一類具有抗腫瘤活性的硝酸酯類no供體型吳茱萸堿衍生物的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及天然藥物及藥物化學領域，具體涉及吳茱萸堿13-N位進行修飾的衍生 物。本發明公開了這些13-N位硝酸酯類N0供體取代的吳茱萸堿衍生物的制備方法及抗腫瘤 活性評價。
【背景技術】
[0002] 吳茱萸堿(evodiamine)是從蕓香科吳茱萸屬(Euodia)植物中分離得到的π引噪喹 唑酮類生物堿化合物。吳茱萸堿是一種淡黃色針狀結晶，不溶于水，易溶于二氯甲烷、氯仿， 可溶于甲醇、乙酸乙酯等有機溶劑。對多種腫瘤細胞都有很好的抑制作用。吳茱萸堿具有抗 腫瘤細胞增殖、抑制腫瘤細胞微管的形成與侵襲，誘導腫瘤細胞凋亡與壞死，增強細胞自 噬，是良好的拓撲異構酶抑制劑。研究表明，吳茱萸堿對宮頸癌細胞、人白血病細胞、肝癌細 胞、黑色素瘤細胞、胃癌細胞、結腸癌細胞等均有一定的抑制作用，其藥理活性研究也十分 深入，對吳茱萸堿抗腫瘤作用機制的研究也逐漸成為熱點。隨著對吳茱萸堿藥理作用研究 的深入，吳茱萸堿引起了國內外科學家的極大興趣，開展了對吳茱萸堿衍生物的合成工作。 目的是獲得活性更好、毒性更低、性質更穩定的抗腫瘤候選化合物。與提取分離、作用機制 方面的報道相比，關于吳茱萸堿結構修飾與改造、衍生物合成等藥物化學方面的報道較少。
[0003] N0在腫瘤發生、發展和死亡中的作用已成為腫瘤生物學研究的熱點之一。大量的 研究表明，N0在腫瘤作用方面具有促瘤和抑瘤雙重活性。體內持續低濃度的N0可以促進腫 瘤細胞的生長，抑制其凋亡；而高濃度的N0則產生細胞毒性，誘導腫瘤細胞凋亡，阻止腫瘤 細胞的擴散和轉移。N0供體型抗腫瘤藥物一般是指N0供體通過連接基團與現有的抗腫瘤藥 物(或活性基團）結合而成的前體藥物，在體內可以通過酶解作用，釋放N0和原藥。
[0004] 本發明以吳茱萸堿為先導化合物，利用拼合原理，選擇能夠產生高濃度N0的硝酸 酯作為N0供體，將其通過連接基團連接到其分子結構的13-N上，設計和合成了通式為I的N0 供體型吳茱萸堿衍生物。
【發明內容】
[0005] 發明要解決的技術問題是尋找抗腫瘤活性好的吳茱萸堿衍生物，并進一步提供一 種治療腫瘤及其它疾病或病癥的藥物組合物。
[0006 ]為解決上述技術問題，本發明提供如下技術方案：
[0007]通式I所示硝酸酯N0供體型吳茱萸堿衍生物：
[0008]
[0009] 其中R代表(CH2)n，n為1-8之間的整數；
[0010] 優選地，n = 2-8的整數；
[0011] 進一步地，本發明優選化合物為：
[0012] 2-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_乙硝酸酯(2a)
[0013] 3-(8，13，1315，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_丙硝酸酯(2b)
[0014] 4-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_ 丁硝酸酯(2c)
[0015] 5-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_戊硝酸酯(2d)
[0016] 6-(8,13,13b，14-四氫-14-甲基剛噪[2' ,3' ;3,4]吡啶并[2，l-b]__#-5-(7H)_ 酮)_己硝酸酯(2e)
[0017] 8-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，卜13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_辛硝酸酯(2f)
[0018] 本發明通式I的衍生物可用下列方法制備得到：
[0019]
[0020] R代表(CH2)n，n為1-8之間的整數；
[0021 ]溴代醇在濃硫酸作用下，與發煙硝酸反應，得到相應的硝酸酯類N0供體（1)。以吳 茱萸堿為原料，以DMF為溶劑，NaH的堿性條件下，與（1)反應，得到相應的吳茱萸堿N0供體衍 生物2。
[0022]藥理試驗證明，本發明的吳茱萸堿衍生物具有更好的抗腫瘤作用，可以用于進一 步制備抗腫瘤藥物。
【具體實施方式】：
[0023] 實施例1
[0024] 2-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_乙硝酸酯(2a)
[0025] 將濃H2S〇4(20mmol)在冰浴下滴加到發煙硝酸(20mmol)中，攪拌lOmin后，滴加溴代 醇（lOmmol)的二氯甲燒溶液。反應3h后，加入10mL H20結束反應。分離有機相，飽和食鹽水 洗滌，無水硫酸鈉干燥、過濾、濃縮，得化合物1，粗品可直接用于下一步反應。將吳茱萸堿 (9 lmg，0 · 3mmo 1)溶于5mL無水DMF中，加入化合物 1 (0 · 4mmo 1)，NaH(1 Omg，0 · 36mmo 1)，室溫攪 拌1.51UTLC監測反應，待反應完全或不繼續進行時，停止反應。乙酸乙酯萃取三次，有機相 用飽和食鹽水洗滌，再用無水硫酸鈉干燥、過濾、濃縮，硅膠柱層析(石油醚:丙酮= 2:1)，得 到目標化合物2a。黃色油狀物，產率45%，ESI-MS m/z 393.2[M+H]VH-NMR(400MHz，CDC13) S7.16~8.12(13H，m，H-l~4,9~12，-Ph)，5.93(lH，br.s，H-3)，4.45(lH，m，H-7b)，3.19 (lH，m，H-7a)，3.00(lH，m，H-8b)，2.86(lH，m，H-8a)，2.34(3H，s，-NCH3)。
[0026] 實施例2
[0027] 3-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_丙硝酸酯(2b)
[0028] 參照實施例1的合成方法。黃色油狀物，產率85%^31-1^111/2 407.2[1+!1] +。1!1-NMR(400MHz，CDCl3)S7.17~8.14(13H，m，H-l~4,9~12，-Ph)，5.94(lH，br.s，H-3)，4.49 (lH，m，H-7b)，3.17(lH，m，H-7a)，3.01(lH，m，H-8b)，2.88(lH，m，H-8a)，2.38(3H，s，-NCH 3)。
[0029] 實施例3
[0030] 4-(8，13，1313，14-四氫-14-甲基吲哚[2/，3/;3,4]吡啶并[2，1-13]喹吡啉-5(7!1)-酮)_ 丁硝酸酯(2c)
[0031 ] 參照實施例1的合成方法。黃色油狀物，產率77%431-1^111/2 421.1[1+!1] +。1!1- NMR(400MHz，CDCl3)S7.15~8.15(13H，m，H-l~4,9~12，-Ph)，5.96(lH，br.s，H-3)，4.49 (lH，m，H-7b)，3.15(lH，m，H-7a)，3.03(lH，m，H-8