專利名稱：用于檢測靶物質的試劑盒和用該試劑盒檢測靶物質的方法
技術領域：
本公開內容涉及用于檢測靶物質的試劑盒(kit)和使用其檢測靶物質的方法。
背景技術：
抗生物素蛋白和生物素，像在抗體和抗原之間的反應的情況中一祥，經由基于非共價結合的分子間相互作用而彼此非常穩定地結合以形成復合物。最多四個生物素分子可連接到ー個抗生物素蛋白分子，并且抗生物素 蛋白和生物素之間的相互作用具有在目前已知的存在于天然體系的實體中最強的結合力。然而，當熒光分子篩或酶接觸抗生物素蛋白時，與不意圖檢測的物質或基質的非特異性結合的水平高，且因此，信噪比變低。因此，難以實現高靈敏度的傳感器。因而，不能以高再現性和高靈敏度檢測靶物質。而且，在熒光分子篩的情況下，當暴露于光時，尤其是紫外區的光時，熒光分子篩的熒光性質降低，并且在酶的情況下，根據包括例如溫度或濕度的條件，其活性也可容易地降低。因此，使用熒光分子篩或酶的采用靶物質信號放大方法的檢測試劑盒具有差的長期保存性質，而且，在自診斷具有頻繁的急性發作的心血管疾病、在家庭中的循環系統疾病、和在現場作業中的醫療中有限制。而且，高量子點即使當長時間暴露于高能量的光時也幾乎不被光漂白。因此，量子點可比熒光分子篩更穩定地更長時間地發射熒光信號。而且，由于量子點的表面被改造以降低非特異性結合的水平，因此信噪比相對地提高。而且，通過將兩性離子化合物引入量子點的表面，可最小化量子點和不意圖檢測的物質或基質之間的非特異性結合，所述兩性離子化合物幫助表面電荷具有根據周圍條件幾乎不改變的這樣的電荷特性并且使其表面具有幾乎中性。通過利用這樣的特性，提出快速且容易地放大靶物質檢測信號的方法。

發明內容
提供用于檢測靶物質的試劑盒，其中該試劑盒包含包括第一分子和連接至該第一分子的探針的靶物質結合部分；和包括納米顆粒的靶物質檢測部分，所述納米顆粒各自具有第二分子和具有兩性離子的化合物連接到其的表面，其中所述第一分子特異性結合到所述第二分子而成對。提供通過使用該試劑盒檢測靶物質的方法。


由結合附圖考慮的實施方式的以下描述，這些和/或其它方面將變得明晰和更容易理解，在所述附圖中圖I是根據本發明實施方式的靶物質檢測部分的示意圖，其中兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接到量子點的表面；圖2是用于比較量子點的吸收率(吸光度)(A)和發射光譜(C)與兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素(鏈親和素，streptavidin)連接的量子點的吸收率(吸光度)(B)和發射光譜(D)的圖；圖3顯示關于兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接的的量子點(A)、生物素連接的量子點(B)、結合前的量子點(C)的通過動態光散射測量的流體動力學尺寸的結果，在所述兩性離子化合物和所述抗生物素蛋白鏈菌素連接的量子點之間的特異性結合由于其間的相互作用而發生。所述圖各自的數字是具有最高頻率的頂點的測量值；圖4是根據在量子點的表面處的非特異性結合力的肌紅蛋白檢測信號放大強度的圖；圖5是說明通過使用根據本發明實施方式的靶物質檢測部分和靶物質結合部分檢測肌紅蛋白的方法的示意圖； 圖6A是根據反應時間的關于兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接的量子點及生物素連接的量子點之間的特異性相互作用的熒光信號強度的圖，且圖6B是根據用生物素連接的量子點處理次數的肌紅蛋白檢測熒光信號強度的圖；圖7是由于兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接的量子點與生物素連接的量子點之間的特異性相互作用而放大的肌紅蛋白的檢測信號強度圖，其中由關于97. 