一種坎格雷洛中間體的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種坎格雷洛中間體的制備方法，氰基乙酸乙酯和硫脲在堿性條件下發生閉環反應生成的產物在堿性條件下與三氟丙烷反應后，經硝化反應、還原反應后，再與甲酸進行閉環反應；生成的產物進行氯化反應后，產物在堿性條件下與2?(硫代甲基)乙胺進行縮合反應；得到的產物在烷基化試劑和TMSOTF作用下與1,2,3,5?四乙酰?β?D?呋喃核糖反應，產物在堿性條件下水解得坎格雷洛中間體。本發明方法無需使用硅膠柱層析，極大的節省了工藝成本；并且制備過程中不涉及二硫化碳、發煙硝酸或者濃硫酸，不具備任何危險；此外也不采用貴金屬氫化還原劑，不但降低了成本并且降低了操作危險；本發明方法容易操作，操作安全可靠，適合大規模的工業生產。
【專利說明】
一種坎格雷洛中間體的制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及一種制備坎格雷洛中間體6-N-(2-(甲硫基）乙基-2-((3,3,3-三氟丙 基)硫代)腺苷(I)的制備方法，屬于藥物合成技術領域。
[0002]

【背景技術】
[0003] 6-N-(2-(甲硫基）乙基-2-((3，3，3-三氟丙基)硫代)腺苷（I)是N-烷基-2-取代ATP 類似物，是靜脈用P2Y12受體詰抗劑Cangrelor(l)核心結構。坎格雷洛（1) (cangrelor/ Kengreal)是一種靜脈用P2Y12受體拮抗劑，用于接受PCI冠狀動脈疾病(CAD)患者的抗栓治 療。2015年6月22日，FDA批準坎格雷洛可降低PCI相關的嚴重并發癥風險，例如心肌梗死和 支架內血栓。
[0004]
[0005] 目前合成該化合物（I)的方法主要有兩種，一種是以2-巰基腺苷（2)為原料，堿性 條件下進攻氯代三氟丙基得到化合物3，Ac保護化合物3裸露的羥基以及氨基得到化合物4， 經過取代反應得到化合物5,經過堿性條件下脫出Ac保護基得到化合物（1)(見Scheme 1)。 該方法中，原料2-巰基腺苷市場供應少價格高，且制備該原料需要用到劇毒二硫化碳，副產 物劇毒的硫化氫，不利于環境和生產操作，收率較低并且每一步都需要硅膠柱層析，不利于 實現工業化生產。
[0006]
[0007] 第二種方法是以硫代巴比妥酸為起始原料，制備6-N-(2-(甲硫基）乙基)-2-( (3， 3，3-三氟丙基)硫代)-9H-嘌呤（13)及坎格雷洛(Scheme 2)，該路線中，制備化合物8時用到 容易腐蝕的發煙硝酸或者濃硫酸，在生產中都不易操作和產生危險;在制備化合物10的過 程中采用金屬還原會產生環境的污染，用貴金屬氫化會增加成本和使用危險的氫氣;在制 備化合物11時用到高壓反應釜，該反應溫度也較高80~130°C。


【發明內容】

[0010] 本發明所要解決的技術問題是針對現有技術中存在的不足，而提供一種坎格雷洛 中間體(6_N-(2_(甲硫基）乙基_2_( (3，3，3_二氣丙基)硫代)腺昔（I))的制備方法，該方法 條件溫和，適合大規模工業化生產。
[0011] 為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：
[0012] -種坎格雷洛中間體的制備方法，包括以下步驟(如Scheme 3所示）：
[0013]以氰基乙酸乙酯(式15)和硫脲為原料，二者在堿性條件下發生閉環反應生成2-巰 基-4-氨基-6-羥基嘧啶(式16)所示化合物;式16所示化合物在堿性條件下與1-碘-3，3,3_ 三氟丙烷反應生成4-氨基-6-羥基-2-( (3，3，3-三氟丙基)硫代嘧啶(式17)所示化合物;式 17所示化合物經硝化反應得到4-氨基-5-硝基-6-羥基-2-((3,3,3-三氟丙基)硫代嘧啶(式 18)所示化合物;式18所示化合物通過還原反應得到4，5-二氨基-6-羥基-2-( (3，3，3-三氟 丙基)硫代嘧啶(式19)所示化合物;式19所示化合物與甲酸進行閉環反應生成2-( (3,3,3_ 三氟丙基)硫代-7H-嘌呤(式20)所示化合物;式20所示化合物與氯代試劑進行氯化反應生 成氯 -2_( (3，3，3_二氣丙基)硫代-7H-噪呤(式21)，6_氯_2_( (3，3，3_二氣丙基)硫代-7H-嘌呤在堿性條件下與2_(硫代甲基）乙胺進行縮合反應生成6-N-(2-(甲硫基）乙基)-2-((3， 3，3-三氟丙基）硫代-7H-嘌呤（式22);在烷基化試劑BSA和TMS0TF作用下與1，2,3,5_四乙 酰-β-D-呋喃核糖反應得到式14化合物，化合物14在堿性條件下水解得到6-N-(2-(甲硫基） 乙基-2-( (3，3，3-三氟丙基)硫代)腺苷(式I)。
[0014；
[0015]上述技術方案中，方法具體包括以下步驟：
[0016] (1)將堿A加入到溶劑A中使堿溶解，再加入硫脲，將反應體系加熱到35~65°C，加 入氰基乙酸乙酯，回流反應2~4h后降溫到5~20°C，過濾，濾餅用溶劑A洗滌后加入到水中， 加入酸調PH=3~5后大量固體析出，固體經過濾、洗滌、干燥后得到式16所示化合物；
