蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置和方法
【專利摘要】本發明公開蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置和方法，包括層析電泳模塊、第一溶液槽、采用多個電泳泳道的層析電泳分離板、活性層析介質和LED熒光光源，層析電泳分離板的兩端分別接有第一溶液槽和層析電泳模塊，活性層析介質置于電泳泳道內，活性層析介質包括有微粒，微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，在微粒的表面共介結合有二吖吮類偶聯分子。本發明可以在兩小時內完成蛋白質的各種層析電泳分離及其原位化學印跡和免疫成像全過程，具有極高的靈敏度、分辨率和重復性，同時又保持了傳統蛋白質層析和電泳的特點。
【專利說明】蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置和方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及醫學檢測領域，尤其涉及一種蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置和方法。

【背景技術】
[0002]傳統的蛋白質免疫成像，或稱Western，包括蛋白的聚丙烯酰胺凝膠電泳分離、凝膠中蛋白的轉移印跡、依賴抗原抗體相互作用的免疫檢測、和蛋白免疫成像分析四項重要技術組成，是現代生命科學及臨床醫學研究中最常用的蛋白質分析方法。傳統Western分析需要先后使用多種儀器設備、操作步驟繁瑣，技術要求高，通常需要兩天時間才能完成，無法實現自動化，而且得到的結果常常因儀器、試劑、方法和操作者的不同而變化。由于傳統Western分析由四個復雜的技術組成，通常需要四種儀器設備來完成:蛋白電泳儀、蛋白轉膜儀、蛋白免疫印跡儀和蛋白免疫成像儀。其中蛋白的聚丙烯酰胺凝膠電泳操作復雜，無法和蛋白轉移印跡、蛋白免疫成像在自動化方法上等相互兼容。所以，還沒有一個儀器設備可以完成傳統Western分析的四個復雜技術操作。組成傳統Western分析的各單項儀器設備情況如下:I)傳統蛋白電泳儀:即把蛋白按大小、電荷等性質分開。傳統蛋白電泳有SDS-PAGE垂直電泳儀和等電聚焦電泳儀。其中SDS-PAGE垂直電泳儀非常普遍，而等電聚焦電泳儀以美國B1-rad伯樂和美國Thermo熱電的固相等電聚焦膠條(IPG)電泳系統，以及安捷倫Agilent的offgel液相等電聚焦電泳儀為主。這兩種電泳的關鍵缺點是所有的SDS-PAGE垂直電泳儀，由于使用聚丙烯酰胺凝膠介質，都無法做到全自動化；所有的等電聚焦電泳，由于使用IPG膠條，都無法實現實時成像。2)蛋白轉膜儀即把聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白按其分布準確地轉移到在硝酸纖維素膜或PVDF膜上，形成蛋白印跡。盡管很多專業人士仍然沿用傳統手工的轉移液吸潤法，電泳轉移法已經被廣泛使用。電泳轉移法必須使用蛋白轉移印跡儀。目前蛋白電泳轉移儀的市場比較混亂，沒有質量標準。3)蛋白免疫印跡儀:即在硝酸纖維素膜或PVDF膜上完成抗原抗體相互作用。由于要用到兩種抗體，并要完成多次的膜的保護和洗滌，自動化過程比較繁瑣。但正是過程繁瑣，人們對自動化的需求很高。這幾年來，國內外分別推出了全自動蛋白免疫印跡儀。比如英國Bee Robotics的B20型全自動免疫印跡儀、美國TECAN的ProfiBlot48、AutoBlot36和國產上海迅達的XD236自動蛋白印跡儀。但由于價格昂貴，使用不是非常普遍。4)免疫成像儀:即把硝酸纖維素膜或PVDF膜上與抗體相互作用的蛋白顯色并原位成像。根據抗體標記方法和顯色原理的不同，免疫成像儀可分為化學發光成像儀和熒光成像儀。其中，以LICOR的Odyssey近紅外激光成像儀、THERMO的typhoon多功能熒光掃描儀、以及FUJI的LAS-4000熒光及化學發光成像儀為代表。目前，主要以進口設備為主。所以，傳統Western分析存在很多問題首先，傳統Western分析需要先后使用多種儀器設備、操作步驟繁瑣，技術要求高，通常需要兩天時間才能完成全部分析，趕不上現代科學發展的步伐；而且，傳統Western分析的結果常常因儀器、試劑、方法和操作者的不同而變化，不能滿足生物醫學中對蛋白定量的要求；傳統Western分析的四個技術組成部分無法在自動化方法上相互兼容，目前還沒有一個儀器設備可以完成傳統Western分析的全部過程；最后,Western分析方法在臨床上有廣泛的需求，但現在的操作都是開放式的，無法避免操作人員與檢測樣品的接觸，臨床工作可能受到傳染性標本的威脅。
[0003]相對于傳統Western分析中以聚丙烯酰胺凝膠為電泳介質，毛細管電泳是以毛細管為分離通道、以自由溶液為介質的微量蛋白分離方法。通常，毛細管電泳使用內徑為25-100 ym的彈性(聚酰亞胺)涂層熔融石英毛細管，除了電泳緩沖液外，不需要固體介質。所以，容積小，散熱快，可承受高電場(100-1000 V/cm)，容易實現自動化。最近，以毛細管電泳為基礎的全自動蛋白免疫分析儀器已經問世，可以完成痕量、甚至幾十個細胞的蛋白Western分析。毛細管電泳蛋白免疫分析的優勢:I)高效，塔板數目在105-107片/m間；2)快速，一般在十幾分鐘內完成分離；3)微量，進樣所需的樣品體積為納升級；4)自動化，是目前自動化程度較高的分離方法。毛細管電泳蛋白免疫分析的缺點是I)由于進樣量少，因而制備能力差，特別是需要進一步質譜分析時，經常無法達到所需要的量；2)由于毛細管直徑小，使光路太短，檢測或成像靈敏度較低(如紫外吸收光譜法);3)由于電滲現象因樣品組成而異，蛋白分離的重現性差；4)儀器設備昂貴，特殊毛細管耗材成本太高，限制了它的推廣應用。對比之下，傳統Western分析的優點正是毛細管電泳蛋白免疫分析系統所缺少的，而毛細管電泳蛋白免疫分析系統的優點正是傳統Western分析所不具備的。所以，最理想的系統應該結合兩者的優點，同時克服兩者的缺點。


