本發明屬于分析(xi)化學(xue)檢測(ce)技(ji)術(shu)領域，具體涉及一種電感(gan)耦(ou)合等(deng)離(li)子體質譜法（icp-ms）測(ce)定(ding)依魯替(ti)尼中殘留鈀的微波(bo)消(xiao)解前處理(li)方法。
背景技術：
近年來，重(zhong)金屬對(dui)人體(ti)的(de)(de)(de)危害越(yue)來越(yue)受到重(zhong)視，但對(dui)原料(liao)藥(yao)(yao)合成(cheng)過(guo)程(cheng)中(zhong)使用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)含(han)重(zhong)金屬催化劑的(de)(de)(de)重(zhong)視程(cheng)度卻相對(dui)較(jiao)低，特(te)別是含(han)有鈀(ba)(ba)的(de)(de)(de)催化劑。若藥(yao)(yao)物殘留的(de)(de)(de)鈀(ba)(ba)含(han)量過(guo)高(gao)，會對(dui)心、肝、腎造成(cheng)損害，并產生溶血。歐(ou)洲(zhou)藥(yao)(yao)品局（ema）人用(yong)(yong)(yong)藥(yao)(yao)委員會（chmp）在(zai)2014年12月采納的(de)(de)(de)ich元素雜質指(zhi)導(dao)原則中(zhong)將鈀(ba)(ba)定義(yi)為2b級，該(gai)原則指(zhi)出(chu)若在(zai)藥(yao)(yao)物的(de)(de)(de)原料(liao)、輔料(liao)或其他藥(yao)(yao)物成(cheng)分的(de)(de)(de)生產過(guo)程(cheng)中(zhong)使用(yong)(yong)(yong)了鈀(ba)(ba)，應對(dui)其進行風險評估。
依魯替尼（ibrutinib）是由美國johnson公司與pharmacyclics公司共同研發的布魯頓酪氨酸激酶抑制劑，于2013年11月獲美國食品藥品管理局(fda)批準上市，商品名為imbruvica，化學名為1-[(3r)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑(zuo)并(bing)[3,4-d]嘧啶-1-基(ji)]-1-哌(pai)啶基(ji)]-2-丙烯-1-酮，分(fen)子式(shi)為c25h24n6o2，分(fen)子量為440.50，其結構式(shi)為：
現有(you)藥品中(zhong)重金屬檢(jian)測的(de)(de)(de)(de)前處(chu)理方式(shi)主要有(you)以(yi)下三(san)種：直(zhi)接(jie)溶(rong)(rong)解(jie)(jie)法(fa)、微波消解(jie)(jie)法(fa)以(yi)及高溫熾灼的(de)(de)(de)(de)方法(fa)。其(qi)中(zhong)，直(zhi)接(jie)溶(rong)(rong)解(jie)(jie)法(fa)簡單、快速，但應用(yong)(yong)范圍有(you)限(xian)；高溫熾灼法(fa)適用(yong)(yong)于(yu)大部分(fen)的(de)(de)(de)(de)樣品，但操(cao)作繁瑣，能耗高，產生的(de)(de)(de)(de)廢氣易造(zao)成環(huan)境污(wu)染并會對實驗人員身體(ti)造(zao)成毒害。同時(shi)，經(jing)試(shi)驗證明，若要嚴格控(kong)制依魯(lu)替(ti)尼中(zhong)鈀的(de)(de)(de)(de)殘留量，使其(qi)不得過百萬分(fen)之二，考慮到儀器(qi)的(de)(de)(de)(de)檢(jian)出(chu)限(xian)和定量限(xian)，則供試(shi)品的(de)(de)(de)(de)濃度應為(wei)20mg/ml。但在常(chang)溫下，采用(yong)(yong)直(zhi)接(jie)溶(rong)(rong)解(jie)(jie)法(fa)無法(fa)使樣品達到完全溶(rong)(rong)解(jie)(jie)，而高溫熾灼法(fa)操(cao)作過程太過繁瑣，因此，在對依魯(lu)替(ti)尼中(zhong)殘留鈀的(de)(de)(de)(de)檢(jian)測研究過程中(zhong)，建立一種新的(de)(de)(de)(de)樣品前處(chu)理方法(fa)，以(yi)滿足檢(jian)驗及監管的(de)(de)(de)(de)需要是很(hen)有(you)必要的(de)(de)(de)(de)。