[0017] 所述的硫脲、氰基乙酸乙酯和堿A的摩爾比為1:1.0~1.5:2~3,優選為1:1.0~ 1.05:2.1~2.4;
[0018]所述的堿A為有機堿，優選為醇鈉、叔丁醇鉀、DBU、三乙胺、二異丙基乙胺等中的任 意一種；所述的醇鈉，優選為甲醇鈉或乙醇鈉，或用金屬鈉現制備的甲醇鈉或者乙醇鈉溶 液；
[0019]所述的溶劑A為無水醇溶劑，優選為乙醇、甲醇、異丙醇、正丁醇等中的任意一種； [0020]所述的硫脲與溶解用的溶劑A的重量比為1:8~12,與洗滌用的溶劑A的重量比為 1:2~2.5;
[0021]所述的氰基乙酸乙酯與所述的水的重量為1:10~20;
[0022] 所述的調節pH用的酸為無機酸鹽酸（10 %~25 % )，硫酸（10 %~80 % )等;有機酸 如甲酸或乙酸等。
[0023] (2)將堿B加入到溶劑B中，攪拌，再加入步驟（1)得到的式16所示化合物，在15~45 °C條件下、在2~4h內向反應體系中滴加三氟碘丙烷，滴加完畢后反應3~5h，補加醇溶劑 后攪拌30~60min，過濾，濾餅用醇溶劑洗滌，減壓蒸出溶劑B后再加入水，用酸調節PH=6~ 8,降溫到-2~5°C攪拌2~5h，固體析出，過濾，濾餅經水洗滌、干燥后得到式17所示化合物； [0024]所述的式16所示化合物與堿B、三氟碘丙烷的摩爾比為1:2~4:1~3;優選為1:2~ 3:1.3~2;
[0025]所述的滴加三氟碘甲烷的溫度優選為20~30°C;所述的反應時間優選為3.5~4h; [0026]所述的式16所示化合物與溶解用的溶劑B的重量比為1:4~10;
[0027]所述的式16所示化合物，與補加的醇溶劑的重量比為1:10~20,與洗滌用的醇溶 劑的重量比為1:1~5;
[0028]所述的式16所示化合物與加入水的量的重量比為1:15
[0029]所述的堿B為有機堿或無機堿;有機堿為醇鈉、三乙胺、吡啶、DBU等中的任意一種； 無機堿為 NaHC03、KHC〇3、NaOH、Κ0Η、L i OH、NaC03、K2CO3、CSC03 等中的任意一種；
[0030] 所述的溶劑B為N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜，乙腈、甲醇、乙醇等中的任意一 種；
[0031] 所述的醇溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇等中的任意一種；
[0032] 所述的調節PH的酸為有機酸或無機酸；有機酸為甲酸、乙酸、丙酸等中的任意一 種;所述的無機酸為鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等中的任意一種；
[0033] (3)將步驟(2)得到的式17所示化合物加入到溶劑水中，加入酸后，在0.5~3h內滴 加完亞硝酸鹽水溶液，滴加完畢后在10~40°C下反應1~5h，反應結束后，過濾，濾餅經水洗 滌、干燥后得式18所示化合物；
[0034] 所述的式17所示化合物、亞硝酸鹽、酸的摩爾比為1:1~5:10~30,優選為1:2~4: 15 ~20;
[0035]所述的酸為有機酸或無機酸;有機酸為甲酸、乙酸、丙酸等中的任意一種;無機酸 為鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等中的任意一種，
[0036]所述的硝酸鹽水溶液為亞硝酸鈉、亞硝酸鉀、亞硝酸鋰水溶液等中的任意一種，質 量分數為15%~60%，優選為18~28% ;
[0037]所述的式17所示化合物與溶劑水的重量比為1:15~20 [0038] 所述的反應溫度優選為15~25°C，反應時間優選為2~4h。
[0039] 式18所不化合物，分子式為C7H7F3N4O2S，分子量為268.22，結構式為
[0040]
其HNMR如圖1所示；
[0041] (4)將步驟(3)得到的式18所示化合物和堿C加入到溶劑水中，降溫到0~5°C后加 入還原劑攪拌1~3h，之后升溫到室溫反應8~18h，反應完成后過濾，濾餅經水洗滌、干燥后 得到式19所示化合物；
[0042] 所述的式18所示化合物、堿C和還原劑的摩爾比為1:4~10:2~25,優選為1:4.5~ 7:4 ~10;
[0043]所述的式18所示化合物與溶劑水的質量比為1:20~50，優選為1:30~40;
[0044] 所述的堿C為無機堿，優選為NaHC03、KHCO3、NaOH、Κ0Η、Li OH、NaC03、K2CO3、CsC03 等 中的任意一種；
[0045] 所述的還原劑為保險粉，環利粉、二氧化硫脲(1/5~1/3)等中的任意一種；
[0046] 所述的在室溫下反應的時間優選為12~16h。
[0047] 式19所不化合物，分子式為C7H9F3N4OS，分子量為254.23,結構式為
i其!!·?如圖2所示； ?