【發明內容】

[0004]本發明所要解決的技術問題是，克服現有技術的缺點，提供一種能夠實現全自動化過程的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置和方法。
[0005]為了解決以上技術問題，本發明提供蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括多通道層析電泳模塊、第一溶液槽、采用多個電泳泳道的多通道層析電泳分離板、活性層析介質和LED熒光光源，所述多通道層析電泳模塊的液相出口接至多通道層析電泳分離板的一端，多通道層析電泳分離板的另一端接至第一溶液槽，所述活性層析介質置于層析電泳分離平板的電泳泳道內，所述LED熒光光源用于照射所述多通道層析電泳分離板，所述活性層析介質包括有微粒，所述微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，在所述微粒的表面共介結合有二吖吮類偶聯分子。
[0006]本發明技術方案的進一步限定為，所述多通道層析電泳模塊為多通道層析電泳切換模塊，所述溶液槽為多通道層析電泳切換模塊，所述多通道層析電泳切換模塊分別包括電泳槽、多通道加樣孔、多通道開關和多個層析液相通道，所述電泳槽內分別有正電極和負電極，多通道加樣孔與電泳槽相連通，多通道加樣孔經多通道開關分別與電泳泳道相連通，所述層析液相通道分別與電泳泳道相連通。
[0007]本發明技術方案的進一步限定為，所述的多通道開關為多通道氣動開關，在所述每個加樣孔的底部有一個氣動開關槽，所述每個氣動開關槽內有一個氣動開關膜，將氣動開關槽分隔成兩個通道，所述的每個加樣孔經氣動開關槽的一個通道與層析液相通道相連通，另一個通道與氣動開關氣體入口相連通，當氣動開關膜從氣動開關氣體入口輸入正壓或負壓驅動時，氣動開關膜分別開啟和關閉每個加樣孔與每個層析液相通道之間的通路。
[0008]本發明技術方案的進一步限定為，還包括微量液相驅動泵，所述微量液相驅動泵置于層析液相通道的入口處和出口處。
[0009]本發明技術方案的進一步限定為，所述微粒為直徑是10微米至100微米的微球。
[0010]本發明技術方案的進一步限定為，所述多通道層析電泳分離板由兩塊含有多個4-12毫米寬、0.1-1毫米深槽的玻璃、有機玻璃或透明高分子材料板面對面粘合而成，形成多個4-12毫米寬、0.2-2毫米深的多通道層析電泳分離槽，兩端有固定填料將泳道口封住，形成多個電泳泳道。
[0011]基于以上技術問題，本發明還提供蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，包括如下步驟:1)利用多通道層析電泳分離板中的活性層析介質進行層析電泳分離，所述活性層析介質包括有微粒，所述微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，2)在所述的活性層析介質中微粒為其表面共介結合有二吖吮類偶聯分子的微粒，用特定波長的光照射所述微粒，激活所述層析電泳介質表面的二吖吮類分子，使活化的二吖吮類分子與周圍的蛋白質發生化學偶聯，共價結合到所述微粒表面，使蛋白質在所述微粒表面產生原位化學印跡；3)將第一抗體輸送到多通道層析電泳分離板中與發生化學偶聯的原位化學印跡蛋白質相互作用；4)洗掉未反應的第一抗體，將第二抗體輸送到多通道層析電泳分離板中與第一抗體相互作用；當第二抗體是熒光標記的，用LED熒光光源照射第二抗體的表面，激發熒光標記發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板正上方的帶有相應濾光片的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質熒光免疫成像；如果使用的是酶聯標記的第二抗體，將酶聯標記的發光底物輸送到多通道層析電泳分離槽中與酶聯標記物相互作用而發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板正上方的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質化學發光免疫成像。
[0012]本發明技術方案的進一步限定為，所述步驟I采用如權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，Ib)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離。
[0013]本發明技術方案的進一步限定為，所述步驟I采用如權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，Ib)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽的起始位置，Ic)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉；同時，通過所述層析液相通道將所需層析流動相輸入多通道層析電泳分離槽，使蛋白質樣品在所述層析電泳介質中得到分離。
[0014]本發明技術方案的進一步限定為，所述步驟4)具體步驟如下:4)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中依次輸入緩沖液、一種或幾種能夠識別某些蛋白質的第一抗體、熒光或酶聯標記的第二抗體。
[0015]基于以上技術問題，本發明還提供多功能蛋白質層析電泳及其回收方法，根據權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括如下步驟:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，Ib)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離；lc)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉；同時，通過所述層析液相通道將所需層析流動相輸入多通道層析電泳分離槽，使分離后的蛋白質樣品按先后順序由右多通道層析電泳切換模塊的液相出口輸出并用收集器分別收集。
