液質聯用法測定18種酚類及其衍生物特定遷移量方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于化合物檢測領域，涉及食品接觸材料中有害18種酚類及其衍生物特 定迀移量的檢測方法，尤其涉及一種使用高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS)法測定塑 料類食品包裝材料及容器中18種酚類及其衍生物特定迀移量的檢測方法。 技術背景
[0002] 多種酚類或酚類衍生物被用作原料或抗氧劑、紫外吸收劑、殺菌防霉劑、分子量調 節劑等功能助劑，添加到塑料中，以增加塑料制品的性能和外觀。但是部分添加的酚類或酚 類衍生物也具有較大的毒性，一些塑料類食品接觸材料制品中添加的酚類或酚類衍生物功 能助劑，在使用過程中也會迀移到食物中，直接危害人體健康。歐盟在2011年發布的（EU) N0 10/2011法規，將多種酚類或酚類衍生物的特定迀移量加以限定。近年來，塑料類食品接 觸材料相關制品中檢出具毒副作用的酚類或酚類衍生物的也時有發生。
[0003] 目前，國內外有關塑料類食品接觸材料制品中檢測受限酚類或酚類衍生物的檢 測方法主要有：氣相色譜法（GC)、高效液相色譜法（HPLC)及高效液相色譜-串聯質譜法 (HPLC-MS/MS)。而已有的這些檢測方法也存在著同時檢測酚類或酚類衍生物的總數較少， 以及對于脂肪性食品模擬物中酚類或酚類衍生物的檢測，大都未使用（EU)NO10/2011法 規規定的植物油食品模擬物，而是使用了異辛烷等方面的不足。

【發明內容】

[0004] 為了解決塑料類食品包裝材料及容器中多種有害抗氧劑特定迀移量同時檢測的 難題，提高檢測效率，本發明提供一種高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS)法檢測塑料類 食品接觸材料中18種酚類及其衍生物的特定迀移量的檢測方法，該方法具有靈敏、準確、 快速、簡便的特點。
[0005] 本發明的高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS)法檢測塑料類食品接觸材料中18 種酚類及其衍生物的特定迀移量的方法，通過以下步驟實現：
[0006] 一、迀移試驗
[0007] 根據食品接觸塑料制品的實際用途，按照一定的表面積體積比將食品模擬物注入 到待測樣品塑料制品或玻璃器皿中，在器皿口或容器口以表面皿或鋁箱紙進行密封后，在 烘箱或培養箱中按歐盟N0 10/2011法規規定確定迀移溫度和迀移時間進行迀移試驗，完 畢后冷卻至室溫，將其中的食品模擬物轉移到干凈玻璃器皿中待后續處理；其中食品模擬 物分別為食品模擬物A、B、C、Dl、D2。
[0008] 其中的食品模擬物根據歐盟（EU)NO10/2011法規規定，食品模擬物A:10%乙醇 水溶液（v/v)，用于模擬pH> 4. 5的水性食品；食品模擬物B:3%乙酸水溶液（w/v)，用于 模擬pH< 4. 5的酸性食品；食品模擬物C:20%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精 含量不超過20%的食品；食品模擬物D1 :50%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含 量大于20%的食品以及油水乳化液；食品模擬物D2 :植物油，用于模擬表面含有游離脂肪 的食品。
[0009] 按歐盟（EU)NO10/2011法規規定，按表1所示根據產品實際用途選擇合適的迀移 試驗條件。
[0010] 表1迀移實驗條件的選擇
[0011]
[0012] 根據歐盟（EU)NO10/2011法規規定，表面積體積比：對于< 500mL，> 10L容器類 塑料制品或不可盛裝的扁平制品，將塑料制品剪切好放入干凈的玻璃器皿中，以6dm2食品 接觸面的表面積對應1L食品模擬物的比例；對于> 500mL，< 10L的容器類塑料制品，則將 食品模擬物注入至距容器邊緣4/5處。
[0013] 二、食品模擬物的處理
[0014] (1)食品模擬物A、B、C、D1的處理：將各食品模擬物充分混勻后，用注射器吸取上 述稀釋后的各食品模擬物1~2mL，經親水性聚四氟乙烯針頭過濾器過濾至進樣瓶中，待 測；
[0015] (2)食品模擬物D2的處理：稱取植物油食品模擬物10g(精確至0.lg)于50mL具 塞玻璃離心試管中，分別加入10mL正庚烷和lmL四氫呋喃，混勻后，再加入5mL乙腈，旋緊 塞子，置于分液漏斗振蕩器上300r/min震蕩20min，再靜置15min，用2mL注射器吸取上層 乙腈溶液1~2mL，過0. 45ym聚四氟乙烯針頭過濾器至進樣瓶中，蓋緊蓋子，混勻后，待 測；
