一種肝素鈉粗品提取方法
【技術領域】
:
[0001]本發明涉及一種肝素鈉提取方法，特別是涉及一種肝素鈉粗品提取方法。
【背景技術】
:
[0002]肝素鈉是一種酸性粘多糖，具有強抗凝作用，主要存在于哺乳動物的腸粘膜中，是臨床抗血栓疾病的首選藥物，國家大量出口的貴重生化藥品。
[0003]傳統的制取肝素鈉主要有兩種方法，一種是鹽解，一種是酶解。鹽解方法的主要缺點是肝素鈉的產量偏低，酶解方法的主要缺點是腸渣都被分解，污染比較嚴重。

【發明內容】

:
[0004]本發明的目的在于提供一種減少污染，同時能夠提高肝素鈉產量的肝素鈉粗品提取方法。
[0005]本發明的目的由如下技術方案實施:一種肝素鈉粗品提取方法，其包括如下步驟:
(I)鹽解；⑵吸附；⑶清洗樹脂；⑷樹脂脫附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0006](I)鹽解:將新鮮小腸粘膜絞碎，將絞碎的所述新鮮小腸粘膜和水按1:3的質量比混合后，抽入反應罐中加鹽或鹽水調整鹽度至5.9-6.1度，加食用堿調整pH值為9-9.3后，直接升溫至95-97?并保溫9-10分鐘進行鹽解，鹽解后撈出腸渣并收集作為飼料，剩余腸粘膜和水的混合液；
[0007](2)吸附:用80-100目濾網過濾所述腸粘膜和水的混合液，過濾后濾液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述濾液與所述清水的體積比為1:1，調節水溫到58-60°C，此時調整鹽度至2.5-3度，加入備用的樹脂進行吸附，所述樹脂與所述新鮮小腸粘膜的體積比是0.75:100 ；
[0008](3)清洗樹脂:吸附完畢后，收集吸附后所述樹脂，用40_50°C所述清水清洗吸附后所述樹脂2-3遍，洗去吸附后所述樹脂表面油脂及雜質；
[0009](4)樹脂脫附:將清洗后所述樹脂濾干，然后將清洗后所述樹脂放入脫附灌中，然后再向所述脫附灌中加入20度鹽水，清洗后所述樹脂與所述鹽水的體積比為2:1，攪拌10分鐘，進行鹽度調整，調整鹽度至17-18度，調整pH值到8.3-8.5，然后加溫至55_60°C攪拌2-2.5小時進行第一次脫附，第一次脫附完畢后收集第一次脫附樹脂和第一次脫附濾液；然后對所述第一次脫附樹脂進行第二次脫附，此時要求鹽度不能低于20度，加溫55-60°C，攪拌2-2.5小時；然后收集第二次脫附樹脂和第二次脫附濾液；收集起來的所述第二次脫附樹脂裝在濾網中，放入20-25?的鹽水中浸泡后重復用于所述步驟(2);樹脂主要起吸附作用，由于采取清水浸泡，使樹脂充分擴張，又采用兩次不同濃度的鹽水進行浸泡，使樹脂吸附的肝素鈉充分洗脫出來，既增加了肝素鈉的提取量，又提高了樹脂的反復吸附能力。
[0010](5)沉淀:收集所述第二次脫附濾液用做下一次的第一次脫附循環使用；將所述第一次脫附濾液收集到沉淀桶中，將PH值調整為9-12，沉淀12小時以上，堿蛋白和其他雜質就會分離出來，并且沉淀于所述沉淀桶桶底；
[0011](6)酒精分解:沉淀后將所述沉淀桶上面的清液抽出來過濾，向過濾后清液中邊攪拌邊加入鹽酸，調整所述過濾后清液pH為中性，然后邊攪拌邊向所述過濾后清液中加入70度以上的酒精，調整所述過濾后清液的酒精度至30-35度，再調整pH值為8-9，沉淀24-48小時，形成酒精上清液和肝素鈉漿糊；
[0012](7)干燥:將所述酒精上清液抽出，收集所述肝素鈉漿糊，并將收集的所述肝素鈉漿糊用棉布吊濾24小時，然后取出，烘干制得成品肝素鈉。
[0013]具體的，所述樹脂為強堿性離子交換樹脂。
[0014]本發明的優點在于，分離出的腸渣作為飼料，第二次脫附濾液用做下一次的第一次脫附循環使用，解決了污染的問題；本發明提高了鹽度，傳統方法使用的鹽度是四度，本專利使用的鹽度是六度，提高了肝素鈉的產量。以一萬根羊原腸為例，傳統鹽解的方法生產
