一株擬青霉屬真菌及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一株擬青霉屬真菌，特別涉及一株擬青霉屬真菌QDlO菌株及其用途。 本發明屬于微生物技術領域。
【背景技術】
[0002] 隨著世界經濟的飛速增長，人類經濟活動增加，帶來了一個全球不容忽視的大問 題一環境污染，特別是工業廢物排放、農用化學品的隨意處理，給土壤、河流等造成很大的 污染，尤其是重金屬污染。目前為止，全世界平均每年排放鉛約5 X IO5萬kg，汞約1500萬 kg等。還有研究表明，一些進入市場的初級農產品有重金屬殘留物，如鎘米等。這些進入食 物鏈，會給自然環境甚至人體造成很大的損傷。因此，重金屬污染修復工作的開展對于整個 人類和生態環境都有很重大的意義。
[0003] 重金屬污染的治理工作已得到多方關注，尤其是對鉛鎘污染的土壤修復。鉛、鎘屬 于五大污染重金屬，其污染范圍很廣，水體、土壤等均受其害。特別是土壤，近些年來污染范 圍越來越廣。據統計，我國約有1.3X10 4hm2耕地受到鉛等重金屬嚴重污染，致使糧食減產 達LOX 107t。含鉛汽油的使用也加重了土壤中鉛的污染。近些年，在對蔬菜等可食用農作 物的檢測過程中發現有鉛、鎘超標的現象。
[0004] 土壤鉛鎘的污染所帶來的危害是很大的，對人類和生態環境都有很大的影響。在 植物方面，首先會導致產量下降，嚴重的植物會死亡。在人和動物方面，鉛、鎘對動物和人的 毒害是通過食物鏈進入人體和動物體內。鉛積累過量會導致腎臟衰竭、智力下降等中毒癥 狀。鎘積累過量可能會導致"痛痛病"，引起腎小球功能衰竭等疾病，影響動物的生產活動， 嚴重的重金屬會遍布動物全身。
[0005] 與微生物修復技術相比，常見的物理化學修復技術易造成二次污染。而微生物修 復以污染小、成本低等特點成為熱門的重金屬土地污染修復技術，越來越受到關注。微生物 修復重金屬污染土壤及水體是指通過生物體與重金屬顆粒間的相互作用來減輕重金屬對 于環境的危害。在生物修復方法所用的生物材料中，真菌材料具有生物量大、重金屬吸附容 量大、吸附后金屬易回收等眾多優點。而微生物代謝物質如胞外多糖，幾丁質等也參與重金 屬的吸附與固定化過程。這主要是基于微生物細胞表面的功能基團，如羥基，羰基，巰基和 胺基基團等，這些功能基團能夠與重金屬陽離子有效地結合，從而具有對重金屬的吸附作 用。真菌對重金屬的生物吸附是污染治理研究和運用的重點。
[0006] 本發明經篩選和鑒定得到了一株擬青霉屬（Paecilomyces sp.)真菌QDlO菌株， 該菌株的最低抑菌濃度（MIC)為鎘（Cd2+) 1000mg/L，共同抗性為800&1500mg/L(Cd2+&Pb2+)。 通過研究吸附條件改善其吸附效果，提高吸附能力，使高抗性QDlO菌株其自身抗逆性更 強，更有利于實際應用。

【發明內容】

[0007] 本發明的目的之一在于提供一株擬青霉屬真菌，該真菌的最低抑菌濃度（MIC)為 鎘（Cd2+) 1000mg/L，共同抗性為 800&1500mg/L(Cd2+&Pb2+)。
[0008] 本發明的目的之二在于提供所述的擬青霉屬真菌在重金屬鎘或鉛污染治理中的 應用。
[0009] 為了達到上述目的，本發明采用了以下技術手段：
[0010] 本發明篩選到的一株擬青霉屬（Paecilomyces sp.)真菌，命名為擬青霉 QDlO (Paecilomyces sp. QD10)，分類命名為擬青霉 QDlO (Paecilomyces sp. QD10)，于 2015 年6月26日保藏在中國典型培養物保藏中心，地址在武漢大學，其微生物保藏號是CCTCC NO. M 2015405。
[0011] 擬青霉屬真菌QDlO菌株具有如下特性：
[0012] 微生物特征：在固體培養基上菌落表面呈白色，反面呈淡黃色，質地棉絮狀，生長 快速，在固體培養基生長48h時，其直徑可2-3cm。在培養IOd后表面會出現結晶。光學顯 微鏡下顯示QDlO營養菌絲壁光滑，菌絲無色透明，菌絲發達，頂端漸細成明顯的細長頸，可 見大量橢圓形孢子。