[0016]基于以上技術問題，本發明還提供多功能蛋白質層析電泳方法，根據權利要求3所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括如下步驟:1a)調節所述氣動開關槽中氣體壓力，使所述氣動開關膜處于正壓狀態下，關閉所述多通道加樣孔與所述層析液相通道之間的通路，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，Ib)調節所述氣動開關槽中氣體壓力，使所述氣動開關膜處于負壓狀態下，打開所述多通道加樣孔與所述層析液相通道之間的通路，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離。
[0017]本發明的有益效果是:本專利的創新點之一就是獨特的層析電泳介質并用該層析電泳介質代替聚丙烯酰胺凝膠，一方面使蛋白質可以在層析電泳介質中完成分離，使它具有了傳統蛋白電泳的制備和普遍使用的特點，另一方面在于它的表面包裹著一層化學偶聯物質，可以在特殊波長的LED光誘導下活化，與蛋白在原位發生偶聯反應，使蛋白共價結合到層析電泳介質上。完成傳統蛋白電泳的原位立體印跡過程。這些創新點都是毛細管電泳無法完成，是對毛細管電泳相關免疫分析的一個創新性改造。這些便利的條件，方便實現WESTERN儀的全自化。
[0018]本發明有效地結合了傳統的液相層析電泳、化學敏偶聯特性，傳統Western分析三種技術的優勢，研發了一種新型層析電泳(電色譜，electro chromatography,指蛋白在液相層析介質中進行的電泳，目前只在毛細管電泳中使用)，可以使常規Western分析自動化，從而建立全自動Western儀。首先，由于全自動Western儀即有傳統Western的制備和成像優勢，又有毛細管電泳的自動化和快速分析功能的，它比傳統的Western分析具有更加實用和更廣泛的應用價值。全自動Western儀極大地提高了 Western分析的速度，即節省時間，又節省人力。另外，不需要高級技術人員，能夠減少人為的操作誤差，比較容易推廣，降低了 Western技術的使用門濫兒。全自動Western儀的生物安全性:由于傳統Western分析中不能避免操作人員與蛋白樣本的接觸,特別在分析有傳染性疾病的臨床標本時，操作人員難免受到潛在威脅。全自動Western儀的使用可以最大限度地保護操作人員免受具潛在傳染性標本的威脅，消除生物安全性隱患。可以使用全自動Western儀來檢測的病原體包括I)病毒:HIV、HCV、HEV、巨細胞病毒、單純皰疹病毒、細小病毒、風疹病毒、EB病毒等；2)細菌:螺旋體、布氏桿菌、幽門螺旋菌、梅毒、耶爾森氏菌屬；3)寄生蟲:弓形體病等。
[0019]全自動Western儀的重要意義:全自動Western儀能夠提高生命科學研究和臨床醫學診斷的能力，在生命科學研究、臨床醫學診斷和疾病檢測控制等方面都具有巨大的應用前景。在臨床診斷方面，全自動Western儀的出現將使得Western分析技術被更廣泛的采用。在生命科學研究方面，由于Western是確認蛋白表達、分子量、等電點和蛋白相互作用等必不可少的標準方法，全自動Western儀的使用將極大地提高發表文章的速度和質量。全自動Western儀適用于大學、醫學科研單位、醫院檢驗科、疾病控制中心、檢驗檢疫系統、中心實驗室等。所以，全自動Western儀的研制具有非常高的實用性，對現代生命科學的發展具有重要意義。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]圖1是本發明蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置剖視示意圖；
圖2是本發明蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置的層析電泳切換模塊剖切示意圖；
圖3是本發明蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置的層析電泳分離板立體示意圖；
圖中，I層析電泳切換模塊，2層析電泳分離板，3層析電泳介質，4LED熒光光源，5微量液相驅動泵，6電泳電極,7電泳槽,8加樣孔,9氣動開關空氣入口，10氣動開關膜，11電泳泳道。

【具體實施方式】
[0021]實施例一
一種可實現蛋白質層析電泳及其原位化學印跡介質，包括層析介質，所述層析介質為10-100微米直徑的離子交換樹脂、各種親和層析介質及反相層析微球，所述層析介質填充在所述的多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11內，當所述電泳泳道11內填充了不同的層析介質時，再加入層析液相(流動相)，蛋白質將按照電荷分布和疏水性等進行分離。微球表面共介結合有二吖吮類偶聯分子。所述微球經過與二吖吮類化合物偶聯，形成獨特的二吖吮化合物包裹微球，當用特定波長的光照射所述微球，激活所述層析介質表面的二吖吮類分子，使活化的二吖吮類分子與周圍的蛋白質發生化學偶聯，共價結合到所述微球表面，使蛋白質在所述微球表面產生原位化學印跡。
[0022]實施例二
一種蛋白質層析電泳及其原位化學印跡介質，包括電泳介質，所述電泳介質包括微粒，所述微粒的直徑為20-50微米無孔二氧化硅微球或多孔玻璃微球或其他高分子材料微球。所述微球經過與二吖吮類化合物偶聯，形成獨特的二吖吮化合物包裹微球，用所述二吖吮化合物包裹微球作為層析電泳介質3取代傳統聚丙烯酰胺凝膠，可以對蛋白質進行電泳分離操作。用二氧化硅微球或多孔玻璃微球或其它高分子材料微球填充在所述的多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11內，另外，當所述電泳泳道11內填充了多糖或兩性電解質等介質時，蛋白質在電泳介質中受到電泳緩沖液組成和二氧化硅微球表面分子的作用，使不同蛋白質在所述層析電泳介質3中的泳動按其分子特性，如分子量和等電點等特性，達到層析電泳分離的目的。
