲存于Sahigrenska醫院內，直至檢測分析。
全部的分析都在Sahigrenska大學醫院的實驗室內進行。
收集血清樣品以分析抗GH抗體采用不含抗凝血劑的試管，以實驗計劃所示的時間間隔(見下文)收集2個5ml血液樣品。所有血清樣品標上病人識別號碼和病人首個字母、血液樣品的收集日期和時間。可在方便的時間(即沒有規定任何時間，但需在本研究時間內)收集樣品，但必須記錄收集樣品的精確時間和日期。在CRF中必須記錄收集樣品之前給予r-hGH劑量的精確時間。
抽取8ml血液注入一個采血管內，在冷凍機內凝結(最長時間為30分鐘)制備血清。室溫下3500RPM離心10分鐘(參照制造商說明)，收集血清，分為4等分試樣，每等分試樣是1ml。立即在-20℃或以下冷凍樣品直至裝運。其中一等分試樣將被送至(冷凍狀態)中心實驗室，其余三等分試樣將在研究地點儲存于-20℃或以下，作為后備樣品。由CRA公司將樣品送到中心實驗室。
研究進度

1若在研究第1天的14天內完成，不必重復該程序。
2若病人的病情明顯轉差，加大劑量，改變為交替注射，每日1mg和0.5mg。
帕金森病統一評分量表(UPDRS)使用UPDRS作為分級工具來跟進帕金森氏病的縱向病程，是常見的一種做法。它由以下三部分組成1)心理狀態、行為和情緒，2)ADL和3)運動。這三部分都通過會見來評價。其中一些部分需要為每個肢體劃分多個等級。總分可能有199分。199分代表喪失活動能力最壞的情形，0分代表活動能力正常。
I.心理狀態、行為和情緒●智力障礙0-沒有1-輕度(持續性健忘，無需費力就可以部分回想起事件)2-中度記憶喪失，不能辨認方向，處理復雜問題有中等程度困難3-重度記憶喪失，不能區分時間，往往也不能辨認地方，處理問題的能力嚴重受損4-重度記憶喪失，只能分辨人，沒有判斷和解決問題的能力。
●思維障礙0-沒有1-生動清晰的夢想2-“良性”幻覺，保留有洞察力3-偶然至經常性出現幻覺或錯覺，沒有洞察力，可能影響到日常生活4-持續性出現幻覺、錯覺或茂盛性精神病●抑郁癥0-無1-悲傷和內疚期比正常人長，但不會超過數天或一星期2-抑郁癥狀持續超過一星期3-植物性癥狀(失眠、食欲減退、意志缺失、體重減輕)4-有自殺傾向的植物性癥狀
●動機/主動性0-正常1-自信心不足，較被動2-對某些選定的活動失去主動性或興趣3-對每日(常規)活動失去主動性或興趣4-不再有、完全失去動機II.日常生活活動●講話0-正常1-受到輕度影響，較易被人明白2-受到中度影響，可能需要復述3-受到重度影響，經常要復述4-多數時間都難以理解●唾液分泌0-正常1-唾液分泌稍多，但有明顯增多的趨勢，晚間可能流口水2-中度唾液分泌過多，最小量地流口水3-大量地流口水●吞咽0-正常1-不常發生噎塞2-偶然發生噎塞3-需要進食軟的食物4-需要鼻胃管(NG tube)或胃管(G-tube)●書寫0-正常
1-字體稍小或書寫稍慢2-全部字的字體很小，但仍可辨認3-受到嚴重影響，不是全部字都能被辨認4-多數字體難以辨認●切割食物/手持器具的能力0-正常1-有點慢和笨拙，但無需別人幫助2-能夠切割大部分食物，但有時需要別人幫助3-必須由別人切好食物，但能自己進食4-需要別人喂食●穿衣0-正常1-有點慢，但無需別人幫助2-偶然需要別人幫助扣鈕和穿衣袖3-經常需要幫助，但仍可獨自做某些事4-完全失去能力●衛生0-正常1-有點慢，但無需別人幫助2-淋浴或沐浴需要幫助，或者衛生護理方面極為緩慢3-需要別人幫助沖洗、刷牙、上廁所4-完全失去能力●在床上轉身/整理床上用品0-正常1-有點慢，但無需別人幫助2-能夠自己轉身或者整理被褥，但很費勁
3-能夠開始做但無法自己轉身或整理4-完全失去能力●與僵硬(freezing)無關的跌倒0-正常1-跌倒次數很少2-偶然跌倒，少于每日一次3-每日平均跌倒一次4-每日跌倒超過一次●行走中的僵硬現象0-正常1-較罕見，起步可能有些困難2-偶然由于僵硬而跌倒3-經常僵硬，偶然跌倒4-經常由于僵硬而跌倒●行走0-正常1-輕度困難，躑躅而行，或手臂擺幅減少2-中度困難，但無需別人幫助3-有嚴重障礙，需要別人幫助4-即使有人幫助也完全無法行走●震顫0-無1-輕度震顫，不常發生，但對病人沒有造成困擾2-中度震顫，對病人造成困擾3-明顯地震顫，影響到很多活動4-重度震顫，影響到很多活動
