化合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥領域，具體的，本發明涉及化合物及其制備方法和應用，更具體 的，本發明涉及式I所示化合物以及衍生物及其制備方法、藥物組合物、式I所示化合物 在制備藥物中的用途。
【背景技術】
[0002] 腫瘤是機體在各種致癌因素作用下，局部組織的某一個細胞在基因水平上失去對 其生長的正常調控，導致其克隆性異常增生而形成的異常病變。學界一般將腫瘤分為良性 和惡性兩大類。
[0003] 然而，現有腫瘤的治療手段仍有待改進。

【發明內容】

[0004] 應用最先進的計算機三維分子對接模擬技術，在第一代泛素激酶抑制劑兩類化合 物系列的基礎上設計第二代候選化合物，通過物理化學性質、藥代動力學參數和結合受體 蛋白（E2/E3偶聯口袋）的預測和篩選、自由能微擾和分子動力學理論，化合物和受體蛋白 的二元復合物的物理結合自由能由穩定態的全體采樣積分給出，由此優化選擇得到化合 物。此抑制劑系列可用于治療癌癥。
[0005] 泛素-蛋白酶系統（ubiquitin-proteasome system, UPS)是真核細胞內主要的蛋 白水解酶，由泛素、泛素活化酶、泛素耦聯酶、泛素-蛋白連接酶、26S以及泛素再循環酶等 組成。泛素分子主要通過泛素活化酶、泛素結合酶和泛素-蛋白連接酶與靶蛋白結合形成 一條多泛素鏈，將底物蛋白泛素化，使靶蛋白被26S蛋白酶體所識別和降解。泛素-蛋白酶 體系統是細胞內三磷酸腺苷依賴的非溶酶體蛋白降解機制，可高效選擇性地降解細胞內蛋 白質，參與細胞的多種生理活動過程，比如細胞凋亡、MHCI類抗原的遞呈、細胞周期以及細 胞內信號傳導等，對維持細胞正常的生理功能具有十分重要的意義。
[0006] 泛素蛋白激酶抑制劑具有調控細胞周期，以凋亡機制殺滅腫瘤細胞；其通過穩定 Ι-kB蛋白來抑制轉錄活化因子（NP-kB)，可使細胞對于化療藥或其他細胞應激更敏感，同 時使腫瘤細胞對TNF誘導和藥物誘導的敏感性增加。泛素蛋白激酶抑制劑能夠阻斷NF-kB 介導的細胞黏附分子在內皮細胞的表達，從而起到抗血管生成與抗腫瘤的作用。
[0007] 本發明旨在至少在一定程度上解決相關技術中的技術問題之一。為此，本發明的 一個目的在于提出一種能夠用于治療癌癥的藥物的化合物。
[0008] 在本發明的第一方面，提供了一種化合物，根據本發明的實施例，該化合物為式I 所示化合物或式I所示化合物的對映異構體、非對映異構體、外消旋體、藥學上可接受的 鹽、結晶水合物、酮-烯醇互變異構化合物或溶劑合物，
[0009]
[0010] 其中，
[0011] R1為任選取代的苯基；
[0012] R2為對甲基苯基、甲基；
[0013] X 為 C 或 N。
[0014] 發明人驚奇地發現，根據本發明實施例的化合物具有有效地抗癌活性。尤其是，針 對癌癥，例如腦癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、宮頸癌、結腸癌、乳腺癌和前列腺癌。
[0015] 根據本發明的實施例，上述化合物還可以具有下列附加技術特征：
[0016] 在本發明的一個實施例中，R1為苯基，至少一個鹵素取代的苯基，氰基取代的苯 基。
[0017] 在本發明的一個實施例中，所述鹵素為F、Cl或Br。
[0018] 在本發明的一個實施例中，所述化合物為下列化合物或者所述下列化合物的對映 異構體、非對映異構體、外消旋體、藥學上可接受的鹽、結晶水合物或溶劑合物：
[0019]
[0020] 在本發明的第二方面，本發明提供了一種制備前面所述化合物的方法，根據本發 明的實施例，該方法包括：
[0021] (1)使式Al所示化合物與硝基甲烷進行接觸，以便獲得式A2所示化合物；
[0022] (2)使所述式A2所示化合物與式A3所示化合物進行接觸，以便獲得式A4所示化 合物；
[0023] (3)使所述式A4所示化合物進行還原反應，以便獲得式A所示化合物；
[0024] (4)使式Bl所示化合物與甘氨酸乙酯鹽酸鹽進行接觸，以便獲得式B2所示化合 物；