[0016] 三、空白試驗
[0017] 按照步驟二中（1)、（2)方法處理未與待測樣品接觸的食品模擬物A、B、C、D1、D2。
[0018] 四、高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS)法測定。
[0019] 儀器條件：
[0020] 1)色譜柱：C8柱，高X內徑X膜厚=250mmX4. 6mmX5ym，或相當者；
[0021] 2)流動相A:純水；流動相B:體積分數為25%的異丙醇甲醇溶液；梯度洗脫條件： 0 ~5.Omin:35 ~90%B;5. 0 ~10.Omin:90%B;10. 0 ~10.lmin:90 ~100%B;10. 1 ~ 13. 5min:100%B;13. 5 ~14.Omin:100 - 35%B;14. 0 - 16. 5min:35%B;
[0022] 3)柱溫：40°C;
[0023] 4)進樣量：10yL;
[0024] 5)柱前流速：lmL/min;
[0025] 6)柱后三通管引入流動相：0. 5%二乙胺水溶液；
[0026] 7)柱后引入流動相流速：0. 20mL/min;
[0027] 8)電噴霧離子源工作模式：負離子；
[0028] 9)數據采集模式：多反應監測；
[0029] 10)簾氣：40uL/min;
[0030] 11)碰撞氣：中等；
[0031] 12)電噴霧離子源電壓：-4500V;
[0032] 13)溫度：70(TC;
[0033] 14)離子源氣體：氣體 1，70. 0yL/min;氣體 2, 70. 0yL/min;
[0034] 15)入 口電壓：-10.OV;
[0035] 16)碰撞室出口電壓：_8.OV;
[0036] 17)定量方式：校準曲線外標法，獲得18種酚類及其衍生物特定迀移量。
[0037] 本發明由于采用了上述的技術方案，食品模擬物A、B、C、D1用親水性聚四氟乙酸 針頭過濾器過濾，食品模擬物D2采用乙腈正庚烷液液分配去除植物油中甘油酯，可以高 效、簡便、快速的測定塑料類食品包裝材料及容器中18種酚類及其衍生物特定迀移量。檢 測結果根據歐盟NO10/2011法規規定判斷特定迀移量是否符合要求。十八種酚類或酚類 衍生物在五種食品模擬物中的定量限為0. 0014~0. 5倍歐盟（EU)NO10/2011法規限量； 在0. 25或0. 5~5倍法規限量范圍內線性關系良好（r2>0. 9904) ;0. 5、1. 5、4. 0倍法規限量 水平的加標回收率為74. 7%~129%，相對標準偏差為0.44%~11.6%。實驗結果表明： 該方法色譜分離和線性關系較好，回收率和準確度高，滿足歐盟（EU)N0 10/2011法規附表 1中18種酚類或酚類衍生物特定迀移量的限量要求，為實際樣品的檢測提供了快速便捷的 方法。
[0038] 本發明提供一種同時測定塑料制品五種食品模擬物中18種酚類或酚類衍生物特 定迀移量的高效液相色譜-串聯質譜聯用方法。食品模擬物浸泡待測樣品，冷卻至室溫并 混勻，水基浸泡液經聚四氟乙酸針頭過濾器過濾后進樣；植物油食品模擬物用乙腈提取后， 上清液用聚四氟乙酸針頭過濾器過濾后進樣。用Cs柱梯度洗脫分離；質譜具電噴霧離子源， 在負離子多反應監測模式下運行。該方法色譜分離和線性關系較好，回收率和準確度高，滿 足歐盟N0 10/2011法規中18種酚類或酚類衍生物的限量要求，為實際樣品的檢測提供了 快速便捷的方法。
【具體實施方式】
[0039] 下面結合實施例對本發明做進一步的詳細說明。
[0040] 實施例1
[0041] 本發明的高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS)法測定塑料類食品包裝材料及容 器中18種酚類及其衍生物特定迀移量的檢測方法，提供以下步驟實現：
[0042] 一、樣品前處理方法
[0043] 1、迀移試驗
[0044] 1. 1食品模擬物：根據歐盟（EU)N0 10/2011法規規定，食品模擬物A: 10 %乙醇水 溶液（v/v)，用于模擬pH> 4. 5的水性食品；食品模擬物B:3%乙酸水溶液（w/v)，用于模 擬pH< 4. 5的酸性食品；食品模擬物C:20%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含 量不超過20%的食品；食品模擬物D1 :50%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含量 大于20%的食品以及油水乳化液；食品模擬物D2 :植物油，用于模擬表面含有游離脂肪的 食品