一種從吐根中提取精制生物堿的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及中藥成分提取技術領域，具體涉及一種從吐根中提取精制生物堿的方 法。
【背景技術】
[0002] 吐根為茜草科植物 Cephaelisipecacuanha(Brot. )A. Rich 或 Cephaelis acuminate Kar sten的干燥根莖，是巴西、哥斯達黎加或印度進口藥材，在美國藥典、日本 藥典及歐洲藥典均有收載。現代藥理學研究表明，吐根具有止咳化痰、催吐、抗阿米巴病等 功效；有研究表明其主要藥理活性成分為生物堿類化學成分，其中以吐根堿和吐根酚堿為 主，兩者占總生物堿的90%以上，由于吐根堿和吐根酚堿為游離態并不穩定，臨床上多采 用其鹽酸鹽進行治療，其中鹽酸吐根堿多用于治療急性阿米巴病，而鹽酸吐根酚堿則主要 用于催吐和祛痰。吐根總生物堿中還有一種英文名為AIDS031406的生物堿，其CAS號為 15401-60-2,其化學式為C27H35NO12，暫無中文名，其國內外的研究較少，目前只有用于實驗 室含量測定、對照試驗、藥理試驗的市售產品，商品名為Ipecoside。
[0003] 雖然吐根中各生物堿之間，如吐根堿和吐根酚堿的結構相近，但是其在人體內的 吸收、分布、代謝和排泄是有很大差異的，各生物堿之間在藥理上也是有一定差異的，為了 更安全準確的用藥，對于吐根中各生物堿的分離純化精制是非常有必要的。然而吐根為進 口藥材，國內對其研究甚少，也缺乏相應的提取分離精制方法的文獻，且國外文獻中，對吐 根中的吐根堿、吐根酚堿以及AIDS031406的提取分離方法也研究較少。CN102633793A的專 利公開了從吐根中提取分離鹽酸吐根堿和鹽酸吐根酚堿的一種制備方法，采用超聲提取、 濃縮、萃取、分離純化、冷凍干燥的步驟進行，得到的鹽酸吐根堿和鹽酸吐根酚堿的純度超 過98%，然而該制備方法是一種半制備方法，所用的試劑及設備都是實驗室分析用的，其收 率較小，產量低，只停留在實驗室研究階段，并不能實現工業化生產；同時萃取過程采用了 乙醚試劑，乙醚是極易揮發的至麻醉試劑，使用及用量是嚴格控制的，根本就無法應用于生 產。

【發明內容】

[0004] 有鑒于此，本申請提供一種從吐根中提取精制生物堿的方法，所述方法能將吐根 中的吐根堿、吐根酚堿以及AIDS031406以鹽酸鹽的形式提取分離出來，其中鹽酸吐根堿 的純度達到98. 5 %以上，鹽酸吐根酚堿的純度達到98. 5 %以上，AIDS031406的純度達到 99%，總收率達到80%以上，產量高，適合于工業化生產，其方法簡單，純度較高，過程中除 甲醇或乙醇外，不涉及其他有機溶劑，綠色環保。
[0005] 為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是一種從吐根中提取精制生物堿的 方法，所述方法包括以下步驟：
[0006] (1)提取濃縮：取吐根藥材，粉碎，加入酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液進行提取， 得提取液A，將提取液A進行減壓濃縮，得濃縮液B ;加入酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液的目 的是將吐根中的吐根堿、吐根酚堿以及AIDS031406轉化為穩定的鹽酸鹽形式；
[0007] (2)分離富集：取濃縮液B，上反相聚合填料J進行吸附，吸附完成后進行解析，先 用水洗，收集水洗液C ;再用醇溶液E洗脫，收集解析液D ;其中水洗液C中為鹽酸吐根酚堿， 解析液D中為鹽酸吐根堿和AIDS031406 ;