●與帕金森癥無關的感覺疾病1-無2-偶然有麻痹、刺痛和輕度疼痛3-經常性，但不致痛苦4-經常有疼痛感覺5-極度痛楚III.運動檢查●講話0-正常1-表達、措辭、音量有輕微喪失2-單調，發音含糊，但仍可被理解，中度障礙3-明顯障礙，不容易被理解4-無法理解●面部表情0-正常1-表情有輕微減少，可能呈現面無表情2-表情有輕微但有限度的異常不足3-表情有中度減少，嘴唇有時分離4-面具臉或不變的臉，嘴唇分開1/4時或以上，完全失去表情●靜態時震顫●臉0-無1-輕度震顫，不常發生2-中度震顫，經常發生3-明顯地震顫，經常發生4-重度震顫，經常發生
●右上肢(RUE)0-無1-輕度震顫，不常發生2-中度震顫，經常發生3-明顯地震顫，經常發生4-重度震顫，經常發生●左上肢(LUE)0-無1-輕度震顫，不常發生2-中度震顫，經常發生3-明顯地震顫，經常發生4-重度震顫，經常發生●右下肢(RLE)0-無1-輕度震顫，不常發生2-中度震顫，經常發生3-明顯地震顫，經常發生4-重度震顫，經常發生●左下肢(LLE)0-無1-輕度震顫，不常發生2-中度震顫，經常發生3-明顯地震顫，經常發生4-重度震顫，經常發生
●動作或姿態震顫●右上肢(RUE)0-無1-動作出現輕度震顫2-動作出現中度震顫3-動作出現中度震顫，并且維持著姿勢4-明顯地震顫，影響到進食●左上肢(LUE)0-無1-動作出現輕度震顫2-動作出現中度震顫3-動作出現中度震顫，并且維持著姿勢4-明顯地震顫，影響到進食●僵硬性●頸0-無1-輕度，或者僅在開始運動時2-溫和/中等3-在運動的整個過程都很顯著4-重度●右上肢(RUE)0-無1-輕度，或者僅在開始運動時2-溫和/中等3-在運動的整個過程都很顯著4-重度
●左上肢(LUE)0-無1-輕度，或者僅在開始運動時2-溫和/中等3-在運動的整個過程都很顯著4-重度●右下肢(RLE)0-無1-輕度，或者僅在開始運動時2-溫和/中等3-在運動的整個過程都很顯著4-重度●左下肢(LLE)0-無1-輕度，或者僅在開始運動時2-溫和/中等3-在運動的整個過程都很顯著4-重度●手指輕拍●右手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行
●左手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●手運動(快速地連續開合手)●右手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●左手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●快速交替運動(手掌掌心向上向下)●右手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行
●左手0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●腿部靈敏性(腳后跟踏地，幅度應為3時)●右腿0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●左腿0-正常1-輕度緩慢，和/或幅度減少2-中度受損，有一定次數但易疲倦，可能會偶然停頓3-重度受損，經常性動作緩慢和停頓4-幾乎無法進行●從椅子起身(pt.以兩只手臂交叉疊放在胸前起身)0-正常1-緩慢，可能需要嘗試超過一次2-靠手臂或座位自身向上推起身3-往往向后倒，可能需要嘗試多次，但無需別人幫助能夠起身4-沒有別人幫助無法起身
●姿勢0-正常1-輕度身體彎曲，對于老年人可能屬于正常2-有限度的異常，中度身體彎曲，可能向一側傾斜3-重度身體彎曲，駝背4-顯著的肢節彎曲，肢體姿勢異常●步態0-正常1-行走緩慢，可能小步曳行，無慌張和前沖步態2-行走困難，需要少許幫助或無需幫助，有一些慌張和前沖步態，小步行走3-有嚴重障礙，經常需要別人幫助4-不能行走●姿勢穩定性(后退試驗)0-正常1-無需幫助能獨自恢復2-如果不攙扶會跌倒3-自然跌倒4-無法站立●身體運動徐緩/運動功能減退0-正常1-最低度的緩慢，可能是正常的，審慎的性格2-輕度緩慢，運動不能，肯定是異常，或者運動幅度減少3-中度緩慢，運動不能，幅度小4-顯著緩慢，運動不能，幅度小諾丁漢健康調查表使用該問卷調查是測定生活素質的常用做法。
以下列出人們可能在日常生活中碰到的問題。仔細閱讀所有問題，若此刻任一問題適用于你，請在其“是”下面的空格r打上勾號。若任一問題不適用于你，請在其“否”下面的空格r打上勾號。請回答全部問題。如果你不確定回答是或否，請將你認為在此刻是最真正的答案打上勾號。


