一種從海帶中制備海帶多糖的方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種多糖的制備方法，具體涉及一種從海帶中制備海帶多糖的方法。
【背景技術】
[0002] 海帶（LaminariaJaponicaAresch)是褐藻門海帶目海帶科海帶屬的大型海藻。 海帶富含多種功能性成分，具有極高的食用和藥用價值，其藥用價值在《本草綱目》、《神農 本草經》和《食物本草》等傳統醫書中都已有記載。研宄表明海帶的多種生物功能大多與海 帶中的生理活性多糖有關，如免疫調節、抗腫瘤、抗凝血、降脂、降糖、抗氧化等。
[0003]目前，對于海帶多糖的提取方法已有一些海帶多糖提取的文獻或報道，傳統方法 主要為酸提取法、堿提取法、酶提取法等，這些提取方法都存在一定的缺陷：酸提可造成多 糖水解，堿提取法造成多糖生物活性降低，酶提取法耗時，工業生產需要使用的酶量大，成 本高，熱水提取醇沉的方法簡便，但是耗時耗能。脫除多糖中蛋白的方法有三氯乙酸沉淀法 及savage法等，利用三氯乙酸沉淀蛋白，多糖收率較高，但常伴有糖鏈降解；savage法采用 氯仿及戊醇等有機試劑使蛋白變性、沉淀，其處理條件溫和，能較好的避免多糖降解，但處 理效率低，多糖損失嚴重。如中國專利CN103421126A，公開了一種制備海帶多糖的方法，將 海帶洗凈后，曬干、粉碎、過篩后浸泡到水中，經過水提和超聲波浸提，然后再醇沉，得到海 帶多糖沉淀，最后將沉淀烘干，即的粗品的海帶多糖，該方法得到海帶多糖含量低。現有方 法均存在不足，這在一定程度上制約了海帶多糖的精深加工與應用。

【發明內容】

[0004] 本發明提供了一種工藝成熟、適合生產的從海帶中制備海帶多糖的方法。
[0005] 本發明是通過如下技術方案實現的：
[0006] 一種從海帶中制備海帶多糖的方法，包括下述步驟：
[0007] 1)原料處理：將海帶干制后，粉碎；
[0008] 2)高壓微射流超微粉碎處理：將粉碎后的海帶，按照1:8-10的重量比加入純凈 水，用高速剪切乳化機處理10_20min，轉速為8000-12000r/min，然后用高壓微射流超微粉 碎設備于25°C進行處理，處理壓力為80-120MPa，處理次數為2-3次，得到膏狀漿液；
[0009] 3)發酵：將步驟2)得到的膏狀漿液經過超高溫瞬時滅菌，然后調整PH6. 5-7. 0， 按體積百分比為10-15%接入培養成熟的乳酸菌液體菌種，放入發酵罐中發酵，發酵溫度在 35-37°C，發酵時間 3-4h;
[0010] 4)酶解：將步驟3)得到的發酵液經過超高溫瞬時滅菌，調pH值至4. 0-5.0,再加 入濾液重量1. 5-2. 5%的胃蛋白酶，攪拌均勻，37-40°C酶解l_2h，然后沸水浴10-20min，過 濾，收集濾液；
[0011] 5)脫色：向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的 乙醇，4°C靜置4h，過濾，濾液中加入濾液重量0. 5%的活性碳，80°C保溫25-35min進行脫 色，抽濾，收集濾液；
[0012] 6)除蛋白：向步驟5)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95% 的乙醇，4°C靜置4h，過濾，向濾液中緩緩加入醋酸鉀稀溶液至終濃度2mol/L，4°C靜置過 夜，離心10-15min，沉淀進行冷凍干燥得成品。
[0013] 優選的，步驟1)中粉碎至40-60目。
[0014] 優選的，步驟3)中乳酸菌為保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、乳脂鏈球 菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、長雙歧桿菌。
[0015] 優選的，步驟4)中胃蛋白酶的酶解時間為2h，胃蛋白酶的用量為2.0%。
[0016] 優選的，步驟5)中，向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度 為95 %的乙醇，4°C靜置4h，過濾，沉淀加入步驟4)中，再次酶解。
[0017] 優選的，步驟6)中，離心為5000r/min。
[0018] 采用本發明的得方法得到的海帶多糖，具有如下性狀：
[0019] 白色略帶黃色的粉末，易吸濕，易溶于水。
[0020] 采用本發明的方法以海帶為原料制備海帶多糖，與現有技術相比，本發明的優 占.