[0048] (5)將步驟(4)得到的式19所示化合物加入到甲酸水溶液中，在80~100 °C下反應4 ~6h，反應體系用堿C調PH為2-4后繼續反應0.5~2h，過濾，濾餅經水洗滌、干燥后得到式20 所示的化合物；
[0049] 所述的式19所示化合物與甲酸水溶液中甲酸的摩爾比為1: 50~100，優選為1:65 ~80;
[0050] 所述的甲酸水溶液中甲酸的質量分數為50~100%，優選為80~100% ;
[0051 ]所述的用堿C為無機堿，優選NaHC03、KHCO3、NaOH、Κ0Η、Li OH、NaC03、K2CO3、CsC03 等 中的任意一種；
[0052] 式20所不化合物，分子式為C8H7F3N4OS，分子量為264.23，結構式為
5其!1她?如圖3所示;化合物20為嘌呤環7位氫產物；
[0053] (6)室溫下，將化合物20加入到溶劑C中，然后加入氯代試劑，降溫到0~10°C后再 加入堿D，在75~95°C下反應1~3h后，減壓蒸餾除去氯代試劑，然后將殘留物加入到冰水 中，經萃取、分液、洗滌、干燥、過濾、降壓蒸餾除溶劑C后得到式21所示化合物；
[0054]所示的式20所示化合物、氯代試劑、堿C的摩爾比為1:8~15:0.8~1.5，優選為1: 10~15:1.1~1.5;
[0055]所述的溶劑C為乙腈或甲苯，所述的式20所示化合物與溶劑C重量比為1:12~20; [0056]所述的堿D為有機堿:吡啶，DBU，三乙胺，二異丙基乙胺等中的任意一種；
[0057]所述的氯代試劑為三氯氧磷，五氯化磷，三氯化磷，氯化亞砜等中的任意一種。 [0058] (7)室溫下，將步驟(6)得到的式21所示化合物和側鏈2_(硫代甲基）乙胺加入到溶 劑D中，加熱到70~80°C，攪拌反應4~8h，過濾，濾餅用溶劑D洗滌、干燥后得到式22所示化 合物；
[0059] 所示的式21所示化合物和側鏈2-(硫代甲基）乙胺的摩爾比為1:1~3，優選1:1.5 ~2 · 5;
[0060] 所述的式21所示化合物和溶解用的溶劑D的重量比為1:10~30,優選1:10~15; [0061]所述的溶劑D為醇溶劑，優選為甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、叔丁醇等中的任意一 種。
[0062] (8)室溫下，將式22所示化合物加入到溶劑E中，然后加入烷基化試劑，在75~90°C 下反應15~40min，然后降溫到25~40 °C，減壓蒸餾除去溶劑E，殘留物中加入溶劑F，在2~ 3h內滴加三氟甲磺酸三甲基硅酯（TMS0TF)和1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖溶于溶劑F中 形成混合溶液;升溫到75~85°C反應1~3h;反應完成后，將體系降溫加入乙酸乙酯，分液、 萃取水相，有機相依次經過飽和碳酸氫鈉和飽和食鹽水洗滌，干燥劑干燥、過濾、減壓蒸餾 溶劑后得到式14所示化合物；
[0063] 式22所示化合物、烷基化試劑、三氟甲磺酸三甲基硅酯、1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋 喃核糖的摩爾比為1:1~4:1~3:1~3,優選1:1~3:1~2.5:1~2;
[0064]所述的溶劑E為乙腈、1，2_二氯乙烷(DCE)、甲苯等中的任意一種;溶劑F為1，2_二 氯乙烷(DCE)、甲苯、乙腈等中的任意一種；
[0065] 所述的烷基化試劑為N，0-雙三硅基乙酰胺(BSA)或六甲基二硅烷胺(HMDS);
[0066] 所述的式22所示化合物，與溶劑E的重量比為1:4~10，與殘留物中加入溶劑F重量 比為1:3~5
[0067] (9)室溫下，將步驟(8)得到的式14所示化合物、堿加入到溶劑G中，加熱至60~85 °C且在此溫度下反應0.5~3h，反應結束后減壓蒸餾除去溶劑G，再向體系中加入水，析出固 體后過濾，濾餅干燥后即為式1所示的化合物；
[0068]所述的式14所示化合物與堿的摩爾比為1:2~7，優選為1:3~6;
[0069]所述的堿為甲醇鈉、乙醇鈉、，碳酸鉀、叔丁醇鉀等中的任意一種；