技術實現要素：
為(wei)克服上述問題，本發明提供(gong)了一種依魯(lu)替尼樣品的(de)微波消解前處理方法(fa)，其適用于依魯(lu)替尼中(zhong)鈀殘留量的(de)icp-ms測(ce)定。
為實(shi)現(xian)上述目的，本發明(ming)采用如(ru)下技術方案(an)：
一(yi)種icp-ms測(ce)定依魯(lu)替(ti)尼中殘(can)留鈀的微(wei)波消(xiao)(xiao)解前處理方法，其具體是取依魯(lu)替(ti)尼0.15~0.23g，加酸2~6ml，再加入(ru)0.2~1ml雙氧水，混(hun)勻，常溫下浸(jin)泡預消(xiao)(xiao)解5~15小時，然后(hou)置于微(wei)波消(xiao)(xiao)解儀中進行微(wei)波消(xiao)(xiao)解，結束后(hou)放冷，將(jiang)消(xiao)(xiao)解溶液轉(zhuan)入(ru)10ml量瓶中，用2wt%鹽(yan)酸溶液洗滌消(xiao)(xiao)解罐，將(jiang)洗液并(bing)至量瓶中，再用2wt%鹽(yan)酸溶液稀釋定容，搖勻進行測(ce)定；
其中，所(suo)述微(wei)波消解的功(gong)率為600~1000w，升溫程序為：0~15min，從室溫升溫至190℃，然后(hou)保(bao)持20min。
優選地，依魯(lu)替(ti)尼(ni)的(de)取用量為(wei)0.2g。
所述酸(suan)為硝(xiao)酸(suan)或(huo)濃硫酸(suan)，優選硝(xiao)酸(suan)。
優選地，酸(suan)的用量(liang)為(wei)5ml。
優(you)選地，雙氧水的用(yong)量為(wei)0.5ml。
優選(xuan)地，浸(jin)泡預消解的(de)時間為12小時。
優選(xuan)地(di)，微波(bo)消解的功率(lv)為(wei)800w，升(sheng)溫(wen)程序為(wei)：0~5min，從室溫(wen)升(sheng)溫(wen)至150℃；5~15min，從150℃升(sheng)溫(wen)至190℃，然后保持20min。
依(yi)魯替尼(ni)易溶(rong)于(yu)二甲(jia)亞砜，可(ke)溶(rong)于(yu)甲(jia)醇，但不溶(rong)于(yu)水。同時，取依(yi)魯替尼(ni)，分別以(yi)鹽酸(suan)(suan)(suan)、氫氟酸(suan)(suan)(suan)、磷酸(suan)(suan)(suan)、稀硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)和(he)稀高(gao)氯酸(suan)(suan)(suan)為溶(rong)劑，結(jie)果均不能完全溶(rong)解(jie)(jie)。本發(fa)明根(gen)據依(yi)魯替尼(ni)在強氧(yang)(yang)化(hua)劑中(zhong)加(jia)熱易發(fa)生氧(yang)(yang)化(hua)降解(jie)(jie)這一特點，采用(yong)以(yi)氧(yang)(yang)化(hua)性酸(suan)(suan)(suan)和(he)雙氧(yang)(yang)水為溶(rong)劑、高(gao)溫(wen)加(jia)熱及(ji)微波消(xiao)解(jie)(jie)結(jie)合(he)(he)，使(shi)(shi)依(yi)魯替尼(ni)氧(yang)(yang)化(hua)分解(jie)(jie)，增加(jia)其(qi)在水中(zhong)的(de)溶(rong)解(jie)(jie)度，使(shi)(shi)樣品完全溶(rong)解(jie)(jie)，而后(hou)加(jia)入(ru)一定量的(de)酸(suan)(suan)(suan)液，使(shi)(shi)后(hou)期采用(yong)電感耦(ou)合(he)(he)等(deng)離子體(ti)質譜法(fa)進行(xing)測(ce)定時，具有(you)較(jiao)高(gao)的(de)靈(ling)敏(min)度。
本發(fa)明在(zai)對(dui)依魯替尼中殘留(liu)鈀進行研究的(de)過程(cheng)中，建立了一種新的(de)樣品(pin)微(wei)波消解(jie)前處(chu)理方(fang)(fang)法，該方(fang)(fang)法試劑消耗(hao)(hao)少、能耗(hao)(hao)低、利于(yu)環保，且操作簡便快(kuai)速、基本上不(bu)會對(dui)實驗人員的(de)身(shen)體造成(cheng)毒(du)害，可使依魯替尼中殘留(liu)鈀的(de)檢測更加快(kuai)捷、方(fang)(fang)便。