[0023]所述微球經過與二吖吮類化合物偶聯，形成獨特的二吖吮化合物包裹微球，當用特定波長的光照射所述微粒，激活所述層析介質表面的二吖吮類分子，使活化的二吖吮類分子與周圍的蛋白質發生化學偶聯，共價結合到所述微粒表面，使蛋白質在所述微粒表面產生原位化學印跡。
[0024]實施例三
如圖1至圖2所示，一種蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，俗稱全自動Western儀，它包括多通道層析電泳模塊、多通道層析電泳分離板2、置于多通道層析電泳分離板2的正下方的LED突光光源4和置于多通道層析電泳分離板2正上方的照機機或攝像鏡頭。多通道層析電泳模塊負責將蛋白質、電泳緩沖液和層析液等輸送到多通道層析電泳分離板2中進行分離處理，所述多通道層析電泳分離板2容納進行分離的電泳層析介質。所述LED熒光光源4可以提供激活光化學反應和激發熒光標記抗體顯色所需要波長的單色光源。其中，其中LED熒光光源4由多個特定波長的LED燈組成點光源矩陣，保證所述層析電泳介質3表面的二吖吮類分子分子充分活化。所述照相或攝像鏡頭用于觀察和記錄蛋白質涌動圖像。所述電泳層析介質中包括有微粒，在所述微粒的表面共介結合有二吖吮類偶聯分子。所述微粒的直徑為10微米至100微米的微球。所述微粒可以為離子交換樹脂、親和層析介質、反相層析介質微粒或者無孔二氧化硅微粒或多孔玻璃微粒或其它高分子材料微球。多通道層析電泳模塊包括兩個層析電泳切換模塊1，分別為負極層析電泳切換模塊I和正極層析電泳切換模塊1，負極層析電泳切換模塊I和正極層析電泳切換模塊I分別置于電泳泳道11的左右兩側。層析電泳切換模塊I和所述多通道層析電泳分離板2在一個平面，其中至少一個層析電泳切換模塊I可以在平面的上來回滑動實現層析電泳切換模塊I與電泳泳道11的分離合并；當兩個層析電泳切換模塊I都分開時，多通道層析電泳分離板2可以自由取出或放回；當兩個層析電泳切換模塊I合并時，層析電泳切換模塊I的多個出口分別與多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11對齊；層析電泳切換模塊I和多通道層析電泳分離板2結合部位有橡膠圈或膜，以確保電泳泳道11暢通但與外界嚴密不漏水和氣。如圖3所示，多通道層析電泳分離板2為多個電泳泳道11。這樣在進行樣品檢驗時就可以同時檢驗多組樣品，所述的電泳泳道11為上下兩塊具有刻槽的玻璃或有機玻璃板扣合而成，具體地，米用兩塊刻有0.1-1暈米深,6-12暈米寬,60-120暈米長刻槽的玻璃或透明亞克力材料，面對面粘合后形成0.2-2毫米厚，6-12毫米寬，60-120毫米長的可以容納層析電泳介質3的電泳泳道11，兩端有固定填料將泳道口封住，容許液相流動的同時防止微粒流出。所述固定填料可以采用如下方式成型:在所形成的層析電泳泳道11 一端加入少量20微米二氧化硅微球和甲酰胺并在高溫下使其偶聯固化，形成大約2-5毫米厚的二氧化硅微球固化層。所述的二氧化硅微球固化層將容許液體通過，但可以阻止所述層析電泳介質3的流出。同樣也可以采用離子交換樹脂或者反相層析微球和甲酰胺并在高溫下使其偶聯固化，形成大約2-5毫米厚的離子交換樹脂或者反相層析微球固化層。如圖2所示，所述多通道層析電泳切換模塊I分別包括電泳槽7、多通道加樣孔8、多通道氣動開關和多個層析液相通道，所述電泳槽7內分別有正電極和負電極，多通道加樣孔8與電泳槽7相連通，多通道加樣孔8經多通道氣動開關分別與層析液相通道相連通，所述層析液相通道分別與電泳泳道11相連通。所述多個層析液相通道的入口或出口處裝有微量液相驅動泵5。在所述每個加樣孔8的底部有一個氣動開關槽，所述每個氣動開關槽內有一個氣動開關膜10，將氣動開關槽分隔成兩個通道，所述的每個加樣孔8經氣動開關槽的一個通道與層析液相通道相連通，另一個通道與氣動開關空氣入口 9相連通，氣動開關空氣入口 9連有吸氣閥和出氣閥，當氣動開關膜10從氣動開關空氣入口 9輸入正壓或負壓驅動時，氣動開關膜10分別開啟和關閉每個加樣孔8與每個層析液相通道之間的通路。用于進行電泳和層析分離。
[0025]對于上述發明，其技術特點在于能夠進行蛋白質層析和蛋白質液相電泳兩種運作模式。而所述層析電泳轉換模塊可以在蛋白質層析和蛋白質電泳兩種運作模式之間進行切換，達到完成蛋白質層析和蛋白質電泳兩種操作的目的。對于上述層析電泳切換模塊1，當處于電泳模式時，所述的層析電泳切換模塊I的氣動開關空氣入口 9處于負壓力,氣動開關膜10處于開啟狀態，正負電泳電極6可以通過電泳緩沖液，經由加樣孔8和氣動開關膜10與多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11相連，形成電泳回路。(或:由負極層析電泳切換模塊I的電泳槽7負電泳電極6進入加樣孔8進入氣動開關膜10，進入多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11，再進入正極層析電泳切換模塊I的電泳槽7的正極。)當處于層析模式時，所述的層析電泳切換模塊I的氣動開關空氣入口 9通常處于正壓力,氣動開關膜10處于關閉狀態，此時氣動開關膜10關斷，多通道層析電泳分離板2與正負電泳電極6和電泳緩沖液被氣動開關膜10分隔，電泳回路中斷，同時微量液相驅動泵5和多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11相連，組成液相層析回路。所述的微量液相驅動泵5可以將需要的溶液和試劑輸送到電泳泳道11中。