[0070]所述的溶劑G為醇溶劑，優選為甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、叔丁醇等中的任意一 種；
[0071]所述的堿與醇溶劑的用量重量比為1:20~30;
[0072]所述的向體系中加入水，水的重量為式14所示化合物質量的8~20倍。
[0073]本發明技術方案的優點在于，本發明方法制備過程中無需使用硅膠柱層析，極大 的降低了工藝成本;并且制備過程中不涉及劇毒物質二硫化碳，也不涉及腐蝕性藥品發煙 硝酸或者濃硫酸，操作不具備任何危險;此外也不采用貴金屬氫化還原劑，不但降低了成本 并且降低了操作危險;本發明方法容易操作，操作安全可靠，適合大規模的工業生產。
【附圖說明】
[0074] 圖1為式18所示化合物(分子式為C7H7F3N4〇2S)的HNMR圖；
[0075] 圖2為式19所示化合物(分子式為C7H9F3N4〇S)的HNMR圖；
[0076] 圖3為式20所示化合物(分子式為C8H7F3N4〇S)的HNMR圖。
【具體實施方式】
[0077]以下對本發明技術方案的【具體實施方式】詳細描述，但本發明并不限于以下描述內 容：
[0078] 實施例1:
[0079] 一種6-N_( 2_(甲硫基）乙基-2-((3，3，3-三氟丙基)硫代)腺苷（I)的制備方法，包 括以下步驟：
[0080] (1)化合物16的制備
[0081 ] 室溫下，稱取乙醇鈉127.8g( (1.88mol)加入到670g乙醇的3L反應瓶，攪拌使之全 部溶解，加入硫脲67.3g(0.884m〇l)。加熱至45°C，稱取氰基乙酸乙酯100g(0.884mol)加入 反應瓶中加熱至回流，回流后2h，TLC反應完成，降至15°C，過濾，濾餅用無水乙醇200g洗一 次，取出濾餅，加入到3L反應瓶中，加入水lkg攪拌使之溶解，20°C以下加入乙酸，調PH=4， 大量固體析出。抽濾。濾餅46 °C烘干過夜，得到產品116.4g，收率92 %。
[0082] (2)化合物17的制備
[0083] 室溫下，稱取碳酸鉀190g(1.4mol)加入到到3L三口瓶中，加入DMF 500g攪拌，加入 化合物16 100g(0.7mol)，開始攪拌，20-30°C滴加三氟碘丙烷203.7g(0.91mol)，2.5h滴加 完，加完后繼續攬摔反應3.5h后TLC檢測反應完成。加入1.6kg甲醇，攬摔40min，抽濾。濾餅 用甲醇洗兩次每次120g。減壓旋蒸濾液至不出液體，殘留物中加入1.5Kg水，再向其中加入 1N的鹽酸溶液調PH=7，冰浴下攪拌3h，抽濾，45°C烘干得到139g產品，收率83%，純度HPLC: 98.7%〇
[0084] (3)化合物18的制備
[0085] 稱取110g(0.46mol)化合物17加入到5L三口瓶中，加入水1925g，攪拌，加入乙酸 460g，滴加19%亞硝酸鈉水溶液340g(0.94mol)，lh滴加完畢。在20-25°C下反應1.5h后TLC 檢測反應完成。抽濾。濾餅用水洗3次，每次500ml，45 °C鼓風干燥得到產品105g，收率85 %， 純度HPLC:98.1%。
[0086] 4 MMR(400MHz，DMS0)Sl2.79(s，lH)，l 1.27(s，lH)，9.09(s，lH)，3.43-3.25(m， 2H)，2.85-2.67(m，2H)
[0087] (4)化合物19的制備
[0088] 稱取50g(0.1866mol)化合物18加入到5L三口瓶中，加入水1.5kg，加入碳酸氫鈉 86. lg(l .024mol)，攪拌，降溫至0°C，開始分批加入保險粉156g(0.896mol)。加完攪拌lh，升 至室溫反應13h，TLC檢測反應完全，過濾，濾餅用水洗滌兩次，每次100g，濾餅45 °C鼓風干燥 24h，得到43.6g化合物 19，收率92 %，純度HPLC: 99.3 %，。
[0089] 4 MMR(400MHz，DMS0)S5.79(s，2H)，3.34(s，2H)，3·19(ι?，J= 12.0,10.4Hz，2H)， 2.68(m,J = 22.1,15.7Hz,2H).