5pg/mL l. 60 μ g/mL的多種肌紅蛋白濃度的檢測基質的熒光顯微鏡圖片，以相對熒光強度(分別地，32次(倒三角形)和4次(三角形)放大的檢測信號)、和信噪比(分別地，32次(圓形)和4次(正方形)放大的檢測信號)量化結果。
具體實施例方式現在將詳細介紹實施方式，其實例示于附圖中，其中相同的附圖標記始終表示相同的元件。在這方面，本實施方式可具有不同的形式，并且不應解釋為限于本文中闡述的描述。因而，以下僅通過參考附圖描述實施方式以解釋本說明書的各方面。本發明的一方面提供用于檢測靶物質的試劑盒，其中該試劑盒包含包括第一分子和連接至該第一分子的探針的靶物質結合部分；和包括納米顆粒的靶物質檢測部分，所述納米顆粒各自具有第二分子和具有兩性離子的化合物連接到其的表面，其中所述第一分子特異性結合到所述第二分子而成對。術語“靶物質”指樣品中待檢測的物質，并且該靶物質可為例如生物聚合物，如蛋白質、核酸、碳水化合物、或脂質。該試劑盒包含靶物質結合部分和靶物質檢測部分。該試劑盒的靶物質結合部分是直接結合到靶物質的部分，并且該試劑盒的靶物質檢測部分可經由與該靶物質結合部分的特異性結合檢測該靶物質的存在。根據本發明的實施方式，該靶物質結合部分可包括第一分子和連接至該第一分子的探針。根據本發明的實施方式，該第一分子可特異性結合到包含于該靶物質檢測部分中的第二分子而成對。術語“特異性結合”指兩個或更多個分子之間經由共價鍵或非共價鍵的相互作用，且特異性結合的實例是抗原和抗體之間經由特異性結合的免疫反應。根據上述定義，第一分子和第二分子對可例如選自單鏈核酸分子和具有與其互補的序列的單鏈核酸分子對、雙鏈DNA和與其特異性結合的蛋白質對、以及抗原和抗體對。詳細地，所述對可選自抗生物素蛋白鏈菌素和生物素對、抗生物素蛋白和辣根過氧化物酶對、抗生物素蛋白鏈菌素和堿性磷酸酶對、以及抗生物素蛋白和生物素對，但不限于此。由于第一分子和第二分子之間的特異性結合，當檢測到靶物質時，該包括第一分子的靶物質結合部分可位于該包括第二分子的靶物質檢測部分附近。術語“探針”指在靶物質的檢測期間直接特異性結合到靶物質的分子。因而，根據靶物質，所述探針可變化。例如，如果靶物質為抗原蛋白質，所述探針可為特異性結合到該抗原蛋白質的抗體。根據本發明的實施方式，所述探針可為特異性結合到靶物質的分子。所述探針可例如選自核酸、碳水化合物、抗體、和脂質，但不限于此。根據本發明的實施方式，靶物質檢測部分可包括納米顆粒，所述納米顆粒各自具有所述第二分子和具有兩性離子的化合物連接到其的表面。術語“納米顆粒”指由約f約IOOOnm的直徑的材料組成的顆粒，并且所述納米顆粒可為金屬納米顆粒或非金屬納米顆粒。根據本發明的實施方式，所述金屬納米顆粒可選 自金、銀、銅、鋁、鎳、鈀、钚、磁鐵、和其氧化物，但不限于此，并且所述非金屬納米顆粒可選自二氧化硅、聚苯乙烯、膠乳、和基于丙烯酸酯的材料，但不限于此。而且，納米顆粒可為包括選自周期表中II VI族化合物半導體、III V族化合物半導體、和IV族化合物半導體的一種或多種量子點復合物。