環孢菌素t及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及化合物制備及用途領域，具體涉及環孢菌素 T及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 我國草地農業發展緩慢，最直接的影響就是造成畜牧業發展也減速，因而致使每 年我國從國外進口的牧草以及購買嬰兒奶制品的數量逐年上升。宄其原因主要是因為我國 缺少具有抗性的優異牧草品種，尤其是具有抗植物病原真菌的牧草。每年我國牧草由于植 物病原真菌的危害，造成大面積減產和生長緩慢，并且還影響奶制品的安全。雖然現階段化 學合成的殺滅植物病原真菌藥物在植物病害防治中起著不可代替的作用。但是，大家對農 藥毒性和農藥對環境的污染問題越來越重視，一些毒性高，殘留長的殺菌劑品種，如有機氯 汞制劑(艾氏劑、六六六）等相繼禁用。從微生物中尋找新的無毒、無污染、可持續利用的生 物源殺菌劑已成為當現代農藥研宄開發的一個熱點。
[0003] 微生物源殺菌劑是指利用微生物及其代謝產物來防治植物病原真菌。目前，該類 型殺菌劑已成為農藥發展的主要趨勢。我們知道禾草的很多草已成為具有抗菌活性的優異 牧草，如野大麥，中華羊茅等，然而其抗性特點來源于自身的內生真菌你為其宿主 提供的此利益。如果能從你中找到具有抑制植物病原真菌的代謝物，并且這些代謝 物對牲畜無毒，那么將這些內生真菌接種于普通的牧草中，使其成為具有抗性的優良牧草， 將解決我國缺乏具有抗植物病原真菌的優良牧草問題。同時這類微生物源殺菌劑不會對生 態環境產生污染，還具有可持續性，這將是抗菌藥物研制與生產單位重要的工作方向。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了環孢菌素 T及其制備方法 和應用。
[0005] 為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為：環孢菌素 T，結構式如式（I )所 示：
【主權項】
1. 環孢菌素T，其特征在于，結構式如式（I )所示：
2. 根據權利要求1所述的環孢菌素T，其特征在于，所述環孢菌素T是由青海的麥賓草 iaflgwiora?)中分離得到的foiico/a內生真菌的代謝產物。
3. 根據權利要求1所述的環孢菌素 T的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 先將內生真菌接種于馬鈴薯葡萄糖液體培養基，置于恒溫箱搖 床上培養，培養溫度為27°C，培養時間為7天，得到內生真菌懸浮液， 接種量為從馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基挑取〇. 5 cm2的瓊脂塊； 2) 將步驟1)得到的搖床培養后內生真菌懸浮液，接種于100個 1000 mL的錐形瓶中，每瓶內含有100 g大米培養基，于27°C的恒溫箱內培養30天；接種量 為每個錐形瓶接3. 0 mL懸浮液，懸浮液孢子濃度為I X IO6個孢子/mL ;每瓶大米培養基含 水量為160mL蒸餾水； 3) 以乙酸乙醋萃取步驟2)得到的培養內生真菌的大米培養基， 得到粗浸膏； 4) 將步驟3)得到的粗浸膏以氯仿-甲醇作溶劑過硅膠柱子，柱子規格為外徑6cm，內 徑5. 3cm，長45. 7cm，再以葡聚糖凝膠色譜分離得到環孢菌素T。
4. 根據權利要求3所述的環孢菌素T的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中，馬鈴薯 葡萄糖液體培養基的制備方法為：每200g 土豆，加入1000ml蒸餾水，煮開后再煮沸30min， 將煮液用紗布過濾于燒杯中，在濾汁中補足水分至l〇〇〇ml，重新倒入鍋中，加入20g蔗糖即 可。
5. 根據權利要求1所述的環孢菌素 T在牧草抗性檢測中的應用。
6. 根據權利要求1所述的環孢菌素T在抑制植物病原真菌中的應用。
7. 根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述植物病原真菌為細交鏈孢、小麥離蠕 孢病菌、燕麥鐮孢病菌和新月彎孢霉。
【專利摘要】本發明公開了環孢菌素T，結構式如式（Ⅰ）所示，并提供了其制備方法和應用。本發明提供的環孢菌素T及其制備方法和應用，其有益效果為：（1）環孢菌素T對牲畜無毒，其來源Epichlo? bromicola是一種有益的內生真菌；（2）環孢菌素T具有廣譜殺菌活性，用量低，防病效果優于陽性藥物；（3）環孢菌素T是天然產物，可以通過對Epichlo? bromicola內生真菌大量發酵得到，具有可持續性；（4）Epichlo? bromicola內生真菌可接種于其它劣勢牧草上，其具有培育抗植物病原真菌的優勢牧草的潛質。
【IPC分類】A01P3-00, G01N33-68, C07K1-16, C07K7-64
【公開號】CN104877013
【申請號】CN201510298350
【發明人】宋秋艷, 高坤, 南志標, 田沛, 宋輝
【申請人】蘭州大學
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年6月3日