[0021] 1、本發明通過使用高壓微射流超微粉碎技術處理海帶原料，利用高壓微射流超微 粉碎設備產生擠壓力、剪切力、沖擊力，經過液-液、液-固之間的高速撞擊、高剪切、空穴作 用等，使物料的分子結構發生變化。高壓微射流超微粉碎設備可以做到納米分散，細化效 果可達0.lum甚至以下，壓力高達100-200MPa，得到的溶液顆粒粒徑分布均勻，具有操作簡 單、無污染、可在線清潔消毒、可高效率進行細胞破壁等諸多優點。
[0022] 2、現有技術制備海帶多糖采用酶解，酶解只能處理蛋白，而本發明先通過乳酸菌 來處理，具有促進蛋白質的分解，在接下來的酶解步驟中，加強了酶解效果，即使采用單一 的酶，也有很好的效果。
[0023] 3、采用本發明方法得到的海帶多糖，得到的產品晶形較好、色澤好，產品的含量可 高達99 %以上、收率28 %以上。
【具體實施方式】
[0024] 下面以實施例對本發明作進一步說明，但本發明并不局限于這些實施例。
[0025] 實施例1 :
[0026] 一種從海帶中制備海帶多糖的方法，包括下述步驟：
[0027] 1)原料處理：將海帶干制后，粉碎；
[0028] 2)高壓微射流超微粉碎處理：將粉碎后的海帶，按照1:8的重量比加入純凈水，用 高速剪切乳化機處理l〇min，轉速為12000r/min，然后用高壓微射流超微粉碎設備于25°C 進行處理，處理壓力為80MPa，處理次數為3次，得到膏狀漿液；
[0029] 3)發酵：將步驟2)得到的膏狀漿液經過超高溫瞬時滅菌，然后調整pH7.0,按體積 百分比為10%接入培養成熟的保加利亞乳桿菌液體菌種，放入發酵罐中發酵，發酵溫度在 35-37°C，發酵時間3h;
[0030] 4)酶解：將步驟3)得到的發酵液經過超高溫瞬時滅菌，調pH值至4. 0,再加入濾 液重量2. 5 %的胃蛋白酶，攪拌均勻，37-40°C酶解2h，然后沸水浴lOmin，過濾，收集濾液；
[0031] 5)脫色：向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的 乙醇，4°C靜置4h，過濾，濾液中加入濾液重量0. 5%的活性碳，80°C保溫35min進行脫色，抽 濾，收集濾液；
[0032] 6)除蛋白：向步驟5)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95% 的乙醇，4°C靜置4h，過濾，向濾液中緩緩加入醋酸鉀稀溶液至終濃度2mol/L，4°C靜置過 夜，離心lOmin，沉淀進行冷凍干燥得成品。
[0033] 實施例2 :
[0034] 一種從海帶中制備海帶多糖的方法，包括下述步驟：
[0035] 1)原料處理：將海帶干制后，粉碎；
[0036] 2)高壓微射流超微粉碎處理：將粉碎后的海帶，按照1:10的重量比加入純凈水， 用高速剪切乳化機處理15min，轉速為10000r/min，然后用高壓微射流超微粉碎設備于 25°C進行處理，處理壓力為lOOMPa，處理次數為2次，得到膏狀漿液；
[0037] 3)發酵：將步驟2)得到的膏狀漿液經過超高溫瞬時滅菌，然后調整pH6. 5,按體 積百分比為12%接入培養成熟的嗜酸乳桿菌液體菌種，放入發酵罐中發酵，發酵溫度在 35-37°C，發酵時間4h;
[0038] 4)酶解：將步驟3)得到的發酵液經過超高溫瞬時滅菌，調pH值至4. 5,再加入濾 液重量2.0%的胃蛋白酶，攪拌均勻，37-40°C酶解lh，然后沸水浴15min，過濾，收集濾液；
[0039] 5)脫色：向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的 乙醇，4°C靜置4h，過濾，濾液中加入濾液重量0. 5%的活性碳，80°C保溫25min進行脫色，抽 濾，收集濾液；
[0040] 6)除蛋白：向步驟5)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95% 的乙醇，4°C靜置4h，過濾，向濾液中緩緩加入醋酸鉀稀溶液至終濃度2mol/L，4°C靜置過 夜，離心12min，沉淀進行冷凍干燥得成品。