術語“兩性離子”指在相同分子中在不同位置包含正電荷和負電荷的分子，且因而，當具有兩性離子的化合物在水溶液中離子化時，該化合物具有正電荷和負電荷。根據本發明的實施方式，具有兩性離子的化合物連接到靶物質檢測部分的表面以防止與靶物質結合部分非特異性結合。根據本發明的實施方式，具有兩性離子的化合物可例如選自氨基酸、N-二(羥乙基)甘氨酸、三(羥甲基)甲基甘氨酸(tricine)、氨基磺酸、生物堿、賽洛西賓(二甲-4-羥色氨磷酸)(psilocybin)、醌型、和甜菜堿，但不限于此。而且，第二分子可特異性結合到包含于靶物質結合部分中的第一分子而成對。所述第一分子和所述第二分子對已在以上描述，且由于第二分子和第一分子之間的特異性結合，在靶物質的檢測期間，包含第一分子的靶物質結合部分可位于包含第二分子的靶物質檢測部分附近。根據本發明的實施方式，第二分子可經由結合到各納米顆粒的表面的接頭連接。接頭可為本領域中用作接頭的各種化合物的任一種，并可根據第二分子中存在的官能團適當地選擇。例如，接頭可選自包含羥基、硫醇基、或酚基的有機酸，和包含吡啶、甲基胺、咪唑、苯并咪唑、組氨酸、磷腈堿、或羥基的有機堿，但不限于此。所述接頭包含納米顆粒結合位點和納米顆粒非結合位點，其中所述納米顆粒結合位點選自包含羥基、硫醇基、或酚基的有機酸，和包含吡啶、甲基胺、咪唑、苯并咪唑、組氨酸、磷腈堿、或羥基的有機堿，并且所述納米顆粒非結合位點選自羧酸和疊氮基。根據本發明的實施方式，靶物質檢測部分可進一步包含連接到各納米顆粒的表面的可檢測標記。術語“可檢測標記”可為特異性檢測在沒有標記的相同種類的分子中的包含標記的分子的原子或分子。可檢測標記可包括例如有色珠、抗原晶體、酶、可雜交核酸、著色材料、熒光材料、磷光材料、可電檢測的分子、或提供改變的熒光偏振或改變的光漫射的材料。而且，所述標記可包含放射性同位素(如P32和S35)、化學發光的化合物、被標記的結合蛋白質、重金屬原子、和光譜標志(如模(die))、或磁性標記材料。本發明的另一方面提供檢測靶物質的方法，該方法包括a)使該試劑盒的靶物質結合部分與待檢測的靶物質接觸山)使操作a)的結果(result)與該試劑盒的靶物質檢測部分接觸；和c)檢測靶物質。現將詳細描述靶物質檢測方法的各操作。首先，所述方法可包括使該試劑盒的靶物質結合部分與待檢測的靶物質接觸。根據本發明的實施方式，靶物質可固定在固體載體上。例如，固體載體可選自載玻片、圓片(晶片，wafer)、珠、膜、和板，但不限于此。根據本發明的實施方式，靶物質可根據待檢測的靶物質而不同，并且其非限制性實例為核酸如DNA、RNA、肽核酸(PNA)、或鎖核酸 (LNA)，蛋白質，肽，碳水化合物，和其組合。接觸可在本發明的領域中廣泛已知的緩沖溶液中進行。也就是說，接觸可在靶物質中存在的分子與靶物質結合部分以穩定狀態相互作用的條件下進行。而且，接觸可通過例如將包含靶物質結合部分的緩沖溶液直接加到固定在固體載體上的靶物質而進行。通過所述接觸，結合到靶物質結合部分的表面的探針可特異性結合到靶物質，且因而，在第一分子暴露時靶物質結合部分結合到靶物質。根據本發明的實施方式，所述方法可進一步包括，在操作a)之后，a-Ι)除去未結合的靶物質結合部分。在a-Ι)的操作中，靶物質結合部分可通過加入過量的本領域中廣泛已知的洗滌溶液例如蒸餾水、醇等而除去。然后，所述方法包括使操作a)的結果與試劑盒的靶物質檢測部分接觸。如在操作a)中一樣，所述接觸可在本領域中廣泛已知的緩沖溶液中進行。也就是說，接觸可在靶物質中存在的分子、靶物質結合部分、和靶物質檢測部分以穩定狀態相互作用的條件下進行。