現在請回到問卷調查開端，確保你對問卷的每個問題都已經回答了“是”或者“否”。
姿勢-運動手動試驗的描述(Johnels B，Ingvarsson P.E，Thorselius M，Valls M，Steg G.Disability profilesand objective quantitative assessment in Parkinson′s disease.Acta Neurol.Scand.，198979227-238)姿勢-運動手動(PLM)試驗是一種新方法，用來測量帕金森氏病喪失活動能力的程度。它采用光電照相機來記錄自由地活動的病人的身體運動。用自動計算機技術來量化運動能力以保證評價是客觀的。
試驗程序PLM試驗要求受試者撿起地板上一件物品，并向前行走將該物品放在位于他下巴高度的一個架子上，通過改變姿勢和向前運動而壓迫身體，這要求一個針對目標的手臂-手運動。與相同年齡正常受試者的能力進行比較，可以用本試驗測量帕金森氏病病人的姿勢的、運動的和手部運動的動作受影響程度、獨立生活所要求的全部基本運動功能，這是帕金森氏病病人通常發生的缺陷。
提出這個構想是因為帕金森氏病病人的腦部中多巴胺神經細胞退化程度和模式是各不相同的，而且這種程度和模式的不同導致每個病例的姿勢、運動和手部受影響程度不同，使得喪失活動能力的情況各異，故有必要分別加以治療。在這種情況下，PLM試驗應該用來為每個病人記錄和量化此種情況，作為合理治療的基礎。
自主神經試驗的描述(Holmberg B，Kallio M，Johnels B，、Elam M，Cardiovascular Reflex Testingcontributes to Clinical Evaluation and Differential Diagnosis of ParkinsonianSyndromes)全部自主神經試驗都在臨床神經生理學系進行，在那里自主神經功能的臨床常規測試均基于心率和血壓隨時間而變化的分析。將受試者安置并固定在一傾斜的桌子上，開始記錄心率和血壓。同時采用根據體積-鉗夾(volumn-clamp)原理的連續性非侵入式手指量血壓方法(Finapres，OhmedaMonitoring Systems，Englewood，Colorado，USA)和自動式量血壓方法(Sphygmomanometer BP-203Y，Nippon Colin Co，Muranaka，Komaki-City，Japan)，在左上臂上放置一條臂帶。用計算機程序計算心率，由Finapres的脈沖信號觸發。在60秒內的靜態期和在控制的深呼吸期(每一周期6個呼吸循環)內評價竇性心律不齊，按如下公式計算100(HRmax-HRmin)/HRmean。
然后進行起坐測試，使身體從水平位置抬高到75°傾斜所用的時間限于2秒。基于量血壓數據，量化在傾斜8分鐘內心率和血壓的變化，這是因為已經注意到，即使小心將手指套放在心臟位置，采用Finapres公司的設備仍無法避免流體靜力學誤差。Finapres信號定性表明一些病人的起坐血壓很快地明顯下降，而病人由于暈厥癥狀而不得不水平地躺下之前，無法獲得可靠的套囊壓力數據。
MSA的診斷標準●多系統萎縮癥(Gilman S，Low PA，Quinn N et al.Consensus statement on the diagnosis ofmultiple system atrophy.J Auton Nerv Syst 1998；74189-192)表1 診斷MSA采用的臨床領域、特征和標準I.自主神經和尿功能障礙A.自主神經和泌尿的特點1.起坐性低血壓(收縮壓20mmHg，舒張壓10mmHg)2.尿失禁或不完全膀胱排空B.MSA中自主神經功能衰竭或尿功能障礙的標準起坐性血壓降低(收縮壓30mmHg，舒張壓15mmHg)，或者尿失禁(持續的，膀胱自然地部分或全部排空，男性伴隨有勃起障礙)，或者兩者。
II.帕金森氏病A.帕金森氏病的特點1.運動徐緩(隨意運動緩慢，重復動作過程中速度逐漸減慢，幅度逐漸減小)2.僵硬3.姿勢不穩定(不是由初級視覺、前庭、小腦或本體感覺功能障礙造成)4.震顫(姿勢、靜態或兩者)B.MSA中帕金森氏病的標準運動徐緩加上上述第2至第4項中至少一項。
III.小腦功能障礙A.小腦的特點1.步態不協調(寬基站立姿勢，步伐的長度和方向不規則)2.共濟失調性構音困難3.四肢失調