[0025] (5)使所述式B2所示化合物進行水解反應，以便獲得式B所示化合物；
[0026] (6)使所述式A所示化合物與所述式B所示化合物進行接觸，以便獲得式I所示化 合物；
[0028] 其中R^R2J是如前面所定義的。
[0029] 根據本發明的實施例的方法，能夠有效地制備前面所描述的化合物，關于該化合 物的特征和優點，前面進行了詳細描述，同樣適用本方法，在此不再贅述。
[0030] 由此，根據本發明的實施例，本發明提出了一條合成路線，可以用于制備式I所示 化合物：
[0032] 所述式Al所示化合物與硝基甲烷溶于醋酸中，并在醋酸胺的作用下80攝氏度攪 拌4-5小時，獲得式A2所示化合物；所述式A2所示化合物與式A3所示化合物溶于環己烷， 并在二水乙酸鋅的作用下80攝氏度攪拌8-14小時；獲得式A4所示化合物；將所述式A4所 示化合物溶于甲醇和水的混合液中，并在還原劑的作用下獲得式A所示化合物；使式Bl所 示化合物與甘氨酸乙酯鹽酸鹽溶于乙腈，在堿的作用下50攝氏度攪拌5小時獲得式B2所 示化合物；將所述式B2所示化合物在堿的作用下脫去酯基，獲得式B所示化合物；使所述 式A所示化合物與所述式B所示化合物溶于無水DMF，在HOBT，DMP和EDC的作用下獲得 式I所示化合物；
[0033] 在本發明的第三方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包括前面所描述的化合 物。發明人發現，該藥物組合物能夠有效地用于抗腫瘤，尤其是，針對癌癥，例如腦癌、肺癌、 卵巢癌、膀胱癌、宮頸癌、結腸癌、乳腺癌和前列腺癌。
[0034] 關于該化合物的特征和優點，前面進行了詳細描述，同樣適用于本藥物組合物，在 此不再贅述。
[0035] 在本發明的第四方面，本發明提供了前面所述的化合物或藥物組合物在制備藥物 中的用途，所述藥物用于治療癌癥，任選地，所述癌癥為癌癥，例如腦癌、肺癌、卵巢癌、膀胱 癌、宮頸癌、結腸癌、乳腺癌和前列腺癌。
【具體實施方式】
[0036] 下面詳細描述本發明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發 明，而不能理解為對本發明的限制。
[0037] 實施例1
[0038] 化合物I-I :N-(2-(4-氟苯基）-2-(1H-吲哚-3-基）乙基）-2-(甲基磺酰氨基） 乙酰胺
[0040] 取圓底燒瓶，分別加入對氟苯甲醛（15. 26mmol) I. 892g，MeN02(152. 6mmol)9. 315g，醋 酸銨（45. 78mmol)3. 529g，醋酸50mL，80°C反應5小時。將反應液倒入冰水中，析出固體，抽濾， 得化合物A2-1，為淡黃色針狀固體I. 4g，產率54. 9%。
[0041] 取圓底燒瓶，分別加入化合物 A2-1 (3. 59mmol) 600.0 mg，吲噪（3. 95mmol) 462. 7mg， 二水乙酸鋅（〇· 359mmol)78. 7mg，環己烷 30mL，80°C反應 14 小時。TLC(PE:EA = 3:1)，用乙 酸乙酯（30mLX3)萃取，飽和食鹽水和無水硫酸鈉干燥。濃縮，柱層析分離（PE:EA = 6:1)。 得產物化合物A4-1，為黃色液體1.0 g，產率98. 1 %。
[0042] 1H NMR (400MHz，CDCl3) δ 8. 11 (s，1H)，7. 37 (d，J = 8. 0Hz，1H)，7. 28 (d，J =8. 1Hz, 1H), 7. 23 (dd, J = 8. 3, 5. 4Hz, 2H), 7. 17 (t, J = 7. 7Hz, 1H), 7. 05 (t, J =7. 5Hz, 1H) , 6. 99 - 6. 88 (m, 3H) , 5. 12 (t, J = 8. 0Hz, 1H) , 4. 98 (dd, J = 12. 5, 7. 5Hz, 1H), 4. 83 (dd, J = 12. 4, 8. 6Hz, 1H).