而且，接觸可通過例如將包含靶物質檢測部分的緩沖溶液直接加到操作a)的結果而進行。作為操作a)的結果，靶物質特異性結合到靶物質結合部分的探針，并且連接到探針的第一分子暴露。因而，當使靶物質檢測部分與其接觸時，連接到靶物質檢測部分的表面的第二分子特異性結合到該第一分子，并且在這種情況下，存在于靶物質檢測部分的表面處的兩性離子化合物幫助表面電荷具有幾乎不根據周圍條件改變的這樣的電荷特性且具有幾乎中性，因此，可防止固體載體和靶物質檢測部分之間的非特異性結合。根據本發明的實施方式，所述方法進一步包括，在操作b)之后，b-Ι)除去未結合的靶物質檢測部分。在操作b-Ι)中，靶物質檢測部分可通過加入過量的本領域中廣泛已知的洗滌溶液例如蒸餾水、醇等而除去。根據本發明的實施方式，所述方法進一步包括，在操作b-Ι)之后，b-2)使試劑盒的靶物質檢測部分和操作b-Ι)的結果接觸。所述方法可進一步包括重復包括操作b)、b-ι)、和b-2)的循環I 24次。該循環是指將在操作b)中已與操作a)的結果接觸的結果與靶物質檢測部分重復接觸。根據分子，包含于靶物質結合部分中的第一分子可特異性結合到多個第二分子。因而，如果包括第二分子的靶物質檢測部分的接觸重復進行直到可與第一分子連接的第二分子的數量飽和，則靶物質檢測部分可特異性結合到靶物質結合部分。如果多個靶物質結合部分和靶物質檢測部分由于特異性結合而彼此相鄰存在，則通過靶物質檢測部分可檢測的信號可被放大。最后，所述方法包括c)檢測靶物質。根據本發明的實施方式，在操作c)中，可檢測選自磁信號、電信號、發射信號、散射信號、和放射性信號的信號。所述信號可例如選自由可檢測標記產生的磁信號、電信號、發射信號(如熒光或拉曼信號)、散射信號、和放射性信號。檢測信號的詳細實例與關于可檢測標記給出的相同。現將參考以下實施例進一步詳細地描述一個或多個實施方式。這些實施例僅用于說明的目的并且不意圖限制所述一個或多個實施方式的范圍。實施例I :合成其非特異性結合最小化的靶物質檢測部分將納米顆粒分散在氯仿中,所述納米顆粒各自具有CdSe/CdZnS的芯/殼結構,通 過使用其中鎘(Cd)、硒(Se)、鋅(Zn)、和硫⑶前體快速加入高溫且氮氣(N2)飽和的包括十八碳烯和油胺的溶劑中的高溫熱分解工藝合成。所述納米顆粒用作量子點。而且，將其中預先合成的下式I表示的兩性離子化合物和下式II表示的包含羧基的化合物已過量溶解于其中的水溶液與包含純化量子點的氯仿溶液混合，并將混合物在室溫下攪拌。式I
0IO
1IIi
SSH
II H H
式丨I
O
S S
I I
H H在這方面，存在于各量子點表面的有機分子配體如三辛基膦、三辛基膦氧化物、油胺、油酸等同時被所述兩性離子化合物和所述包含羧基的化合物取代，使得量子點移動到水溶液層并分散于其中。然后，分離氯仿層，且僅將水溶液層透析以除去殘余配體。然后，以用于幫助共價鍵的基于碳二亞胺的結合試劑處理被羧酸和兩性離子化合物同時表面取代的量子點，并將125 μ L的抗生物素蛋白鏈菌素溶液以2. 5mg/mL抗生物素蛋白鏈菌素溶液對應于Inmol量子點的方式加入其中，從而將抗生物素蛋白鏈菌素結合到羧基。由此，得到具有兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接到其的表面的量子點(構成靶物質檢測部分)。圖I是根據本發明實施方式的靶物質檢測部分的示意圖。參考圖1，靶物質檢測部分包括量子點100，其具有兩性離子化合物110和作為第二分子實例的抗生物素蛋白鏈菌素120經由有機分子配體130連接到其的表面。