4.持續性凝視引起的眼球震顫B.MSA中小腦功能障礙的標準步態不協調加上上述第2至第4項中至少一項。
IV.皮質脊髓束功能障礙A.皮質脊髓束的特點1.腳跖部的伸張反應，反射亢進B.MSA中皮質脊髓束功能障礙在確診MSA時不采用皮質脊髓束功能障礙的特點。
特點(A)是疾病的表現，標準(B)是進行診斷時需要的一個明確的特征或組合特征。
表2 MSA的診斷類型I.可能的MSA一個標準加上獨立的其它領域的兩個特征。當標準是帕金森氏病時，其中一個特點是多巴胺反應較差(因此僅需要一個附加特征)II.很可能的MSA標準是自主神經功能衰竭/尿功能障礙加上對多巴胺反應較差的帕金森氏病或小腦功能障礙。
III.肯定的MSA黑質紋狀體和橄欖橋腦小腦通道內均發生變性改變，由此產生高密度的神經膠質細胞胞漿包含體，這在病理學上確診為MSA。
表3 MSA診斷的排除標準I.病史30歲以下出現癥狀家族有類似的病例全身性疾病或者其它可鑒定到的引起表1所列特征的病因與藥物治療無關的幻覺II.身體檢查癡呆癥的DSM標準眼球垂直方向掃視特別緩慢或者垂直方向核上性凝視麻痹有跡象顯示發生局灶性腦皮層功能障礙，如失語癥、外源肢綜合癥(alienlimb syndrome)、以及頂骨功能障礙(parietal dysfunction)。
III.實驗室研究引起表1所列特征的一個替換原因是代謝、分子、基因和成像證據。六個月后的結果基線特性在隨機選取的總共43個病人中抽取18人，對安全性進行中期分析(9個被給予安慰劑，9個被給予r-hGH)。在該18個病人中再抽取12人進行有效性分析)(6個被給予安慰劑，6個被給予r-hGH)。
人口統計學兩組病人在人口統計學上沒有差別。安慰劑組的體重和BMI指數稍高，但這與臨床結果沒有任何關聯。
疾病類型在疾病類型(即MSA-P或MSA-C)的分布方面，發現治療組之間沒有差別。不過，值得注意的一點是疾病類型的總分布。一般預計，此類疾病的“正常”群體中大約有2/3MSA-P病人，有1/3MSA-C病人。但在本研究群體中，發現兩類病人各占一半。只有一個中心的病人模式與預期的相同，而在其余兩個中心中，MSA-C病人比MSA-P病人稍多。
即使治療組之間的分布較好，這些差異與臨床結果也沒有任何關聯。
疾病癥狀從開始診斷MSA到給予第1劑研究藥物的平均時間稍微比r-hGH病人(大約1.5年，而安慰劑病人約2年)短。但是，當更精密地分析數據時，發現實際上觀察到用來診斷MSA的其它癥狀時，病人已經患上該疾病約3至5年了，而不是所宣稱的2年。
有效性參數只有完成了6個月評價的病人才有資格進行有效性評價，即有效性評價不包括在6個月前就已經退出本研究的那些病人。為此，有6個病人被排除在外，每個治療組排除3人。根據記載，有2個病人在治療期間死亡，1個病人患上呼吸系統和循環衰竭，再有1個病人患上急性心肌梗塞。有3個病人由于不良事件而退出，2個病人由于本人決定離開本研究而退出。
所以，有效性評價共包括12個病人，每個治療組6人。
運動檢查經過觀察從基線到6個月的評分變化，發現兩個治療組的平均水平都有提高。不過，安慰劑組水平提高的幅度比r-hGH組大。r-hGH組的變化水平比通常預測的結果好得多。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
UPDRS總分經過觀察從基線到6個月的評分變化，發現兩個治療組的平均水平都有提高。不過，安慰劑組水平提高的幅度比r-hGH組大。值得注意的一點是，這很可能是由運動檢查評分獲得的良好結果而帶來的后續效果。正常情況下會增加約10至15分，r-hGH組的平均變化比這一增幅稍低。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
自主神經試驗深呼吸時的心率變化(HRV)經過觀察從基線到6個月的深呼吸HRV水平變化，發現安慰劑組的平均水平下降，而r-hGH組的平均水平上升。事實上，r-hGH組的平均水平從基線到第6個月幾乎增大了一倍。
這些結果似乎十分有希望，提示用r-hGH調節心率比用安慰劑好。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
平均動脈壓(MAP)經過觀察從基線到6個月的深呼吸MAP水平變化，發現安慰劑組的平均水平下降，而r-hGH組的平均水平上升。