[0026]當開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路打開，此時在電泳模式下，在電場的作用下蛋白質可以從層析電泳切換模塊I進入多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11中并在層析電泳介質3中得到分離。當關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路關閉，此時在層析模式下，溶液和蛋白質在微量液相驅動泵5的推動下從層析電泳切換模塊I進入多通道層析電泳分離板2并在層析電泳介質3中對蛋白進行層析分離，并可以對液相部分進行置換。值得注意的是:在層析模式下，加樣孔8與電泳泳道11是不相通的，為了使蛋白質能通過氣動開關膜10進入到電泳泳道11中，則應該不時的打開氣動開關膜10，同時在負極或正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5驅動下，蛋白質由負極游向正極。為了實現蛋白質的層析，還可以采用另一種方法:即預先通過電泳模式將蛋白質運送到多通道層析電泳分離槽的起始位置，具體步驟是:調節所述氣動開關槽中氣體壓力，使所述氣動開關膜10處于負壓狀態下，打開所述多通道加樣孔8與所述層析液相通道之間的通路，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊I上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔8中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽的起始位置。在為層析工作模式時，在微量液相驅動泵5的驅動下將與產生原位化學印跡蛋白質發生免疫成像的第一抗體和第二抗體及酶聯標記的發光底物送入多通道層析電泳分離板2中。
[0027]對于上述實施例，電泳槽7可以是一個也可以是多個，另外它也可以單獨與電泳泳道11相連通，只要蛋白質經過電泳槽7的導電通路就可以了。其可以在電泳槽7的通路上設置儲存槽，使蛋白質加樣孔8的輸出端與儲存槽相連通，即可保證電泳過程的完成。所述LED熒光光源4也可以置于多通道層析電泳分離板2的上方，或其它位置只要是可以照射到分離池中的微粒即可。
[0028]上述的電泳泳道11的多通道層析電泳分離板2是一種能夠使用所述層析電泳介質3的電泳裝置，其作用是能夠讓所述層析電泳介質3形成像傳統聚丙烯酰胺凝膠的物理尺寸和形狀，確保蛋白質可以在層析和電泳兩種模式下進行有效分離，同時確保蛋白質可以在層析電泳介質3中完成原位化學印跡和免疫成像等操作。
[0029]本發明還包括一種用來取代傳統聚丙烯酰胺凝膠的層析電泳介質3。所述層析電泳介質3的技術要求包括I)取代傳統聚丙烯酰胺凝膠但仍然能夠進行蛋白質電泳分離，2)容許1-2000微升/分鐘的液體流動速度，保證緩沖液和溶液在層析電泳介質3中的流動，3)具有偶聯蛋白質的化學反應特性，即在光或化學試劑的活化作用下與周圍蛋白質發生化學偶聯反應。
[0030]實施例四
與實施例三不同之處在于，層析電泳切換模塊I只有一個，它位于多通道層析電泳分離板2的左側，右側只有第一溶液槽，在所述第一溶液槽內有正電極。第一溶液槽通過層析液相通道與電泳泳道11相連通，在所述層析電泳切換模塊I的電泳槽7內有負電極，另外所述的微量液相驅動泵5為一個，它位于層析液相通道的入口或出口。
[0031]實施例五
一種蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括多通道層析電泳模塊、第一溶液槽、采用多個電泳泳道11的多通道層析電泳分離板2、活性層析介質和LED熒光光源4，所述多通道層析電泳模塊的液相出口接至多通道層析電泳分離板2的一端，多通道層析電泳分離板2的另一端接至第一溶液槽，所述活性層析介質置于層析電泳分離平板的電泳泳道11內，所述LED熒光光源4用于照射所述多通道層析電泳分離板2。所述多通道層析電泳模塊為多通道層析電泳切換模塊1，所述多通道層析電泳切換模塊I分別包括第二溶液槽和多通道加樣孔8，所述第二溶液槽與電泳泳道11相連通，所述多通道加樣孔8與電泳泳道11相連通，在所述第一、第二溶液槽內分別有正電極和負電極。此結構也可以實現層析模式和電泳模式，在層析模式下溶液、第一抗體和第二抗體及酶聯標記的發光底物從第二溶液槽通過重力也可以從多通道層析電泳分離板2的一邊移向另一邊。
[0032]對于上述實施例，事實上層析電泳模塊可以采用各種各樣結構，如采用獨立的層析輸送模塊或者采用獨立的電泳輸送模塊，加樣孔8可以采用單獨獨立的結構與電泳泳道11相連通，而第一、第二溶液槽則通過另一通道與電泳泳道11相連通。加樣孔8也可以不獨立存在，而是直接通過溶液槽進行蛋白質加樣。而這些只是簡單的列舉，事實上還有很多種其它實現的結構，這些結構都不應脫離本發明的保護范圍。
[0033]上述的獨立的層析輸送模塊可以采用如下結構:所述多通道層析電泳模塊包括溶液槽和多通道加樣孔8，所述溶液槽與電泳泳道11相連通，所述多通道加樣孔8與電泳泳道11相連通。該多通道層析電泳模塊為兩個，一個位于多通道層析電泳分離板2的一端，另一個位于多通道層析電泳分離板2的另一端。
[0034]上述的獨立的電泳輸送模塊可以采用如下結構:所述多通道層析電泳模塊包括溶液槽和多通道加樣孔8，所述溶液槽與加樣孔8相連通，所述多通道加樣孔8與電泳泳道11相連通。該多通道層析電泳模塊為兩個，一個位于多通道層析電泳分離板2的一端，另一個位于多通道層析電泳分離板2的另一端。位于多通道層析電泳分離板2的一端和另一端的溶液槽中分別有負電極和正電極。
[0035]實施例六
與實施例三不同之處在于:所述多通道層析電泳模塊為多通道層析電泳切換模塊1，所述多通道層析電泳切換模塊I分別包括電泳槽7、多通道加樣孔8、多通道開關和多個層析液相通道，所述電泳槽7內分別有正電極或負電極，多通道加樣孔8與電泳槽7相連通，多通道加樣孔8經多通道開關分別與電泳泳道11相連通，所述層析液相通道分別與電泳泳道11相連通。所述多通道開關可以是各種形式的開關，如機械式開關等。
[0036]實施例七