[0041] 實施例3:
[0042] 一種從海帶中制備海帶多糖的方法，包括下述步驟：
[0043] 1)原料處理：將海帶干制后，粉碎；
[0044] 2)高壓微射流超微粉碎處理：將粉碎后的海帶，按照1:8的重量比加入純凈水，用 高速剪切乳化機處理20min，轉速為8000r/min，然后用高壓微射流超微粉碎設備于25°C進 行處理，處理壓力為120MPa，處理次數為3次，得到膏狀漿液；
[0045] 3)發酵：將步驟2)得到的膏狀漿液經過超高溫瞬時滅菌，然后調整pH7.0,按體 積百分比為15%接入培養成熟的嬰兒雙歧桿菌液體菌種，放入發酵罐中發酵，發酵溫度在 35-37°C，發酵時間3h;
[0046] 4)酶解：將步驟3)得到的發酵液經過超高溫瞬時滅菌，調pH值至5. 0,再加入濾 液重量2. 5 %的胃蛋白酶，攪拌均勻，37-40°C酶解2h，然后沸水浴20min，過濾，收集濾液；
[0047] 5)脫色：向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的 乙醇，4°C靜置4h，過濾，濾液中加入濾液重量0. 5%的活性碳，80°C保溫30min進行脫色，抽 濾，收集濾液；
[0048] 6)除蛋白：向步驟5)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95% 的乙醇，4°C靜置4h，過濾，向濾液中緩緩加入醋酸鉀稀溶液至終濃度2mol/L，4°C靜置過 夜，離心15min，沉淀進行冷凍干燥得成品。
[0049]結果：
【主權項】
1. 一種從海帶中制備海帶多糖的方法，其特征在于，包括下述步驟： 1) 原料處理：將海帶干制后，粉碎； 2) 高壓微射流超微粉碎處理：將粉碎后的海帶，按照1:8-10的重量比加入純凈水，用 高速剪切乳化機處理10-20min，轉速為8000-1200()r/min，然后用高壓微射流超微粉碎設 備于25°C進行處理，處理壓力為80-120MPa，處理次數為2-3次，得到膏狀漿液； 3) 發酵：將步驟2)得到的膏狀漿液經過超高溫瞬時滅菌，然后調整pH6. 5-7. 0,按 體積百分比為10-15%接入培養成熟的乳酸菌液體菌種，放入發酵罐中發酵，發酵溫度在 35-37°C，發酵時間 3-4h; 4) 酶解：將步驟3)得到的發酵液經過超高溫瞬時滅菌，調pH值至4. 0-5. 0,再加入濾 液重量1. 5-2. 5%的胃蛋白酶，攪拌均勻，37-40°C酶解l_2h，然后沸水浴10-20min，過濾， 收集濾液； 5) 脫色：向步驟4)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的乙醇， 4°C靜置4h，過濾，濾液中加入濾液重量0. 5%的活性碳，80°C保溫25-35min進行脫色，抽 濾，收集濾液； 6) 除蛋白：向步驟5)得到的濾液中加入相當于濾液重量2倍的質量濃度為95%的乙 醇，4°C靜置4h，過濾，向濾液中緩緩加入醋酸鉀稀溶液至終濃度2mol/L，4°C靜置過夜，離 心10-15min，沉淀進行冷凍干燥得成品。
2. 根據權利要求1所述的一種從海帶中制備海帶多糖的方法，其特征在于：步驟3)中 乳酸菌為保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、乳脂鏈球菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧 桿菌、長雙歧桿菌。
【專利摘要】本發明公開了一種從海帶中制備海帶多糖的方法，包括下述步驟:原料處理、高壓微射流超微粉碎處理、發酵、酶解、脫色、除蛋白、干燥即得成品。相比現有的三氯乙酸沉淀法及savage法等，海帶多糖的收率高、含量高。
【IPC分類】C08B37-00
【公開號】CN104710541
【申請號】CN201510145871
【發明人】歸三岷
【申請人】廣西還珠海洋生物科技有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年3月31日