此外，如圖2中所示，證實雖然兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素連接到靶物質檢測部分，但是構成靶物質檢測部分的量子點的吸收和發射特性與兩性離子化合物和抗生物素蛋白鏈菌素未連接到其的對照組相比良好地保持。實施例2 :證實由于靶物質檢測部分的抗生物素蛋白鏈菌素和生物素之間的特異性結合引起的自組裝在以用于幫助共價鍵的基于碳二亞胺的結合試劑處理被羧基和兩性離子化合物同時表面取代的量子點后，將伯胺連接到其的生物素加到其中，從而制備生物素連接的量子點。在這方面，將36 μ L生物素溶液以lmg/mL生物素溶液對應于Inmol量子點的方式使用。然后，將生物素連接的量子點與根據實施例I制備的靶物質檢測部分混合，然后靜置30分鐘，且然后通過動態光散射測量其流體動力學尺寸。其結果示于圖3中。與實施例I中不同的僅被兩性離子化合物和包含羧基的化合物表面取代而沒有加入 抗生物素蛋白鏈菌素的量子點的流體動力學尺寸(圖3的A)比靶物質檢測部分或生物素連接到其的量子點的尺寸(圖3的B或C)小約f約1.5nm。該結果可由于如下事實具有由于抗生物素蛋白鏈菌素和生物素在量子點的表面處彼此特異性結合而提高的顆粒尺寸的組合物(組分)比在當沒有引入抗生物素蛋白鏈菌素的情況中移動得慢。而且，其中靶物質檢測部分與生物素連接的量子點混合的樣品的流體動力學尺寸(圖3的D)為約lOOOnm。該結果可由于如下事實當多個靶物質檢測部分與多個生物素連接的量子點接觸時，它們連續為彼此提供特異性結合位點，從而使復合物聚集。實施例3 :證實通過抗生物素蛋白鏈菌素和生物素之間的相互作用的生物素連接的量子點的熒光信號的放大在生物素連接的量子點的量逐漸增加的同時，使根據實施例I制備的靶物質檢測部分與生物素連接的量子點接觸。結果，靶物質檢測部分中存在的抗生物素蛋白鏈菌素和生物素連接的量子點之間的特異性結合活躍地進行。由于4個生物素可連接到一個抗生物素蛋白鏈菌素，因此生物素連接的量子點的量越大，則量子點具有的熒光信號的強度越大。如圖4的A中所示，如果非特異性結合沒有最小化，即量子點沒有被兩性離子化合物表面處理，當生物素連接的量子點的量增加時，非特異性結合顯著增加，且因此，噪聲信號也增加(圖4的B)。然而，在被兩性離子化合物表面處理的量子點的情況下，即使當生物素連接的量子點被處理時，噪聲信號也相對地非常低，并且生物素連接的量子點的量越大，則熒光信號的強度越大。因此，當生物素連接的量子點的量達到一定水平時，熒光信號的強度具有最大值(圖4的A)。實施例4 :證實關于由于抗生物素蛋白鏈菌素和生物素之間的特異性結合引起的靶物質檢測部分和靶物質結合部分的自組裝的反應速度，和靶物質檢測信號放大測試如實施例3中所述，證實通過將兩性離子化合物連接到納米顆粒的表面以降低非特異性結合而有效地增強熒光信號。該結果通過檢測作為靶物質的肌紅蛋白而實際地證實。圖5是說明通過使用根據本發明實施方式的靶物質檢測部分和靶物質結合部分檢測肌紅蛋白的方法的示意圖。將肌紅蛋白抗體150固定在基質140上，并使肌紅蛋白160與該基質上的肌紅蛋白抗體150接觸，然后在其上處理生物素連接的肌紅蛋白抗體靶物質結合部分200，從而使生物素暴露于基質140的表面。然后，在其上重復處理具有抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接到其的表面的納米顆粒靶物質檢測部分300以及具有生物素和兩性離子化合物連接到其的表面的納米顆粒靶物質檢測部分310。