一種蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，包括如下步驟:1)利用多通道層析電泳分離板2中的活性層析介質進行電泳層析分離，所述活性層析介質包括有微粒，所述微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，當為無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒時，所述步驟I采用如實施例六所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，所述步驟I)的具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔8中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽7內加入電泳緩沖液，Ib)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊I上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔8中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離。2)在所述的活性層析介質中微粒為其表面共介結合有二吖吮類偶聯分子的微粒，用特定波長的光照射所述微粒，激活所述層析電泳介質3表面的二吖吮類分子，使活化的二吖吮類分子與周圍的蛋白質發生化學偶聯，共價結合到所述微粒表面，使蛋白質在所述微粒表面產生原位化學印跡。3)在完成原位化學印跡以后，將層析電泳切換模塊I切換到層析模式，通過微量液相驅動泵5將第一抗體輸送到多通道層析電泳分離板2中與發生化學偶聯的原位化學印跡蛋白質相互作用；4)洗掉未反應的第一抗體，通過微量液相驅動泵5將第二抗體輸送到多通道層析電泳分離板2中與第一抗體相互作用；當第二抗體是熒光標記的，用LED熒光光源4照射第二抗體的表面，激發熒光標記發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板2正上方的帶有相應濾光片的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質熒光免疫成像。如果使用的是酶聯標記的第二抗體，如第二抗體是過氧化酶標記的，通過微量液相驅動泵5將過氧化酶的發光底物輸送到多通道層析電泳分離槽中與過氧化酶相互作用而發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板2正上方的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質化學發光免疫成像。所述步驟4)具體步驟如下:4)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中依次輸入緩沖液、一種或幾種能夠識別某些蛋白質的第一抗體、熒光或酶聯標記的第二抗體。
[0037]本發明還提供了一種對所述層析電泳介質3中熒光標記蛋白質進行實時監測的方法。即對熒光標記蛋白質進行層析電泳時，通過開啟LED熒光光源4，激發層析電泳泳道11中熒光標記蛋白質，通過肉眼或照相設備，對蛋白質涌動進行實時觀察和成像。
[0038]當采用兩性電解質或多糖進行電泳分離時，本實施例的操作方法如下:在兩個層析電泳切換模塊I的電泳槽7中加入適量電泳緩沖液，通過微量液相驅動泵5用電泳緩沖液對層析電泳切換模塊I和多通道層析電泳分離板2中的液體管道進行沖洗，通過微量液相驅動泵5用含有兩性電解質或多糖對多通道層析電泳分離板2進行平衡。
[0039]當使用兩性電解質(ampholyte)填充多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11時，蛋白質可以按等電點進行分離(等電聚焦);此時若層析電泳介質3中不含有二氧化硅微球，則無法進行原位化學印跡和免疫成像。
[0040]當使用含有多糖的電泳緩沖液填充多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11時，蛋白質可以按分子量大小進行分離。此時若層析電泳介質3中不含有二氧化硅微球，則無法進行原位化學印跡和免疫成像。
[0041]將蛋白質樣品加入到層析電泳切換模塊I的加樣孔8中，通過層析電泳切換模塊I切換到電泳模式并開始電泳，在電場的作用下蛋白質將從加樣孔8進入多通道層析電泳分離板2并在層析電泳介質3中得到分離。
[0042]上述蛋白質樣品也可以換成熒光標記的蛋白質。
[0043]當溴酚藍指示劑在多通道層析電泳分離板2中走到合適的位置以后，開啟所述LED熒光光源4，活化層析電泳介質3表面的二吖吮類偶聯分子，誘發與周圍蛋白質的自由基偶聯反應，完成蛋白質涌動圖像的原位化學印跡。
[0044]通過層析電泳切換模塊I切換到層析模式，通過微量液相驅動泵5由微量液相驅動泵5的輸入口將第一抗體輸送到層析電泳介質3中與偶聯的蛋白質相互作用。
[0045]在層析模式下，通過微量液相驅動泵5洗掉未反應的第一抗體，再將第二抗體輸送到層析電泳介質3中與第一抗體相互作用。
[0046]如果第二抗體是突光標記的，可以開啟所述LED突光光源4,激發突光標記發光，并通過多通道層析電泳分離板2正上方的照相或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和熒光免疫成像。
[0047]如果第二抗體是過氧化酶標記的，通過微量液相驅動泵5將過氧化酶的發光底物輸送到層析電泳介質3中與過氧化酶相互作用而發光，通過照相設備觀察蛋白質涌動圖像，完成蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和化學發光免疫成像。
[0048]當采用離子交換或反相親和層析法進行層析分離時，本實施例的操作方法如下: 如果使用離子交換或反相親和層析等，當使用離子交換樹脂取代層析電泳介質3時，