[0090] (5)化合物20的制備
[0091] 稱取94g(0.37mol)化合物19加入到3L三口瓶中，加入85%甲酸1410g(26mol)，攪 拌，加熱95°C。反應4h，TLC反應完成。降至室溫，反應液用10 %碳酸氫鈉調PH為2-4，繼續攪 拌30min，抽濾，得到黃色固體，固體在46°C烘干12h得到88.9g化合物20，收率91 %，純度 HPLC:98.3%〇
[0092] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0)512.91(s,2H) ,8.04(s , lH), 3.34(dd ,J = 8.4,6.8Hz , 2H), 2.84 -2.66(m,2H).
[0093] (6)化合物21的制備
[0094] 室溫下，將67.4g(0.255mol)化合物20加入到809g乙腈中，降溫到0~10°C，將404g (2.6mo 1)三氯氧磷依次加入到化合20的溶液中，滴加28.3 (0.28mo 1)三乙胺，2h滴加完，然 后加熱升溫到85°C，攪拌反應2h，TLC檢測反應完成后，40~50°C減壓蒸餾除去三氯氧磷，然 后將殘留物加入到冰水400g中，經過乙酸乙酯2*400ml萃取、分液、無水硫酸鈉干燥，過濾， 降壓蒸餾除溶劑得到63g化合物21，收率87%，純度HPLC:98.6%，。
[0095] (7)化合物22的制備
[0096] 室溫下，將53g(0.188mol)化合物21和42g(0.46mol)側鏈2-(硫代甲基）乙胺，加入 到640g甲醇溶液中，加熱到70~80°C，攪拌反應5h，TLC檢測反應完全，降溫到0~5°C，過濾， 濾餅用1 〇〇g甲醇洗滌，45 °C干燥12h濾餅，得到57g化合物22，收率90 %，純度HPLC: 99.2 %。 [0097] (8)化合物14的制備
[0098] 室溫下，33.78(0.1!11〇1)化合物22即6-1(2-(甲硫基）乙基）-2-((3,3,3-三氟丙 基)硫代-7H-嘌呤加入至丨」170gDCE中，加入40 · 7g(0 · 2mol )BSA，并升溫80°C，反應15min，然后 降溫到30~35°C，減壓蒸出溶劑DCE，殘留物溶于140g甲苯，滴加28.9g(0.13mo 1)三氟甲磺 酸三甲基硅酯（TMS0TF)和38.2g(0.12mol) 1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖的甲苯溶液 240g，滴加時間2.5h，升溫80 °C繼續反應2h，TLC反應完成后，將體系降溫室溫，加入500ml乙 酸乙酯稀釋，分液，有機相一次經過飽和碳酸氫鈉 l〇〇ml洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌100ml洗 滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾溶劑得到55.2g化合物14，收率87 %，純度HPLC: 98.6%〇
[0099] (9)化合物(I)的制備
[0100] 室溫下，將32g(0.06mol)化合物14,加入到8.98(0.17!11〇1)甲醇鈉的18(^甲醇溶液 中，加熱60~85°C反應lh，TLC檢測反應完全，減壓蒸餾除去甲醇，向體系中加入水300g，析 出固體，過濾，濾餅45°C烘干，得到化合物20.5g(I)，收率:87.3%，純度HPLC:99.1 %。
[0101] 實施例2:
[0102] (1)室溫下，稱取叔丁醇鉀103.28(0.92!11〇1)加入到45(^甲醇的11^反應瓶，攪拌使 之全部溶解，加入硫脲30.48(0.4111〇1)。加熱至45°(：，稱取氰基乙酸乙酯47.438(0.42111 〇1)加 入反應瓶中加熱至回流，回流后2.7h，TLC反應完成，降至15 °C，過濾，濾餅用甲醇116g洗一 次，取出濾餅，加入到1L反應瓶中，加入水570g攪拌使之溶解，20 °C以下加入15 %鹽酸，調PH =4，大量固體析出。抽濾。濾餅45°C烘干過夜，得到產品49.97g，收率87.5%。
[0103] (2)化合物17的制備
[0104] 室溫下，稱取DBU 190g(1.4mol)加入到到2L三口瓶中，加入DMSO 301g攪拌，加入 化合物16 43g(0.3mol)，開始攪拌，20-30°C滴加三氟碘丙烷101g(0.45mol)，2.7h滴加完， 加完后繼續攪拌反應4h后TLC檢測反應完成。加入774g乙醇，攪拌30min，抽濾。濾餅用乙醇 洗兩次每次90g。減壓旋蒸濾液至不出液體，殘留物中加入645g水，再向其中加乙酸調PH = 7，冰浴下攪拌3h，抽濾，45°C烘干得到61. lg產品，收率85%，純度HPLC: 98.9%。
[0105] (3)化合物18的制備