具體實施方式
為了使本發(fa)明所(suo)述(shu)(shu)的內容更加便于理解，下面結合具體實施方(fang)式對本發(fa)明所(suo)述(shu)(shu)的技術方(fang)案做進(jin)一(yi)步(bu)的說明，但是本發(fa)明不僅(jin)限于此。
實施例1
取依(yi)魯替(ti)尼(ni)0.2g，加硝酸(suan)5ml，再加入(ru)0.5ml雙氧水，混勻，常溫下浸泡(pao)預消(xiao)解(jie)(jie)12小時；擰(ning)緊蓋子，置于微(wei)波消(xiao)解(jie)(jie)儀中進行(xing)微(wei)波消(xiao)解(jie)(jie)，微(wei)波消(xiao)解(jie)(jie)的功率為(wei)800w，升溫程序(xu)為(wei)：0~5min，從室溫升溫至150℃，5~15min，從150℃升溫至190℃，保持20min；結束后放冷，將消(xiao)解(jie)(jie)溶液(ye)(ye)轉入(ru)10ml量(liang)瓶中，用(yong)2wt%鹽(yan)酸(suan)溶液(ye)(ye)洗滌消(xiao)解(jie)(jie)罐，將洗液(ye)(ye)并至量(liang)瓶中，用(yong)2wt%鹽(yan)酸(suan)溶液(ye)(ye)稀釋定容，搖勻。
取3批(pi)依魯替尼樣(yang)品(pin)，按(an)上述方法進行前處理(li)后，采用電感(gan)耦(ou)合(he)等離(li)子體質(zhi)譜(pu)法進行測定(ding)，按(an)標(biao)準(zhun)曲(qu)線法（線性方程(cheng)為(wei)y=0.0094c+0.000015052，r=0.9992）計(ji)算依魯替尼中(zhong)鈀的含量。結果顯示(shi)，3批(pi)樣(yang)品(pin)中(zhong)殘留的鈀含量依次為(wei)0.43ppm、0.69ppm和0.52ppm。
另取(qu)上述(shu)3批(pi)依魯替尼樣品(pin)(pin)各0.2g，精密(mi)稱定(ding)，采用高溫熾(chi)灼法(fa)進行依魯替尼測(ce)定(ding)的(de)前處(chu)理，處(chu)理后(hou)殘(can)渣用2wt%鹽酸(suan)溶液稀釋(shi)至10ml，并采用電感耦合等離子體(ti)質譜法(fa)進行測(ce)定(ding)，結果顯示，3批(pi)樣品(pin)(pin)中(zhong)殘(can)留的(de)鈀含量依次為0.47ppm、0.63ppm和(he)0.62ppm。可見，本(ben)(ben)發(fa)明(ming)(ming)測(ce)定(ding)結果與高溫熾(chi)灼法(fa)基本(ben)(ben)一致(zhi)，但本(ben)(ben)發(fa)明(ming)(ming)操作(zuo)(zuo)時間(jian)明(ming)(ming)顯縮(suo)短，工作(zuo)(zuo)強度低，對工作(zuo)(zuo)環(huan)境污(wu)染小，且(qie)可避免揮發(fa)損失和(he)樣品(pin)(pin)的(de)沾污(wu)，空白位低。
實施例2
取依魯替尼12份，每份0.2g，精密稱定，每3份為一組，共4組，依次加入濃度為1000ng?ml-1的標準鈀溶(rong)液(ye)0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.5ml，然后(hou)分別加硝酸(suan)5ml，再加入0.5ml雙(shuang)氧水，混(hun)勻，常溫(wen)下浸泡(pao)預(yu)消(xiao)(xiao)解12小(xiao)時；擰緊蓋子，置于微波(bo)消(xiao)(xiao)解儀(yi)中(zhong)進行微波(bo)消(xiao)(xiao)解，微波(bo)消(xiao)(xiao)解的功(gong)率為800w，升溫(wen)程(cheng)序為：0~5min，從室(shi)溫(wen)升溫(wen)至150℃，5~15min，從150℃升溫(wen)至190℃，保持20min；結束后(hou)放冷(leng)，將(jiang)(jiang)消(xiao)(xiao)解溶(rong)液(ye)轉入10ml量瓶中(zhong)，用2wt%鹽(yan)酸(suan)溶(rong)液(ye)洗滌(di)消(xiao)(xiao)解罐，將(jiang)(jiang)洗液(ye)并(bing)至量瓶中(zhong)，用2wt%鹽(yan)酸(suan)溶(rong)液(ye)稀(xi)釋定容，搖(yao)勻。