結果，如圖5中所示，根據靶物質檢測部分的處理次數，多個靶物質檢測部分以枝狀形式接到一個靶物質結合部分。因而，突光信號由量子點放大。在這種情況下，證實抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點如何快速地彼此特異性結合。如圖5中所示，在生物素在基質140上暴露的同時，不同地控制在抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點之間的接觸時間，以獲得圖6A的結果。參考圖6A，在用抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點和生物素連接的量子點處理后小于3分鐘時，熒光信號顯著增力口。處理后4分鐘，熒光信號的強度會聚到其最大值。由該結果，證實在抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點之間的結合非常快速地發生，并且在一定時間后，可獲得非常穩定的狀態。而且，對于多種肌紅蛋白濃度，評價當重復處理抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點時的最大信號放大的次數。如圖6B中所示，在32次處理期間測量熒光檢測信號，且在這方面，抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點的處理時間各自為4分鐘。結果，處理次數越多，熒光信號具有的強度越大。因此，熒光信號總體提高，但在第24次處理后，即24次的信號放大后， 熒光信號會聚至其最大值。實施例5 :根據用靶物質檢測部分和靶物質結合部分的重復處理的高靈敏度的靶物質檢測方法基于由實施例2 4獲得的結果，證實抗生物素蛋白鏈菌素和兩性離子化合物連接的量子點與生物素連接的量子點對用于靶物質(例如，肌紅蛋白)的檢測信號的放大。這體現為與常規已知的信號放大方法相比具有非常高的靈敏度的檢測方法。參考圖7，基于其熒光信號放大的基質的熒光顯微鏡照片，證實肌紅蛋白濃度越高，相對熒光強度和信噪比越大。由該結果，主要地，證實肌紅蛋白濃度越高，熒光信號的強度越大。然而，當肌紅蛋白的濃度達到lOOOng/mL或更高時，涂覆有抗體的基質達到其自身檢測極限，且因此，熒光信號會聚到最大值。而且，關于其中信噪比為3或更高的樣品濃度，該體系的檢測極限為約390pg/mL。該檢測極限比典型的基于酶的肌紅蛋白檢測方法低約13倍。而且，考慮到典型地基于酶的肌紅蛋白檢測方法需要約180分鐘的檢測時間，根據本發明實施方式的靶物質檢測方法可用于以高靈敏度檢測肌紅蛋白，同時其檢測時間為約120分鐘或更小，遠短于180分鐘。而且，根據本發明實施方式的靶物質檢測方法用于檢測靶物質，而不使用酶。如上所述，通過使用根據本發明的以上實施方式的一個或多個的用于檢測靶物質的試劑盒和使用該試劑盒檢測靶物質的方法有效地檢測靶物質。應理解，本文中描述的示例性實施方式應僅在描述的意義上考慮并且不是為了限制的目的。各實施方式中的特征或方面的描述應典型地被認為可用于其它實施方式中的其它類似特征或方面。
權利要求
1.用于檢測靶物質的試劑盒，該試劑盒包含 包括第一分子和連接至該第一分子的探針的靶物質結合部分；和 包括納米顆粒的靶物質檢測部分，所述納米顆粒各自具有第二分子和具有兩性離子的化合物連接到其的表面， 其中所述第一分子特異性結合到所述第二分子而成對。