[0106] 稱取55g(0.23mol)化合物17加入到3L三口瓶中，加入水1100g，攪拌，加入50%甲 酸529g，滴加18%亞硝酸鉀水溶液279 8(0.57111〇1)，1.211滴加完畢。在30-35°(：下反應1.711后 TLC檢測反應完成。抽濾。濾餅用水洗3次，每次250ml，45 °C鼓風干燥得到產品57g，收率 92%，純度HPLC:98.4%。
[0107] (4)化合物19的制備
[0108] 稱取50g(0.1866mol)化合物18加入到5L三口瓶中，加入水1.9kg，加入氫氧化鈉 33.6g(0.84mol)，攪拌，降溫至(TC，開始分批加入環利粉150g。加完攪拌lh，升至室溫，反應 13h，TLC檢測反應完全，過濾，濾餅用水洗滌兩次，每次100g，濾餅45 °C鼓風干燥24h，得到 42 · 5g化合物 19，收率90 %，純度HPLC: 99 · 1 %，。
[0109] (5)化合物20的制備
[0110] 稱取80g(0.31mol)化合物19加入到3L三口瓶中，加入90%甲酸10468(20.5111〇1)， 攪拌，加熱95 °C。反應4.5h，TLC反應完成。降至室溫，反應液用10 %氫氧化鈉調PH為2-4，繼 續攪拌30min，抽濾，得到黃色固體，固體在46 °C烘干12h得到77.33g化合物20，收率93 %，純 度 HPLC:98.7%。
[0111] (6)化合物21的制備
[0112] 室溫下，將75g(0.28mol)化合物20加入到1350g甲苯中，降溫到0~10°C，將472.9g (3.97mol)氯化亞砜依次加入到化合20的溶液中，滴加25.8(0.33mol)吡啶，2h滴加完，然后 加熱升溫到85°C，攪拌反應2h，TLC檢測反應完成后，40~50°C減壓蒸餾除去氯化亞砜，然后 將殘留物加入到冰水470g中，經過乙酸乙酯2*450ml萃取、分液、無水硫酸鈉干燥，過濾，降 壓蒸餾除溶劑得到68.8g化合物21，收率86 %，純度HPLC: 98.3 %，。
[0113] (7)化合物22的制備
[0114] 室溫下，將60g(0.21mol)化合物21和38.818(0.43!11〇1)側鏈2-(硫代甲基）乙胺，加 入到870g乙醇溶液中，加熱到70~80°C，攪拌反應5h，TLC檢測反應完全，降溫到0~5°C，過 濾，濾餅用14 5 g乙醇洗滌，4 5 °C干燥12 h濾餅，得到6 6 g化合物2 2，收率9 2 %，純度Η P L C: 99.0%〇
[0115] (8)化合物14的制備
[0116] 室溫下，6(^(0.18111〇1)化合物22即6-^(2-(甲硫基）乙基)-2-((3,3,3-三氟丙基） 硫代-7Η-嘌呤加入到480g乙腈中，加入63.22 8(0.39111〇1)圓03，并升溫80°(：，反應151^11，然 后降溫到30~35°C，減壓蒸出溶劑乙腈，殘留物溶于192gDCE，滴加77.1g(0.35mol)三氟甲 磺酸三甲基硅酯（TMS0TF)和96.3g(0.30mol) 1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖的DCE溶液 606.4g，滴加時間2.4h，升溫80 °C繼續反應2h，TLC反應完成后，將體系降溫室溫，加入800ml 乙酸乙酯稀釋，分液，有機相一次經過飽和碳酸氫鈉150ml洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌150ml 洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾溶劑得到88g化合物14，收率85 %，純度HPLC: 98.4%〇
[0117] (9)化合物(I)的制備
[0118] 室溫下，將50g(0.09mol)化合物14,加入到53.58(0.39111〇1)碳酸鉀的128(^乙醇溶 液中，加熱75~80 °C反應2.5h，TLC檢測反應完全，減壓蒸餾除去乙醇，向體系中加入水 950g，析出固體，過濾，濾餅45 °C烘干，得到化合物34.7g(I)，收率：88.6 %，純度HPLC: 99.2%〇
[0119] 實施例3:
[0120] (1)室溫下，稱取三乙胺159.28(1.42111〇1)加入到75(^甲醇的21^反應瓶，攪拌使之 全部溶解，加入硫脲45g(0.59mol)。加熱至45°C，稱取氰基乙酸乙酯68.2g(0.6mol)加入反 應瓶中加熱至回流，回流后2.5h，TLC反應完成，降至15°C，過濾，濾餅用異丙醇190g洗一次， 取出濾餅，加入到2L反應瓶中，加入水810g攪拌使之溶解，20 °C以下加入40 %甲酸，調PH = 4，大量固體析出。抽濾。濾餅45 °C烘干過夜，得到產品76g，收率89.9 %。
[0121] (2)化合物17的制備