[0008] (3)純化：將水洗液C注入制備型高效液相進行分離純化，根據鹽酸吐根酚堿的檢 測圖譜相應譜帶收集溶液G ;將解析液D注入制備型高效液相進行分離純化，根據鹽酸吐根 堿、AIDS031406的檢測圖譜相應譜帶，分別收集溶液H、溶液I ;通過制備型高效液相色譜， 直接得到含有三種成分的純品溶液，提高收率；
[0009] (4)富集干燥：將溶液G、溶液H、溶液I濃縮后，分別上反相聚合填料K進行吸附， 吸附完成后，分別用醇溶液F洗脫，將洗脫后得到的洗脫液減壓濃縮至干，再進行真空干 燥，即得鹽酸吐根酚堿純品、鹽酸吐根堿純品、AIDS031406純品。
[0010] 優選的，步驟（1)中，所述酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液中，含有體積百分比為 0. 05%的鹽酸，以及體積百分比為70- 90%的甲醇或乙醇。
[0011] 更為優選的，所述酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液中，甲醇或乙醇的體積百分比為 80%〇
[0012] 優選的，步驟（1)中，提取液A減壓濃縮的溫度不高于65°C。
[0013] 優選的，步驟（2)中，所述反相聚合填料J為任意一種選自AB-8型大孔吸附樹脂、 DlOl型大孔吸附樹脂、XAD-16N填料、MCIGEL聚合填料、YMC填料、匪100-反相聚合物色譜 填料。
[0014] 更為優選的，步驟（2)中，所述反相聚合填料J為任意一種選自AB-8型大孔吸附 樹脂、DlOl型大孔樹脂、匪100-反相聚合物色譜填料。
[0015] 優選的，步驟（2)中，所述醇溶液E為甲醇溶液或乙醇溶液，所述醇溶液E中甲醇 或乙醇的體積百分比為30- 80%。
[0016] 優選的，步驟（4)中，所述反相聚合填料K為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0017] 優選的，步驟（4)中，所述醇溶液F為甲醇溶液或乙醇溶液，所述醇溶液F中甲醇 或乙醇的體積百分比為80-100%。
[0018] 優選的，步驟（4)中，所述減壓濃縮的溫度不高于55°C，所述真空干燥的溫度為 40- 50°C。
[0019] 本申請技術方案中的AB-8型大孔吸附樹脂、DlOl型大孔吸附樹脂、XAD-16N填料、 MCI GEL聚合填料、YMC填料、匪100-反相聚合物色譜填料均為市售產品。
[0020] 本申請與現有技術相比，其詳細說明如下：本申請技術方案提供了從吐根中提 取精制生物堿的方法，包括提取濃縮、分離富集、純化、富集干燥的操作步驟，其中提取濃 縮步驟中采用酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液進行提取，將吐根中的吐根堿、吐根酚堿以及 AIDS031406轉化為穩定的鹽酸鹽形式，有利于后續步驟的進行，同時提高產品純度；在分 離富集步驟中，采用反相聚合填料進行富集，將鹽酸吐根酚堿、鹽酸吐根堿與AIDS031406 分離開來，其中水洗液C中為鹽酸吐根酚堿，解析液D中為鹽酸吐根堿和AIDS031406,此外 避免了除甲醇或乙醇外其他有機溶劑的使用；在純化步驟中，通過制備型高效液相色譜，直 接得到含有三種成分的純品溶液，提高收率；在富集干燥過程中，通過再一次富集，將純品 溶液由溶液形式轉化為固體形式，經真空干燥后得到分離后的鹽酸吐根酚堿純品、鹽酸吐 根堿純品、AIDS031406純品。
