一種甾體皂苷類化合物及其在制備抗腫瘤藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥技術領域，是從重樓屬（Paris)植物中分離的新化合物及其在醫 療方面的用途，具體地說是從傳統中藥金線重樓中提取分離到一種新的留體皂苷類化合物 及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 中藥重樓來源于百合科（Liliaceae)重樓屬植物，主要分布于亞歐大陸的熱帶和 溫帶地區，全世界共有24個種，我國種類最多，有19種，以西南各省區的種類和資源最為豐 富。本屬植物是一類極具藥用價值的植物，其根莖在我國有著悠久的藥用歷史，具有清熱解 毒、消腫止痛和涼肝定驚之功效，用于治療癰瘡、毒蛇咬傷、涼風抽搐、咽喉腫痛和跌打傷痛 等癥。現代藥理學研究表明其具有抗腫瘤、抑菌與止血等作用。
[0003] 金線重樓（ParisdelavayiFranchet)主要分布于四川、云南、湖南和湖北等地， 迄今對其化學成分的研究報道甚少。我們對金線重樓總皂苷進行了系統分離，獲得了一種 新的留體皂苷類化合物，其化學結構和抗腫瘤活性未見有過報道。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的旨在提供一種從金線重樓中提取的留體皂苷類化合物及其在制備 抗腫瘤藥物方面的應用。
[0005] 本發明的目的是這樣實現的，一種留體皂苷類化合物，所述留體皂苷類化合物分 子式為C57H94026，化學結構式如下：
[0006]
[0007] 本發明采用高分辨質譜和二維核磁共振譜等光譜技術，以及化學方法，確定上 述結構化學名稱為（25R) -26_〇- 0 -D-吡喃匍萄糖-A5(6)-稀-咲留-3 0，22a，26-二羥基-3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 - 3)-a-L_吡喃鼠李糖-(1 - 3)-[P-D-吡喃葡萄 糖-(1 - 4)]_a-L-吡喃鼠李糖苷嗎，以下簡稱其為JXZG1。
[0008] 所述留體皂苷類化合物的來源是從金線重樓中提取獲得。
[0009] 本發明還提供了留體皂苷類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述留體皂苷類 化合物可以單獨使用或與其他藥物混合，配制成在臨床上可以使用的注射劑、或散劑、或丸 劑、或片劑、或微囊劑、或軟膠囊劑、或膜劑、或膏劑、或酊劑、或顆粒劑、或氣霧劑。
[0010] 本發明的特點是：本發明提供的這種式I化合物JXZG1苷元與3位糖鏈結構非常 罕見，在本屬植物皂苷中首次發現。該化合物對肝癌細胞和膠質瘤細胞有明顯的抑制作用， 表明其可以進一步作為新的抗腫瘤藥物進行研究開發。
[0011] 本發明從金線重樓中通過提取、分離純化得到式I化合物JXZG1，該化合物為治 療惡性腫瘤提供了先導化合物，可望成為新的抗腫瘤藥物。
【附圖說明】
[0012] 圖1是本發明式I化合物的HMBC和N0ESY相關。
【具體實施方式】
[0013] 實施例1 :
[0014] 本實施例提供了該種留體皂苷類化合物的提取和分離，是從金線重樓中分離 獲得，分子式為C57H94026，化學名稱為（25R) -26-0-e-D-吡喃葡萄糖-A5 (6)-烯-呋 甾-3f3，22a，26-三羥基-3-0-a-L-吡喃鼠李糖_(1 - 3)_a-L-吡喃鼠李 糖-(1 - 3) - [ 0 -D-吡喃葡萄糖-(1 - 4) ] -a-L-吡喃鼠李糖苷嗎，S卩（25R)-26-0-0 -D-Glc-22-hydroxy-5-ene-furost-3 0,26-diol-3-〇-a-L-Rha-(1 ^ 3) -a-L-Rha-(1 ^ 3)-[ 0 -D_Glc_(l- 4)]-a-L-rhamnopyranoside)，以下簡稱JXZG1，化學結構式如下式：