[0122] 室溫下，稱取氫氧化鋰32.83g(l. 37mol)加入到到2L三口瓶中，加入DMF 588g攪 拌，加入化合物70g(0.49mol)，開始攪拌，20-30°C滴加三氟碘丙烷186.3g(0.83mol)，3h滴 加完，加完后繼續攪拌反應3.5h后TLC檢測反應完成。加入1260g異丙醇，攪拌40min，抽濾。 濾餅用異丙醇洗兩次每次150g。減壓旋蒸濾液至不出液體，殘留物中加入1050g水，再向其 中加 lmol/L硫酸調PH= 7，冰浴下攪拌3h，抽濾，45 °C烘干得到104.2g產品，收率89 %，純度 HPLC:98.5%〇
[0123] (3)化合物18的制備
[0124] 稱取5(^(0.21111〇1)化合物17加入到31^三口瓶中，加入水80(^，攪拌，加入25%鹽酸 529g，滴加21%亞硝酸鋰水溶液213 8(0.63111〇1)，1.811滴加完畢。在15-20°(：下反應2.511后 TLC檢測反應完成。抽濾。濾餅用水洗3次，每次230ml，45 °C鼓風干燥得到產品50g，收率 89%，純度HPLC:98.9%。
[0125] (4)化合物19的制備
[0126] 稱取45g (0.17mo 1)化合物18加入到5L三口瓶中，加入水1.44kg，加入氫氧化鉀47g (0.84mol)，攪拌，降溫至0°C，開始分批加入二氧化硫脲（1/5~l/3)495g( 1.3mol)。加完攪 拌2h，升至室溫反應17h，TLC檢測反應完全，過濾，濾餅用水洗滌兩次，每次120g，濾餅45 °C 鼓風干燥24h，得到35.9g化合物19，收率84 %，純度HPLC: 98.6 %，。
[0127] (5)化合物20的制備
[0128] 稱取50g(0.2mol)化合物19加入到2L三口瓶中，加入98%甲酸692g(14.75mol)，· 拌，加熱95°C。反應4h，TLC反應完成。降至室溫，反應液用10 %碳酸氫鉀調PH為2-4，繼續攪 拌30min，抽濾，得到黃色固體，固體在45 °C烘干12h得到77.33g化合物20，收率94.7 %，純度 HPLC:98.3%〇
[0129] (6)化合物21的制備
[0130] 室溫下，將40g(0.15mol)化合物20加入到560g乙腈中，降溫至丨」0~10°C，將378.3g (1.82mol)五氯化磷依次加入到化合20的溶液中，滴加27.4(0.21111〇1)二異丙基乙胺，211滴 加完，然后加熱升溫到85°C，攪拌反應2.3h，TLC檢測反應完成后，40~50°C減壓蒸餾除去氯 化亞砜，然后將殘留物加入到冰水240g中，經過乙酸乙酯2*250ml萃取、分液、無水硫酸鈉干 燥，過濾，降壓蒸餾除溶劑得到37.6g化合物21，收率88 %，純度HPLC: 98.5 %，。
[0131] (7)化合物22的制備
[0132] 室溫下，將30g(0.11mol)化合物21和19.4g(0.21mol)側鏈2-(硫代甲基）乙胺，加 入到390g異丙醇溶液中，加熱到70~80°C，攪拌反應6h，TLC檢測反應完全，降溫到0~5°C， 過濾，濾餅用75g異丙醇洗滌，45°C干燥12h濾餅，得到32g化合物22，收率89%，純度HPLC: 99.4% 〇
[0133] (8)化合物14的制備
[0134] 室溫下，3(^(0.09111〇1)化合物22即6-^(2-(甲硫基）乙基)-2-((3,3,3-三氟丙基） 硫代-7H-嘌呤加入到225g甲苯中，加入29.1 8(0.39!11〇1)83六，并升溫80°(：，反應151^11，然后 降溫到30~35°C，減壓蒸出溶劑甲苯，殘留物溶于135g乙腈，滴加45.5g(0.2mol)三氟甲磺 酸三甲基硅酯（TMS0TF)和51g(0.16mol) 1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖的DCE溶液307g， 滴加時間2.5h，升溫80 °C繼續反應2h，TLC反應完成后，將體系降溫室溫，加入400ml乙酸乙 酯稀釋，分液，有機相一次經過飽和碳酸氫鈉75ml洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌75ml洗滌兩 次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾溶劑得到46.5g化合物14，收率90 %，純度HPLC : 98.8%〇
[0135] (9)化合物(I)的制備
[0136] 室溫下，將40g(0.07mol)化合物14,加入到34.78(0.31!11〇1)碳酸鉀的8348異丙醇 溶液中，加熱75~80°C反應2.5h，TLC檢測反應完全，減壓蒸餾除去異丙醇，向體系中加入水 560g，析出固體，過濾，濾餅45°C烘干，得到化合物28g(I)，收率:89.3%，純度HPLC:99.4%。