蛋白質將按照電荷分布進行分離；當使用反相層析介質(CS，C18等)取代層析電泳介質3時，蛋白質將按照疏水性進行分離；將蛋白質樣品加入到層析電泳切換模塊I的加樣孔8中后切換到層析模式，在正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5的驅動下將蛋白質和層析液從加樣孔8進入多通道層析電泳分離板2并在層析電泳介質3中得到分離。值得注意的是:在層析模式下，加樣孔8與電泳泳道11是不相通的，為了使蛋白質能通過氣動開關膜10進入到電泳泳道11中，則應該不時的打開氣動開關膜10，同時在負極或正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5驅動下，蛋白質由負極游向正極。另外也可以預先通過電泳模式將蛋白質運送到多通道層析電泳分離槽的起始位置。
[0049]其它步驟跟采用兩性電解質或多糖進行電泳分離時相同。
[0050]上述蛋白質也可以是突光標記的蛋白質。
[0051]由于蛋白質是熒光標記的，可以開啟所述LED熒光光源4，激發熒光標記發光，并通過多通道層析電泳分離板2正上方的照相或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像。
[0052]實施例八
與實施例七不同之處在于步驟1:所述步驟I具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔8中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽7內加入電泳緩沖液，Ib)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊I上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔8中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽的起始位置，Ic)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔8與所述電泳泳道11之間的通路關閉；同時，通過所述層析液相通道將所需層析流動相輸入多通道層析電泳分離槽，使蛋白質樣品在所述層析電泳介質3中得到分離。
[0053]實施例九
本實施例提供一種新型蛋白質層析電泳及其回收裝置，可以對蛋白質按等電點、分子量或其它分子特性進行分離并可以回收分離后的蛋白質，即增加了自動部份收集器，所述自動部份收集器為96-孔板部份收集器。其它部分與實施例三相同。本實施例所述的自動部份收集器置于正極層析電泳切換模塊I的下游，正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5之后。可以通過正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5將多通道層析電泳分離板2的電泳泳道11中的蛋白質緩慢泵出，由自動部份收集器按96個組分進行收集。其中96-孔板自動部份收集器可以是市場上現有的自動部份收集器。
[0054]本實施例的操作方法大致如下:
蛋白質液相電泳分離:第一步，在電場的作用下，熒光標記蛋白質將從加樣孔8進入多通道層析電泳分離板2并在層析電泳介質3中得到分離。第二步，開啟所述LED熒光光源4，激發熒光標記發光，并通過多通道層析電泳分離板2正上方的照相或攝像鏡頭記錄蛋白質的涌動圖像。第三步，切換到層析模式，在正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5的驅動下將多通道層析電泳分離板2中分離后的熒光標記蛋白質通過96-孔板部份收集器按組分分別收集。
[0055]蛋白質層析分離:第一步，在正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5的驅動下蛋白質將從加樣孔8進入多通道層析電泳分離板2并在層析電泳介質3中得到分離。第二步，開啟所述LED熒光光源4，激發熒光標記發光，并通過多通道層析電泳分離板2正上方的照相或攝像鏡頭記錄蛋白質的涌動圖像。第三步，在正極層析電泳切換模塊I的微量液相驅動泵5的驅動下將多通道層析電泳分離板2中分離后的記蛋白質通過96-孔板部份收集器按組分分別收集。
[0056]除上述實施例外，本發明還可以有其他實施方式。凡采用等同替換或等效變換形成的技術方案，均落在本發明要求的保護范圍。
【權利要求】
1.蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:包括多通道層析電泳模塊、第一溶液槽、采用多個電泳泳道的多通道層析電泳分離板、活性層析介質和LED熒光光源，所述多通道層析電泳模塊的液相出口接至多通道層析電泳分離板的一端，多通道層析電泳分離板的另一端接至第一溶液槽，所述活性層析介質置于層析電泳分離平板的電泳泳道內，所述LED熒光光源用于照射所述多通道層析電泳分離板，所述活性層析介質包括有微粒，所述微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，在所述微粒的表面共介結合有二吖晚類偶聯分子。
2.根據權利要求1所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:所述多通道層析電泳模塊為多通道層析電泳切換模塊，所述第一溶液槽為多通道層析電泳切換模塊，所述多通道層析電泳切換模塊分別包括電泳槽、多通道加樣孔、多通道開關和多個層析液相通道，所述電泳槽內分別有正電極和負電極，多通道加樣孔與電泳槽相連通，多通道加樣孔經多通道開關分別與電泳泳道相連通，所述層析液相通道分別與電泳泳道相連通。
3.根據權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:所述的多通道開關為多通道氣動開關，在所述每個加樣孔的底部有一個氣動開關槽，所述每個氣動開關槽內有一個氣動開關膜，將氣動開關槽分隔成兩個通道，所述的每個加樣孔經氣動開關槽的一個通道與層析液相通道相連通，另一個通道與氣動開關氣體入口相連通，當氣動開關膜從氣動開關氣體入口輸入正壓或負壓驅動時，氣動開關膜分別開啟和關閉每個加樣孔與每個層析液相通道之間的通路。