2.權利要求I的試劑盒，其中所述具有兩性離子的化合物選自氨基酸、N-ニ(羥こ基)甘氨酸、三(羥甲基)甲基甘氨酸、氨基磺酸、生物堿、賽洛西賓、醌型、和甜菜堿。
3.權利要求I的試劑盒，其中所述第二分子經由結合到各納米顆粒表面的接頭連接到各納米顆粒的表面。
4.權利要求3的試劑盒，其中所述接頭包含納米顆粒結合位點和納米顆粒非結合位點，其中所述納米顆粒結合位點選自包含羥基、硫醇基、或酚基的有機酸，和包含吡啶、甲基胺、咪唑、苯并咪唑、組氨酸、磷腈堿、或羥基的有機堿，并且所述納米顆粒非結合位點選自竣酸和置氣基。
5.權利要求I的試劑盒，其中所述納米顆粒各自包含量子點，所述量子點包括選自周期表中II VI族化合物半導體、III V族化合物半導體、和IV族化合物半導體中的一種或多種、或金、銀、或鐵氧化物。
6.權利要求I的試劑盒，其中所述第一分子和所述第二分子對選自單鏈核酸分子和具有與其互補的序列的單鏈核苷分子對、雙鏈DNA和與其特異性結合的蛋白質對、以及抗原和抗體對。
7.權利要求I的試劑盒，其中所述第一分子和所述第二分子對包含抗生物素蛋白鏈菌素和生物素對、或抗生物素蛋白和生物素對。
8.權利要求I的試劑盒，其中所述探針特異性結合到所述靶物質。
9.權利要求I的試劑盒，其中所述探針選自核酸、碳水化合物、抗體、和脂質。
10.權利要求I的試劑盒，其中所述祀物質檢測部分進ー步包含連接到各納米顆粒的表面的可檢測標記。
11.權利要求10的試劑盒，其中所述可檢測標記選自有色珠、著色材料、熒光材料、磷光材料、電可檢測的分子、和提供改變的熒光偏振或改變的光漫射的材料。
12.檢測靶物質的方法，所述方法包括 a)使權利要求I的試劑盒的靶物質結合部分與待檢測的靶物質接觸； b)使操作a)的結果與權利要求I的試劑盒的靶物質檢測部分接觸；和 c)檢測所述靶物質。
13.權利要求12的方法，其中所述靶物質固定在固體載體上。
14.權利要求12的方法，其中所述固體載體選自載玻片、圓片、珠、膜、和板。
15.權利要求12的方法，其中所述靶物質選自DNA、RNA、肽核酸(PNA)、鎖核酸(LNA)、蛋白質、肽、碳水化合物、和其組合。
16.權利要求12的方法，其中所述方法進ー步包括，在操作a)之后，a-1)除去未結合的靶物質結合部分。
17.權利要求12的方法，其中所述方法進ー步包括，在操作b)之后，b-1)除去未結合的靶物質檢測部分。
18.權利要求17的方法，其中所述方法進ー步包括，在操作b-1)之后，b-2)使權利要求I的試劑盒的靶物質檢測部分與操作b-1)的結果接觸。
19.權利要求12的方法，其中在操作c)中，檢測選自磁信號、電信號、發射信號、散射信號、和放射性信號的信號。
全文摘要
提供用于檢測靶物質的試劑盒和通過使用該試劑盒檢測靶物質的方法。通過使用該試劑盒和該檢測方法有效地檢測靶物質。該試劑盒包含包括第一分子和連接至該第一分子的探針的靶物質結合部分；和包括納米顆粒的靶物質檢測部分，所述納米顆粒各自具有第二分子和具有兩性離子的化合物連接到其的表面，其中所述第一分子特異性結合到所述第二分子而成對。
文檔編號G01N33/53GK102788876SQ20121015329
公開日2012年11月21日 申請日期2012年5月17日 優先權日2011年5月17日
發明者樸埈赫, 樸鐘辰, 樸魯璟, 林圭鉉, 許在賢, 金圣智 申請人:三星電子株式會社, 浦項工科大學校產學協力團