[0043] 圓底燒瓶，分別加入化合物A4-1 (3. 5mmol) 1.0 g，鐵粉（17. 6mmol) 983. Omg，氯化 銨（35.2臟〇1) 1.8828，]^0!1/!120(5/1)，60°(：反應5小時。過濾，濃縮，用乙酸乙酯（301111^3) 萃取，飽和食鹽水和無水硫酸鈉干燥。濃縮，柱層析分離（DCM = MeOH = 25:1)。得化合物 A-I，為黃色油狀物160.0 mg，產率18. 0 %。
[0044] 1H NMR (400MHz, MeOD) δ 7. 34 (ddd, J = 14. 3, 10. 4, 6. 7Hz, 4H) ,7.15 (s, 1H), 7. 08 (t, J = 7. 5Hz, 1H), 7. 00 - 6. 88 (m, 3H), 4. 94 (s, 3H), 4. 66 (t, J = 7. 5Hz, 1H), 3. 62 (dd, J = 12. 5, 7. 3Hz, 1H), 3. 40 (dd, J = 12. 5, 7. 8Hz, 1H).
[0045] 取圓底燒瓶，加入化合物Bl-I (21mmol) 2. 405g，化合物甘氨酸乙酯鹽酸鹽 (20mmol) 2. 792g，乙腈 30mL，10-15°C條件下滴加三乙胺（50mmol) 5. 060g，50°C反應 5 小時。 TLC(PE:EA = 1:1)，過濾，乙腈洗固體殘留物，將濾液濃縮，柱層析分離（PE:EA = 3:1)。得 化合物B2-1，為黃色液體I. 377g，產率38. 0%。
[0046] 取圓底燒瓶，加入化合物B2-1 (9. 08mmol) I. 776g，Me0H/H20 (5/1)，緩慢加入氫氧 化鈉（49mmol) I. 960g，室溫攪拌5小時。濃縮，用2mol/L鹽酸調pH至4-5,用乙酸乙酯萃 取（30mLX 3)，飽和食鹽水和無水硫酸鈉干燥。濃縮，得化合物B-1，為淡黃色固體150.0 mg， 產率為10. 0%。
[0047] 1H NMR (400MHz, MeOD) δ 3. 89 (s, 2H), 3. 02 (s, 3H).
[0048] 取前形瓶，加入化合物B-I (0· 623mmol) 100.0 mg，化合物A-I (0· 556mmol) 143. 4mg， H0BT(L 132mmol) 152. 9mg，DMAP(0. 1132mmol) 13. 8mg，EDC(1. 132mmol)217. Omg，通入氬氣， 加入無水01^，室溫攪拌過夜。110(001:160!1=15:1)，用乙酸乙酯萃取（301^\3)，飽和 食鹽水和無水硫酸鈉干燥。濃縮，柱層析分離（DCM:MeOH = 30:1)。得產物I-I白色固體 197. Omg，產率 91. 0%。
[0049] 1H NMR (400MHz，MeOD) δ 7. 39 - 7. 29 (m，4H)，7. 19 (s，1H)，7. 08 (dd，J = 11. 2, 4. 2Hz, 1H), 7. 00(dd, J = 12. 2, 5. 4Hz, 2H), 6. 96 - 6. 89 (m, 1H), 4. 51 (d, J = 7. 8Hz, 1H), 4. 01 - 3. 93 (m, 1H), 3. 84 - 3. 76 (m, 1H), 3. 67 (s, 2H), 2. 83 (s, 3H). 13C NMR (100MHz, Acetone-d6) δ 169. 28 (s), 163. 54 (s), 161. 14 (s), 140. 26 (s), 137. 76 (s), 130 .80 (d, J = 8. 0Hz), 127. 92 (s)，122. 74 (s)，122. 40 (s)，119. 80 (s)，119. 59 (s)，116. 89 (s)， 115. 83 (s)，115. 62 (s)，112. 22 (s)，46. 27 (s)，44. 95 (s)，42. 90 (s)，40. 38 (s) ·
[0050] 實施例2
[0051] 化合物1-2 :N-(2-(2, 4-二氟苯基）-2-(1H-吲哚-3-基）乙基）-2-(甲基磺酰氨 基）乙酰胺
[0053] 取圓底燒瓶，分別加入2,4_二氟苯甲醛（15.26mmol)L 892g， MeN02(152