專利名稱：豬的胰蛋白酶(try)elisa檢測試劑盒的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及生物技術領域，尤其涉及一種用于檢測豬胰蛋白酶的試劑盒。
背景技術：
酶聯免疫吸附測定法(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)是將抗原、 抗體免疫反應的特異性和酶的高效催化作用原理有機地結合起來的一種敏感性高、特異性 強、重復性好的實驗診斷方法，可敏感地檢測體液中微量的特異性蛋白。豬胰蛋白酶是豬胰腺分泌的一種水解酶。能水解由肽鏈相連的氨基酸類化合物， 具有酯酶活性。正常豬血清中含量甚微。人和豬的急性胰腺炎的發病機理都是由于胰腺因 胰蛋白酶的自身消化作用，對其周圍組織的消化，從而繼發一系列的器官的功能障礙。在正 常情況下，胰液內的胰蛋白酶原無活性，待其流入十二指腸，受到膽汁和腸液中的腸激酶的 激活作用后乃變為有活性的胰蛋白酶，方具有消化蛋白質的作用。通過對實驗模型豬的觀 察，大多數患急性胰腺炎的豬胰蛋白酶明顯增高，因此測定豬血清胰蛋白酶對診斷豬急性 胰腺炎有重要意義。目前，對于胰蛋白酶的檢測主要是測定其活性，方法主要有放射免疫分 析法(RIA)和以苯甲酰-L-精氨酸乙酯(簡稱BAEE)，對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯(簡稱 TAME)，苯甲酰-L-精氨酸-對硝基苯胺(簡稱ΒΑΡΑ)和苯甲酰-L-精氨酸-β -萘酰胺(簡 稱ΒΑΝΑ)等為底物，用紫外吸收法測定的方法。RIA技術極其敏感而又極其特異，但其卻需 要具備尖端復雜的設備，且成本也不低。同時，RIA還需要特殊的預防措施，因為其要用到 放射性物質。因此，如今RIA在很大程度上已經被ELISA所取代。采用BAEE、TAME等為底 物，用紫外吸收法測定的方法，由于血清中還有其他蛋白酶也能水解試劑中的底物，同時還 有蛋白酶的抑制物存在，這些都會影響測定結果，并且由于實驗操作繁瑣，不能定量，其應 用意義不大。因此，有必要選用一種快速、簡便能夠定量且靈敏度、準確度和特異性高的方 法來進行胰蛋白酶的檢測。

實用新型內容本實用新型要解決的技術問題是提供一種檢測豬胰蛋白酶的ELISA試劑盒，其 操作簡便，成本低，穩定性好，適合于血液及其它生物液體中胰蛋白酶的檢測。為了解決上述技術問題，本實用新型所采用的技術方案是一種豬的胰蛋白酶 (TRY)ELISA檢測試劑盒，包括酶標板，所述酶標板包括固相載體和包被層，固相載體上設置 有多個微孔，包被層附著在固相載體的微孔表面，包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗 體和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的復合層。本實用新型采用ELISA方法的試劑盒可以定量檢測血液或其它生物液體中胰蛋 白酶含量，顯著提高了胰蛋白酶檢測結果的準確度；并且靈敏度高，即使少量或痕量酶也能 夠檢測出；特異性高，幾乎不受體液中其他物質，如酶抑制利、激活劑等的影響，不受藥物的 干擾，且操作簡單，省時省力，特別適用于胰蛋白酶的檢測。
權利要求一種豬的胰蛋白酶(TRY)ELISA檢測試劑盒，包括酶標板，所述酶標板包括固相載體和包被層，其特征在于所述固相載體上設置有多個微孔，所述包被層附著在所述固相載體的微孔表面，所述包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗體和牛血清白蛋白依次涂布在所述固相載體的微孔表面上形成的復合層。
專利摘要本實用新型涉及檢測豬胰蛋白酶的生物技術領域，具體提供了一種豬的胰蛋白酶(TRY)ELISA檢測試劑盒，包括酶標板，其中酶標板又包括固相載體和包被層，固相載體上設置有多個微孔，包被層附著在固相載體的微孔表面，包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗體和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的復合層。本實用新型操作簡便，成本低，穩定性好，適合于血液及其它生物液體中胰蛋白酶的檢測。
文檔編號G01N33/577GK201716317SQ201020245770
公開日2011年1月19日 申請日期2010年7月2日 優先權日2010年7月2日
發明者叢旭霞, 何峰容, 汪景, 章秀波, 童曉玲, 馬云芳 申請人:武漢優爾生科技股份有限公司