[0137] 上述實例只是為說明本發明的技術構思以及技術特點，并不能以此限制本發明的 保護范圍。凡根據本發明的實質所做的等效變換或修飾，都應該涵蓋在本發明的保護范圍 之內。
【主權項】
1. 一種坎格雷洛中間體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 氰基乙酸乙酯(式1)和硫脲在堿性條件下發生閉環反應生成式16所示化合物； (2) 式16所示化合物在堿性條件下與1-碘_3,3,3_三氟丙烷反應生成式17所示化合物； (3) 式17所示化合物經亞硝酸鹽硝化后得到式18所示化合物； (4) 式18所示化合物通過還原反應得到式19所示化合物； (5) 式19所示化合物與甲酸進行閉環反應生成式20所示化合物； (6) 式20所示化合物與氯代試劑進行氯化反應生成式21所示化合物； (7) 式21所示化合物在堿性條件下與2-(硫代甲基）乙胺進行縮合反應生成式22所示化 合物； (8) 式22所示化合物在烷基化試劑和TMSOTF作用下與1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖 反應得到式14所示化合物； (9) 式14所示化合物在堿性條件下水解得到6-N-(2-(甲硫基）乙基-2-((3,3,3-三氟丙 基)硫代)腺苷(式I); 反應方程式如下：2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)中，所述的硫脲和氰基乙酸乙酯和 的摩爾比為1:1.0~1.5,反應條件為35~65°C、回流反應2~4h。3. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2)中，所述的式16所示化合物與1_ 碘-3，3，3-三氟丙烷的摩爾比為1:1~3，反應條件為:將1-碘-3，3，3-三氟丙烷在15~45°C 下、2~4h內滴加到式16所示化合物中，反應3~5h。4. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的式17所示化合物加水溶 解后加入有機酸/無機酸中，在0.5~3h內滴加完亞硝酸鹽水溶液后在10~40°C下反應1~ 5h;所述的式17所示化合物、有機酸/無機酸、亞硝酸鹽的摩爾比為1:1~5:10~30。5. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，所述的式18所示化合在0~5°C 下與還原劑攪拌1~3h，然后在室溫條件下反應8~18h;所述的式18所示化合與還原劑的摩 爾比為1:2~25;所述的還原劑為保險粉，環利粉、二氧化硫脲中的任意一種。6. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(5)中，所述的式19化合物與甲酸的摩 爾比1:50~100,反應條件為80~100°C下反應4~6h。7. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(6)中，所述的式20所示化合物與氯代 試劑在堿性條件下，在75~95°C下反應1~3h得式21所示化合物，20所示化合物與氯代試劑 的摩爾比為1:8~15;所述的氯代試劑為三氯氧磷，五氯化磷，三氯化磷，氯化亞砜中的任意 一種。8. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(7)中，所述的式21所示化合物與側鏈 2_(硫代甲基）乙胺的摩爾比為1:1~3,反應條件為加熱到70~80°C，攪拌反應4~8h。9. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(8)中，所述的式22所示化合物、烷基 化試劑在75~90°C下反應15~40min，然后在2~3h內向產物中滴加 TMSOTF和1，2,3,5-四 乙酰-β-D-呋喃核糖的混合物，在75~85°C下反應1~3h得式14所示化合物； 所述的烷基化試劑為N，0-雙三硅基乙酰胺或六甲基二硅烷胺； 所述的式22所示化合物、烷基化試劑、TMS0TF、1，2，3，5-四乙酰-β-D-呋喃核糖的摩爾 比為1:1~4:1~3:1~3。10. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(9)中，式14所示化合物在堿存在下、 在60~85 °C下水解反應0.5~3h后得到終產物； 所述的堿為甲醇鈉、乙醇鈉、碳酸鉀、叔丁醇鉀中的任意一種;式14所示化合物與堿的 摩爾比為1:2~7。
【文檔編號】C07H1/00GK106008632SQ201610346519
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月24日
【發明人】郭亮亮, 劉力杰, 馮文化
【申請人】伊泰(北京)合成技術有限公司