這些結果似乎十分有希望，提示用r-hGH調節血壓比用安慰劑好。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
諾丁漢健康調查表(NHP)疼痛經過觀察從基線到6個月的NHP中疼痛評分的變化水平，發現安慰劑組的平均水平有輕微上升，而r-hGH組的平均水平只有極少幅度的變化。這可能提示r-hGH具有有益的效果。
情感經過觀察從基線到6個月的NHP中情感評分的變化水平，發現安慰劑組的平均水平只有極少幅度的變化，而r-hGH組的平均水平下降。這可能提示r-hGH具有有益的效果。
身體狀況經過觀察從基線到6個月的NHP中身體狀況評分的變化水平，發現安慰劑組的平均水平有輕微上升，而r-hGH組的平均水平只有極少幅度的變化。這可能提示r-hGH具有有益的效果。
仰臥血壓經過觀察從基線到6個月的仰臥血壓的變化水平，發現兩個治療組的平均水平都有上升。安慰劑組的上升幅度比r-hGH組稍低。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
站立血壓經過觀察從基線到6個月的站立血壓的變化水平，發現兩個治療組的平均水平都有上升。安慰劑組的上升幅度遠遠低于r-hGH組。值得注意的一點是，這與自主神經試驗得出的方向一致，再次表明r-hGH有可能產生有益的效果。
所以，可得出如下結論治療組之間在臨床上有差別，采用r-hGH較有利。
有效性結論總體而言，r-hGH對自主神經變量(即HRV、MAP和血壓)有正面的效果，而且發現對量表中運動癥狀產生的效果。所以，本發明提出hGH可作為治療多系統萎縮癥的新方法。
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權利要求
1.一種與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者一種刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征的藥物中的用途。
2.如權利要求1所述的用途，其中，帕金森疊加綜合征選自進行性核上麻痹癥、多系統萎縮癥、帕金森氏-肌萎縮側索硬化癥-關島癡呆癥、全身性萊維小體病、皮質基底神經節變性、阿爾茨海默氏病/帕金森氏疊加綜合征、亨廷頓氏病剛性變異型、哈-斯-克二氏病、和Gerstmann-Strausler綜合征。
3.如權利要求2所述的用途，其中，帕金森疊加綜合征是多系統萎縮癥。
4.如權利要求1至3中任一項所述的用途，其中，所述物質選自(a)人生長激素；(b)(a)的對hGH受體有激動劑活性的片段；(c)(a)或(b)的突變體，該突變體的序列與(a)或(b)至少有70％的同一性并且對hGH受體有激動劑活性；(d)(a)或(b)的突變體，該突變體是由在溫和條件下能與編碼(a)或(b)的天然DNA序列的互補序列雜交的DNA序列編碼的并且對hGH受體有激動劑活性；或者(e)(a)、(b)、(c)或(d)的對hGH受體有激動劑活性的鹽或功能衍生物。
5.如權利要求1至4中任一項所述的用途，其中，所述物質是天然存在的人生長激素。
6.如權利要求1至4中任一項所述的用途，其中，所述物質是重組人生長激素。
7.如權利要求4或6所述的用途，其中，所述片段是hGH的C-端片段。
8.如權利要求7所述的用途，其中，所述C-端片段含有hGH的氨基酸177至191。
9.如權利要求4或6所述的用途，其中，所述人生長激素突變體是在人生長激素N-端具有一個附加甲硫氨酸殘基的甲硫氨酰人生長激素。
10.如權利要求4至6中任一項所述的用途，其中，所述人生長激素片段是缺少從Glu 32到Glu 46的15個氨基酸殘基的人生長激素。
11.如權利要求4所述的用途，其中，所述片段是缺少N端前8個氨基酸殘基的截短形式人生長激素。
12.如權利要求4所述的用途，其中，所述片段是缺少N端前13個氨基酸殘基的截短形式人生長激素。
13.如權利要求4所述的用途，其中，所述功能衍生物包括人生長激素二聚體，選自通過鏈問二硫鍵連接的二硫化物二聚體、共價不可逆的非二硫化物二聚體、非共價二聚體，及其混合物。
14.如權利要求4所述的用途，其中，所述功能衍生物是人生長激素的化學衍生物。
15.如權利要求14所述的用途，其中，人生長激素的N-端是乙酰化的。
16.如權利要求14或15所述的用途，其中，人生長激素是脫酰胺化的。