[0013] 理化性質：在pH 3-9馬鈴薯（PDA)培養基中生長良好，在溫度10-45°C間生長良 好，能夠使明膠液化，水解淀粉和纖維素，還能夠利用麥芽糖和纖維素作為碳源。
[0014] 本發明的擬青霉屬真菌QDlO菌株的ITS s-rDNA序列與目前發表的擬青菌屬真菌 的ITS s-rDNA序列，同源性達到98%以上。綜合形態特征與分子生物學鑒定，QDlO菌株為 擬青霉屬（Paecilomyces sp.)真菌，其ITSs-rDNA保守序列如SEQ ID NO :1所示。
[0015] 本發明的擬青霉屬真菌QDlO菌株的最低抑菌濃度（MIC)為鎘（Cd2+) 1000mg/L，共 同抗性為800&1500mg/L(Cd2+&Pb2+)。通過研究吸附條件改善其吸附效果，提高吸附能力，使 高抗性QDlO菌株自身抗逆性較強，更有利于實際應用。
[0016] 因此，進一步的，本發明還提供了所述的擬青霉屬真菌在重金屬鎘或鉛污染治理 中的應用。優選的，將所述的擬青霉屬真菌與植物聯用，共同用于重金屬鎘或鉛的污染治 理。
[0017] 綜上所述，本發明篩選出的擬青霉屬真菌QDlO菌株混合抗性較強，在 800&1500mg/L(Cd 2+&Pb2+)的混合培養基中也能良好生長。通過研究吸附條件改善其吸附效 果，提高吸附能力，使高抗性QDlO菌株自身抗逆性更強，更有利于實際應用。
【附圖說明】
[0018] 圖1為QDlO菌株的菌落特征；
[0019] 圖2為光學顯微鏡下顯示的QDlO營養菌絲及孢子形態；
[0020] 圖3為不同投菌量對QDlO菌株吸附效果的影響圖，其中A圖為不同投菌量對QDlO 菌株吸附Cd2+效果的影響圖，B圖為不同投菌量對QDlO菌株吸附Pb 2+效果的影響圖；
[0021] 圖4為不同pH值對QDlO菌株吸附效果的影響圖；
[0022] 圖5為不同溫度對QDlO菌株吸附效果的影響圖；
[0023] 圖6為不同時間對QDlO菌株吸附效果的影響圖；
[0024] 圖7為采用QDlO菌株或與植物聯合修復重金屬鎘或鉛污染土壤的效果。
【具體實施方式】
[0025] 下面結合具體實施例和附圖來進一步描述本發明，本發明的優點和特點將會隨著 描述而更為清楚。但實施例僅是范例性的，并不對本發明的范圍構成任何限制。本領域技 術人員應該理解的是，在不偏離本發明的精神和范圍下可以對本發明技術方案的細節和形 式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發明的保護范圍內。
[0026] 實施例1本發明擬青霉屬真菌QDlO菌株的分離、純化及鑒定
[0027] 1材料與方法
[0028] I. 1培養基和溶液
[0029] 馬鈴薯（PDA)培養基：葡萄糖20g，20%左右的馬鈴薯浸出液1000 ml (稱取去皮馬 鈴薯200g，切塊，加水1000 ml煮沸半小時，用雙層紗布過濾取汁，補足水量至1000ml)，瓊脂 20g，pH 自然。
[0030] 基礎培養基：葡萄糖10g，硝酸鉀lg，硫酸鎂0. 2g，磷酸二氫鉀0. 5g，瓊脂15g，蒸 餾水 1000ml。
[0031] 明膠液化培養基：蛋白胨5g，明膠200g，葡萄糖20g，蒸餾水1000ml。
[0032] 淀粉水解培養基：Κ2ΗΡ0410· 0g，KH2P04 0· 3, NaCl 0· 5g，MgCO3L 0g，KNO3L 0g，可溶 性淀粉2. 0g，瓊脂15g ;pH7. 2,蒸餾水1000ml。
[0033] 纖維素水解培養基：MgSO4 · 7H20 0· 5g，K2HPO4O. 5g，NaCl 0· 5g，KNO3L 0g，濾紙條， 蒸饋水l〇〇〇ml。
[0034] 溶液：配制100g · L 1Pb (NO3) 2的母液和100g · L 1CdSO4的母液，滅菌備用。
[0035] I. 2 QDlO菌株的分離純化：
[0036] ①取土