采用電感耦合等離子體質譜法進行測定，并計算回收率。測定結果顯示，4組樣品的平均回收率分別為97.3%、91.8%、95.1%和99.9%，rsd分別為1.9%、1.2%、1.5和2.6%，測得的檢測限為2.5ng?ml-1，定量限為5.7ng?ml-1，由此表明，采用本(ben)發明方法處理后的樣品經電(dian)感耦合(he)等離(li)子體(ti)質譜法測定(ding)準確(que)度高。
實施例3
將實施例1前處(chu)理過程中加入的硝酸改為硫(liu)酸，其他條(tiao)件(jian)一致(zhi)進行處(chu)理，將處(chu)理好的溶(rong)液(ye)采用電(dian)感耦合等離子體(ti)質(zhi)譜(pu)法進行測定。結果顯(xian)示(shi)，3批(pi)樣品中殘留(liu)的鈀含量依次為0.44ppm、0.58ppm和0.57ppm。
實施例4
將(jiang)實施例(li)1前(qian)處理(li)過程中加入硝酸的量(liang)改為(wei)2ml，其他條件一致進行處理(li)，將(jiang)處理(li)好(hao)的溶液采用電感耦合等(deng)離子體質譜法進行測定。結(jie)果顯示(shi)，3批樣品中殘留的鈀(ba)含量(liang)依次為(wei)0.44ppm、0.59ppm和0.58ppm。
實施例5
將(jiang)實施例1前處理過(guo)程中加入硝酸的(de)(de)量改為(wei)6ml，其他條件(jian)一致進(jin)行處理，將(jiang)處理好的(de)(de)溶液(ye)采用電感耦(ou)合(he)等(deng)離子體質譜法(fa)進(jin)行測定。結果顯示，3批(pi)樣品中殘留的(de)(de)鈀含(han)量依(yi)次為(wei)0.46ppm、0.61ppm和0.57ppm。
實施例6
將(jiang)(jiang)實施例1前處理過程中加入依魯替尼(ni)的量改為0.15g，其他(ta)條件一(yi)致進(jin)(jin)行處理，將(jiang)(jiang)處理好的溶(rong)液采(cai)用電感耦合(he)等(deng)離子體質譜法進(jin)(jin)行測定(ding)。結果顯示，3批樣品中殘留的鈀(ba)含量依次為0.41ppm、0.58ppm和(he)0.54ppm。
實施例7
將實施例(li)1前處理過程中(zhong)加入依魯替尼的(de)量改(gai)為(wei)0.23g，其他(ta)條(tiao)件(jian)一致進行處理，將處理好的(de)溶液采用電感(gan)耦合等離子體質譜(pu)法進行測(ce)定。結果顯示，3批樣品中(zhong)殘(can)留的(de)鈀含量依次為(wei)0.46ppm、0.65ppm和0.61ppm。
實施例8
將實施例1前處(chu)理過程中加入雙(shuang)氧(yang)水的(de)量改為(wei)0.2ml，其他條件一致進(jin)(jin)行處(chu)理，將處(chu)理好的(de)溶液采用電(dian)感耦合等離(li)子體質譜法進(jin)(jin)行測(ce)定。結果顯示，3批(pi)樣(yang)品中殘留的(de)鈀含(han)量依次為(wei)0.41ppm、0.62ppm和0.56ppm。
實施例9
將(jiang)實(shi)施例1前處理(li)(li)過程中(zhong)加入雙氧水的量改為1.0ml，其他條件一致進(jin)行處理(li)(li)，將(jiang)處理(li)(li)好的溶(rong)液采用電感(gan)耦(ou)合等離(li)子體質(zhi)譜法(fa)進(jin)行測定。結果顯示，3批(pi)樣品中(zhong)殘留(liu)的鈀含量依次(ci)為0.45ppm、0.60ppm和0.59ppm。
實施例10
將實施例1前處(chu)(chu)理過(guo)程中浸(jin)泡預消解的時間(jian)控制為5小時，其他條件(jian)一致進(jin)行處(chu)(chu)理，將處(chu)(chu)理好的溶液采用電感耦合等(deng)離(li)子體(ti)質譜法進(jin)行測定。結果顯示，3批樣品中殘留的鈀(ba)含量(liang)依次為0.43ppm、0.56ppm和(he)0.59ppm。
實施例11
將實施例1前處(chu)理過程中(zhong)浸(jin)泡預(yu)消解的(de)時(shi)間控制(zhi)為15小時(shi)，其他條件一致進行(xing)(xing)處(chu)理，將處(chu)理好的(de)溶液采用電感耦合等離子體質譜法進行(xing)(xing)測(ce)定(ding)。結果顯示，3批樣品中(zhong)殘留的(de)鈀(ba)含量依(yi)次為0.45ppm、0.63ppm和0.59ppm。