0.59個億單位的肝素鈉，另外生產腸渣一千千克；傳統酶解的方法生產0.83個億單位的肝素鈉，不出產腸渣。本專利生產0.83個億單位的肝素鈉，出產一千千克的腸渣；本發明既能達到酶解的出藥率也不會浪費生產中所產生的腸渣，從而達到生產的最高效益。
【具體實施方式】
:
[0015]實施例1:一種肝素鈉粗品提取方法，其包括如下步驟:⑴鹽解；(2)吸附；(3)清洗樹脂；⑷樹脂脫附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0016](I)鹽解:將新鮮小腸粘膜絞碎，將絞碎的所述新鮮小腸粘膜和水按1:3的質量比混合后，抽入反應罐中加鹽或鹽水調整鹽度至5.9度，加食用堿調整pH值為9后，直接升溫至95°C并保溫10分鐘進行鹽解，鹽解后撈出腸渣并收集作為飼料，剩余腸粘膜和水的混合液；
[0017](2)吸附:用80目濾網過濾所述腸粘膜和水的混合液，過濾后濾液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述濾液與所述清水的體積比為1:1，調節水溫到58°C，此時調整鹽度至2.5度，加入備用的樹脂進行吸附，所述樹脂與所述新鮮小腸粘膜的體積比是 0.75:100 ；
[0018](3)清洗樹脂:吸附完畢后，收集吸附后所述樹脂，用50°C所述清水清洗吸附后所述樹脂2遍，洗去吸附后所述樹脂表面油脂及雜質；
[0019](4)樹脂脫附:將清洗后所述樹脂濾干，然后將清洗后所述樹脂放入脫附灌中，然后再向所述脫附灌中加入20度鹽水，清洗后所述樹脂與所述鹽水的體積比為2:1，攪拌10分鐘，進行鹽度調整，調整鹽度至17度，調整pH值到8.3，然后加溫至55°C攪拌2小時進行第一次脫附，第一次脫附完畢后收集第一次脫附樹脂和第一次脫附濾液；然后對所述第一次脫附樹脂進行第二次脫附，此時要求鹽度不能低于20度，加溫55°C，攪拌2小時；然后收集第二次脫附樹脂和第二次脫附濾液；收集起來的所述第二次脫附樹脂裝在濾網中，放入20°C的鹽水中浸泡后重復用于所述步驟(2);樹脂主要起吸附作用，由于采取清水浸泡，使樹脂充分擴張，又采用兩次不同濃度的鹽水進行浸泡，使樹脂吸附的肝素鈉充分洗脫出來，既增加了肝素鈉的提取量，又提高了樹脂的反復吸附能力。
[0020](5)沉淀:收集所述第二次脫附濾液用做下一次的第一次脫附循環使用；將所述第一次脫附濾液收集到沉淀桶中，將PH值調整為9，沉淀12小時以上，堿蛋白和其他雜質就會分離出來，并且沉淀于所述沉淀桶桶底；
[0021](6)酒精分解:沉淀后將所述沉淀桶上面的清液抽出來過濾，向過濾后清液中邊攪拌邊加入鹽酸，調整所述過濾后清液pH為中性，然后邊攪拌邊向所述過濾后清液中加入70度以上的酒精，調整所述過濾后清液的酒精度至30度，再調整pH值為8，沉淀24小時，形成酒精上清液和肝素鈉漿糊；
[0022](7)干燥:將所述酒精上清液抽出，收集所述肝素鈉漿糊，并將收集的所述肝素鈉漿糊用棉布吊濾24小時，然后取出，烘干制得成品肝素鈉。
[0023]具體的，所述樹脂為強堿性離子交換樹脂。
[0024]實施例2:—種肝素鈉粗品提取方法，其包括如下步驟:⑴鹽解；(2)吸附；(3)清洗樹脂；⑷樹脂脫附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0025](I)鹽解:將新鮮小腸粘膜絞碎，將絞碎的所述新鮮小腸粘膜和水按1:3的質量比混合后，抽入反應罐中加鹽或鹽水調整鹽度至6.1度，加食用堿調整pH值為9.3后，直接升溫至97°C并保溫9分鐘進行鹽解，鹽解后撈出腸渣并收集作為飼料，剩余腸粘膜和水的混合液；
[0026](2)吸附:用100目濾網過濾所述腸粘膜和水的混合液，過濾后濾液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述濾液與所述清水的體積比為1:1，調節水溫到60°C，此時調整鹽度至3度，加入備用的樹脂進行吸附，所述樹脂與所述新鮮小腸粘膜的體積比是0.75:100 ；
[0027](3)清洗樹脂:吸附完畢后，收集吸附后所述樹脂，用40°C