[0021 ] 經實驗驗證，所述方法中，鹽酸吐根堿的純度能達到98. 5%以上，鹽酸吐根酚堿的 純度能達到98. 5%以上，AIDS031406的純度能達到99%，其總收率達到80- 90%，相比于 現有技術中，純度達到95%，收率僅為30%，本申請技術方案得到的成分純度較高，收率上 具有明顯的優勢，且方法簡單，過程中除甲醇或乙醇外，不涉及其他有機溶劑，綠色環保。所 述方法可用于標準品的精制制備，也可以用于工業化的生產，質量穩定可控，具有很好的應 用前景。
【具體實施方式】
[0022] 為了使本領域的技術人員更好地理解本發明的技術方案，下面結合具體實施例對 本發明作進一步的詳細說明。
[0023] 實施例一
[0024] 本實施例所述的從吐根中提取精制生物堿的方法，包括以下步驟：
[0025] (1)提取濃縮：取吐根藥材，吐根藥材產自哥斯達黎加，粉碎后，加入酸性甲醇溶 液或酸性乙醇溶液進行提取，提取6次，合并得提取液A，將提取液A在60°C下減壓濃縮，得 濃縮液B ;
[0026] (2)分離富集：取濃縮液B，上DlOl型大孔吸附樹脂進行吸附，吸附完成后進行解 析，先用水洗，收集水洗液C ;再用濃度為45- 60%的醇溶液E洗脫，收集解析液D，所述醇 溶液E為甲醇溶液；
[0027] (3)分離純化：將水洗液C注入制備型高效液相進行分離純化，根據鹽酸吐根酚堿 的檢測圖譜相應譜帶收集溶液G ;將解析液D注入制備型高效液相進行分離純化，根據鹽酸 吐根堿、AIDS031406的檢測圖譜相應譜帶，分別收集溶液H、溶液I ;
[0028] (4)富集干燥：將溶液G、溶液H、溶液I濃縮后，分別上AB-8型大孔吸附樹脂進行 吸附，吸附完成后，分別用濃度為95-100%的醇溶液F洗脫，所述醇溶液F為甲醇或乙醇 溶液，將洗脫后得到的洗脫液在50°C下減壓濃縮至干，再在45°C下真空干燥，即得鹽酸吐 根酚堿純品、鹽酸吐根堿純品、AIDS031406純品。
[0029] 其中，所述步驟（1)中，根據酸性甲醇溶液或酸性乙醇溶液中甲醇或乙醇的體積 百分比進行分組編號，其中1組為酸性甲醇溶液，甲醇的體積百分比為70%，2組為酸性甲 醇溶液，甲醇的體積百分比為80%，3組為酸性甲醇溶液，甲醇的體積百分比為90%，4組 為酸性乙醇溶液，乙醇的體積百分比為70%，5組為酸性乙醇溶液，乙醇的體積百分比為 80%，6組為酸性乙醇溶液，乙醇的體積百分比為90%，上述各組中，其酸性均由體積百分 比為0.05%的鹽酸提供，通過HPLC分別檢測每組方法中，所得鹽酸吐根酚堿純品、鹽酸吐 根堿純品以及AIDS031406純品的純度，總生物堿的收率，分組檢測結果見表1。
[0030] 表1實施例一分組檢測結果
[0031]
[0033] 從以上數據可以看出，上表中1一6組，其各組分純度較高，均能達到98%以上，在 高純度的同時，且能達到至少80%的收率，其中第2組酸性甲醇溶液，甲醇的體積百分比為 80 %，其效果最好，為本申請的優選方案。
[0034] 實施例二
[0035] 本實施例所述的從吐根中提取精制生物堿的方法，包括以下步驟：
[0036] (1)提取濃縮：取吐根藥材，吐根藥材產自哥斯達黎加，粉碎后，加入酸性甲醇溶 液進行提取，其中酸性甲醇溶液中，含有體積百分比為0.05%的鹽酸，以及體積百分比為 80%的甲醇，提取6次，合并得提取液A，將提取液A在60°C下減壓濃縮，得濃縮液B ;
[0037] (2)分離富集：取濃縮液B，上反相聚合填料J進行吸附，吸附完成后進行解析，先 用水洗，收集水洗液C ;再用濃度為45- 60%的醇溶液E洗脫，收集解析液D，所述醇溶液