實施例12
將實(shi)施例1前處理(li)過程中(zhong)微波消(xiao)解(jie)的功率控制為(wei)(wei)600w，其他條件(jian)一致(zhi)進行處理(li)，將處理(li)好的溶液采用電感耦合等離子體質譜法進行測定。結果顯(xian)示(shi)，3批(pi)樣(yang)品中(zhong)殘留的鈀含(han)量依(yi)次為(wei)(wei)0.43ppm、0.66ppm和0.62ppm。
實施例13
將實施(shi)例1前處(chu)理過程(cheng)中微波消解的(de)功率(lv)控制為1000w，其他(ta)條(tiao)件一致進行處(chu)理，將處(chu)理好(hao)的(de)溶液采用電感耦合等(deng)離子體質(zhi)譜(pu)法進行測(ce)定。結果顯(xian)示，3批樣(yang)品中殘留(liu)的(de)鈀含(han)量依次(ci)為0.41ppm、0.62ppm和0.61ppm。
對比例1
將(jiang)(jiang)實施(shi)例1前處(chu)理(li)過程中浸(jin)泡預(yu)消解的時間改為3小時，依(yi)魯(lu)替尼不能完全溶解，再經微(wei)波消解后放(fang)冷，將(jiang)(jiang)消解溶液轉入(ru)10ml量(liang)(liang)瓶中，用2wt%鹽酸溶液洗滌消解罐，將(jiang)(jiang)洗液并至量(liang)(liang)瓶中，用2wt%鹽酸溶液稀釋定容，搖勻。取(qu)該(gai)溶液離心后采(cai)用電感耦合(he)等離子體質譜(pu)法進行測(ce)定。結果(guo)顯(xian)示(shi)，3批樣品(pin)中殘留(liu)的鈀含量(liang)(liang)依(yi)次為0.39ppm、0.44ppm和0.42ppm，其測(ce)定結果(guo)明顯(xian)低于實施(shi)例1測(ce)得的結果(guo)。
對比例2
將實(shi)施例(li)(li)1前處(chu)理(li)過程中雙氧水的(de)(de)加入量改為0.1ml，依(yi)魯替尼(ni)不能完全溶(rong)解(jie)(jie)(jie)，再經微波(bo)消解(jie)(jie)(jie)后放冷，將消解(jie)(jie)(jie)溶(rong)液轉入10ml量瓶(ping)中，用(yong)2wt%鹽(yan)酸溶(rong)液洗滌(di)消解(jie)(jie)(jie)罐，將洗液并至量瓶(ping)中，用(yong)2wt%鹽(yan)酸溶(rong)液稀(xi)釋定(ding)(ding)容，搖勻。取該溶(rong)液離心后采(cai)用(yong)電感耦合等離子體(ti)質譜法進行測定(ding)(ding)。結(jie)果顯(xian)(xian)示，3批樣品中殘(can)留的(de)(de)鈀含量依(yi)次為0.35ppm、0.46ppm和0.43ppm，其(qi)測定(ding)(ding)結(jie)果明顯(xian)(xian)低(di)于(yu)實(shi)施例(li)(li)1測得的(de)(de)結(jie)果。
對比例3
將(jiang)實施(shi)例(li)1前處理過程中硝酸(suan)的(de)加(jia)入量改為(wei)1ml，微波消(xiao)解后(hou)，依魯替尼不能完(wan)全溶(rong)解，放冷，將(jiang)消(xiao)解溶(rong)液(ye)轉入10ml量瓶(ping)中，用(yong)2wt%鹽酸(suan)溶(rong)液(ye)洗(xi)滌(di)消(xiao)解罐，將(jiang)洗(xi)液(ye)并至(zhi)量瓶(ping)中，用(yong)2wt%鹽酸(suan)溶(rong)液(ye)稀釋(shi)定容，搖(yao)勻。取(qu)該(gai)溶(rong)液(ye)離(li)心后(hou)采用(yong)電感耦合等離(li)子體質譜法進行(xing)測(ce)定。結(jie)果顯(xian)示，3批(pi)樣(yang)品中殘(can)留的(de)鈀含量依次為(wei)0.32ppm、0.47ppm和0.41ppm，其測(ce)定結(jie)果明顯(xian)低于實施(shi)例(li)1測(ce)得的(de)結(jie)果。
以上(shang)所述僅為本(ben)發明的(de)較佳實施例，凡依本(ben)發明申請專利(li)范圍(wei)所做(zuo)的(de)均(jun)等變化(hua)與修飾，皆應屬本(ben)發明的(de)涵蓋范圍(wei)。