[0015]
[0016] 制備JXZG1的原料為采自陜西省寶雞市太白縣金線重樓根莖，經粉碎成粗粉后， 取6公斤，加入60升濃度為70 %的乙醇進行回流提取，共提取3次，每次2小時，合并提 取液，減壓回收溶劑，得乙醇提取物680克。將乙醇提取物分散于8升水中，用石油醚萃 取3次，每次8升；萃取后的水相再用正丁醇萃取3次，每次8升，合并正丁醇萃取液，減壓 回收溶劑后得到總皂苷提取物170克；將總皂苷進行硅膠柱層析，以體積比為10:1:0~ 6. 5:3. 5:1 (均取下層作為洗脫液）的氯仿-甲醇-水混合溶劑梯度洗脫，按150mL為一個 流份接收，并用硅膠薄層層析檢測（薄層展開溶劑采用體積比為10:1的水飽和正丁醇-甲 醇混合溶劑，顯色劑為體積比為1:4的硫酸-甲醇溶液，噴顯色劑后于105°C加熱顯色），收 集Rf值在0. 5~0. 65處顯示紫紅色斑點的流份，即為含化合物JXZG1的總皂苷混合物，減 壓蒸干溶劑后得11. 2克樣品。
[0017] 樣品采用Sephdex LH-20 (GE-Healthcare公司）葡聚糖凝膠柱層析，以甲醇洗脫， 按20mL為一個流份接收，薄層層析檢測，合并含JXZG1的第8~10流份，減壓蒸干溶劑后 得1. 2克樣品，最后經高效液相色譜儀（戴安公司）分離純化（HPLC條件為：YMC-Pack R&D 0DS-A色譜柱20 X 250mm，55%乙腈為流動相，流速8mL/min，25°C，206nm紫外檢測），得到 JXZG1的純品55mg。
[0018] 實施例2:
[0019] 化合物JXZG1的結構鑒定：JXZG1為白色無定形粉末（MeOH)， Liebermann-Burchard和Mo1i sh反應均呈陽性，提示該化合物可能為一留體苷類化合 物。如表1所示，ESI-MS給出其準分子離子峰m/z 1217[M+Na]+和m/z 1193[M-H]， -已51-]\^給出準分子離子峰111/21217.5940[]\1+似]+ (〇&1(3^(^(：571194026似1217.5931)，結 合13C-NMR(125MHz，CD30D)數據，確定其分子式為C57H94026。
[0020] 分析該化合物的1H-NMR(500MHz，⑶觀)，可觀察到在其高場區有7個甲基信號 S〇? 86(3H，s，CH3-18)，0? 96(3H，d，J= 6. 6Hz，CH3-27)，1. 02(3H，d，J= 6. 9Hz，CH3-21)， 1. 08 (3H，s，CH3-19)，1. 26 (3H，d，J= 5. 5Hz，CH3ofRha)，1. 27 (3H，d，J= 5. 9Hz，CH3of Rha" )，1.31(3H，d，J= 6. 2Hz，CH3ofRha< )。同時，在其低場區可以看到一個寬單峰 的烯氫質子信號S5. 40 (1H，brs，H-6)。通過該化合物的13C-NMR、HSQC及其DEPT譜數據 可發現 7 個甲基碳信號S17.0(018)，17.4(027)，16.0(021)，20.0(019)，18. 1(CH3of Rha)，18. 7 (CH3ofRha")和 18. 0 (CH3ofRha'），一對雙鍵碳信號S142. 1 (C-5,C)和 S122. 8 (C-6,CH)預示1個三取代雙鍵的存在。此外，C-16位與C-22位為連氧碳，其化學 位移值分別為S82. 4(-般為5 80. 0左右）和5 112. 1(-般為5 109. 0左右），這兩個碳 信號為留體皂苷中苷元極具特征性信號，易于辨別。C-22位碳信號出現在5 112.