專利名稱：羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法
技術領域：
本發明屬于羥基喜樹堿的制備方法，具體涉及羥基喜樹堿納米粒的制備方法。
背景技術：
羥基喜樹鹼屬于細胞毒類藥物，它在殺死癌細胞的同時，對正常細胞有明顯的影響，其臨床副作用主要表現為抑制造血系統等。
目前臨床上用于治療肝癌、肺癌的藥物，絕大多數的毒副作用較強。其主要原因是因為這些藥物在體內的分布沒有選擇性，除了對癌變的細胞有殺滅作用之外，對正常細胞的代謝也同樣有影響，其結果是產生不必要副作用。使患者的治療難以繼續進行，導致癌癥病人生存質量下降，死亡率增加。
目前國內用聚乳酸制備納米粒的方法有三種，黎洪珊報導的溶劑揮發法，鹽析法和溶劑非溶劑法，其中溶劑揮發法需用大量低沸點的有機溶劑，對環保不利。第二種方法鹽析法只適用于在水中的溶解度較小的藥物，而羥基喜樹對鹼的水溶較大，不合適。第三種方法，即溶劑非溶劑法，是通過改變溶劑的極性而使藥物從溶中析出來。

發明內容
本發明的目的在于提供一種不同于上述三種方法的羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法。
本方明是這樣實現的通過表面活性處理的羥基喜樹堿的水溶液加堿調節pH值為7.5～12.0，通過超聲波處理后冷卻0～10℃，加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中攪拌后，通過高速離心分離的沉淀物水洗后，再離心分離得羥基喜樹堿納米粒。
本項目是選擇合適的載體和工藝將羥基喜樹鹼制成50～300nm超微粒。經靜脈給藥后，對肝臟有較高的選擇性，而其他器官中分布的量較少，從而達到提高羥基喜樹鹼的抗癌效果，而減少對正常細胞的影響，最終實現提高抗腫瘤藥物治療的順應性，提高患者的生存質量，延長生存時間的效果。該法的優點是，加鹼，由[OH-]崔化聚合，然后揮去有機溶劑，(少量有機溶劑)而制得羥基喜樹鹼聚乳酸納米粒。


附圖 羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法流程圖具體實施方式
(1)1～100重量份羥基喜樹堿，1～100重量份表面活性劑伯羅沙姆或土溫-80或司盤-65溶于10～100重量份的蒸餾水中，滴加氫氧化鈉調節pH值為7.5～12.0，通過水浴超聲波處理10～60秒得溶液A；(2)將1～500重量分聚乳酸溶于丙酮或三氯甲烷中得溶液B；(3)將0～10℃的溶液A在攪拌條件下加入0～10℃的溶液B并攪拌；(4)將混合液置在45～70℃水浴中攪拌；(5)將攪拌后的沉淀物在室溫下離心分離水洗，再離心分離，得羥基喜樹堿納米粒。
以15.0mg的羥基喜樹減原料為例將15.0mg的羥基喜樹堿和37.8mg的表面活性劑伯羅沙姆溶于15ml蒸餾水中，加2滴NaoH溶液(NaOH的PH值13.34)，并短時水浴超聲30秒，得溶液A。
另將100.0mg的聚乳酸溶于5ml丙酮中，得溶液B。
將溶液A和B降溫到0～2℃，并在磁力攪拌下(攪拌速度約為1000轉/分)，用注射器將溶液B快速(約1ml/s)注入到溶液A中，持續攪拌1min。
迅速將混合液置60℃水浴中，同時磁力攪拌，調節攪拌速度至500轉/分，持續水浴覺拌1hr，用蒸餾水洗滌得到產品。
將高速離心后的成品，凍干，取凍干品約100mg，加堿處理，取堿性溶液用紫外分光度法，在412nm處測定吸收度，將A值代入回歸方程求濃度。計算出包封率為73.2％。
取成品12.6mg，用pH為10.37的蒸餾水稀釋至250ml，分別取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml置于25ml容量瓶中，稀釋至刻度線。
在412nm處測吸光度，作標準曲線回歸，結果如表一


以吸光度讀數平均值A對濃度c進行直線回歸，得c＝18.2745A+0.01796r＝0.999861號與6號點的吸光度偏離較大，舍棄后，以吸光度讀數平均值A對濃度c進行直線回歸，得c＝18.2998A-0.03489r＝0.999987將高速離心后的樣品，經透外電鏡測得粒度分布如下50～80nm占6％80～100nm占8％ 110～140nm占11％140～170nm占18％ 170～200nm占24％200～230nm占16％ 230～260nm占11％60～300nm占6％實驗表明，應用該方法測得的羥基喜樹鹼聚乳酸納米粒成球形，分散性好，載藥量高。
權利要求
1.一種羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是通過表面活性處理的羥基喜樹堿的水溶液加堿調節pH值為7.5～12.0，通過超聲波處理后冷卻至0～10℃，加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中攪拌后，通過高速離心分離的沉淀物水洗后，再離心分離得羥基喜樹堿納米粒。
2.如權利要求1所述羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是通過表面活性處理的羥基喜樹堿的水溶液是羥基喜樹堿和伯羅沙姆或土溫-80或司盤-65的蒸餾水溶液。
3.如權利要求1所述羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是聚乳酸溶液是聚乳酸與丙酮或三氯甲烷的溶液。
4.如權利要求1所述羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是(1)1～100重量份羥基喜樹堿，1～100重量份表面活性劑伯羅沙姆或土溫-80或司盤-65溶于10～100重量份的蒸餾水中，滴加氫氧化鈉調節pH值為7.5～12.0，通過水浴超聲波處理得溶液A；(2)將1～500重量分聚乳酸溶于丙酮或三氯甲烷中得溶液B；(3)將0～10℃的溶液A在攪拌條件下加入0～10℃的溶液B并攪拌；(4)將混合液置在45～70℃水浴中攪拌；(5)將攪拌后的沉淀物在室溫下離心分離水洗，再離心分離，得羥基喜樹堿納米粒
5.如權利要求4所述羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是步驟(3)、(4)中在磁力條件下攪拌。
6.如權利要求4所述羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法，其特征是步驟(1)中水浴超聲波處理時間為10～60秒。
全文摘要
本發明的目的在于提供羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法。它是通過表面活性處理的羥基喜樹堿的水溶液加堿調節pH值為7.5～12.0,通過超聲波處理后冷卻0～10℃,加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中攪拌后,通過高速離心分離的沉淀物水洗后,再離心分離得羥基喜樹堿納米粒。該法的優點是,加鹼,由[OH
文檔編號A61K31/4738GK1363394SQ01133700
公開日2002年8月14日 申請日期2001年11月22日 優先權日2001年11月22日
發明者易以木, 楊唐玉, 吳漢強, 陳秀珍 申請人:黃石李時珍藥業集團武漢李時珍藥業有限公司