4.根據權利要求2或3所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:還包括微量液相驅動泵，所述微量液相驅動泵置于層析液相通道的入口處和/或出口處。
5.根據權利要求1或2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:所述微粒為直徑是10微米至100微米的微球。
6.根據權利要求1或2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，其特征在于:所述多通道層析電泳分離板由兩塊含有多個4-12毫米寬、0.1-1毫米深槽的玻璃、有機玻璃或透明高分子材料板面對面粘合而成，形成多個4-12毫米寬、0.2-2毫米深的多通道層析電泳分離槽，兩端有固定填料將泳道口封住，形成多個電泳泳道。
7.蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，其特征在于:包括如下步驟:1)利用多通道層析電泳分離板中的活性層析介質進行層析電泳分離，所述活性層析介質包括有微粒，所述微粒為表面活化離子交換樹脂、親和層析填料、反相層析填料或者無孔二氧化硅微粒或者多孔玻璃微粒或者高分子材料微粒，2)在所述的活性層析介質中微粒為其表面共介結合有二吖吮類偶聯分子的微粒，用特定波長的光照射所述微粒，激活所述層析電泳介質表面的二吖吮類分子，使活化的二吖吮類分子與周圍的蛋白質發生化學偶聯，共價結合到所述微粒表面，使蛋白質在所述微粒表面產生原位化學印跡；3)將第一抗體輸送到多通道層析電泳分離板中與發生化學偶聯的原位化學印跡蛋白質相互作用；4)洗掉未反應的第一抗體，將第二抗體輸送到多通道層析電泳分離板中與第一抗體相互作用；當第二抗體是熒光標記的，用LED熒光光源照射第二抗體的表面，激發熒光標記發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板正上方的帶有相應濾光片的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質熒光免疫成像；如果使用的是酶聯標記的第二抗體，將酶聯標記的發光底物輸送到多通道層析電泳分離槽中與酶聯標記物相互作用而發光，直接觀察或通過位于多通道層析電泳分離板正上方的照相機或攝像鏡頭觀察和記錄蛋白質的涌動圖像，完成蛋白質化學發光免疫成像。
8.根據權利要求7所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，其特征在于:所述步驟1采用如權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，lb)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離。
9.根據權利要求7所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，其特征在于:所述步驟1采用如權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，具體步驟如下:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，lb)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽的起始位置，lc)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉；同時，通過所述層析液相通道將所需層析流動相輸入多通道層析電泳分離槽，使蛋白質樣品在所述層析電泳介質中得到分離。
10.根據權利要求7至9中任意一項權利要求所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像方法，其特征在于:所述步驟4)具體步驟如下:4)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中依次輸入緩沖液、一種或幾種能夠識別某些蛋白質的第一抗體、熒光或酶聯標記的第二抗體。
11.多功能蛋白質層析電泳及其回收方法，其特征在于:根據權利要求2所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括如下步驟:1a)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，lb)開啟多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路打開，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離；lc)關閉多通道開關，使所述多通道加樣孔與所述電泳泳道之間的通路關閉；同時，通過所述層析液相通道將所需層析流動相輸入多通道層析電泳分離槽，使分離后的蛋白質樣品按先后順序由右多通道層析電泳切換模塊的液相出口輸出并用收集器分別收集。
12.多功能蛋白質層析電泳方法，其特征在于:根據權利要求3所述的蛋白質層析電泳及其原位化學印跡和免疫成像裝置，包括如下步驟:1a)調節所述氣動開關槽中氣體壓力，使所述氣動開關膜處于正壓狀態下，關閉所述多通道加樣孔與所述層析液相通道之間的通路，通過所述層析液相通道向所述多通道層析電泳分離槽中加入所需要的層析電泳緩沖液，在所述蛋白質加樣孔中加入需要層析分析的蛋白質樣品，在電泳槽內加入電泳緩沖液，lb)調節所述氣動開關槽中氣體壓力，使所述氣動開關膜處于負壓狀態下，打開所述多通道加樣孔與所述層析液相通道之間的通路，同時在所述左右兩個多通道層析電泳切換模塊上加合適電壓，使所述蛋白質加樣孔中的蛋白質樣品在電場中移動到所述多通道層析電泳分離槽中得到分離。
【文檔編號】G01N33/68GK104297491SQ201410533235
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月11日 優先權日:2014年10月11日
【發明者】楊靜華 申請人:南京山諾生物科技有限公司