17.如權利要求14至16中任一項所述的用途，其中，人生長激素的一或多個甲硫氨酸殘基是亞砜化的。
18.如上述權利要求中任一項所述的用途，其中，人生長激素以每人約0.1mg至10mg的日劑量或以每人約0.5mg至6mg的日劑量給予。
19.如權利要求18所述的用途，其中，人生長激素以每人約1mg的日劑量給予。
20.如權利要求18或19所述的用途，其中，人生長激素每日或每隔一日給予。
21.如上述權利要求中任一項所述的用途，其中，人生長激素以交替日劑量方式給予，第一劑的劑量比第二劑高。
22.如權利要求21所述的用途，其中，第一劑是每人約1mg，第二劑是每人約0.5mg。
23.如上述權利要求中任一項所述的用途，其中，人生長激素的周劑量是每人約6mg，或者每人約5mg，或者每人約4.5mg。
24.如權利要求1至3中任一項所述的用途，其中，所述物質選自(a)人生長素釋放激素(hGHRH)；(b)(a)的對hGHRH受體有激動劑活性的片段；(c)(a)或(b)的突變體，該突變體的序列與(a)或(b)至少有70％的同一性并且對hGHRH受體有激動劑活性；(d)(a)或(b)的突變體，該突變體是由在溫和條件下能與編碼(a)或(b)的天然DNA序列的互補序列雜交的DNA序列編碼的并且對hGHRH受體有激動劑活性；或者(e)(a)、(b)、(c)或(d)的對hGHRH受體有激動劑活性的鹽或功能衍生物。
25.如權利要求4或24所述的用途，其中，所述功能衍生物包含至少一部分連接于一個或多個官能基團，所述官能基團以氨基酸殘基上一個或多個側鏈的形式出現。
26.如權利要求25所述的用途，其中，所述部分是PEG化的。
27.胰島素樣生長因子(IGF)在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途。
28.如權利要求27所述的用途，其中，所述IGF選自IGF-I或IGF-II。
29.如權利要求27或28所述的用途，其中，所述藥物還含有同時、相繼或分別使用的胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBP)。
30.如權利要求29所述的用途，其中，所述IGFBP是IGFBP3。
31.如權利要求27至30中任一項所述的用途，其中，所述藥物還含有如權利要求1至26中任一項所述的物質。
32.一種核酸分于在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中，所述核酸分子包含與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質的編碼序列。
33.如上述權利要求中任一項所述的用途，其中，所述藥物通過皮下途徑給予。
34.如權利要求1至32中任一項所述的用途，其中，所述藥物通過肌內途徑給予。
35.如上述權利要求中任一項所述的用途，其中，所述藥物以自動注射器給予。
36.一種載體在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中所述載體能誘導和/增強內源性產生與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
37.一種細胞在制備用于治療和/或預防帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的藥物中的用途，其中所述細胞經過基因改造產生與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質。
38.一種治療帕金森疊加綜合征特別是多系統萎縮癥的方法，其中，所述方法包括把有效量的與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者刺激內源性hGH釋放或加強內源性hGH活性的物質給予有需要的病人。
全文摘要
本發明涉及一種與人生長激素(hGH)受體結合并啟動該受體信號傳導的物質或者一種刺激內源性hGH的釋放或加強內源性hGH的活性的物質在治療和/或預防帕金森疊加綜合征中的用途。本發明特別涉及hGH在治療和/或預防多系統萎縮癥中的用途。
文檔編號A61K38/30GK1838966SQ03827096
公開日2006年9月27日 申請日期2003年7月29日 優先權日2003年7月29日
發明者B·－A·本特松 申請人:阿雷斯貿易股份有限公司